目的:探讨β-葡聚糖联合激发型抗CD40单克隆抗体(5C11)对树突状细胞(DCs)的作用及分子机制。方法:采用密度梯度离心法从健康人新鲜的浓缩白细胞中分离出单个核细胞，使用GM-CSF和IL-4细胞因子法诱导培养未成熟DCs，经不同刺激方式(5C11、β-葡聚糖、5C11＋β-葡聚糖)激发后，流式细胞术检测不同组DCs表面共刺激分子CD40、CD80、CD83、CD86和MHCⅡ类分子HLA-DR的表达，ELISA法检测IL-12、IL-6、TNF-α、IL-10等相关细胞因子的表达，Western blot检测MAPK信号通路中相关蛋白质的磷酸化水平。结果:β-葡聚糖能够显著诱导CD40在DCs表面的表达( P<0.05)，联合5C11后，其他表面分子CD80、CD83、CD86的表达进一步显著上调，尤其对DCs成熟的重要标志分子CD83的上调表现出强烈的协同效应( P<0.01)；ELISA检测结果显示β-葡聚糖联合5C11可以诱导DCs大量分泌IL-12、IL-6、TNF-α等促炎因子，对发挥DCs功能的关键因子IL-12的分泌表现出协同效应( P<0.01)；Western blot结果显示p38 MAPK、p44/42 MAPK的磷酸化水平显著上升，且磷酸化时间提前，维持时间也延长( P<0.01)。 结论:β-葡聚糖联合5C11可协同促进DCs的成熟并提高DCs的免疫功能，为肿瘤DCs疫苗的制备方案提供了新思路。

目的:探讨儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）合并热带念珠菌血症（CTBI）的临床特征、诊疗与预后，提高对该病的认识。方法:回顾性分析2015年1月至2018年12月在6家医院诊断的14例ALL合并CTBI患儿的一般资料、临床表现、辅助检查、治疗及转归情况。收集同期入院的无侵袭性真菌病（IFD）的ALL患儿（28例）及其他IFD患儿（9例）的临床资料作为对照组。采用Logistic回归分析探讨CTBI发生的危险因素。结果:14例患儿中男7例、女7例，年龄1岁5月龄~13岁。14例均有发热，9例有消化系统症状，3例粪培养有真菌；7例有呼吸系统症状，1例痰培养为真菌；2例有中枢神经症状；10例发生休克。14例患儿均有中性粒细胞缺乏，中性粒细胞缺乏持续时间1~53 d。C反应蛋白>50 mg/L的比例明显高于其他IFD病例（8/14比1/9， P<0.05），(1, 3)-β-D-葡聚糖、半乳甘露聚糖检测及肺部影像学无特异性。14例患儿血培养均可见热带念珠菌，13例完善药敏，均对氟胞嘧啶、两性霉素B敏感，4例对氟康唑、伏立康唑、伊曲康唑敏感。14例患儿中，1例放弃治疗后失访，1例在抗真菌治疗前死亡，余12例予抗真菌治疗；14例患儿中死亡7例。ALL合并CTBI组（14例）与ALL未发生IFD组（28例）在ALL未缓解（χ2=37.847， P<0.01）、住院时间>15 d（χ2=8.351， P=0.004）、中性粒细胞缺乏（χ2=14.280， P<0.01）、中性粒细胞缺乏时间>10 d（χ2=10.254， P=0.001）、应用广谱抗菌药物（χ2=13.888， P<0.01）、皮肤黏膜破损（χ2=5.923， P=0.015）方面差异有统计学意义。 结论:CTBI耐药率及病死率高，针对耐唑类热带念珠菌，推荐使用两性霉素B或棘白菌素+氟胞嘧啶联合治疗，降低治疗相关死亡风险。

患者女，67岁，2022年2月出现咳嗽、咳大量白色痰，伴气短、低热。外院胸部CT提示右肺下叶斑片、团片影，右肺门增大，临床予"头孢"类抗生素治疗后未再发热。2022年4月咳嗽、咳痰症状加重，予抗生素治疗后症状无明显好转。2022年7月就诊于本院，(1，3)－β－ D－葡聚糖(G试验)和曲霉半乳甘露聚糖抗原(GM试验)、呼吸道病原体抗体、痰抗酸染色、结核/非结核分枝杆菌核酸、分枝杆菌培养及抗核抗体(antinuclear antibody, ANA)谱、抗中性粒细胞胞质抗体(anti neutrophil cytoplasmic antibodies, ANCA)检测结果均阴性；痰液细胞学病理可见非典型细胞；纤维气管镜检查提示右下叶背段开口狭窄，支气管黏膜刷片病理见挤压变形的异型细胞。临床考虑"慢性炎性机化可能"，予激素治疗后咳嗽、气短症状稍减轻。2022年9月复查胸部增强CT，结果示：右肺见弥漫大片状磨玻璃密度及实变影，其内散在小囊状透光区，病变见不均匀的轻中度强化，其内见明显的血管强化影，呈"血管造影征"，病变范围较前增大；另见左肺多发结节(图1)。血糖类抗原(carbohydrate antigen, CA)19－9: 4 224[正常参考值范围(下同)：0~34] kU/L，细胞角蛋白19片段(cytokeratin 19－fragments, Cyfra)21－1：4.0 (0~3.5) μg/L，CA242>150(0~20) kU/L，CA72－4：12.4 (0~6.9) kU/L。既往史：患者40年前曾患肺结核。

目的:探讨环指蛋白152(RNF152)在结肠炎相关结肠癌(CAC)发生发展过程中的作用及其作用机制。方法:联合应用氧化偶氮甲烷(AOM)和葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导C57BL/6小鼠，建立CAC发生发展4个阶段(分别为正常上皮组织、炎症恢复期、轻度不典型增生、腺癌)的小鼠模型。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测不同阶段小鼠结肠组织中RNF152 mRNA的表达。利用人结直肠癌RKO细胞建立稳定高表达RNF152的细胞系。采用流式细胞术检测RNF152高表达对细胞凋亡的影响，Western blot法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bcl-XL的表达。使用NO自由基供体DETA NONOate处理细胞，比较RNF152高表达对NO诱导细胞凋亡的影响。结果:AOM和DSS联合使用能有效地模拟人类CAC的病程，AD3组小鼠成瘤率为100%。CAC小鼠模型的结肠全基因组表达谱芯片显示，RNF152 mRNA的表达水平随着结肠癌的发生发展逐步降低。RT-qPCR检测结果显示，腺癌组结肠组织中RNF152 mRNA的表达水平为1.23±0.18，高于对照组结肠组织(0.52±0.08, P<0.01)。RNF152稳定高表达的RKO-RNF152细胞中，sub-G1期细胞比例[(3.6±0.4)%]高于RKO-PCDB细胞[(1.8±0.1)%, P<0.01]，Bcl-XL和Bcl-2的蛋白表达水平明显下调。DETA NONOate处理后，RKO-RNF152细胞的凋亡比例为(31.2±3.1)%，高于RKO-PCDB细胞[(14.2±2.1)%, P<0.001]。 结论:RNF152的表达降低与CAC的发生发展有关，可能通过抑制细胞凋亡促进了CAC的发生发展。

例1 　男，33岁，因诊断寻常型天疱疮11个月，气喘2周于2020年7月就诊。患者于2019年确诊为寻常型天疱疮，予甲泼尼龙60 ~ 100 mg/d与硫唑嘌呤200 mg/d治疗。因病情反复改为利妥昔单抗联合甲泼尼龙治疗，于2020年5月21日和2020年6月5日分别静脉滴注利妥昔单抗1.0 g。甲泼尼龙初始剂量为100 mg/d，第3、11、16、30天分别减量至80、60、48、40 mg/d，30 d时皮损基本消退。第1次应用利妥昔单抗5周后（此时甲泼尼龙40 mg/d），患者出现气喘，活动后明显，偶伴有干咳。家族史和既往史无特殊。体检：体温36.6 ℃，全身未见水疱。各系统检查无异常。胸部高分辨率CT示：两肺间质性肺炎，两肺上叶局限性肺气囊。实验室检查：利妥昔单抗治疗前CD4 + T细胞429.45个/μl（参考值200 ~ 1 820个/μl，下同），CD19 + B细胞481.45个/μl（50 ~ 670个/μl），免疫球蛋白（Ig）M浓度为0.63 g/L（0.4 ~ 2.3 g/L），治疗后CD4 + T细胞354.54个/μl，CD19 + B细胞0.49个/μl，IgM 0.629 g/L。淋巴细胞计数0.59 × 10 9/L[（1.1 ~ 3.2） × 10 9/L]；乳酸脱氢酶604 U/L（120 ~ 250 U/L）；真菌β-D-葡聚糖试验236.1 pg/ml（< 60 pg/ml，阴性）；病毒8项（乙肝表面抗原定量、乙肝表面抗体定量、乙肝e抗原、乙肝e抗体、乙肝核心抗体、HIV抗原/抗体联合检测、丙肝抗体、梅毒螺旋体）和曲霉菌免疫学试验均阴性；动脉血气分析正常。送检支气管肺组织特殊染色：阿新蓝染色阴性，吉姆萨染色阴性，六胺银染色（+/-），过碘酸雪夫染色（PAS）阴性；肺泡灌洗液二代测序结果提示，可疑致病菌主要有耶氏肺孢子菌、白念珠菌、人类疱疹病毒4型（EB病毒）。

目的:探讨二代测序技术在非人类免疫缺陷病毒（HIV）感染者肺孢子菌肺炎诊断中的应用价值。方法:回顾性分析解放军总医院第四医学中心2017年9月1日至2018年9月1日采用二代测序技术诊断的5例非HIV感染者肺孢子菌肺炎的诊治过程，并与常规实验室微生物检验结果进行比较，分析二代测序技术在非HIV感染者肺孢子菌肺炎诊断中的应用价值。结果:5例中男性3例，女性2例，平均年龄（48±6）岁。3例为膜性肾病，1例为结核性脑膜炎，1例为食管癌放化疗后，发病前均有糖皮质激素用药史。临床表现为发热、咳嗽、呼吸困难，胸部CT表现为双肺磨玻璃影，1， 3-β-D-葡聚糖试验结果均>1 000 ng/L。5例均行支气管肺泡灌洗，1例BALF六亚甲基四胺银染色发现肺孢子菌包囊，5例BALF二代测序均检出肺孢子菌和人类疱疹病毒核酸序列。5例均应用磺胺甲噁唑/甲氧苄啶治疗，中位治疗时间33（23，72） d，1.44 g，口服，1次/8 h；更昔洛韦治疗中位时间为15（6，22） d， 250 mg，静脉滴注，1次/12 h。经治疗后胸部CT表现及临床症状均好转，无死亡病例。结论:BALF的二代测序诊断非HIV患者肺孢子菌肺炎的特异度及敏感度高，较常规实验室检验方法更快速、全面、准确，可作为肺孢子菌肺炎诊断的方法之一。

目的:了解临床医务人员对重症感染诊断的临床思维，评估其对重症感染早期识别的能力。方法:对2019年9月26日至28日参加广西医师协会重症医学医师分会学术年会的临床医务人员就重症感染诊断临床思维情况进行问卷调查。调查对象包括医师、护士、临床药师、医学研究生，除外非临床人员。诊断感染的临床思维依据包括临床症状、特异生化检查、微生物培养、高通量测序技术（NGS）。对各指标的可信度级别归纳为高（可信度51%～100%）、低（可信度0%～50%）进行数据统计。结果:参会人员共600余人，有540人参与问卷调查，参与率约为90.0%；回收合格问卷466份，有效率86.3%；其中医师280份，临床护士155份，临床药师10份，临床研究生21份。医师、护士、临床药师、医学研究生的工作年限分别为（8.2±6.0）、（6.4±6.3）、（4.5±4.0）、（3.8±2.6）年。医师组以中级职称为主（占43.2%），护士组、临床药师组、医学研究生组均以初级职称为主（分别占各自组的53.5%、80.0%、81.0%）。且医师、护士主要来自综合重症监护病房（ICU；分别占73.2%、51.0%）。重症感染诊断临床思维调查结果显示，医生、护士、临床药师、医学研究生4类人群对感染相关症状的认同高度可信度均较一致，其中发热高度可信的比例为80.0%～91.1%，低血压为76.2%～90.0%，意识障碍为80.0%～85.0%，呼吸急促为81.0%～100.0%，尿量减少为81.9%～90.0%。对于病原学培养与NGS结果的解读存在认识水平不足，29.3%～42.6%的医务人员表示对NGS不了解；对病原学标本培养结果的解读也存在差异，医生、护士、临床药师、医学研究生认为标本培养阳性能诊断感染的比例分别为93.6%、85.2%、90.0%、85.7%（ P＝0.021）。不同人群对于某些传统的感染相关的实验室指标如白细胞计数（WBC）增高（χ 2＝8.542、 P＝0.026）、C -反应蛋白（CRP）增高（χ 2＝8.826、 P＝0.024）、白细胞介素- 6（IL-6）增高（χ 2＝13.944、 P＝0.002）、1，3-β-D葡聚糖检测（G试验）阳性（χ 2＝10.988、 P＝0.009）以及半乳甘露聚糖抗原检测（GM试验）阳性（χ 2＝12.306、 P＝0.004）的可信度认同差异存在统计学意义。 结论:不同岗位的临床医务人员对重症感染诊断临床思维存在差异，综合诊断能力有待培养提高。

目的:血清GM试验联合G试验评估慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者病情严重程度的研究。方法:回顾性研究。选取东营市东营区人民医院2018年1月至2020年3月住院治疗期间的AECOPD患者110例，进行GM试验及G试验，将血清半乳甘露聚糖水平>0.7 μg/L，1，3-β-D葡聚糖水平>200 ng/L的24例患者作为观察组，将血清半乳甘露聚糖水平<0.5 μg/L，1，3-β-D葡聚糖水平<50 ng/L的70例患者作为对照组，分别检测观察组与对照组在吸烟、合并症、吸入糖皮质激素用量、入院时症状、肺功能第1秒用力呼气容积占预计值百分比、用力肺活量占预计值百分比、实验室指标、使用抗生素治疗的种类及时间、病情缓解时间、住院时间、预后等方面的差异。结果:观察组患者吸烟比例、合并慢性心力衰竭的情况均高于对照组( P值均<0.05)。观察组吸入倍氯米松用量>1 000 μg/d的患者比例(58.3%)高于对照组(34.3%)；观察组出现喘憋症状及肺部哮鸣音的比例明显高于对照组；观察组肺功能第1秒用力呼气容积占预计值百分比明显低于对照组；观察组嗜酸粒细胞百分比高于5.0%的患者比例明显高于对照组、动脉血氧分压则较对照组明显下降；观察组使用超过1类抗生素治疗的比例明显高于对照组、治疗时间明显长于对照组；观察组病情缓解时间、住院时间明显较对照组长；此次住院期间观察组死亡患者比例明显高于对照组( P值均<0.05)。 结论:检测AECOPD患者血清半乳甘露聚糖水平及1，3-β-D葡聚糖水平，可帮助评估COPD伴有急性加重患者的病情严重程度、预估死亡风险。

目的:观察人白细胞介素-1受体Ⅱ(IL-1R2)在肠癌肿瘤微环境(TME)中的表达特征，探究IL-1R2在结肠癌中的作用。方法:分析基因表达谱数据库(GEO)中的结肠癌单细胞转录组测序(scRNA-seq)数据，确定IL-1R2基因在肿瘤组织中的表达分布。采用随机数字表法将小鼠分为对照组和IL-1R2敲基因组(Il1r2 －/－)。利用氧化偶氮甲烷(AOM)和葡聚糖硫酸钠(DSS)制备结肠炎相关肠癌模型。在AOM/DSS诱导后的第70d，收集肿瘤组织，计数肿瘤数量并测量其直径；应用流式细胞术分析Il1r2 －/－小鼠和对照组小鼠TME中各类细胞群体浸润的差异以及免疫检查点分子的表达差异。采用独立样本 t检验比较两组间差异。使用双向方差分析来比较体重曲线。 结果:小鼠结肠癌和人类结肠癌CD45 ＋免疫细胞的scRNA-seq数据的分析结果显示，与正常组织比较，IL-1R2在结肠癌组织中高表达。Il1r2 －/－小鼠与对照组小鼠肿瘤数量之间的差异无统计学意义(4.750±0.977比7.800±1.114， t＝2.005， P>0.05)，但是Il1r2 －/－小鼠肿瘤负荷显著低于对照组(24.170±7.483比96.000±19.990， t＝3.618， P<0.01)。Il1r2 －/－小鼠TME中CD45 ＋免疫细胞(35.140±3.673比7.076±1.929， t＝6.764， P<0.001)和CD8 ＋T细胞(26.820±1.004比15.900±2.665， t＝3.835， P<0.05)的比例显著高于对照组，CD4 ＋T细胞的比例有下降趋势，差异无统计学意义( P>0.05)。IL-1R2缺失导致程序性死亡因子-1(PD-1) ＋CD4 ＋T细胞(14.340±3.401比24.570±2.330， t＝2.482， P<0.05)、T细胞免疫球蛋白黏蛋白-3(Tim-3) ＋CD4 ＋T细胞(20.740±4.001比41.500±4.108， t＝3.620， P<0.01)、PD-1 ＋Tim-3 ＋CD4 ＋T细胞(7.184±2.129比15.140±1.730， t＝2.900， P<0.05)比例显著低于对照组，而CD8 ＋T细胞上PD-1和Tim-3的表达差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:IL-1R2在结肠癌中高表达，IL-1R2缺失可以降低小鼠对结肠炎相关肠癌的易感性。

目的:探讨危重烧伤并发侵袭性真菌感染患者的临床特征及死亡的危险因素。方法:采用回顾性病例系列研究方法。2017年1月—2022年12月，郑州市第一人民医院收治88例符合入选标准的危重烧伤并发侵袭性真菌感染患者，其中男61例、女27例，年龄26~74岁。统计患者侵袭性真菌感染部位和病原菌检出情况。依据入院后28 d内的生存结局，将患者分为存活组（63例）和死亡组（25例）。比较2组患者入院时年龄、性别、体重、烧伤总面积、合并吸入性损伤情况、合并高血压和糖尿病情况、急性生理学和慢性健康状况评价Ⅱ（APACHE Ⅱ）评分以及伤后入院时间等基本资料与伤情，入院后24 h内检测的白细胞计数、血小板计数、红细胞计数、单核细胞计数、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、葡萄糖、肌酐、尿素氮、D-二聚体、半乳甘露聚糖（GM）、1，3-β-D葡聚糖和肌酸激酶等血生化指标水平，治疗过程中连续性肾脏替代治疗、呼吸机辅助呼吸、气管切开、深静脉置管、手术植皮>2次等有创操作和应用血管活性药物情况，入院后1、3、7、14 d的C反应蛋白（CRP）、降钙素原、乳酸、白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等感染指标水平，治疗过程中病原菌检出情况。对数据行独立样本 t检验、重复测量方差分析、 χ2检验、Mann-Whitney U检验、Bonferroni校正。行多因素logistic回归分析，筛选影响危重烧伤并发侵袭性真菌感染患者死亡的独立危险因素。 结果:侵袭性真菌感染的主要部位为创面（67例）和血流（46例），感染的真菌主要为假丝酵母菌属真菌（58株），病原菌混合感染者共30例。与存活组比较，死亡组患者入院时APACHE Ⅱ评分、合并吸入性损伤和高血压比例均明显升高（ t=2.11， χ2值分别为6.26、9.48， P<0.05），其余基本资料和伤情均无明显变化（ P>0.05）。与存活组比较，死亡组患者入院后24 h内D-二聚体、GM、1，3-β-D葡聚糖水平均明显升高（ t值分别为2.42、2.05、2.21， P<0.05），入院后24 h内其余血生化指标及治疗过程中行各项有创操作和应用血管活性药物比例均无明显变化（ P>0.05）。2组患者入院后1、3 d的感染指标水平均相近（ P>0.05），死亡组患者入院后7 d的降钙素原与入院后14 d的CRP、降钙素原、乳酸、IL-6和TNF-α水平以及病原菌混合感染比例均明显高于存活组（ t值分别为4.69、3.89、6.70、6.14、4.65、3.26， χ2=12.67， P<0.05）。多因素logistic回归分析显示，合并吸入性损伤、合并高血压和病原菌混合感染均为影响危重烧伤并发侵袭性真菌感染患者死亡的独立危险因素（比值比分别为5.98、4.67、6.19，95%置信区间分别为1.42~15.39、1.41~25.28、1.86~20.58， P<0.05）。 结论:危重烧伤并发侵袭性真菌感染患者感染的主要部位为创面和血流，感染的真菌主要为假丝酵母菌属真菌，病原菌混合感染比例较高；该类患者死亡的独立危险因素为合并吸入性损伤、合并高血压和病原菌混合感染。