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舌黏膜鳞状细胞癌外科治疗的专家共识
编辑人员丨4天前
口腔癌在世界范围内的年发病人数超过300 000例,5年生存率为50%~60%,其中舌癌占比近40%。肿瘤存在肿瘤异质性,个体预后存在差异,但手术仍是治疗舌癌的第一选择。舌癌手术效果可直接决定患者的生存时间,其造成的损伤严重影响患者的外观、语言、咀嚼、吞咽等生理功能,舌癌的外科治疗必须兼顾功能重建,以提高患者的生存质量。在过去几十年里,人们对舌癌基因组学的认识不断深入,认识到临床研究前模型可以保存有肿瘤异质性,其在发现肿瘤标志物和药物临床转化中有巨大应用前景,舌癌的诊断和治疗取得了许多进展,但临床上对其诊疗仍存在诸多争论。因此,本专家共识总结了舌癌外科诊疗的进展和有争议的热点,主要涵盖了术前诊断评估、外科处理要点和术后功能康复等内容。
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编辑人员丨4天前
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光学信号定量方法用于近红外荧光分子成像辅助口腔鳞状细胞癌手术的研究
编辑人员丨4天前
目的:评价光学信号定量分析方法应用于口腔鳞状细胞癌(oral squamous cancer cell,OSCC)手术中的可行性。方法:首先,将OSCC细胞系(SCC9和HSC3)及正常上皮细胞株Leuk-1与吲哚菁绿(indocyanine green,ICG)体外共培养6 h,验证近红外光学信号定量分析区分肿瘤细胞及正常细胞的能力。其次,将16只BALB/c雄性小鼠(5~6周龄,20~25g)分为两组,每组8只,将SCC9和HSC3细胞以1×10 6 个/ml浓度分别接种于小鼠背部建立皮下移植瘤模型,模型构建成功后经尾静脉注射5 mg/kg ICG,配对 t检验分析近红外光学信号定量分析在OSCC与正常组织的差异。最后,纳入2019年11月至2020年7月就诊于蚌埠医学院第一附属医院口腔科的10例OSCC患者,其中舌癌6例,颊癌4例,男6例,女性4例,平均年龄58.6岁(46~71岁),均在术前6~8 h经肘静脉注射ICG,剂量为0.75 mg/kg。术中测量OSCC患者的肿瘤、瘤周(肿瘤边界外2.0 cm)及正常舌或颊黏膜的近红外光学信号强度。采用单因素方差分析评估三个样本组的近红外荧光强度,Tukey事后多重比较检验分析三者之间的信号背景比(signal background ratio,SBR)。 结果:体外共培养实验显示,OSCC细胞株HSC3和SCC9的近红外荧光强度显著强于正常上皮细胞株Leuk-1( P<0.01)。体内结果显示,OSCC的近红外光学信号强度高于正常组织,SBR为8.67±0.35。临床研究显示,肿瘤组织的荧光强度[(408.23±101.51)AU]显著高于瘤周和正常组织[分别为(253.12±64.89)和(261.50±80.47)AU]( P<0.05);肿瘤与瘤周组织、肿瘤与正常组织的近红外信号强度的SBR为1.61±0.53和1.56±0.48,而瘤周与正常组织的SBR为0.96±0.17。 结论:近红外光学信号定量分析可区分OSCC和正常细胞。在OSCC根治术中,光学信号定量结合ICG近红外荧光分子成像技术辅助精确手术具有临床可行性。
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编辑人员丨4天前
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IL-8干预中性粒细胞叉头状转录因子P3表达对口腔鳞状细胞癌进展的影响
编辑人员丨4天前
目的:探讨白细胞介素-8(IL-8)干预中性粒细胞叉头状转录因子3(FOXP3)表达对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞进展的影响。方法:收集2016年12月至2019年12月我院收治的36例OSCC患者癌组织和同期进行体检的12例健康志愿者正常口腔黏膜组织。采用免疫组织化学染色检测组织中FOXP3和IL-8表达,采用免疫荧光检测癌组织中性粒细胞FOXP3表达。购置人舌鳞癌细胞系SCC-9细胞,抽取健康志愿者外周血提取中性粒细胞,分析中性粒细胞和IL-8对SCC-9细胞增殖的影响,采用RT-qPCR检测IL-8对中性粒细胞FOXP3 mRNA表达的影响,利用P60特异性抑制中性粒细胞FOXP3表达分析其表达的下调对SCC-9细胞增殖和迁移的影响。结果:OSCC组织中FOXP3和IL-8阳性表达率(71.05%、76.32%)高于正常口腔黏膜组织(8.70%、4.35%),( P<0.05);OSCC组织中性粒细胞FOXP3蛋白呈低表达,且其水平随疾病进展而降低( P<0.05);SCC-9+中性粒细胞+IL-8组细胞增殖率高于SCC-9组、SCC-9+中性粒细胞组和SCC-9+IL-8组( P<0.05);IL-8干预组中性粒细胞FOXP3 mRNA水平低于PBS对照组( P<0.05);SCC-9细胞+中性粒细胞+P60组细胞增殖率显著高于SCC-9细胞组、SCC-9细胞+中性粒细胞组和SCC-9细胞+P60组( P<0.05);培养24 h后SCC-9细胞+中性粒细胞+P60组细胞划痕伤口愈合率高于SCC-9细胞组、SCC-9细胞+中性粒细胞组和SCC-9细胞+P60组( P<0.05)。 结论:OSCC组织中FOXP3和IL-8呈高表达,而中性粒细胞FOXP3表达降低,IL-8可能通过下调FOXP3基因表达趋化中性粒细胞进入肿瘤微环境促进SCC-9细胞增殖和迁移。
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编辑人员丨4天前
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微小RNA-296-3p靶向核蛋白1调控舌鳞状细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究
编辑人员丨4天前
目的:研究微小RNA-296-3p对舌鳞状细胞癌(简称舌鳞癌)细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其潜在机制。方法:以正常口腔上皮黏膜角质细胞HOK为对照,实时定量聚合酶链反应法检测舌鳞癌细胞系CAL27、SCC15和SCC9中miR-296-3p和核蛋白1(NUPR1) mRNA的表达,蛋白印迹法检测NUPR1蛋白表达水平。CAL27细胞分为对照组(NC组)、miR-con组、miR-296-3p组、si-con组、si-NUPR1组、miR-296-3p+pcDNA组和miR-296-3p+pcDNA-NUPR1组,细胞计数试剂盒8(CCK8)法检测细胞活性,Transwell检测细胞迁移和侵袭,蛋白印迹法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证CAL27细胞中miR-296-3p与NUPR1的调控关系。结果:与HOK细胞相比,在舌鳞癌细胞系CAL27、SCC15和SCC9中miR-296-3p的含量显著降低(0.54 ± 0.08、0.38 ± 0.05、0.59 ± 0.07比1.04 ± 0.12, t = 10.401、15.231、9.718, P均<0.05),NUPR1 mRNA (5.94 ± 0.40、4.48 ± 0.45、5.19 ± 0.48比0.94 ± 0.12, t = 35.918、22.803、25.769)和NUPR1蛋白(0.79 ± 0.09、0.54 ± 0.05、0.62 ± 0.08比0.28 ± 0.04, t = 15.535、12.182、11.404)表达量均显著升高( P均<0.05)。与NC组、miR-con组相比,miR-296-3p组CAL27细胞活性、迁移数、侵袭数及PCNA、MMP-2和MMP-9的蛋白表达均降低( P均<0.05)。与NC组、si-con组相比,si-NUPR1组CAL27细胞活性、迁移数、侵袭数及PCNA、MMP-2和MMP-9的蛋白表达均降低( P均<0.05)。miR-296-3p在CAL27细胞负调控NUPR1表达。与miR-296-3p+pcDNA组相比,miR-296-3p+pcDNA-NUPR1组CAL27细胞活性(138.34 ± 5.73比98.54 ± 5.89, t = 14.530)、迁移数(95.28 ± 7.56比67.92 ± 5.23, t = 8.929)、侵袭数(184.53 ± 17.57比101.26 ± 10.64, t = 12.162)及PCNA (0.68 ± 0.07比0.35 ± 0.06, t = 10.738)、MMP-2(0.43 ± 0.05比0.29 ± 0.04, t = 6.559)和MMP-9(0.58 ± 0.06比0.33 ± 0.08, t = 7.500)的蛋白表达均升高( P均<0.05)。 结论:miR-296-3p通过靶向负调控NUPR1表达抑制舌鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭。
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编辑人员丨4天前
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hsa_circ_0000231调控Wnt/β-catenin信号通路影响舌癌细胞的增殖和迁移
编辑人员丨4天前
目的:探讨hsa_circ_0000231在舌鳞状细胞癌(tongue squamous cell carcinoma,TSCC)发生、发展中的作用机制。方法:收集2014年12月至2017年12月在南通大学附属医院和南通大学附属肿瘤医院收治并进行手术的舌癌患者60例(男32例,女28例,年龄36~84岁),唾液标本来自同时期的10例舌癌患者,以及10名健康志愿者(男5名,女5名,年龄40~75岁),3株舌癌细胞为TSCC常用工具细胞(CAL-27、Tca-8113、HN-4)。采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测60对新鲜配对TSCC组织、10对唾液标本及3株TSCC细胞系中的hsa_circ_0000231的表达;结合随访资料,分析hsa_circ_0000231相对表达量与患者临床病理特征及预后的关系。选择敲低效率最高的细胞行蛋白免疫印迹法(WB)、细胞计数试验(cell counting kit-8,CCK-8)、克隆形成、Transwell侵袭和划痕试验,研究TSCC细胞的增殖、侵袭、转移及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的能力;使用Wnt/β-catenin通路激活剂LiCl与TSCC细胞共培养,WB检测并研究Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达变化。裸鼠成瘤实验比较皮下移植瘤的生长。使用SPSS 25.0统计分析软件行数据分析,组间比较采用 t检验和 χ 2检验。 结果:hsa_circ_0000231在TSCC患者组织、唾液标本及细胞系CAL-27、Tca-8113和HN-4中高表达,配对癌旁组织、健康人唾液标本及正常人类口腔黏膜细胞(human oral keratinocytes,HOK)中低表达( P值均<0.05)。单因素分析显示hsa_circ_0000231表达水平、肿瘤分化程度和T分级与TSCC患者的生存预后相关( P值均<0.05)。多因素Cox风险回归模型分析显示hsa_circ_0000231表达水平(χ 2=5.77, P=0.016)和T分级(χ 2=5.27, P=0.029)是TSCC患者预后不良的独立影响因子。WB显示,敲低hsa_circ_0000231表达可以显著提高CAL-27和Tca-8113细胞中EMT相关蛋白即E-钙黏蛋白的表达,并降低Snail、N-钙黏蛋白和波形蛋白的表达。与阴性对照组相比,干扰组细胞中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白β-catenin、C-myc、Bcl-2、MMP-9和CyclinD1的表达被抑制,使用Wnt/β-catenin通路激活剂LiCl与干扰组TSCC细胞共培养后,干扰组细胞中上述蛋白的表达趋势被逆转;细胞功能学证实敲低hsa_circ_0000231表达可以显著抑制CAL-27和Tca-8113细胞增殖、侵袭和转移能力;使用LiCl逆转了hsa_circ_0000231促进CAL-27和Tca-8113细胞迁移和侵袭的能力。裸鼠成瘤实验显示使用LiCl处理过的皮下移植瘤的质量和体积明显大于hsa_circ_0000231敲低组。 结论:hsa_circ_0000231是TSCC的独立预后因子,hsa_circ_0000231可以通过激活Wnt/β-catenin通路促进舌癌细胞的增殖、侵袭和转移。
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编辑人员丨4天前
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超声加速卢戈氏碘液增强Micro-CT成像用于口腔鳞状细胞癌术中成像的可行性研究
编辑人员丨2023/12/16
目的:将超声引入卢戈氏碘液(Lugol's iodine)增强Micro-CT成像中,评价其加速口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)样本Micro-CT增强成像的可行性.方法:首先,超声(3 W)作用于Lugol's iodine(1%、3%、5%)染色 Cal-27 细胞过程中,作用时间为 5、10、15 min.平均光密度值(average optical density,AOD)评价Cal-27染色差异.其次,选择36只Balb/c裸鼠[8周龄,(25±2)g]断颈法处死后分离小鼠舌体组织,按照随机分组分为超声组及无超声组,再以1%、3%、5%Lugol's iodine染色(n=6),在染色后0.5 h和1 h行Micro-CT成像和CT值定量分析.选取南京市口腔医院口腔颌面外科的4例病理诊断为颊黏膜鳞状细胞癌的OSCC男性患者,纳入8块肿瘤样本,随机分为超声组和无超声组.以3%Lugol's iodine浸染组织块,Micro-CT成像时间为染色后0.5 h、1 h、2 h、4 h.CNR值定量分析肿瘤和正常组织间的成像清晰度.结果:细胞实验结果显示,超声作用Cal-27在5 min和10 min时,1%、3%Lugol's iodine的AOD值高于对照组(P<0.05).动物实验结果显示,超声作用下小鼠舌体组织的Micro-CT成像的CT值高于对照组(P<0.05).临床研究结果显示,OSCC标本超声作用3%Lugol's iodine染色2 h的Micro-CT成像可见肿瘤和正常组织边界,同时HE切片可见分界线.结论:超声辅助Lugol's iodine可加速Cal-27的浸润,与此同时超声辅助Lugol's iodine增强Micro-CT成像用于OSCC样本术中切缘评价具有一定的临床可行性.
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编辑人员丨2023/12/16
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基于生物信息学分析LAMB3在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义
编辑人员丨2023/10/21
目的 基于生物信息学方法,通过HPA、TCGA和GEPIA等多个数据库探讨LAMB3在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达及临床意义.方法 HPA数据库分析LAMB3 mRNA和蛋白在不同部位的表达.R软件通过TCGA数据库分析LAMB3 mRNA在OSCC和正常对照样本中的表达差异及与临床病理特征间的关系.GEPIA、TCGA数据库应用Log-rank法行预后分析.BioGRID数据库分析与LAMB3 具有交互作用的基因.R软件通过TCGA数据库筛选LAMB3 在OSCC中的共表达基因并行富集分析.STRING数据库筛选并构建LAMB3共表达基因的蛋白质互作网络(protein-protein interaction network,PPI network).结果 人正常样本中LAMB3 mRNA在舌部表达最高.LAMB3 蛋白在2例正常口腔黏膜样本和2例OSCC样本中均为中度表达.LAMB3 mRNA在OSCC中表达上调,与临床分期、年龄和总生存率相关,与肿瘤分化程度和性别不相关.OSCC中LAMB3的共表达基因中正相关145个、负相关4个.PPI network中具有相互作用关系最多的前10位基因里多为整联蛋白家族成员(ITGA3、ITGA5、ITGA6、ITGB4).结论 LAMB3 在OSCC中呈高表达,其高表达与年龄和临床分期相关且预后较差,并且与共表达基因中的整联蛋白在OSCC发生或发展相关的功能与通路的调控机制中关系密切,可为LAMB3为靶点的OSCC临床诊断或治疗提供新的研究方向和依据.
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编辑人员丨2023/10/21
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FAT10在4-硝基喹啉-1-氧化物诱导舌癌模型中的表达特点
编辑人员丨2023/8/6
目的:建立与人舌黏膜鳞癌相近的大鼠舌癌模型,并研究其发生发展过程中双泛素FAT10的表达变化.方法:实验组SD雄性大鼠使用含有40μg/mL的4-硝基喹啉-1-氧化物(4-NQO)饮水喂养,分别在8、16、24周时取大鼠舌体中病灶部位组织,行组织学观察;对照组大鼠正常饮用水喂养24周.使用免疫组织化学法检测FAT10、p53在舌黏膜不同程度病变组织中的表达.结果:大鼠舌黏膜经过4-NQO不同时间的刺激,可发展成不同程度的上皮异常增生以及鳞状细胞癌.从正常黏膜到不同程度的不典型增生以及最后高分化的鳞癌中,FAT10的表达强度呈逐渐增高趋势;p53在正常黏膜为阳性表达,在不典型增生中表达升高,而在癌组织中表达降低.结论:在舌癌的发生、发展过程中,FAT10可能发挥了癌基因的作用.
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编辑人员丨2023/8/6
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副神经化上斜方肌肌皮瓣即刻修复舌鳞癌缺损的初步探索
编辑人员丨2023/8/6
目的 探讨副神经化上斜方肌肌皮瓣即刻修复舌鳞癌手术后舌体缺损的临床疗效.方法 收集2015年1月至2016年12月重庆医科大学附属口腔医院口腔颌面外科收治的6例经病理确诊的舌鳞癌患者,均行舌颈联合根治性颈清术,术中采用副神经和舌下神经吻合术的上斜方肌肌皮瓣同期修复舌缺损.供区创面直接拉拢缝合,未行植皮.结果 6例皮瓣全部成活.6个月至1年后,皮瓣呈现黏膜化,类似口腔黏膜形态,质地良好.再造舌的早期(3个月内)动度主要依靠残留舌体的运动.6个月后再造舌有明显动度,但灵活度较健侧差,患者对语言、吞咽等功能满意.结论 副神经化上斜方肌肌皮瓣是修复舌鳞癌术后缺损理想皮瓣之一.
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编辑人员丨2023/8/6
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上斜方肌肌皮瓣在舌鳞癌术后缺损即刻修复的临床应用
编辑人员丨2023/8/6
目的 探讨以颈横动脉为蒂的上斜方肌肌皮瓣修复舌鳞癌术后缺损的临床应用效果.方法 2013年1月至2015年12月对16例经病理确诊的舌鳞癌患者均行舌颈联合根治性颈清术,术中采用以颈横动脉为蒂的上斜方肌肌皮瓣同期修复舌缺损.供区创面直接拉拢缝合,未行植皮.结果 16例患者皮瓣全部成活,皮瓣成活率为100%.术后早期再造舌外形和功能较差.术后3个月至1年,皮瓣出现黏膜化,患者的语言、咀嚼和吞咽功能改善明显.结论 以颈横动脉为蒂的上斜方肌肌皮瓣是修复舌鳞癌术后缺损理想的皮瓣之一.
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编辑人员丨2023/8/6
