目的 基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨蓝盆花的抗大鼠肝纤维化作用及机制.方法 将50只SD大鼠按随机数表法分为对照组、模型组和蓝盆花高、中、低剂量组,对照组外其他4组通过腹腔注射CCl4橄榄油溶液诱导肝纤维化,对照组给予同等剂量橄榄油溶液.造模4周后,分别按照高、中、低剂量灌胃给予蓝盆花溶液.生化鉴定检测大鼠ALT、AST活性;通过HE染色观察大鼠肝脏组织病理学变化;通过Western Blot检测肝纤维化标志物E-cadherin、α-SMA和Collagen Ⅰ,同时检测PI3K、Akt以及mTOR蛋白表达.结果 干预4周后,蓝盆花高、中剂量组的肝细胞变性、坏死和肝小叶结构破坏等肝损伤表现明显减轻,大鼠血清ALT、AST水平明显下降(P＜0.05).肝纤维化可显著增加α-SMA和Collagen Ⅰ的表达,并降低E-cadherin的表达(P＜0.05).与模型组相比,高、中剂量组大鼠肝纤维化标志物α-SMA和Collagen Ⅰ蛋白水平显著降低,E-cadherin蛋白水平显著升高,p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白水平显著降低(P＜0.05).结论 蒙药蓝盆花对肝纤维化具有一定的治疗效果,可能通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路,发挥其对肝脏的保护作用.

目的 探索德都红花-7味散及其主要成分通过调控趋化因子受体(CCR1)、DNA甲基转移酶1(DNMT1)抑制四氯化碳(CCl4)所致肝纤维化的影响.方法 将C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、德都红花-7味散组(灌胃0.75 g·kg-1德都红花-7味散)、蓝盆花组(灌胃0.75 g·kg-1蓝盆花)和木犀草素低、高剂量组(分别灌胃0.02、0.04 g·kg-1木犀草素).除空白组外,其余各组均腹腔注射10％CCl4橄榄油溶液建立肝纤维化模型,各组均用0.5％CMC-Na溶解灌胃药物,每日1次,连续给药4周,末次给药后采集血液和肝组织.用酶联免疫吸附试验法检测血清DNMT1、CCR1、平滑肌肌动蛋白(α-smA)、Ⅲ型前胶原(precollagen Ⅲ)含量,用蛋白质印迹法检测DNMT1、CCR1、α-smA、Ⅰ型胶原(Collagen Ⅰ)蛋白表达情况.结果 空白组、模型组、德都红花-7组、木犀草素低剂量组、木犀草素高剂量组、蓝盆花组血清DNMT1含量分别为(4.56±0.69)、(6.09±0.59)、(5.21±0.33)、(4.99±0.68)、(5.03±0.45)和(5.17±0.61)pg·mL-1,CCR1 含量分别为(13.38±0.47)、(11.20±0.73)、(12 97±0.80)、(12.89±0.75)(12.88±0.95)和(12.92±0.58)pg·mL-1,α-smA 含量分别为(181.80±24.50)、(281.30±26.60)、(220.90±22.30)、(193.70±16.10)、(199.30±17.70)和(205.80±14.70)pg·mL-1,precollagen Ⅲ含量分别为(49.29±8.26)、(77.56±8.61)、(67.56±5.63)、(55.47±7.07)、(64.93±8.66)和(59.66±8.51)pg·mL-1,肝组织DNMT1蛋白相对表达水平分别为 0.08±0.03、0.26±0.08、0.13±0.01、0.12±0.05、0.13±0.05 和0.15±0.03,CCR1 蛋白相对表达水平分别为 0.18±0.03、0.13±0.02、0.21±0.06、0.22±0.07、0.17±0.07 和 0.18±0.06,α-smA蛋白相对表达水平分别 为 0.03±0.01、0.27±0.11、0.09±0.05、0.12±0.08、0.09±0.07 和0.11±0.07,Colagen Ⅰ 蛋白相对表达水平分别为 0.09±0.04、0.65±0.22、0.28±0.12、0.26±0.19、0.30±0.22 和 0.25±0.12.模型组的上述指标与空白组比较,各给药组上述指标与模型组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 木犀草素是德都红花-7味散减轻CC14引起肝纤维化的药效物质基础之一,其通过CCR1、DNMT1、α-smA、Collagen Ⅰ蛋白,抑制或延缓肝纤维化的形成.

目的 探讨蓝盆花醇提物抗肝纤维化(HF)的作用及机制.方法 采用四氯化碳灌胃法建立HF模型.通过观察肝组织病理学变化,检测HF指标[α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶原蛋白Ⅰ(Collagen Ⅰ)]及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路相关因子mRNA和蛋白表达水平,考察低、中、高剂量(50、100、200 mg/kg)蓝盆花醇提物对HF模型大鼠的改善作用及可能机制.按1 800 mg/(kg·d)(以生药量计)灌胃大鼠蓝盆花醇提物制备含药血清,以低、中、高浓度(将含药血清稀释至10%、15%、20%)蓝盆花醇提物含药血清干预HSC-T6细胞,观察其对微小RNA-21(miRNA-21)表达的影响;将miRNA-21模拟物/抑制剂转染至HSC-T6细胞,并检测PI3K/Akt信号通路相关因子的mRNA和蛋白表达水平.结果 体内实验结果表明,低、中、高剂量蓝盆花醇提物均可显著改善HF模型大鼠肝组织病理学变化,降低其胶原百分比(P＜0.01),下调其HF指标及PI3K、Akt的mRNA和蛋白表达(P＜0.01),上调其磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)的mRNA及其蛋白表达(P＜0.01).体外实验结果表明,低、中、高浓度蓝盆花醇提物含药血清均可显著抑制miRNA-21的表达(P＜0.01);转染miRNA-21模拟物后,细胞中PI3K、Akt的mRNA和蛋白表达上调(P＜0.01),PTEN的mRNA及其蛋白表达下调(P＜0.01);而转染miRNA-21抑制剂后,细胞中上述指标的变化与转染miRNA-21模拟物相反(P＜0.01).结论 蓝盆花醇提物可通过抑制miRNA-21表达、上调PTEN表达,进而抑制PI3K/Akt信号通路活性,最终发挥抗HF的作用.

目的 探讨蒙药蓝盆花总黄酮提取物(total flavonoid extract of Scabiosa comosa,TFS)对肝纤维化体内外的影响,以及通过对ITGB4/FAK/p38信号通路的调控对肝纤维化的作用.方法 体内实验:选取50只Wistar大鼠随机分为空白组,模型组,TFS高(200mg/kg)、中(100mg/kg)、低(50mg/kg)剂量组,除对照组外均给予2ml/kg CC14灌胃.期间对TFS各剂量组给药,而对照组和模型组不做处理,灌胃10周.检测血清丙氨酸氨基转移酶(glutamic-pyruvic transaminase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(glutamic-oxaloacetic transaminase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)含量及肝组织羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)含量;苏木精-伊红(hematoxylin eosin,HE)染色、Masson染色观察肝组织病理学改变;肝组织经转录组测序筛选与肝纤维化相关的通路;实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)与Western blot法分别检测肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、collagen I及ITGB4/FAK/p38信号通路相关mRNA及蛋白表达情况.体外实验:MTT法检测TFS对HSC-T6细胞的抑制率;RT-qPCR与Western blot法分别检测HSC-T6细胞中α-SMA、collagen I及ITGB4/FAK/p38信号通路相关mRNA及蛋白表达;流式细胞术检测不同浓度TFS对HSC-T6细胞凋亡的影响.结果 与空白组比较,TFS显著增加了模型组中ALT、AST、ALP及HYP的含量(P＜0.01);与模型组比较,TFS显著降低了TFS剂量组中ALT、AST、ALP、HYP的含量(P＜0.01);肝组织病理变化显示,肝纤维化增生明显改善;GO、KEGG富集分析表明,ITGB4/FAK/p38信号通路在模型组相关性显著.不同剂量的TFS对HSC-T6细胞均有抑制作用;体内外RT-qPCR与Western blot法检测结果显示,TFS各剂量组α-SMA、collagen I、ITGB4/FAK/p38信号通路相关的mRNA及蛋白表达显著下降(P＜0.05);凋亡结果亦显示,TFS各剂量组细胞凋亡数明显增加(P＜0.01).结论 蒙药蓝盆花总黄酮提取物可显著抑制肝纤维化进展,其调控机制可能与ITGB4/FAK/p38信号通路有关.

目的:建立蒙药蓝盆花的HPLC特征图谱,并同时测定其中7种成分的含量.方法:采用COSMOSIL C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-0.1％磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;变波长模式检测;柱温20 ℃;流速1.0 mL/min;进样量10μL.结果:首次建立蓝盆花药材的HPLC特征图谱,发现了18个共有峰,通过对照品指认了10个共有峰,并对特征图谱中的绿原酸、獐牙菜苷、木犀草苷、异绿原酸A、大波斯菊苷、木犀草素、芹菜素7个成分进行含量测定.结论:该方法操作简单,重复性良好,具备定性定量双重作用,可为蒙药蓝盆花的质量标准研究提供更全面的依据,也为该药材的资源开发利用奠定基础.

目的:初步探讨蒙药蓝盆花乙醇提取物在大鼠体内的血中移行成分,为阐明该药的药效物质基础提供参考.方法:将10只大鼠随机分成给药组(以生药量计为0.3 g/100 g)和空白组(0.5%羧甲基纤维素钠溶液),每组5只,灌胃给药,给药量均为2 mL/100 g,早、晚8:00各给药1次,连续给药3 d.末次给药30 min后,肝门静脉取血,经有机溶剂沉淀法分别制得含药血清和空白血清样品.以蓝盆花原药材为对照,采用超高效液相色谱-串联质谱法进行测定,通过比较3种样品的化学成分差异,再结合化合物对照品和文献数据,鉴定蓝盆花乙醇提取物灌胃后大鼠体内的血中移行成分.结果:共发现了39个血中移行成分,其中原型成分17个、代谢成分22个,原型成分主要为黄酮类及苯丙酸类,在大鼠体内多发生甲基化、硫酸化与葡萄糖醛酸化等反应.结论:初步确定了大鼠灌胃蓝盆花乙醇提取物后的入血成分,为该药材进一步的体内代谢研究奠定了基础.

本文综述分析文献报道的文冠木及蒙药复方古日古木-7(G-7)主要成分的药代动力学性质等数据,探讨水煎剂和散剂(或甲醇提取物)可吸收成分的差异及原理.G-7含红花、石膏、麻黄、紫花地丁、诃子、蓝盆花、木通.其中诃子含有大量多酚成分,有抗丙肝病毒蛋白酶等活性.给药G-7后诃子主要成分的血药浓度-时间曲线下面积(AUC0 ～ 10h)比单独给药诃子时明显增加.没食子酸、诃子裂酸、诃黎勒酸的AUC0 ～10h分别增加了2.6、10.3、3.0倍,说明G-7中其他药材可增加诃子主要活性成分的吸收.给大鼠灌胃G-7甲醇提取物后,极性较小的鞣花酸的AUC0 ～ 10h＞没食子酸,而灌胃水煎剂时极性大的没食子酸的AUC0～10h＞鞣花酸.文冠木不能被溶剂提取出的大分子鞣质可被胃液降解成其组成单元——表儿茶素;灌胃文冠木全粉时表儿茶素的AUC0～ 10h和最大血药浓度(Cmax)明显增加,分别达到灌胃其提取物时的1.1和1.2倍.甲醇提取物(或中药全粉的散剂)给药后,亲脂性及不可提取成分的体内吸收较多,因此,民族药散剂的体内药效物质与水煎剂有所不同,这可能是有些药材在民族医药与中医药中用途不同的科学原理;这些结果也提示,民族药散剂的主要质量控制指标成分也会与汤剂有所不同.

目的:采用四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用(HPLC-Q-Exactive-MS)技术建立蒙药蓝盆花含药血清色谱图并分析其入血成分.方法:采用ACE EXCEL 3 C18-PFP(100 mm×3 mm,3μm)色谱柱;以乙腈-0.1％甲酸溶液为流动相,梯度洗脱;柱温为45℃;流速为0.5 mL/min;热电喷雾(HESI)质谱离子源,负离子全扫描模式下采集数据,建立15批蓝盆花含药血清和空白血清色谱图;采用SIMCA-P+ 14.0软件进行模式识别及多维统计分析.结果:建立了蒙药蓝盆花血清图谱,共确定17个成分,聚类分析结果表明15批蓝盆花样品分为3类,与主成分分析结果一致;正交偏最小二乘判别分析法筛选出绿原酸、新绿原酸及芹菜素3种差异较大药源性成分.结论:本研究首次采用HPLC-Q-Exactive-MS技术建立蒙药蓝盆花血清图谱,该方法可较全面地反映蓝盆花口服给药后吸收入血情况,为其体内药效物质研究及质量控制奠定基础.

目的 分析并总结蒙药材蓝盆花属植物的研究进展.方法 检索生物医学文献数据库(CBM)、中国期刊全文数据库(CNKI)、维普中文科技期刊全文数据库(VIP)与万方数据库(Wanfang),检索数据库至2019年录入的蓝盆花属植物研究的有关资料.结果 1.蓝盆花属植物药为野生花卉,根茎发达 、耐干旱盐碱,具有维护草地生态平衡 、防止荒漠化和美化环境的生态作用,同时也是蒙医药使用的传统特色药材,中亚地区民间也有使用.2.有15种及变种,化学成分:黄酮类22个 、酚酸类11个及环烯醚萜类等,6个成分可作为质量评价,10个成分可作为指纹图谱主要峰值,29个成分可移行血液.3.主要成分绿原酸体内积累随季节变化,人工种植蓝盆花与野生品种生物学特征无显著差异.4.蓝盆花属植物药不能自花传粉,自然条件下依赖昆虫传粉生殖.5.总结蓝盆花注射液与滴丸剂的制备工艺.6.蓝盆花注射液与提取物具有解热与抗炎作用,能提高巨噬细胞溶菌酶活性,具有抗氧化 、抗肝损伤及纤维化作用,可提高肾小管上皮细胞内Na+-ATP、K+-ATP与Ca+-ATP酶系统活性.7.蓝盆花属植物的根具有一定毒性.结论 蓝盆花属植物具有较高的生态价值,有解热 、抗氧化和保肝等药理作用,黄酮与酚酸类是其当前研究最多的成分;该文可为深入研究和开发该类药用植物资源提供参考.

目的 基于灰色关联度法探究蒙药蓝盆花保肝活性成分.方法 以Wistar大鼠为供体,制备灌胃给药蓝盆花醇提物后9个时间点含药血清,采用高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨率质谱(HPLC-Q-Exactive-MS)分析不同时间点13个成分峰面积,采用MTT法检测不同时间点含药血清对H2O2致HL-7702肝细胞氧化损伤模型存活率的影响.通过灰色关联度法分析不同时间点含药血清中各成分峰面积,即各成分相对含有量与相应细胞存活率的相关性.结果 入血的13个原型成分与保肝活性关联度均大于0.75,说明这些成分均具有不同程度的保肝活性,其中关联度大于0.8的成分有3,5-二咖啡酰基奎宁酸、对香豆酸、香叶木素、芹菜素、对羟基苯甲酸,提示这些成分可能表现出相对较高的保肝活性.结论 该研究借助灰色关联度法,从体内代谢同时兼顾药效的角度寻找保肝活性成分,从蓝盆花含药血清中筛选到5个潜在的具有较高活性的保肝药效成分,该方法有助于快速准确地发现蒙药蓝盆花药效成分(群),为深入蓝盆花的体内代谢研究奠定基础.