位于中缅边境的云南省腾冲市蚊虫丰富多样，本研究于2018年在腾冲市采集了蚊虫，采用RT-PCR的方法对这些蚊虫进行研究，共检出15株乙型脑炎病毒(JEV)、2株伊蚊黄病毒(AeFV)、2株云南库蚊黄病毒、1株Culex theileri黄病毒、1株Yamadai黄病毒(YDFV)和1株按蚊相关黄病毒(AAFV)，其中成功扩增到1株JEV和1株AeFV的全序。基于E基因的系统进化分析显示新检出的腾冲JEV均属于GI-b型，与2010年腾冲检出的毒株亲缘关系最近，与目前使用的乙脑疫苗比较在E蛋白上存在6个氨基酸残基的差异，且三带喙库蚊的JEV带毒率为2.4 (1.4~3.9)/1 000。上述研究结果提示腾冲是潜在的乙脑疫源地，存在暴发流行的风险，有必要在当地广泛持续的开展虫媒病毒监测。

目的:了解内蒙古自治区的吸血昆虫及其携带虫媒病毒的种类及分布，为虫媒病毒病的预防提供基础数据。方法:在自然界使用灯诱法采集蚊虫标本，形态学分类后分装编号，液氮保存。组织培养法进行病毒分离。使用多种生物学信息软件（BioEdit、MEGA等）对病毒核苷酸序列进行分子生物学特征分析。结果:2014、2017-2018年在内蒙古自治区5个县（旗）的采集点共采集到2属3种蚊虫24 240只，蠓虫17 110只。其中在淡色库蚊标本中检测到乙脑病毒基因阳性，并且获得4株可以稳定传代的病毒分离物，经分子生物学鉴定分别为盖塔病毒、浓核病毒。盖塔病毒（NMDK1813-1）E2基因遗传进化分析结果显示，与甘肃分离株（GS10-2）在同一进化分支，且有6个共同的氨基酸变异位点。结论:本研究发现的乙脑病毒和盖塔病毒均是在内蒙古蚊虫标本中新近发现的病毒，这为内蒙古地区的虫媒病毒及其传播疾病的预防及控制提供了基础数据，对内蒙古的虫媒病毒及其病毒病的预防及控制提出了新的挑战。

基孔肯雅热是一种蚊媒传染病，因检测手段的局限，常被误诊和漏诊。本文报道了义乌确诊的6例输入性基孔肯雅热病例，并对比国内外文献，比较了临床症状的差异，重点阐述了以往文献，特别是国内文献极少关注的淋巴细胞减少的特征。

目的:明确山西省五个地区虫媒病毒种类及其分布特征，对采集的蚊虫样本进行病毒的分离与鉴定。方法:于2020年7~9月采集当地的蚊虫标本，利用实时荧光定量PCR法检测蚊虫标本中的8种虫媒病毒，通过细胞培养对其进行病毒分离，使用分子生物学和生物信息学方法对病毒分离物进行鉴定和分析。结果:在121批蚊虫样本中，检测到1批乙型脑炎病毒阳性，2批库蚊黄病毒阳性以及8批南定病毒阳性。分离到7株病毒分离物，编号为：SX-YJ-Cxp-4、SX-YJ-Ars-2、SX-YJ-Cxp-1、SX-LY-Cxp-10、SX-GP-Ars-5、SX-GP-Cxp-2、SX-GP-Cxp-4，鉴定均为南定病毒，对其中一株进行全基因组测序，结果显示：山西南定病毒分离株与云南南定病毒分离株属于同一进化分支。结论:首次在山西省分离到南定病毒。

目的:对天津市1例输入基孔肯雅热病例开展病毒基因分型，确定基孔肯雅病毒（CHIKV）与全球主要流行株的关系。方法:提取临床症状疑似为CHIKV感染患者血清中RNA，采用荧光定量RT-PCR法检测CHIKV核酸。两步RT-PCR法扩增编码CHIKV包膜糖蛋白E1的基因，扩增产物经测序后开展测序分析。将测序结果与全球其他地区流行毒株一同构建系统发生树。结果:天津市输入型CHIKV基因分型属于能够感染白纹伊蚊并在其体内繁殖的东/中/南非基因型印度洋亚型（ECSA-IOL）。系统发生树分析表明，此次输入的CHIKV与2016-2017年在巴基斯坦、意大利、孟加拉国等国家流行的CHIKV毒株高度同源，序列的同源性高达99.4%，并与这些国家流行的CHIKV毒株共同组成1个基因分型簇。结论:此次输入性基孔肯雅热病例感染的毒株更容易在人群中传播，提示应加强对基孔肯雅热输入性病例的防控工作，以防止该蚊媒传染病在我国发生本地聚集性传播。

目的:探索云南省师宗县蠓虫携带虫媒病毒情况。方法:采用RT-PCR方法对2013年7月采集自云南省师宗县的74批3 705只蠓虫进行检测，然后对扩增条带进行克隆测序。采用DNAStar软件中MegAlign进行同源性分析，使用MEGAX软件ALIGN进行序列比对和基于Maximum Likelihood (ML)方法进行遗传进化分析。结果:在云南省采集74批蠓虫样品中3批标本(SZC33、SZC42和SZ625C8-2)扩增出600 bp左右大小电泳条带；经过对以上PCR产物直接进行测序，SZC33和SZ625C8-2样本获得西藏环状病毒序列，而SZC42样品测序失败；对SZC42样品PCR产物进行克隆，挑取5个克隆进行测序，5个克隆均获得一段长为589个核苷酸(nucleotide，nt)序列，经BLASTx比对发现这5个克隆的核苷酸序列均与美国蚊虫中发现的星状病毒样病毒(culex bastrovirus-like virus, CAVL)的非结构蛋白基因氨基酸同源性最高，遗传进化分析结果显示云南省蠓虫(SZC42)样本检测到的病毒基因序列与美国蚊虫中检测到的CAVL(NC_040647)、巴西污水中检测到的星状病毒(Astrovirus，AV)(MF042208)以及越南蝙蝠检测到的AV(NC_032426)遗传进化关系较近，但形成独立的进化分支。结论:云南省蠓虫中发现的SZC42病毒序列为星状病毒序列。

目的:了解杭州市2017—2019年登革热流行特征及疫情处置情况，比较输入和本地疫情差异，为制定登革热防控措施提供依据。方法:采用描述性流行病学方法分析2017—2019年登革热疫情的流行病学特征，比较输入病例与本地病例的流行特征、登革病毒分型、核心区布雷图指数及成蚊叮咬指数及持续时间。结果:2017—2019年共报告登革热输入病例213例，本地病例1 210例；输入病例以30~<40岁及20~<30岁的人群为主，分别占34.74%和26.76%，本地病例以≥60岁及50~<60岁人群为主，分别占21.07%和17.85%。各月份均有输入病例报告，本地病例高峰在8—10月。输入病例4种登革病毒血清型别均有检出，本地病例2017年主要为Ⅱ型病毒株，2018、2019年均为Ⅰ型病毒株。输入病例分离株包括Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型，分别占55.28%、29.19%、12.42%和3.11%。应急处置后，核心区3 d的布雷图指数和叮咬指数达标率分别为62.77%和76.96%，8 d的达标率分别为77.46%和83.64%；输入病例核心区持续时间较本地病例核心区短（ χ2=55.473， P<0.05）。 结论:杭州市登革热输入与本地病例高危人群不完全重合，本地核心区响应和适应机制不够及时。今后应持续加强输入病例检测，加强对本地病例核心区蚊媒的控制。

目的:探索人肝癌细胞HepG2感染寨卡病毒(Zika virus，ZIKV)后的外泌体miRNA的表达差异，对其靶基因进行预测、分析。方法:以感染复数0.5的ZIKV(ZJ03株)感染HepG2，以超速离心法提取、纯化感染2 d与未感染细胞的外泌体(Exo-ZIKV与Exo-NC)。以透射电镜观察外泌体形态，纳米粒径分析检测外泌体粒径分布，Western blot检测外泌体标志蛋白质等方法鉴定。提取纯化外泌体小RNA，进行miRNA测序与分析，对部分差异表达miRNA采用实时定量PCR验证。生物信息方法分析差异miRNA靶基因。结果:在透射电镜下呈杯托状双层膜小囊泡结构；粒径大小分布几乎一致但Exo-ZIKV浓度(5.24×10 8颗粒/ml )较Exo-NC(3.06×10 8 paritcle/ml)增多。Western blot检测出Hsp70、CD63和CD9蛋白表达，测序分析显示共20个差异表达miRNA，其中12个miRNA表达上调8个miRNA表达下调，上调miRNA多与抗病毒通路相关，差异表达miRNA对应的靶基因主要富集在嘧啶与嘌呤代谢等途径中。 结论:ZIKV感染能刺激HepG2细胞外泌体分泌增加，且引起外泌体miRNA表达变化，这为深入了解ZIKV感染导致肝细胞损伤机制提供新基础，为ZIKV治疗提供新的思路。

寨卡病毒(Zika virus，ZIKV)自2015年以来在全球大范围暴发流行，ZIKV感染除可引起发热、皮疹等常见的临床症状外，还可引起孕妇流产及新生儿小头畸形等有别于其他蚊媒病毒感染的临床症状。因此，成功的寨卡疫苗除了需要对成人接种者提供保护外，还应对胎儿及新生儿提供保护作用。虽然寨卡疫苗的开发已成为近年的研究热点，但鲜有关于寨卡DNA疫苗为母婴提供双重保护的研究报道。本研究利用ZIKV前膜蛋白和包膜蛋白构建寨卡候选DNA疫苗并免疫成年小鼠，成功诱导成年小鼠产生了较高水平的ZIKV特异性抗体，并且此抗体水平及其中和活性可至少维持至末次免疫后30周，长效体液免疫反应效果显著。与此同时，疫苗接种可显著增强小鼠CD8 +记忆T细胞反应及分泌Th1/Th2型细胞因子的能力。特别值得一提的是，疫苗除了可以在成鼠体内诱导高水平的免疫应答外，免疫后的雌性成鼠在受孕并分娩后，于初乳及1日龄乳鼠的血清中均可检出具有中和活性的ZIKV特异性抗体，提示高水平的特异性母体抗体可跨胎盘转移至乳鼠体内，使乳鼠在一定时间内具备抵抗ZIKV攻击的能力，有效抑制ZIKV在乳鼠体内的感染及播散，更可避免由ZIKV感染而引起的生长发育障碍，为乳鼠提供特异性的围产期保护作用。本研究利用免疫功能健全的BALB/c母鼠免疫-乳鼠攻毒的动物模型成功评价了寨卡疫苗对母婴的保护作用，对寨卡DNA疫苗的围产期应用奠定了基础，同时为BALB/c乳鼠模型用于ZIKV的研究提供了依据。

目的:分析广东省2020-2022年新型冠状病毒感染疫情防控期间入境人员健康管理措施（入境管理措施）对境外输入性登革热（输入性登革热）疫情流行特征的影响。方法:收集并整理广东省2016年1月1日至2022年8月31日输入性登革热疫情资料、2016-2021年蚊媒密度监测数据、2011-2021年国际航班旅客年运输量及登革热年报告病例数，分析入境管理措施实施前（2016年1月1日至2020年3月20日）与实施后（2020年3月21日至2022年8月31日）输入性登革热疫情流行特征变化。结果:2020年3月21日至2022年8月31日累计报告输入性登革热病例52例，其输入传播风险强度为0.12，低于入境管理措施实施前（1 828例，5.29）。与入境管理措施实施前相比较，输入性登革热疫情在季节、性别、年龄、职业和来源国分布特征差异无统计学意义（均 P>0.05）。在隔离点发现病例占59.62%（31/52），在口岸发现占38.46%（20/52），入境管理措施实施前以医院发现为主（95.08%，1 738/1 828）。在提供入境日期的51例病例中，82.35%（42/51）和98.04%（50/51）的病例在入境后7 d内和14 d内被发现，略高于入境管理措施实施前［（72.69%（362/498）和97.59%（486/498）］。2020-2021年广东省伊蚊幼虫密度的布雷图指数月均值与2016-2019年月均值差异有统计学意义（ Z=2.83， P=0.005）。2011-2021年广东省国际航班旅客年运输量与输入性登革热病例及本地病例年报告数均存在正相关性（ r=0.94， P<0.001； r=0.72， P=0.013）。 结论:广东省实施境外人员入境后集中隔离14 d，绝大多数输入性登革热病例在入境后14 d内被发现，输入性登革热病例导致续发本地传播风险大幅度降低。