口腔癌在世界范围内的年发病人数超过300 000例，5年生存率为50%~60%，其中舌癌占比近40%。肿瘤存在肿瘤异质性，个体预后存在差异，但手术仍是治疗舌癌的第一选择。舌癌手术效果可直接决定患者的生存时间，其造成的损伤严重影响患者的外观、语言、咀嚼、吞咽等生理功能，舌癌的外科治疗必须兼顾功能重建，以提高患者的生存质量。在过去几十年里，人们对舌癌基因组学的认识不断深入，认识到临床研究前模型可以保存有肿瘤异质性，其在发现肿瘤标志物和药物临床转化中有巨大应用前景，舌癌的诊断和治疗取得了许多进展，但临床上对其诊疗仍存在诸多争论。因此，本专家共识总结了舌癌外科诊疗的进展和有争议的热点，主要涵盖了术前诊断评估、外科处理要点和术后功能康复等内容。

目的:评价光学信号定量分析方法应用于口腔鳞状细胞癌（oral squamous cancer cell，OSCC）手术中的可行性。方法:首先，将OSCC细胞系（SCC9和HSC3）及正常上皮细胞株Leuk-1与吲哚菁绿（indocyanine green，ICG）体外共培养6 h，验证近红外光学信号定量分析区分肿瘤细胞及正常细胞的能力。其次，将16只BALB/c雄性小鼠（5~6周龄，20~25g）分为两组，每组8只，将SCC9和HSC3细胞以1×10 6 个/ml浓度分别接种于小鼠背部建立皮下移植瘤模型，模型构建成功后经尾静脉注射5 mg/kg ICG，配对 t检验分析近红外光学信号定量分析在OSCC与正常组织的差异。最后，纳入2019年11月至2020年7月就诊于蚌埠医学院第一附属医院口腔科的10例OSCC患者，其中舌癌6例，颊癌4例，男6例，女性4例，平均年龄58.6岁（46~71岁），均在术前6~8 h经肘静脉注射ICG，剂量为0.75 mg/kg。术中测量OSCC患者的肿瘤、瘤周（肿瘤边界外2.0 cm）及正常舌或颊黏膜的近红外光学信号强度。采用单因素方差分析评估三个样本组的近红外荧光强度，Tukey事后多重比较检验分析三者之间的信号背景比（signal background ratio，SBR）。 结果:体外共培养实验显示，OSCC细胞株HSC3和SCC9的近红外荧光强度显著强于正常上皮细胞株Leuk-1（ P<0.01）。体内结果显示，OSCC的近红外光学信号强度高于正常组织，SBR为8.67±0.35。临床研究显示，肿瘤组织的荧光强度［（408.23±101.51）AU］显著高于瘤周和正常组织［分别为（253.12±64.89）和（261.50±80.47）AU］（ P<0.05）；肿瘤与瘤周组织、肿瘤与正常组织的近红外信号强度的SBR为1.61±0.53和1.56±0.48，而瘤周与正常组织的SBR为0.96±0.17。 结论:近红外光学信号定量分析可区分OSCC和正常细胞。在OSCC根治术中，光学信号定量结合ICG近红外荧光分子成像技术辅助精确手术具有临床可行性。

目的:探讨hsa_circ_0000231在舌鳞状细胞癌（tongue squamous cell carcinoma，TSCC）发生、发展中的作用机制。方法:收集2014年12月至2017年12月在南通大学附属医院和南通大学附属肿瘤医院收治并进行手术的舌癌患者60例（男32例，女28例，年龄36~84岁），唾液标本来自同时期的10例舌癌患者，以及10名健康志愿者（男5名，女5名，年龄40~75岁），3株舌癌细胞为TSCC常用工具细胞（CAL-27、Tca-8113、HN-4）。采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应（quantitative real-time polymerase chain reaction，qRT-PCR）检测60对新鲜配对TSCC组织、10对唾液标本及3株TSCC细胞系中的hsa_circ_0000231的表达；结合随访资料，分析hsa_circ_0000231相对表达量与患者临床病理特征及预后的关系。选择敲低效率最高的细胞行蛋白免疫印迹法（WB）、细胞计数试验（cell counting kit-8，CCK-8）、克隆形成、Transwell侵袭和划痕试验，研究TSCC细胞的增殖、侵袭、转移及上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）的能力；使用Wnt/β-catenin通路激活剂LiCl与TSCC细胞共培养，WB检测并研究Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达变化。裸鼠成瘤实验比较皮下移植瘤的生长。使用SPSS 25.0统计分析软件行数据分析，组间比较采用 t检验和 χ 2检验。 结果:hsa_circ_0000231在TSCC患者组织、唾液标本及细胞系CAL-27、Tca-8113和HN-4中高表达，配对癌旁组织、健康人唾液标本及正常人类口腔黏膜细胞（human oral keratinocytes，HOK）中低表达（ P值均<0.05）。单因素分析显示hsa_circ_0000231表达水平、肿瘤分化程度和T分级与TSCC患者的生存预后相关（ P值均<0.05）。多因素Cox风险回归模型分析显示hsa_circ_0000231表达水平（χ 2=5.77， P=0.016）和T分级（χ 2=5.27， P=0.029）是TSCC患者预后不良的独立影响因子。WB显示，敲低hsa_circ_0000231表达可以显著提高CAL-27和Tca-8113细胞中EMT相关蛋白即E-钙黏蛋白的表达，并降低Snail、N-钙黏蛋白和波形蛋白的表达。与阴性对照组相比，干扰组细胞中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白β-catenin、C-myc、Bcl-2、MMP-9和CyclinD1的表达被抑制，使用Wnt/β-catenin通路激活剂LiCl与干扰组TSCC细胞共培养后，干扰组细胞中上述蛋白的表达趋势被逆转；细胞功能学证实敲低hsa_circ_0000231表达可以显著抑制CAL-27和Tca-8113细胞增殖、侵袭和转移能力；使用LiCl逆转了hsa_circ_0000231促进CAL-27和Tca-8113细胞迁移和侵袭的能力。裸鼠成瘤实验显示使用LiCl处理过的皮下移植瘤的质量和体积明显大于hsa_circ_0000231敲低组。 结论:hsa_circ_0000231是TSCC的独立预后因子，hsa_circ_0000231可以通过激活Wnt/β-catenin通路促进舌癌细胞的增殖、侵袭和转移。

目的 了解舌粘膜癌变中基因体甲基化的差异表达基因.方法 用浓度 50 mg/L的 4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)诱导C57BL/6 小鼠舌癌.基因芯片和甲基化DNA免疫沉淀测序(MeDIP-Seq)检测0 周、12 周、28 周(代表正常、癌前、癌变)的舌粘膜的基因表达和基因组DNA甲基化.在人正常舌粘膜和癌前病变组织中用qRT-PCR和飞行质谱检测泛素羧基水解酶CYLD的mRNA表达和基因体甲基化.结果 正常、癌前和舌癌3 组间基因体MeDIP-score(mean±s)分别是(5.58±14.80)、(5.79±13.35)、(5.83±17.25),差异无统计学意义(H=100.75,P>0.05).3 组间 145 个差异表达基因伴基因体甲基化改变.CYLD在人癌前病变组织中表达降低伴有基因体甲基化降低(P<0.05).结论 舌粘膜癌变有多个基因体甲基化异常的差异表达基因,CYLD在人癌前病变中低表达可能与基因体甲基化有关.

目的 研究舌黏膜癌变过程中基因组甲基化特征,探讨舌癌中DNA甲基化的规律.方法 用50 mg/L的4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)饮水诱导C57BL/6J小鼠舌黏膜癌变,分别取第0、12、28周的舌黏膜(分别代表正常、癌前病变和癌变)进行基因芯片检测和甲基化DNA免疫沉淀测序(MeDIP-Seq),在人舌黏膜组织和人舌癌细胞系中,用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和飞行质谱检测验证转化生长因子贝塔信号蛋白1(SMAD1)的表达和启动子的甲基化.结果 28周较12周和0周舌黏膜的胞嘧啶鸟嘌呤岛(CGI)甲基化水平均升高,12周时启动子甲基化水平高于0周.在0、12和28周期间,208个差异表达基因与启动子中的差异甲基化呈负相关.与正常黏膜相比,细胞系中SMAD1的mRNA上调,同时启动子甲基化水平降低.结论 舌黏膜癌变中伴随DNA甲基化修饰异常,舌癌中SMAD1高表达伴启动子低甲基化.

目的:利用含高浓度4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)的水与固体饲料相结合方式,旨在探讨短时间构建高生存率舌癌小鼠模型的方法.方法:将12只BALB/c小鼠随机分为对照组(H2O,n=4)、中剂量实验组(250 μg/mL 4NQO,n=4)和高剂量实验组(300 μg/mL 4NQO,n=4),固液交替喂养,对小鼠的外貌、体质量和舌黏膜状态进行观察并记录,12周后处死小鼠,取材进行HE染色.结果:研究发现中剂量组的小鼠均造模成功,其中3只小鼠的舌黏膜出现乳头状样新生物,并且HE染色发现癌巢及角化珠的病理特征,余1只小鼠舌黏膜仅出现白斑样改变,病理表现为舌黏膜上皮重度异型增生.而高剂量组中的小鼠在造模过程中全部死亡.结论:250 μg/mL4NQO能在12周内成功诱导出舌癌小鼠模型,并能保证较高的生存率.

目的 研究核因子E2相关因子(Nrf2)在4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)诱导的小鼠舌癌发生中对增殖和分化的影响.方法 野生型(WT)与Nrf2基因敲除(Nrf2-/-)C57BL/6J小鼠各36只,其中阴性对照组10只,饮用纯净水,4NQO组26只,饮用4NQO水溶液(50μg/ml)16周.24周末处死小鼠,取舌组织用于病理学分析、Brdu和免疫组化(IHC)染色.通过生物信息学分析Nrf2与KLF4的相关性.结果 构建了4NQO诱导的小鼠舌癌模型,并发现Nrf2-/-小鼠的舌癌发生率和Brdu染色的阳性细胞数明显高于WT小鼠.IHC染色显示,Nrf2-/-小鼠舌组织中分化相关基因KLF4、Loricrin、CK5的表达显著低于WT小鼠.在舌癌和正常组织中Nrf2的表达与KLF4成显著正相关.结论 敲除Nrf2可以促进舌癌发生和细胞增殖,并抑制癌变过程中的细胞分化.

目的 探讨多因素Logistic回归模型和XGBoost模型对舌癌患者放疗期间发生口腔感染的预测价值.方法 选取2003年1月—2022年12月在新疆医科大学第一附属医院就诊的431例放疗的舌癌患者,随机分为训练组288例和预测组143例.比较多因素Logistic回归模型和XGBoost模型对舌癌患者放疗期间发生口腔感染的预测效能.结果 多因素Logistic回归模型结果显示,年龄[O^R =3.250(95%CI:1.476,7.634)],肿瘤分期[O^R =2.941(95%CI:1.248,7.613)],口腔环境[O^R =0.210(95%CI:0.079,0.502)],是否手术[O^R =0.285(95%CI:0.113,0.663)],血红蛋白[O^R =0.323(95%CI:0.139,0.712)],血清白蛋白[O^R =0.353(95%CI:0.148,0.851)]是放疗期间发生口腔感染的独立预测因素.XGBoost模型结果显示,口腔环境、手术、肿瘤分期、血清白蛋白、年龄、同步化疗、红细胞计数、血红蛋白、中性粒细胞计数为重要性指标.多因素Logistic回归模型和XGBoost模型受试者工作特征曲线下面积分别为0.830、0.835,两者比较,差异无统计学意义(P>0.05);敏感性分别为88.24%(95%CI:0.729,1.000)、82.35%(95%CI:0.642,1.000);特异性分别为 68.25%(95%CI:0.601,0.764)、69.84%(95%CI:0.627,0.786).结论 多因素Logistic回归模型和XGBoost模型对舌癌患者放疗期间发生口腔感染的预测均有意义,两者预测效能相当.建立模型有助于筛选出口腔感染的高危人群,及早采取预防措施,降低口腔感染发生风险.

目的:建立与人舌黏膜鳞癌相近的大鼠舌癌模型,并研究其发生发展过程中双泛素FAT10的表达变化.方法:实验组SD雄性大鼠使用含有40μg/mL的4-硝基喹啉-1-氧化物(4-NQO)饮水喂养,分别在8、16、24周时取大鼠舌体中病灶部位组织,行组织学观察;对照组大鼠正常饮用水喂养24周.使用免疫组织化学法检测FAT10、p53在舌黏膜不同程度病变组织中的表达.结果:大鼠舌黏膜经过4-NQO不同时间的刺激,可发展成不同程度的上皮异常增生以及鳞状细胞癌.从正常黏膜到不同程度的不典型增生以及最后高分化的鳞癌中,FAT10的表达强度呈逐渐增高趋势;p53在正常黏膜为阳性表达,在不典型增生中表达升高,而在癌组织中表达降低.结论:在舌癌的发生、发展过程中,FAT10可能发挥了癌基因的作用.

目的:研究靶向抑制叉头框C2(FOXC2)的表达对舌鳞癌细胞系Tca8113移植瘤血管形成的影响.方法:将舌癌Tca8113细胞系接种40只裸鼠皮下建立移植瘤模型,并随机分为空白对照组、空载体组、无关片段组、干扰质粒组.用脂质体法对空载体组、无关片段组、干扰质粒组进行瘤内及瘤周注射转染,RNA干扰抑制FOXC2的表达,处死裸鼠后取瘤体测量体质量及体积,免疫印迹法检测FOXC2蛋白表达,免疫组织化学法检测移植瘤微血管参数.结果:干扰质粒组的瘤体体积、体质量、FOXC2蛋白表达、微血管参数均小于其他各组(P<0.05).结论:通过RNA干扰靶向抑制FOXC2的表达,能抑制舌鳞癌细胞移植瘤的血管形成.