葡萄糖磷酸异构酶(GPI)缺乏症是一种罕见的常染色体隐性遗传病， GPI突变造成的酶结构异常及活性缺乏是其主要的致病原因。该病的临床表现包括新生儿高胆红素血症、先天性非球形红细胞溶血性贫血等，在感染等诱因下可发生急性溶血危象，部分病例伴有神经系统症状。GPI缺乏症的实验室检查方法主要包括GPI活性测定和 GPI基因检测。笔者拟就GPI缺乏症的发病机制、临床特征、实验室检查、治疗及预后的研究现状进行总结，旨在为该病的临床诊疗提供参考。

获得性大疱性类天疱疮样表皮松解症（EBA）是一种自身抗体驱动的、粒细胞介导的皮肤病。既往研究证据表明，免疫细胞的分化、功能、代谢相互影响，这是免疫反应的先决条件。例如，Th1和M1型巨噬细胞即使在有氧条件下也要依赖于糖酵解，而M2型巨噬细胞、调节性T细胞（Treg）和静止记忆T细胞则主要依赖于氧化磷酸化（OxPhos）。但细胞代谢的作用及其作为EBA治疗靶点的潜力尚不清楚。为此作者研究了2-脱氧-D-葡萄糖和二甲双胍在EBA抗体转移C57BL/6J野生型小鼠中的作用。研究结果显示二甲双胍和2-脱氧-D-葡萄糖均能够在该模型中减轻EBA症状。而后，该项研究证明了免疫复合物对中性粒细胞的刺激增加了有氧糖酵解的速率，并且这种增加是诱导对EBA至关重要的白三烯B4和活性氧的释放所必需的。因此，2-脱氧-D-葡萄糖作为糖酵解酶己糖激酶和磷酸葡萄糖异构酶的抑制剂，庚酸作为GAPDH的抑制剂，减弱了这种中性粒细胞的反应。在超药理学剂量时，二甲双胍能够降低氧化磷酸化水平，也能抑制这种中性粒细胞反应，而在体内二甲双胍却不大可能对中性粒细胞产生直接影响。氧化磷酸化抑制剂寡霉素同样能够抑制这种中性粒细胞反应，且免疫复合物刺激不会改变氧化磷酸化的速率，这意味着中性粒细胞完整线粒体反应是抑制糖代谢反应的基础。总的来说，该研究强调2-脱氧-D-葡萄糖和二甲双胍是治疗EBA的潜在药物，而中性粒细胞的糖酵解和氧化磷酸化都是EBA颇具前景的治疗靶点。

目的:探索巨噬细胞在非酒精性脂肪性肝炎(NASH)中的作用、机制和治疗价值。方法:通过给予8周龄雄性Alms突变( foz/ foz)小鼠高脂饮食6、8和10周，给予8周龄雄性C57BL/6小鼠蛋氨酸胆碱缺乏(MCD)饮食7 d、3周和4周分别构建NASH小鼠模型，对照组小鼠分别给予普通饮食和MCD对照饮食。采用荧光定量聚合酶链反应方法检测NASH模型小鼠和对照组小鼠肝脏的 F4/80 mRNA水平，采用免疫荧光染色观察对照组小鼠和NASH模型小鼠肝脏中的巨噬细胞。lysM-Cre/DTR转基因小鼠予MCD饮食5周后，分为转基因实验组(给予白喉毒素清除巨噬细胞)和转基因对照组(给予磷酸盐缓冲液注射)。检测转基因实验组和转基因对照组小鼠肝脏中的甘油三酯水平和脂质过氧化物水平，并对小鼠的肝脏组织进行炎症评分。通过细胞因子分析实验和蛋白质印迹法分析巨噬细胞调节NASH中炎症的作用机制。通过AML-12肝细胞和RAW264.7巨噬细胞条件培养基与细胞共培养观察肝细胞和巨噬细胞的相互作用。通过氯膦酸脂质体清除野生型和NASH模型小鼠中的巨噬细胞，证实其在NASH预防中的价值。统计学方法采用独立样本 t检验。 结果:NASH模型 foz/ foz小鼠高脂饮食饲养6、8和10周时肝脏中的 F4/80 mRNA水平均高于对照组小鼠(1.49±0.19、1.70±0.15、1.93±0.04比1.05±0.22)，差异均有统计学意义( t＝3.06、4.92、7.92，均 P<0.05)；NASH模型小鼠MCD饮食饲养7 d和3周时肝脏中的 F4/80 mRNA水平均高于对照组小鼠(2.70±0.99和3.08±1.71比1.00±0.83)，差异均有统计学意义( t＝3.43、3.54，均 P<0.01)；免疫荧光染色结果显示，与对照组比较，NASH模型小鼠MCD饲养4周时肝脏中F4/80 +诱导型一氧化氮合酶(iNOS) +的M1型巨噬细胞增多，F4/80 +CD206 +的M2型巨噬细胞明显减少。巨噬细胞清除后转基因实验组小鼠的炎症评分、肝脏甘油三酯和脂质过氧化物水平均低于转基因对照组[(0.69±0.32)分比(1.95±0.74)分、(43.97±13.24) g/mg比(63.09±14.85) g/mg、(24.84±6.21) nmol/mg比(37.91±8.91) nmol/mg]，差异均有统计学意义( t＝3.14、2.72、2.41，均 P<0.05)。细胞因子分析实验结果显示，巨噬细胞清除可显著降低血液中白细胞介素(IL)-12和巨噬细胞炎症蛋白-1α的蛋白质水平(差异倍数分别为-3.98、-2.74，均 P<0.05)。转基因实验组小鼠细胞核中CCAAT/增强子结合蛋白β蛋白质减少。体外研究发现RAW264.7巨噬细胞条件培养基可促进AML-12肝细胞中脂肪聚集；MCD培养基处理的AML-12肝细胞条件培养基可促进RAW264.7巨噬细胞向M1型极化。经氯膦酸脂质体处理后的野生型小鼠肝脏中的甘油三酯和脂质过氧化物的蛋白质表达水平均低于MCD诱导的NASH模型小鼠[(45.33±14.59) g/mg比(63.10±16.02) g/mg、(2.11±0.48) nmol/mg比(2.73±0.17) nmol/mg]，差异均有统计学意义( t＝2.84、2.73，均 P<0.05)。蛋白质印迹法结果显示，经氯膦酸脂质体处理后的NASH模型小鼠肝脏中的磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶、肌醇需求酶-1α、蛋白质二硫键异构酶、葡萄糖调节蛋白78、磷酸化真核起始因子2α的蛋白质相对表达量均低于未经氯膦酸脂质体处理的NASH模型小鼠(1.84±0.36比3.05±0.83、1.50±0.84比6.65±1.47、0.87±0.12比2.28±0.52、1.68±0.43比4.76±1.13、1.42±0.19比2.75±0.79)，差异均有统计学意义( t＝2.32、5.28、4.56、4.41、2.85，均 P<0.05)。 结论:NASH中巨噬细胞发生M1型极化，并与肝细胞相互作用促进炎症因子分泌、脂肪合成因子上调、氧化应激和内质网应激，引起NASH进展。巨噬细胞清除剂氯膦酸脂质体是预防NASH潜在的新途径。

目的:探讨抗氨基甲酰化蛋白(carbamylated protein,CarP)抗体在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)中的表达水平及应用价值.方法:回顾2018年12月至2019年6月就诊于新疆维吾尔自治区人民医院风湿免疫科的RA患者、非RA患者以及体检中心健康对照人群的人口学资料、实验室检查结果及肌肉骨骼超声结果,采用间接酶联免疫吸附试验测定各研究对象血清中抗CarP抗体的浓度并进行统计学分析.结果:共纳入259例研究对象,其中RA组158例(包括血清阴性RA 45例),非RA组59例,健康对照组42例.RA组患者抗CarP抗体浓度[8.31(5.22,15.26)U/mL]高于非 RA 组[4.50(3.35,5.89)U/mL]及健康对照组[3.46(2.76,4.92)U/mL];非RA组抗CarP抗体浓度与健康对照组相比,差异无统计学意义(P=0.10).受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析抗CarP抗体诊断RA的灵敏度58.2％、特异度93.1％,抗CarP抗体、抗环瓜氨酸多肽(cyclic peptide containing citrulline,CCP)抗体及类风湿因子(rheumatoid factor,RF)三者联合检测时灵敏度 82.3％、特异度96.5％.抗CarP抗体在血清阴性RA患者中的阳性率为44.4％(20/45).单因素Logistic回归分析显示,年龄、C 反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、RF、葡萄糖-6-磷酸异构酶(glucose-6-phosphate isomerase,GPI)、抗CCP抗体、抗CarP抗体是RA发生的危险因素;多因素Logistic回归分析发现,抗CCP抗体、抗CarP抗体是RA发生的独立危险因素.Spearman相关性分析发现,抗CarP抗体与肿胀关节数、压痛关节数、ESR、28个关节的疾病活动度评分(disease activity score for 28 joints,DAS28)、临床疾病活动指数(clinical disease activity index,CDAI)、简化疾病活动指数(simplified disease activity index,SDAI)无明显相关性(P＞0.05).有骨侵蚀RA组患者(88例)抗CarP抗体浓度高于无骨侵蚀RA组(70例),差异有统计学意义(P＜0.05).结论:抗CarP抗体对RA的诊断有一定的价值.RF、抗CCP抗体、抗CarP抗体三者联合检测可提高其诊断价值,抗CarP抗体可能是血清阴性RA的有效辅助诊断工具.RA患者血清中高水平的抗CarP抗体浓度可能提示骨侵蚀风险增加,应早期干预治疗,但仍需进一步队列研究随访观察.

[背景]慢性过量氟暴露会导致中枢神经系统出现损伤,造成一定程度的学习记忆功能损害,然而其损伤机制尚不明确,仍需进一步探究.[目的]应用 4D非标记定量蛋白质组学技术探究慢性过量氟暴露致大脑损伤的差异表达蛋白及其潜在的作用机制.[方法]选取SPF级成年SD大鼠 24只,雌雄各半,采用随机数字表法分为对照组与染氟组,每组 12只.其中,对照组饮用自来水(氟含量<1 mg·L-1),染氟组饮用氟化钠溶液(氟含量10 mg·L-1),两组均饲以普通鼠饲料(氟含量<0.6 mg·kg-1).饲养 180 d后称SD大鼠的体重,随后取部分脑组织分别行苏木素-伊红(HE)染色和尼氏体染色的病理学检查,其余脑组织速冻后于-80℃保存.每组脑组织样本随机挑选 3份进行蛋白质组学检测,筛选出差异表达蛋白并进行亚细胞定位分析,随后进行基因本体(GO)功能分析、京都基因和基因百科全书(KEGG)通路分析、聚类分析及蛋白相互作用网络分析获得关键蛋白.最后选用脑组织样本提取蛋白行蛋白免疫印迹实验检测关键蛋白的表达水平.[结果]饲养 180 d后,染氟组SPF级成年SD大鼠的体重较对照组明显降低(P<0.05).HE染色结果显示染氟组大鼠脑皮质未见明显形态变化,海马区见神经元丢失、神经元排列层次不整齐、部分神经元嗜酸性变和胞体固缩.尼氏染色结果显示染氟组大鼠脑皮质及海马区神经元染色变浅(尼氏体减少).蛋白质组学检测共鉴定出 6927个蛋白,经过筛选在对照组与染氟组中获得差异表达蛋白 206个,包括 96个表达上调蛋白和 110个表达下调蛋白,差异蛋白主要定位于细胞质(30.6%)、细胞核(27.2%)、线粒体(13.6%)、质膜(13.6%)和胞外(11.7%).GO分析结果显示差异表达蛋白主要参与铁离子运输、多巴胺神经元分化的调控和炎症反应中呼吸爆发的负调控等生物过程,行使亚铁结合、铁氧化酶活性、细胞因子活性等分子功能,位于滑面内质网膜、膜的固定成分、氯化物通道复合体等细胞组分.KEGG显著富集通路为次级代谢产物的生物合成、碳代谢和多样环境中的微生物代谢等.差异蛋白相互作用网络分析结果显示葡萄糖-6-磷酸异构酶(Gpi)连接度最高.经蛋白免疫印迹实验检测,Gpi在染氟组成年SD大鼠脑组织中表达水平较对照组降低(P<0.05).[结论]慢性氟中毒大鼠脑组织中存在多种差异表达蛋白,其功能与次级代谢产物的生物合成、碳代谢和多样环境中的微生物代谢有关;Gpi可能参与慢性过量氟暴露致脑神经损伤.

不同的淋巴细胞分型在RA中的功能不同,现已明确辅助性淋巴细胞(Helper T cells,Th)-1、Th17等T细胞在RA中的发病机制.糖代谢主要包括有氧氧化、糖酵解、磷酸戊糖途径,其代谢过程不仅可以为细胞新陈代谢提供能量和原料,而且其中间产物也参与信号通路的传导.肿瘤细胞利用Warburg效应满足其高能量代谢需求,T细胞被激活,几种糖酵解的关键酶快速转录表达,包括三磷酸甘油醛脱氢酶、葡萄糖磷酸异构酶、二磷酸果糖酶、烯醇酶、和磷酸果糖激酶2/果糖-2,6-二磷酸酶(phosphofructokinase-2/fructose-2,6-bisphosphatase,PFKFB).有氧糖酵解与T细胞分化有关,并且能够促进T细胞产生IFN-γ和血管内皮细胞增生[1-2].在RA滑膜组织和血浆中,烯醇化酶、醛缩酶、磷酸己糖异构酶、葡萄糖6磷酸酶的代谢失调能够诱导免疫细胞活化,和一些炎症因子(如TNF-α,IL-17,IFN-γ)和自身抗体的产生,造成慢性炎症反应和骨破坏[-34].RA中T细胞的分化增殖与糖代谢也有密切联系,但其作用机制尚不明确.

目的 探讨消瘀接骨散外敷配合电磁波谱治疗仪(TDP)照射辅助治疗类风湿关节炎(RA)的效果及其对肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素17(IL-17)的影响.方法 选取RA患者60例,按随机数字表分为研究组和对照组,每组30例.对照组给予常规治疗,研究组在常规治疗基础上加用消瘀接骨散外敷配合电磁波谱治疗仪照射辅助治疗.结果 治疗后两组比较,两组RA患者的DAS 28-3评分均降低,对照组差值为(-1.38 ±0.56)分,研究组差值为(-2.20 ±0.74)分,两组治疗后比较,研究组DAS 28-3缓解程度优于对照组(P<0.01);两组患者主要症状(关节疼痛、关节压痛、关节肿胀、晨僵)分值均明显降低(P<0.01);在改善关节压痛、关节肿胀、晨僵症状积分方面,研究组优于对照组(P<0.05);研究组红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸肽(CCP)、葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)、免疫球蛋白均降低,补体C3、C4升高(P<0.01或P<0.05);对照组GPI无显著变化,补体C3升高,其余指标均降低(P<0.01或P<0.05);研究组在降低ESR、CRP、抗CCP方面,优于对照组(P<0.05),在升高C3方面,研究组优于对照组(P<0.01),两组TNF-α、IL-17降低,IL-10值升高(P<0.05).两组治疗后相比较,研究组在降低IL-17、升高IL-10方面,研究组优于对照组(P<0.05).结论 消瘀接骨散外敷配合TDP照射可改善RA患者炎性指标,上调体内抑炎因子水平,提高临床缓解率.

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是以关节软骨破坏和慢性炎症为特点的自身免疫性疾病,是最常见的风湿病之一,呈全球分布,病因尚不清楚,以慢性、对称性、多关节炎和关节外病变为主要临床表现,具有活动期和稳定期.免疫应答的紊乱和关节部位的过度炎症参与其发病机制.若不早期诊断、及时有效地治疗,可导致关节畸形及功能障碍.葡萄糖-6-磷酸异构酶(glucose-6-phos-phate isomerase,GPI)最早于1968年因非球形红细胞溶血性贫血得到认识.近年有研究提出,葡萄糖-6-磷酸异构酶在类风湿关节炎患者血清和关节液中明显增高,有助于诊断和评估病情.本文就其在类风湿关节炎中的相关研究做一综述.

目的 探究用壮医热敏探穴针刺疗法治疗36例类风湿关节炎的临床效果.方法选择72例类风湿关节炎患者为研究对象,随机分为对照组和观察组患者各36例.对照组患者单纯给予西药治疗,观察组患者则在对照组基础上给予壮医热敏探穴针刺疗法治疗,2周为1个疗程,两组均连续治疗2个疗程.比较两组治疗的临床效果,观察症状缓解情况,检测治疗前后机体免疫功能指标及血清中血沉(ESR)、类风湿因子(RF)、白细胞介素-22(IL-22)、白细胞介素-37(IL-37)、葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)水平.结果 观察组的临床治疗有效率为91.7%,显著高于对照组的有效率77.8%(P<0.05);观察组患者经治疗后的压痛关节数、肿胀关节数显著少于对照组,关节晨僵持续时间较对照组显著缩短,关节疼痛评分则对照组显著降低(P<0.05);观察组患者治疗后的血清免疫球蛋白IgG、IgA、IgM水平及T细胞亚群CD4+、CD4+/CD8+显著高于对照组,而CD8+水平则明显低于对照组(P<0.05);观察组患者经治疗后的ESR、RF、IL-22、IL-37、GPI水平显著低于对照组患者(P<0.05).结论 加用壮医热敏探穴针刺疗法利于缓解关节压痛、肿胀、晨僵等症状,提高免疫功能,其机制可能在于通过调控IL-22、IL-37、GPI水平以纠正免疫失衡、减轻炎性损伤、保护软骨组织.

目的 分析血清葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)在类风湿关节炎(RA)活动性评估中的应用价值.方法 选择2015年1月至2017年1月新乡市中心医院收治的80例RA患者(RA组),选择同期收治的系统性红斑狼疮(SLE)20例、强直性脊柱炎(AS) 10例作为风湿病对照组,另选择同期体检健康者30例作为正常对照组.抽取所有研究对象外周静脉血,采用酶联免疫吸附试验测定血清GPI水平,分析GPI与RA活动性的关系.结果 RA组患者血清GPI水平高于风湿病对照组与正常对照组,风湿病对照组患者血清GPI高于正常对照组(P＜0.05).RA组活动期患者血清GPI水平高于RA组非活动期患者、正常对照组与风湿病对照组(包括SLE和AS患者)(P＜0.05);RA组非活动期患者血清GPI高于正常对照组和风湿病对照组(包括SLE和AS患者)(P＜0.05).GPI诊断RA的受试者工作特征曲线(ROC)下面积为0.735,最佳临界值为0.73 mg· L-1,当GPI为0.73 mg·L-1时,GPI诊断RA的敏感度为79.0％,特异度为64.5％.GPI与RA疾病活动性呈正相关(r=0.723,P＜0.05).结论 RA患者血清GPI水平高于正常人及其他风湿免疫性疾病患者,且其水平的变化与疾病活动度呈正相关.