目的:了解内蒙古自治区的吸血昆虫及其携带虫媒病毒的种类及分布，为虫媒病毒病的预防提供基础数据。方法:在自然界使用灯诱法采集蚊虫标本，形态学分类后分装编号，液氮保存。组织培养法进行病毒分离。使用多种生物学信息软件（BioEdit、MEGA等）对病毒核苷酸序列进行分子生物学特征分析。结果:2014、2017-2018年在内蒙古自治区5个县（旗）的采集点共采集到2属3种蚊虫24 240只，蠓虫17 110只。其中在淡色库蚊标本中检测到乙脑病毒基因阳性，并且获得4株可以稳定传代的病毒分离物，经分子生物学鉴定分别为盖塔病毒、浓核病毒。盖塔病毒（NMDK1813-1）E2基因遗传进化分析结果显示，与甘肃分离株（GS10-2）在同一进化分支，且有6个共同的氨基酸变异位点。结论:本研究发现的乙脑病毒和盖塔病毒均是在内蒙古蚊虫标本中新近发现的病毒，这为内蒙古地区的虫媒病毒及其传播疾病的预防及控制提供了基础数据，对内蒙古的虫媒病毒及其病毒病的预防及控制提出了新的挑战。

目的:探索云南省师宗县蠓虫携带虫媒病毒情况。方法:采用RT-PCR方法对2013年7月采集自云南省师宗县的74批3 705只蠓虫进行检测，然后对扩增条带进行克隆测序。采用DNAStar软件中MegAlign进行同源性分析，使用MEGAX软件ALIGN进行序列比对和基于Maximum Likelihood (ML)方法进行遗传进化分析。结果:在云南省采集74批蠓虫样品中3批标本(SZC33、SZC42和SZ625C8-2)扩增出600 bp左右大小电泳条带；经过对以上PCR产物直接进行测序，SZC33和SZ625C8-2样本获得西藏环状病毒序列，而SZC42样品测序失败；对SZC42样品PCR产物进行克隆，挑取5个克隆进行测序，5个克隆均获得一段长为589个核苷酸(nucleotide，nt)序列，经BLASTx比对发现这5个克隆的核苷酸序列均与美国蚊虫中发现的星状病毒样病毒(culex bastrovirus-like virus, CAVL)的非结构蛋白基因氨基酸同源性最高，遗传进化分析结果显示云南省蠓虫(SZC42)样本检测到的病毒基因序列与美国蚊虫中检测到的CAVL(NC_040647)、巴西污水中检测到的星状病毒(Astrovirus，AV)(MF042208)以及越南蝙蝠检测到的AV(NC_032426)遗传进化关系较近，但形成独立的进化分支。结论:云南省蠓虫中发现的SZC42病毒序列为星状病毒序列。

中国已从自然界采集的蚊虫标本中分离出多株正布尼亚病毒，包括Simbu血清群的Cat Que、曼扎尼拉和阿卡斑病毒，以及加利福尼亚血清群的Tahyna病毒。但自20世纪80年代以来，还未从蚊虫以外的吸血节肢动物中分离出正布尼亚属的病毒。在本研究中，JXLC1806-2病毒于2018年夏天从中国东部江西省黎川县采集的库蠓中分离，该病毒分离物在接种哺乳动物细胞(BHK-21)48小时内显示出显著的细胞病变作用，病毒滴度为1×10 5.6 pfu/mL。JXLC1806-2病毒不仅在哺乳动物细胞中引起CPE，而且在乳鼠中也可引起发病和死亡，但在C6/36细胞中不引起CPE，并且RT-PCR未检测到复制，提示该病毒为动物病毒。核苷酸和氨基酸序列分析表明，JXLC1806-2病毒基因组由S、M和L三个片段组成。系统发育分析表明，JXLC1806-2病毒的S、M和L基因属于正布尼亚病毒属Tete病毒组，但与Tete血清组的其他成员形成了独立的进化支。结果表明，JXLC1806-2病毒为Tete病毒组的一个新成员，命名为Lichuan病毒，这是中国首次分离到Tete病毒组病毒，也是首次从蚊虫标本之外的蠓虫标本中分离到正布尼亚病毒属病毒。由于该病毒是从养牛场的库蠓中分离，加强该病毒在当地牛群中的监测和检测，以及该病毒是否会在当地其他动物中引起感染和疾病的调查具有十分重要的公共卫生意义。

目的:研究沧源县蠓携带版纳病毒的全基因及其遗传进化特征。方法:2018年在沧源县采集蠓，研磨后将上清液接种BHK-21细胞进行病毒分离的同时用宏转录组学方法检测蠓携带病毒情况，用Perl、Mafft等软件进行病毒序列比对、同源性和分子遗传进化分析。结果:通过宏转录组学方法，从CYC1801组中获得1株版纳病毒的全基因序列，对全基因进行分析显示，节段4和节段7与越南株亲缘关系较近，其余节段均与中国株亲缘关系较近，根据节段12基因序列的系统进化分析，CYC1801与A2基因亚型处于同一进化分支，属于A2型版纳病毒。结论:沧源县蠓携带有版纳病毒并可能作为传播媒介引起疾病流行，需加强监测及防控。

本文记录了我国已知须蠓属Palpomyia 33种.报告了陕西省须蠓属Palpomyia1新种,命名为南泥湾须蠓Palpomyia nanniwana He,Liu and Yu sp.nov..

目的 调查广西壮族自治区(广西)大瑶山国家级自然保护区蠓科昆虫的种类组成及其分布.方法 于2015年7月18-22日在广西大瑶山国家级自然保护区内进行蠓类调查,采用灯诱法(光触媒紫外诱虫灯)和网捕法收集蠓虫标本,并进行分类鉴定.结果 大瑶山国家级自然保护区蠓科昆虫现已知3亚科6属18种,其中蠓亚科2属10种、毛蠓亚科1属2种和铗蠓亚科3属6种.新纪录种11种,包括静波毛蠓、端须铗蠓、冲绳裸蠓、开裂裸蠓、尖峰裸蠓、东方库蠓、印度库蠓、无害库蠓、南山库蠓、边缘库蠓和苍白柱蠓.结论 新纪录种的发现丰富了广西蠓科昆虫的物种多样性,为蠓类治理及蠓传疾病研究提供了参考依据.

目的 调查了解陕西省双翅目Diptera蠓科Ceratopogonidae毛蠓属Dasyhelea种类分布情况.方法 蠓虫采集应用灯诱法和网捕法,统计学处理应用SPSS 9.0软件.结果 调查获得陕西省蠓科Ceratopogonidae毛蠓属Dasyhelea 5种,即竹生毛蠓D bambusaoris Yu、暗色毛蠓D caeruleus Yu et Hao、宽带毛蠓D fasciigera Kieffer、泸定毛蠓D ludingensis Zhang et Yu和西部毛蠓D occasus Zhang et Yu,其中竹生毛蠓D bambusaoris、暗色毛蠓D caeruleus和宽带毛蠓Dfasciigera为陕西省新记录.种类组成上,暗色毛蠓D caerudeus数量最多,占捕获毛蠓总数的50.00％ (38/76);泸定毛蠓D ludingensis次之,占31.58％(24/76);竹生毛蠓D bambusaoris、宽带毛蠓Dfasciigera和西部毛蠓D occasus数量较少,共占捕获毛蠓总数得18.42％(14/76).陕南盆地、秦岭山地、关中平原、陕北黄土高原和塞北风沙草地5个自然地理区中,仅陕南盆地和关中平原有毛蠓分布,其优势种分别为泸定毛蠓和暗色毛蠓.结论 记录毛蠓属Dasyhelea 5种,丰富了陕西省蠓科Ceratopogonidae昆虫.

了解广东省目前流行的乙型脑炎病毒的基因型别,以及新分离毒株与P3和SA14-14-2疫苗株E蛋白的氨基酸差异,推测疫苗株的可能保护效果.本研究对广东省2017年从蚊虫和蠓虫标本分离的10株乙型脑炎病毒基因组序列测定,利用MEGA软件登录GenBank下载乙型脑炎病毒代表株序列并绘制进化树,同时用ClustalW2软件与疫苗株进行氨基酸同源性比对和E蛋白的序列分析.10株乙型脑炎病毒均属基因Ⅰ型GI-b组,但分别位于2个不同的、小的进化分枝中.10株新分离病毒与P3和SA14-14-2疫苗株的E蛋白氨基酸同源性分别位于97.40％～97.60％和97.20％～97.40％之间.E基因区段500个氨基酸中,P3株与新分离乙型脑炎病毒株之间共存在17个氨基酸位点的差异(包括12个共同氨基酸的改变),略高于SA14-14-2疫苗株的16个氨基酸位点变异(包括11个共同氨基酸的改变).其中在DI区的P3和SA14-14-2株分别有1个和3个共同氨基酸变异,D Ⅱ区各有5个共同氨基酸改变,D Ⅲ区分别有5个和2个共同氨基酸改变,结构域之外各有1个共同氨基酸的变异.绝大多数变异发生在非关键位点,只在E306和E388处观察到的氨基酸位点变异与疫苗P3株关键位点的改变有关,这两个位点(G306E,E388G)均发生在D Ⅲ区,而疫苗SA14-14-2未观察到关键位点的改变.总之,广东省流行的乙型脑炎病毒基因型别可能已由Ⅲ型变为Ⅰ型;疫苗SA14-14-2株及P3株与新分离毒株均具有很高的同源性,绝大多数关键氨基酸位点未发生变异,对新分离病毒均具有良好的免疫保护价值.

目的 采用形态学和分子生物学方法对在云南省江城县采集的库蠓进行鉴定,明确该库蠓的准确分类.方法 2017年9月在云南省江城县采集蠓虫样本,采用不损伤库蠓形态的方法提取基因组DNA,用CO Ⅰ基因和ITS-1基因特异引物进行PCR扩增和序列测定,采用Clustal X、DNAStar和Mega 6.1等软件进行核苷酸同源性和系统进化分析.同时将库蠓虫体压片,在体视显微镜下进行形态学鉴定,并计算AR、HR、PR、CR和TR1、TR2、TR3等数值.结果 在江城县采集15只库蠓,均具有两复眼相连接,小眼面间无柔毛,触角15节,第3、11～15节分布有嗅觉器,翅面翅基、径中、径端、径5室、中4室各有1个淡斑,中1室、中2室分别有2个和3个淡斑,其中基淡斑大,向后延伸至臀室基部翅缘;腹部有2个发达受精囊不等大,PR=3.10:±0.48,与苏岛库蠓PR值差异无统计学意义(t=1.79,P＞ 0.05).遗传进化分析显示,在ITS-1基因进化树上江城县采集的15只库蠓与苏岛库蠓位于同一分支内,核苷酸同源性在96.8％～99.3％之间,而与其他库蠓核苷酸同源性均低于94.2％;在CO Ⅰ基因进化树上15只库蠓形成一个独立进化簇,这15只库蠓核苷酸同源性在99.4％以上.结论 15只江城采集的库蠓均为苏岛库蠓,其种内变异较小.本研究增添了苏岛库蠓种类鉴定所需要ITS-1基因和CO Ⅰ基因序列,为库蠓快速鉴定和遗传进化研究提供了序列信息.

目的 了解四川省的蚊、蠓以及相关虫媒病毒种类及分布.方法 在自然界使用灯诱法采集吸血昆虫标本,形态学分类后分装,液氮保存备用.蚊虫、蠓虫研磨上清液接种BHK-21细胞和C6/36细胞进行病毒分离和病毒基因检测.使用BioEdit 7.0.5.3、MEGA 6.0等软件对病毒序列进行分子生物学特征分析.结果 2016-2017年在四川省东南部3个县的7个自然村共采集到3属4种蚊虫17 019只,蠓虫12 700只.三带喙库蚊占蚊虫采集总数的79.4％(13 519/17 019),其次为骚扰阿蚊(11.1％,1 897/17 019),致倦库蚊占采集蚊虫标本总数的5.5％(930/17 019);中华按蚊最少(4.0％,673/17 019).蚊虫标本接种组织细胞后,在合江县采集的三带喙库蚊标本获得3株可以稳定传代的病毒分离株,经分子生物学实验鉴定为基因Ⅰ型流行性乙型脑炎(乙脑)病毒,在合江县采集的7批蚊虫中检测到乙脑病毒基因阳性.蠓虫标本接种细胞后未获得病毒分离物,在合江县采集的4批蠓虫标本经分子生物学检测,显示阿卡斑病毒基因阳性.结论 三带喙库蚊是四川省东南部3县的优势蚊种,四川省东南部存在经蚊虫传播的乙脑病毒及以蠓虫为媒介的阿卡斑病毒.