目的 优选精芪化浊方的最佳提取工艺.方法 采用正交试验设计,以药液比、提取时间、提取次数为考察因素,以黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、大黄素、虎杖苷、积雪草苷、羟基积雪草苷的含量和干浸膏得率为考察指标,运用层次分析法-CRITIC综合加权法进行综合评分;通过对比正交试验和BP神经网络分析的结果,选取最优提取工艺.结果 最优提取工艺为每次加入10倍量水提取(0.5h×3),该工艺条件的综合评分为92.01.结论 优选出的精芪化浊方最优水提工艺稳定可行,可用于实际生产.

目的:探讨虎杖苷(PD)对蛛网膜下腔出血(SAH)后内质网应激的作用及其机制。方法:腹腔注射给予小鼠不同剂量(10、20、30 mg/kg)的PD。检测Sham、SAH、SAH+vehicle、SAH+PD 10 mg/kg、SAH+PD 20 mg/kg、SAH+PD 30 mg/kg各组蛛网膜下腔出血量、神经功能评分、脑含水量和伊文斯蓝渗出。采用蛋白质免疫印迹法检测SIRT1，内质网应激相关标志物和凋亡相关蛋白的表达水平。同时采用免疫荧光染色和缺口末端标记法(TUNEL)染色评价神经元细胞凋亡。组间比较采用单因素方差分析。结果:PD组SAH评分、脑水肿、伊文斯蓝渗出量低于SAH组[(5.75±0.97)分比(12.25±2.03)分、(74.86±7.94)%比(82.24±5.41)%、(1.11±0.21) μg/g比(1.66±0.24) μg/g，( t＝10.83、6.38、6.52，均 P<0.01]。PD组沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)表达高于SAH组(3.96±0.56比1.00±0.04， t＝5.80， P<0.01)。 结论:PD介导SIRT1抑制内质网应激改善蛛网膜下腔出血后的早期脑损伤。

目的:基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法（UPLC-Q/TOF-MS）的高分辨多反应监测扫描模式，建立虎杖中10种酚类物质［虎杖苷、白藜芦醇、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、氧化白藜芦醇、2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、儿茶素和表儿茶素］的同时定量分析方法。方法:采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18（2.1 mm×100 mm，1.7 μm）色谱柱，以乙腈-0.1%甲酸为二元梯度洗脱系统，梯度洗脱，流速0.2 ml/min，高分辨多反应监测扫描模式用于定量分析。结果:虎杖中10种酚类物质在考察浓度范围内线性关系良好（ r2>0.999），批内和批间精密度及重复性 RSD均小于5%，回收率在96.28%～103.23%范围内。10批样本中虎杖苷含量最高，其次是白藜芦醇和大黄素，大黄酚和氧化白藜芦醇含量较低，在个别批次中未实现定量测定。不同批次间待测成分含量差异较大。 结论:本研究建立的同时定量虎杖中10种酚类物质的UPLC-Q/TOF-MS方法简便、准确，可为虎杖的质量评价提供参考。

目的:探讨虎杖干预类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)的分子作用机制。方法:通过TCMSP筛选虎杖的有效活性成分并预测相关靶点，通过GeneCards数据库预测RA相关靶点，将虎杖药效靶点与RA相关靶点取交集，得到虎杖干预RA的共同靶点，使用Cytoscape 3.7.2构建药物-活性成分-靶点-疾病网络。将获得的共同靶点导入STRING数据库进行蛋白质相互作用分析，经R语言计算筛选出虎杖干预RA的核心靶点。运用DAVID在线数据库及R语言对共同靶点进行GO分子功能富集分析和KEGG通路富集分析。使用AutoDock Vina软件对活性成分和前5位核心靶点进行分子对接。结果:筛选获得10个虎杖有效活性成分和对应的203个药效靶点，检索得到4 424个RA相关靶基因，取交集后得到139个虎杖干预RA的共同靶点，蛋白相互作用网络分析提示，v-akt鼠科胸腺瘤病毒癌基因同源物Ⅰ (v-akt murine thymoma viral oncogene homolog 1, AKT1)基因、肿瘤蛋白p53(tumor protein p53, TP53)基因、JUN、MAPK1、人v-rel禽网状内皮细胞过多症病毒癌基因同源物(AV-Rel Reticuloendotheliosis Viral Oncogene Homolog A, RELA)等为核心靶点。GO富集分析得到虎杖干预RA的分子功能共35个，包括ATP结合、锌离子结合、转录因子活性等。KEGG富集分析得到虎杖干预RA的相关信号通路共117条，包括PI3K-Akt信号通路、TNF信号通路、癌症通路等。分子对接显示，有效成分均与基因AKT1、TP53、JUN、MAPK1、RELA对接良好，其中大黄素甲醚双葡萄糖苷与JUN显示出较好的结合能力。结论:基于网络药理学和分子对接法分析虎杖可多靶点、多通路干预RA，为其药品研发提供参考。

目的:探究虎杖苷调节酪氨酸激酶3/信号转导因子和转录激活因子3(JAK3/STAT3)信号通路对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨退变的影响。方法:采用随机数字表法将50只大鼠分为假手术组、模型组、虎杖苷低剂量组、虎杖苷高剂量组、虎杖苷高剂量＋Colivelin(JAK3/STAT3激活剂)组，每组大鼠各10只。改良Mankin评分评价软骨退变程度；酶联免疫吸附剂测定法(ELISA)检测血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、Ⅰ型胶原交联羧基端肽(CTX-Ⅰ)、Ⅱ型胶原CTX(CTX-Ⅱ)水平；苏木精-伊红(HE)染色和番红O-固绿染色观察关节软骨组织形态学改变；原位末端转移酶标记法(TUNEL)观察大鼠软骨细胞凋亡情况；蛋白质印迹法(Western blot)检测大鼠关节软骨组织基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-13、JAK3、STAT3蛋白。组间比较采用单因素方差分析。结果:与假手术组比较，KOA模型组大鼠软骨严重退变，软骨表面膜样结构被显著破坏，与模型组比较，虎杖苷高剂量组大鼠软骨退变程度和软骨表面膜样结构破坏程度显著减轻；虎杖苷高剂量组大鼠Mankin评分、血清IL-1β、IL-6、TNF-α、CTX-Ⅰ、CTX-Ⅱ水平、细胞凋亡率、软骨组织MMP-3、MMP-13、磷酸化JAK3(p-JAK3)/JAK3、p-STAT3/STAT3蛋白相对表达显著低于模型组[(5.30±1.13)分比(12.90±2.36)分、(11.49±1.57) pg/ml比(28.61±3.85) pg/ml、(3.18±0.52) pg/ml比(7.59±1.16) pg/ml、(6.23±1.14) pg/ml比(16.83±1.94) pg/ml、(15.78±1.71) pg/ml比(28.53±3.65) pg/ml、(10.86±1.39) pg/ml比(19.61±2.37) pg/ml、(6.76±0.78)%比(21.83±1.84)%、(0.41±0.03)比(0.74±0.06)、(0.81±0.07)比(1.24±0.11)、(0.46±0.04)比(0.87±0.08)、(0.57±0.05)比(1.05±0.09)， t＝9.185、13.021、10.970、14.897、10.003、10.071、23.846、15.556、14.749、14.496、14.743， P<0.05]；激活剂Colivelin可部分逆转虎杖苷对KOA大鼠软骨的保护作用。 结论:虎杖苷通过抑制JAK3/STAT3信号通路可降低炎性反应，进而改善膝骨关节炎大鼠软骨退变。

目的 探讨虎杖苷调节环磷酸腺苷(cAMP)/环磷酸腺苷结合蛋白1(EPAC1)/Ras相关蛋白1(RAP1)信号通路对子宫内膜癌细胞恶性生物学行为的影响.方法 研究时间为2022年8月—2023年8月.以子宫内膜癌Ishikawa细胞为研究对象,分为空白组、虎杖苷-L组(25μmol/L虎杖苷)、虎杖苷-M组(50 μmol/L虎杖苷)、虎杖苷-H组(100 μmol/L虎杖苷)、Forskolin 组(cAMP 激活剂,100 μmol/L Forskolin)以及虎杖苷-H+Forskolin 组(100μmol/L 虎杖苷+100 μmol/L Forsko-lin).分别以克隆形成实验、Transwell实验、划痕实验、TUNEL法、CCK-8法、Western Blot检测细胞克隆数、侵袭、迁移、凋亡、增殖及EPAC1、RAP1、凋亡蛋白Cleaved Caspase-3、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达.采用ELISA法检测细胞培养基中cAMP水平.结果 与空白组相比,Forskolin组细胞克隆数[(195.66±19.62)个]、侵袭数[(281.52±28.22)个]、迁移率[(82.61±8.31)％]、增殖率[(125.64±12.59)％]、cAMP 水平[(1 385.54±138.56)pmol/ml]、EPAC1(1.56±0.16)、RAP1(2.11±0.22)、MMP-9(1.88±0.19)表达显著增加,凋亡率[(5.47±0.56)％]、Cleaved Caspase-3(0.26±0.03)表达均降低(均P＜0.05),虎杖苷-L组、虎杖苷-M组、虎杖苷-H组细胞克隆数[(105.34±10.57)个、(65.34±6.58)个、(42.27±4.25)个]、侵袭数[(185.72±18.66)个、(145.47±14.58)个、(112.59±11.29)个]、迁移率[(40.21±4.06)％、(31.12±3.12)％、(21.34±2.15)％]、增殖率[(68.37±6.86)％、(48.67±4.88)％、(35.24±3.55)％]、cAMP 水平、EPAC1、RAP1、MMP-9 表达显著降低,凋亡率[(19.85±1.99)％、(27.34±2.77)％、(36.44±3.66)％]、Cleaved Caspase-3 表达均增加(均P＜0.05).与Forskolin组相比,虎杖苷-H+Forskolin组细胞克隆数、侵袭数、迁移率、增殖率、cAMP水平、EPAC1、RAP1、MMP-9表达均显著降低,凋亡率、Cleaved Caspase-3表达均显著增加(均P＜0.05).与虎杖苷-H组相比,虎杖苷-H+Forskolin组细胞克隆数、侵袭数、迁移率、cAMP水平、EPAC1、RAP1、MMP-9表达均显著增加,凋亡率、增殖率、Cleaved Caspase-3表达均显著降低(均P＜0.05).结论 虎杖苷可抑制子宫内膜癌细胞恶性生物学行为发展,可能与抑制cAMP/EP-AC1/RAP1信号通路有关.

[目的]探究虎杖苷(PD)对妊娠期糖尿病(GDM)大鼠的治疗效果及作用机制.[方法]高脂高糖喂养雌性SD大鼠 8 周,雌雄同笼制备孕鼠 84 只,随机分为 7 组(12 只/组):空白组、模型组、PD低、中、高剂量组(30、75、150 mg/kg的PD)、阳性对照组(200 mg/kg盐酸二甲双胍)、抑制剂组[150 mg/kg的PD+30 mg/kg的核转录因子E2 相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)通路抑制剂ML385],除空白组外,其余各组在妊娠 5d后,腹腔注射链脲佐菌素(35 mg/kg)复制GDM大鼠模型.测量各组孕鼠体质量及空腹血糖(FBG);酶联免疫吸附(ELISA)法测定大鼠空腹胰岛素(FINS)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)、胰岛素敏感指数(ISI);全自动生化分析仪分析大鼠血清中血脂水平;苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠胰腺组织损伤;蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测各组大鼠胰腺组织中Nrf2/HO-1 信号通路蛋白表达.[结果]与空白组比较,模型组大鼠体质量、FBG、FINS、HOMA-IR、IL-6、IL-1β、TNF-α水平、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、游离脂肪酸(FFA)含量升高,ISI、HOMA-β、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量、胰岛数量、Nrf2、HO-1蛋白表达水平降低(P<0.05);与模型组比较,PD低、中、高剂量组大鼠体质量、FBG、FINS、HOMA-IR、IL-6、IL-1β、TNF-α水平、TC、TG、LDL-C、FFA含量降低,ISI、HOMA-β、HDL-C含量、胰岛数量、Nrf2、HO-1 蛋白表达水平升高(P<0.05);与阳性对照组比较,PD高剂量组大鼠上述指标差异均无统计学意义(P>0.05),提示与阳性对照药物疗效相当;Nrf2/HO-1 通路抑制剂ML385 可以逆转高剂量PD对GDM大鼠的保护作用(P<0.05).[结论]PD通过降低血糖、血脂和炎症反应来改善GDM,其作用机制可能与激活Nrf2/HO-1 信号通路有关.

目的 建立HPLC法同时测定知黄抗癌方中红景天苷、绿原酸、芒果苷、虎杖苷、盐酸小檗碱、异牡荆素、白藜芦醇的含量.方法 分析采用SPOLAR C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长275 nm.结果 7种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 7),平均加样回收率91.32%～106.95%,RSD 0.4%～2.9%.结论 该方法简便快速,专属性好,可用于知黄抗癌方的质量控制.

目的 探讨虎杖苷通过调节癌基因对小鼠生长骨肉瘤生长的抑制作用.方法 58只小鼠皮下注射U2OS细胞悬液建立骨肉瘤荷瘤小鼠,随机分为模型组、虎杖苷低剂量组、虎杖苷中剂量组、虎杖苷高剂量组和顺铂组.虎杖苷低、中和高剂量组小鼠分别腹腔注射虎杖苷50、100和200 mg/kg;顺铂组小鼠腹腔注射顺铂2 mg/kg,1次/天,连续5 d;模型组小鼠腹腔注射等量生理盐水.测定肿瘤质量,计算抑瘤率;HE染色观察肿瘤细胞形态;TUNEL染色检测肿瘤细胞凋亡率;qRT-PCR法检测c-Myc、p53和PTEN mRNA水平,蛋白印迹法检测c-Myc、p53、PTEN、Bax和Bcl-2蛋白水平.结果 模型组肿瘤细胞形态正常,核大深染,细胞膜完整;虎杖苷低、中和高剂量组以及顺铂组细胞核染色不同程度变淡,细胞核固缩,细胞密度降低,细胞出现坏死,细胞核出现分裂,其中以顺铂组和虎杖苷高剂量组最为显著.与模型组比较,虎杖苷低、中和高剂量组以及顺铂组肿瘤质量、p53和c-Myc mRNA水平、Bcl-2、p53和c-Myc和蛋白相对表达量降低,且顺铂组＜虎杖苷高剂量组＜虎杖苷中剂量组＜虎杖苷低剂量组;而细胞凋亡率、PTEN mRNA以及Bax和PTEN蛋白相对表达量水平升高(P＜0.05).与虎杖苷低剂量组比较,虎杖苷中剂量组和高剂量组以及顺铂组抑瘤率升高,且顺铂组＞虎杖苷高剂量组＞虎杖苷中剂量组(P＜0.05).结论 虎杖苷通过促进抑癌基因表达,抑制促癌基因表达,调节细胞凋亡相关蛋白,促进癌细胞凋亡,抑制骨肉瘤生长.

目的 探讨虎杖苷通过蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号传导与转录激活因子3(STAT3)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用.方法 体外培养HUVECs,500 ng/ml LPS诱导其损伤,设为模型组;在模型组基础上,用不同浓度(10、20、40 μmol/L)虎杖苷干预HUVECs 24 h,分别设置为虎杖苷低浓度组、虎杖苷中浓度组和虎杖苷高浓度组;另设对照组.CCK-8、单核细胞-内皮细胞黏附、划痕和Transwell实验检测细胞活力、黏附、迁移和侵袭能力;ELISA法检测细胞上清液中白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;Western blot法检测JAK2/STAT3信号通路相关蛋白表达水平.结果 与对照组比较,模型组细胞存活率下降(P＜0.01),细胞黏附、迁移及侵袭能力增强(P＜0.001,P＜0.05,P＜0.01),细胞上清液中IL-6和TNF-α含量增加(P＜0.001),细胞中JAK2和STAT3蛋白磷酸化水平升高(P＜0.05).与模型组比较,虎杖苷干预后,LPS损伤细胞情况减轻,虎杖苷低、中、高浓度组细胞存活率增加(P＜0.05),细胞黏附、迁移和侵袭能力下降(P＜0.05,P＜0.05,P＜0.001),细胞上清液中IL-6和TNF-α含量下降(P＜0.05),细胞中JAK2和STAT3蛋白磷酸化水平降低(P＜0.05).结论 虎杖苷能有效减轻LPS对HUVECs的炎性损伤,减少炎症因子分泌,抑制内皮细胞黏附、迁移和侵袭,其机制可能与虎杖苷下调JAK2/STAT3信号通路相关.