目的:探索云南省师宗县蠓虫携带虫媒病毒情况。方法:采用RT-PCR方法对2013年7月采集自云南省师宗县的74批3 705只蠓虫进行检测，然后对扩增条带进行克隆测序。采用DNAStar软件中MegAlign进行同源性分析，使用MEGAX软件ALIGN进行序列比对和基于Maximum Likelihood (ML)方法进行遗传进化分析。结果:在云南省采集74批蠓虫样品中3批标本(SZC33、SZC42和SZ625C8-2)扩增出600 bp左右大小电泳条带；经过对以上PCR产物直接进行测序，SZC33和SZ625C8-2样本获得西藏环状病毒序列，而SZC42样品测序失败；对SZC42样品PCR产物进行克隆，挑取5个克隆进行测序，5个克隆均获得一段长为589个核苷酸(nucleotide，nt)序列，经BLASTx比对发现这5个克隆的核苷酸序列均与美国蚊虫中发现的星状病毒样病毒(culex bastrovirus-like virus, CAVL)的非结构蛋白基因氨基酸同源性最高，遗传进化分析结果显示云南省蠓虫(SZC42)样本检测到的病毒基因序列与美国蚊虫中检测到的CAVL(NC_040647)、巴西污水中检测到的星状病毒(Astrovirus，AV)(MF042208)以及越南蝙蝠检测到的AV(NC_032426)遗传进化关系较近，但形成独立的进化分支。结论:云南省蠓虫中发现的SZC42病毒序列为星状病毒序列。

目的 调查辽宁省蚊、蠓的种类与分布.方法 采用人帐诱、人诱法、诱虫灯诱法采集蚊、蠓,实验室分类鉴定,同时参考文献整理辽宁省蚊、蠓种类及分布.结果 2015-2023 年辽宁省已知蚊科昆虫 5 属 44 种,分布在省内各市,其中广泛分布的种类有淡色库蚊、三带喙库蚊、背点伊蚊、刺扰伊蚊、中华按蚊;已知蠓科昆虫 3 属 50 种,分布在 11 个市,占辽宁省 14 个市的 78.6%.结论 该研究可为辽宁省蚊、蠓的防控提供参考依据.

Objective The purpose of this study was to investigate the bacterial communities of biting midges and ticks collected from three sites in the Poyang Lake area,namely,Qunlu Practice Base,Peach Blossom Garden,and Huangtong Animal Husbandry,and whether vectors carry any bacterial pathogens that may cause diseases to humans,to provide scientific basis for prospective pathogen discovery and disease prevention and control.Methods Using a metataxonomics approach in concert with full-length 16S rRNA gene sequencing and operational phylogenetic unit(OPU)analysis,we characterized the species-level microbial community structure of two important vector species,biting midges and ticks,including 33 arthropod samples comprising 3,885 individuals,collected around Poyang Lake.Results A total of 662 OPUs were classified in biting midges,including 195 known species and 373 potentially new species,and 618 OPUs were classified in ticks,including 217 known species and 326 potentially new species.Surprisingly,OPUs with potentially pathogenicity were detected in both arthropod vectors,with 66 known species of biting midges reported to carry potential pathogens,including Asaia lannensis and Rickettsia bellii,compared to 50 in ticks,such as Acinetobacter lwoffii and Staphylococcus sciuri.We found that Proteobacteria was the most dominant group in both midges and ticks.Furthermore,the outcomes demonstrated that the microbiota of midges and ticks tend to be governed by a few highly abundant bacteria.Pantoea sp7 was predominant in biting midges,while Coxiella sp1 was enriched in ticks.Meanwhile,Coxiella spp.,which may be essential for the survival of Haemaphysalis longicornis Neumann,were detected in all tick samples.The identification of dominant species and pathogens of biting midges and ticks in this study serves to broaden our knowledge associated to microbes of arthropod vectors.Conclusion Biting midges and ticks carry large numbers of known and potentially novel bacteria,and carry a wide range of potentially pathogenic bacteria,which may pose a risk of infection to humans and animals.The microbial communities of midges and ticks tend to be dominated by a few highly abundant bacteria.

目的 描述海南省红树林生境库蠓属(Culicoides)新种和新记录种.方法 将2021-2022年采集自海南省红树林的库蠓属昆虫制作玻片标本,基于形态学特征进行物种鉴定,并对其主要鉴定特征进行拍摄、测量和绘图.结果 在海南省清澜红树林省级自然保护区、东寨港国家级自然保护区发现1新种拟老挝库蠓(C.pseudolaoensis Deng&Li,sp.nov.),其主要鉴别特征为:雌虫大鄂齿10枚,触角嗅觉器分布在第3、11～15节;中胸盾板浅黄色;小盾片褐色;翅基部淡斑大,向后延伸至臀室基部1/2;受精囊3个,椭圆形,位于中部的1个较大.雄虫阳茎中叶端部粗,柱状,阳基侧突基部末端粗壮.在铁炉港红树林自然保护区发现1中国新记录种拟心形库蠓(C.pseudocordiger Wirth & Hubert,1989),其主要鉴别特征为:足第4跗节呈心形;中胸盾板褐色,表面布满粗鬃;翅r2室全部暗色;雄虫阳茎中叶基拱高且端部尖,阳基侧突端部弯曲且具长齿.新种模式标本保存于海南大学植物保护学院昆虫标本馆.结论 记述了库蠓属1新种及1中国新记录种,进一步丰富了中国红树林生境的库蠓种类.

目的 探讨前脑啡肽原-最低限度免疫定义基因表达-核定位信号(PPENK-MIDGE-NLS)基因载体后处理对大鼠心肌缺血再灌注线粒体自噬的影响.方法 成年雄性SD大鼠随机分为假手术对照组(sham)组:开胸不进行冠状动脉左前降支(LAD)血流阻断及再灌注;缺血再灌注(L/R)组、PPENK-MLDGE (MIDGE)-NLS载体(PPENK)组及Control-MIDGE-NLS载体(对照)组均阻断LAD 30 min,分别于再灌注前给予生理盐水、PPENK-MIDGE-NLS 200 μg及Control-MIDGE-NLS 200 μg,股静脉注射各1.5 mL.再灌注24h后取材.ELISA测定血浆心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)含量;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)法测定心肌梗死面积;透射电镜下观察心肌细胞超微结构及线粒体自噬并分析线粒体损伤评分;Western blot法检测线粒体自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)、p62、线粒体外膜转位酶20(TOM20)、PTEN诱导推定激酶1(PINK1)、帕金森病蛋白(parkin)水平.结果 PPENK组血浆cTnI含量降低,心肌梗死面积减少,线粒体损伤评分改善,心肌组织及线粒体超微结构明显改善,线粒体自噬体增多.线粒体PINK1、parkin、p62、LC3B表达增强.对照组与I/R组间无显著性差异.结论 PPENK-MIDGE-NLS基因载体处理后可减轻大鼠心肌I/R损伤,可能与增强线粒体自噬,保护线粒体结构完整有关.

目的 调查广西壮族自治区(广西)大瑶山国家级自然保护区蠓科昆虫的种类组成及其分布.方法 于2015年7月18-22日在广西大瑶山国家级自然保护区内进行蠓类调查,采用灯诱法(光触媒紫外诱虫灯)和网捕法收集蠓虫标本,并进行分类鉴定.结果 大瑶山国家级自然保护区蠓科昆虫现已知3亚科6属18种,其中蠓亚科2属10种、毛蠓亚科1属2种和铗蠓亚科3属6种.新纪录种11种,包括静波毛蠓、端须铗蠓、冲绳裸蠓、开裂裸蠓、尖峰裸蠓、东方库蠓、印度库蠓、无害库蠓、南山库蠓、边缘库蠓和苍白柱蠓.结论 新纪录种的发现丰富了广西蠓科昆虫的物种多样性,为蠓类治理及蠓传疾病研究提供了参考依据.

目的 观察PPENK-MIDGE-NLS基因载体对大鼠心肌缺血再灌注时线粒体的影响.方法 成年雄性SD大鼠40只,随机分为假手术组(开胸不进行LAD血流阻断,sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、PPENK-MLDGE-NLS载体组(PPENK组)及Control-MIDGE-NLS载体组(control组),后面3组均阻断LAD 30 min,分别于再灌注前给予生理盐水1.5 ml、PPENK-MIDGE-NLS 200 μg/1.5 ml及control-MIDGE-NLS 200 μg/1.5 ml.再灌注24h后,观察基因载体转染后在缺血区心肌组织表达情况;测定缺血区组织中亮氨酸脑啡肽(L-ENK)含量、血浆cTnI浓度,心肌组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及ATP含量,线粒体膜电位水平变化,电子显微镜下观察心肌细胞及线粒体超微结构变化.结果 与sham组相比,I/R组、PPENK组及control组的L-ENK及、SOD活性、ATP含量降低,cTnI浓度及MDA明显上升,线粒体膜电位水平下降(P＜0.05);与I/R组及control组相比,PPENK组心肌L-ENK及SOD活性、ATP含量升高,cTnI浓度及MDA明显降低,线粒体膜电位水平升高(P＜0.05),心肌及线粒体超微结构也有明显改善.control组与I/R组间,L-ENK、SOD、ATP含量、cTnI浓度及MDA、线粒体膜电位水平对比无统计学差异(P＞0.05),两组超微结构改变也相似(P＞0.05).结论 PPENK-MIDGE-NLS基因载体处理缺血再灌注大鼠模型后,能够提高大鼠缺血区局部脑啡肽含量,减轻缺血区心肌氧化应激反应,改善心肌细胞及线粒体结构.

目的 了解四川省的蚊、蠓以及相关虫媒病毒种类及分布.方法 在自然界使用灯诱法采集吸血昆虫标本,形态学分类后分装,液氮保存备用.蚊虫、蠓虫研磨上清液接种BHK-21细胞和C6/36细胞进行病毒分离和病毒基因检测.使用BioEdit 7.0.5.3、MEGA 6.0等软件对病毒序列进行分子生物学特征分析.结果 2016-2017年在四川省东南部3个县的7个自然村共采集到3属4种蚊虫17 019只,蠓虫12 700只.三带喙库蚊占蚊虫采集总数的79.4％(13 519/17 019),其次为骚扰阿蚊(11.1％,1 897/17 019),致倦库蚊占采集蚊虫标本总数的5.5％(930/17 019);中华按蚊最少(4.0％,673/17 019).蚊虫标本接种组织细胞后,在合江县采集的三带喙库蚊标本获得3株可以稳定传代的病毒分离株,经分子生物学实验鉴定为基因Ⅰ型流行性乙型脑炎(乙脑)病毒,在合江县采集的7批蚊虫中检测到乙脑病毒基因阳性.蠓虫标本接种细胞后未获得病毒分离物,在合江县采集的4批蠓虫标本经分子生物学检测,显示阿卡斑病毒基因阳性.结论 三带喙库蚊是四川省东南部3县的优势蚊种,四川省东南部存在经蚊虫传播的乙脑病毒及以蠓虫为媒介的阿卡斑病毒.

The wheat midge,Sitodiplosis mosellana,is a serious pest of wheat worldwide.In North America,management of S.mosellana in spring wheat relies on the timely application of pesticides,based on midge adults levels caught in pheromone traps or seen via field scouting during wheat heading.In this context,biopesticides can be an effective alternative to pesticides for controlling S.mosellana within an Integrated Pest Management program.A field study using insect pathogenic fungus Beauveria bassiana GHA,nematode Steinernemafeltiae with Barricade polymer gel 1％,pyrethrin,combined formulations of B.bassiana GHA and pyrethrin,Jasmonic acid (JA) and chlorpyrifos (chemical check)was performed to determine to which extent they affect midge larval populations,kernel damage levels,grain yield,and quality,and the impacts on adult parasitoid Macroglenes penetrans populations.The results indicated that biopesticides JA and S.feltiae were the most effective in reducing larval populations and kernel damage levels,and produced a higher spring wheat yield when compared to the water control at both study locations (East Valier and North Valier,Montana,USA).Increased test weight in wheat had been recorded with two previous biopesticides at East Valier but not for North Valier,when compared over water control.These results were comparable in efficacy to the chlorpyrifos.This study also suggested that B.bassiana and pyrethrin may work synergistically,as exemplified by lower total larval populations and kernel damage levels when applied together.This study did not demonstrate the effect of any treatments on M.penetrans populations.

目的 了解海南省虫媒病毒种类及分布变化.方法 于2017-2018年在海南省野外采集吸血昆虫标本,所有吸血昆虫标本实验室处理后用BHK-21细胞和C6/36细胞进行病毒分离,同时使用RT-PCR平行检测吸血昆虫标本中虫媒病毒基因.结果 共采集到4属(库蚊、阿蚊、伊蚊、按蚊)15 062只蚊虫和11 360只蠓虫.采集的蚊虫中三带喙库蚊居多,占蚊虫采集总数92.88％(13 990/15 062).经组织培养细胞共获得4株病毒分离物,其中3株乙型脑炎(乙脑)病毒、1株盖塔病毒,在5批三带喙库蚊标本中检测到乙脑病毒基因阳性.遗传进化分析结果显示这3株乙脑病毒和5批PCR筛检阳性的标本均属于基因1型乙脑病毒.当地乙脑病毒的最低感染率为0.57‰(8/13 990).在5批蠓虫标本中检测阿卡斑病毒基因阳性,当地阿卡斑病毒的最低感染率为0.44‰(5/11 360).基于病毒S基因和M基因序列的系统进化分析显示这5株阿卡斑病毒处于单独进化分支形成独特的地理分布特征.结论 继1980年代以来,从海南省的蚊虫标本中再次分离到乙脑病毒和盖塔病毒、蠓虫标本中检测到阿卡斑病毒.应加强乙脑病毒、盖塔病毒和阿卡斑病毒对人畜动物感染状况及疾病负担的监测,以减少对当地公共卫生健康的危害.