目的:建立一种人星状病毒TaqMan实时荧光定量RT-PCR(real-time reverse transcription-polymerase chain reaction)快速检测方法。方法:根据人星状病毒 ORF1 b基因的保守序列设计扩增引物和特异性荧光探针，建立星状病毒TaqMan实时荧光定量RT-PCR快速检测方法，并对该方法的特异性、灵敏度和稳定性进行评价，同时应用该方法对实际临床样本中的星状病毒进行检测。 结果:所建立的人星状病毒TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法具有良好的特异性和稳定性，灵敏度可达10 2拷贝/μl，对星状病毒临床样本检测后，检出率达100%。 结论:本文所建立的人星状病毒TaqMan实时荧光定量RT-PCR法具有简单快速、灵敏度高、特异性强、稳定性好的特点，可应用于临床星状病毒的病原检测和流行病学调查。

目的:了解2020—2022年云南省哨点医院5岁以下诊断为腹泻的住院患儿腹泻病毒的感染状况。方法:2020—2022年共采集粪便标本612份。采用ELISA、荧光PCR以及巢式PCR法对A组轮状病毒（rotavirus，RVA）、诺如病毒（norovirus，NV）、札如病毒（sapovirus，SaV）、人星状病毒（human astrovirus，HAtV）和肠道腺病毒（adenovirus，EAdV）进行检测，RVA阳性标本进行分型。结果:阳性标本266份（混合感染47份），阳性率43.46%。检出率依次是RVA（28.76%，176/612）、NV（11.93%，73/612）、EAdV（4.74%，29/612）、HAtV（3.43%，21/612）和SaV（2.94%，18/612）。2020—2021年RVA以G9P[8]为主，2022年为G8P[8]；NV均以GII为主。不同性别仅NV阳性率差异有统计学意义。12~23月龄总检出率最高，48~59月龄最低，各月龄组间差异有统计学意义；第一季度检出率最高，第二季度次之，四个季度间差异有统计学意义（ P<0.05）。 结论:云南省监测哨点5岁以下病毒性腹泻住院患儿中RVA检出率最高，NV次之。2022年RVA优势流行株由G9P[8]变为G8P[8]。

目的:分析5岁以下急性腹泻婴幼儿中经典人星状病毒(human astrovirus，HAstV)的流行病学特点，了解经典HAstV在婴幼儿腹泻发病中的作用。方法:收集2012年1月至2016年12月于上海复旦大学附属儿科医院门诊就诊的1 010例急性腹泻婴幼儿(年龄≤5岁)的粪便标本1 010份，采用反转录聚合酶链反应或聚合酶链反应检测粪便标本中的经典HAstV、A组轮状病毒、诺如病毒和腺病毒，通过基因测序和进化树分析确定HAstV的型别和亚型。结果:5年经典HAstV的总检出率为2.7%(27/1 010)。2012年、2013年、2014年、2015年和2016年检出率分别为6.9%(10/144)、3.5%(5/144)、2.1%(3/144)、1.5%(4/265)、1.6%(5/313)。HAstV感染腹泻患儿的年龄段集中在0~36月龄，占96.3%(26/27)。除2016年外，其他年份检出的经典HAstV集中在秋冬季。检出的27例经典HAstV感染腹泻患儿的基因型均为HAstV-1型，亚型分别为HAstV-1a和HAstV-1b，以HAstV-1a亚型(63.0%，17/27)为主。腹泻患儿中经典HAstV的感染以单独感染为主，占77.8%(21/27)；混合感染以HAstV与A组轮状病毒(3例)和腺病毒(2例)的两两混合感染为主，还有1例混合感染为HAstV、A组轮状病毒和腺病毒的同时感染。结论:HAstV感染主要集中在0~36月龄婴幼儿。经典HAstV流行基因型别单一，但亚型处于动态变化中，需长期连续监测经典HAstV在腹泻婴幼儿中的流行情况及其基因型别，以防暴发性腹泻的发生。

目的:探讨星状神经节阻滞(stellate ganglion block，SGB)对创伤后应激障碍(post-traumatic stress disorder，PTSD)模型小鼠条件性恐惧记忆的调控作用及其机制。方法:选取8～9周龄SPF级雄性C57BL/6J小鼠，根据随机数字表法分组，并完成以下实验：(1)32只小鼠分为PTSD组、PTSD＋七氟烷组(Sev组)、PTSD＋生理盐水组(NS组)、PTSD＋SGB组(SGB组)，每组8只。采用条件性恐惧实验建立PTSD模型，检测4组小鼠的恐惧记忆；(2)取3只小鼠，采用伪狂犬病病毒(pseudorabies virus，PRV)逆行示踪观察星状神经节(stellate ganglion，SG)到脑内的神经投射；(3)取24只小鼠，分为空白对照(negative control，NC组)、Sev组、NS组、SGB组，每组6只，采用免疫荧光染色观察蓝斑核(locus coeruleus，LC)去甲肾上腺素(norepinephrine，NE)能神经元(LC NE)中c-Fos的表达；(4)取3只小鼠，采用霍乱毒素B亚基(cholera toxin subunit B，CTB)逆行示踪LC到基底外侧杏仁核(basolateral amygdala，BLA)的神经投射；(5)使用化学遗传学和光遗传学方法，借助病毒载体增强神经元活性，观察LC NE-BLA神经环路的化学或光遗传学激活对小鼠恐惧记忆的影响。采用GraphPad Prism 8.0对数据进行单因素方差分析。 结果:(1)造模后，NS组小鼠在测试阶段僵立时间百分比[(59.83±6.31)%]与PTSD组[(62.21±7.90)%]和Sev组[(63.61±8.48)%]相比均差异无统计学意义(均 P>0.05)，SGB组小鼠僵立时间百分比[(47.78±7.02)%]低于NS组( P<0.05)。(2)SG注射PRV病毒示踪结合免疫荧光结果显示，LC NE神经元投射至SG。(3)免疫荧光染色检测小鼠LC NE神经元活动性，结果显示与NC组[(5.52±2.70)%]相比，NS组[(16.75±3.44)%]和Sev组[(14.90±2.73)%]小鼠LC NE神经元中c-Fos表达均明显较高(均 P<0.01)，SGB组小鼠c-Fos表达[(10.90±3.29)%]较NS组低( P<0.05)。(4)CTB逆行追踪结果显示，LC神经元投射到BLA。(5)SGB小鼠经化学遗传激活后，其僵立时间百分比高于激活前[(67.02±9.49)%，(45.97±7.15)%] ( P<0.01)；SGB组小鼠经光遗传学激活后，小鼠的僵立时间百分比也明显高于激活前[(77.37±11.66)%，(47.76±9.63)%] ( P<0.001)。 结论:SGB可以有效降低PTSD模型小鼠的恐惧记忆，并降低了小鼠LC NE神经元活动性，这可能是通过抑制LC NE-BLA神经环路机制实现的。

目的:观察造血干细胞移植（HSCT）后巨细胞病毒（CMV）性视网膜炎（CMVR）相关葡萄膜炎的临床特征。方法:回顾性临床研究。2015年10月至2020年5月于苏州大学附属第一医院眼科检查确诊的HSCT后CMVR患者14例21只眼纳入研究。其中，男性5例8只眼，女性9例13只眼；平均年龄（35.12±12.24 ）岁。所有患眼均行裂隙灯显微镜联合前置镜、眼底彩色照相检查。同时行荧光素眼底血管造影（FFA）检查5例10只眼；房水炎性细胞因子检测3例3只眼。所有患眼接受玻璃体腔注射更昔洛韦治疗；伴有CMV全身感染病史者，静脉滴注更昔洛韦/膦甲酸钠治疗。将患眼视网膜病灶完全消退或房水CMV-DNA阴性者视为CMVR治愈。观察患眼CMVR治愈前后的葡萄膜炎症状、体征、FFA表现及房水炎性因子检测结果。CMVR治愈后随访时间3~ 42个月，平均随访时间（14.28±13.12）个月。结果:所有患眼确诊CMVR时均伴有角膜后尘状和（或）星状沉积物、前房闪辉和细胞以及不同程度玻璃体絮状混浊；视网膜可见出血和黄白色坏死灶混杂而成的典型"番茄炒鸡蛋"样表现。CMVR治愈后，存在角膜后沉着物以及前房闪辉、细胞和玻璃体混浊10例16只眼（71.4%，10/14）。FFA检查发现，CMVR活动期视网膜渗漏以坏死灶及其周围组织为主；CMVR治愈后视网膜渗漏以未坏死区域视网膜及血管为主。房水炎症因子检测结果显示，CMVR活动期白细胞介素（IL）-6、IL-8、血管内皮细胞粘附分子明显增高；CMVR治愈3个月后，炎症因子无明显增高。结论:HSCT后CMVR相关性葡萄膜炎表现为慢性全葡萄膜炎，眼部无明显充血，可见角膜后沉着物以及前房闪辉、细胞和玻璃体混浊，视网膜血管渗漏长时间（>3个月）存在。

目的:分析山东省三个城市食源性腹泻病例中胃肠炎病毒病原谱的分布和流行特征。方法:于2017年1—12月，以山东省济南、烟台和临沂市的6家哨点医院为研究现场，收集1 397例食源性腹泻病例的粪便标本，同时获取其基本信息和临床症状。采用双重荧光定量RT-PCR分别检测如病毒基因Ⅰ组（NoV GⅠ）和Ⅱ组（NoV GⅡ）、札如病毒（SaV）和人星状病毒（HAstV），采用单重荧光定量RT-PCR检测轮状病毒A组（RVA），采用荧光定量PCR检测肠道腺病毒（EAdV），对病毒的特异性片段进行测序、分型。比较不同特征病例胃肠炎病毒阳性率以及阳性和阴性病例间临床症状的差异。结果:年龄 M（ P25， P75）为23（1，42）岁；以男性为主，占57.48%（803例）；≤5岁儿童居多，占36.36%（508例）。胃肠炎病毒阳性率为33.93%（474例），济南、临沂和烟台市分别为32.03%（147/459）、41.54%（189/455）和28.57%（138/483）（ P<0.001）；NoV GⅡ组的阳性率最高，为16.54%（231例），5月（24.75%，50/202）和6月（19.59%，38/194）出现高峰，以GⅡ.P16/GⅡ.2型（48.28%，56/116）为主。阳性病例中，44.51%（211/474）出现呕吐症状，高于阴性病例（34.13%，315/923），差异有统计学意义（ P<0.001）。 结论:山东省食源性腹泻病例中男性、5岁以下儿童居多；NoV GⅡ流行强度较高，发病高峰为春夏季，病毒性胃肠炎临床症状不典型。

目的:了解北京地区5岁以下儿童轮状病毒、诺如病毒、腺病毒及星状病毒相关急性胃肠炎的流行特点和临床特征。方法:在北京地区6个区县6家医院肠道门诊每月收集前30名年龄在5岁以下首次就诊的急性胃肠炎患者的信息资料和粪便样本，并对轮状病毒、诺如病毒、腺病毒及星状病毒四种病原进行PCR检测，采用描述性流行病学方法对四种病毒相关的急性胃肠炎流行特征进行描述，单因素方差分析各病毒引起的急性胃肠炎的Vesikari临床严重程度评分，采用非条件logistic回归分析急性胃肠炎的临床特征相关危险因素。结果:2 052份样本中，非混合感染709例（34.6%）：其中轮状病毒411例（20.0%），诺如病毒153例（7.5%），腺病毒86例（4.2%），星状病毒59例（2.9%）；混合感染135例（6.6%）。轮状病毒性急性胃肠炎的Vesikari评分（8.0±3.1）高于诺如病毒（6.4±2.4， P<0.001）、腺病毒（6.2±2.1， P<0.001）及星状病毒（6.1±2.0， P<0.001）。临床特征比较结果显示：以星状病毒为参照，5岁以下儿童感染轮状病毒急性胃肠炎后更易出现：≥5 d的腹泻（ OR=3.33）、1 d内≥3次的呕吐（ OR=8.79）、≥1 d的呕吐（ OR=3.96）、Vesikari评分≥11的重症病例（ OR=13.19）；感染诺如病毒易出现1 d内≥3次的呕吐（ OR=5.71）；感染腺病毒易出现≥5 d的腹泻（ OR=2.62）；以轮状病毒为参照，5岁以下儿童感染诺如病毒（ OR=0.40）或腺病毒（ OR=0.28）后较少出现≥38.4 ℃的发热症状。 结论:本研究结果显示各病毒导致的急性胃肠炎特点不同，轮状病毒引起的急性胃肠炎临床症状较重，24月龄以下婴幼儿是轮状病毒感染的高危人群，应尽早采取有效预防措施如接种疫苗来保护易感人群。

目的:探索云南省师宗县蠓虫携带虫媒病毒情况。方法:采用RT-PCR方法对2013年7月采集自云南省师宗县的74批3 705只蠓虫进行检测，然后对扩增条带进行克隆测序。采用DNAStar软件中MegAlign进行同源性分析，使用MEGAX软件ALIGN进行序列比对和基于Maximum Likelihood (ML)方法进行遗传进化分析。结果:在云南省采集74批蠓虫样品中3批标本(SZC33、SZC42和SZ625C8-2)扩增出600 bp左右大小电泳条带；经过对以上PCR产物直接进行测序，SZC33和SZ625C8-2样本获得西藏环状病毒序列，而SZC42样品测序失败；对SZC42样品PCR产物进行克隆，挑取5个克隆进行测序，5个克隆均获得一段长为589个核苷酸(nucleotide，nt)序列，经BLASTx比对发现这5个克隆的核苷酸序列均与美国蚊虫中发现的星状病毒样病毒(culex bastrovirus-like virus, CAVL)的非结构蛋白基因氨基酸同源性最高，遗传进化分析结果显示云南省蠓虫(SZC42)样本检测到的病毒基因序列与美国蚊虫中检测到的CAVL(NC_040647)、巴西污水中检测到的星状病毒(Astrovirus，AV)(MF042208)以及越南蝙蝠检测到的AV(NC_032426)遗传进化关系较近，但形成独立的进化分支。结论:云南省蠓虫中发现的SZC42病毒序列为星状病毒序列。

目的:监测2017—2018年杭州地区儿童病毒感染性腹泻病原谱及其流行病学特征。方法:采用随机数字表法收集杭州市儿童医院2017年6月至2018年5月急性腹泻患儿的粪便样本1 061份，采用实时荧光RT-PCR技术检测诺如病毒（NV）、轮状病毒（RV）、星状病毒（AstV）、肠道腺病毒（EAdV）和札如病毒（SaV）5种致腹泻病毒的核酸，应用SPSS 19.0软件对数据进行统计分析，并计算集中度。结果:1 061例儿童腹泻患儿5种病毒检出的总阳性率为24.79%（263例）；其中NV检出率最高（10.37%，110例），其次为RV（8.77%，93例）；NV检出以GⅡ型为主，RV检出以A组为主；以NV与RV混合感染最为常见，共15例。混合感染共20例，1~<5岁儿童混合感染阳性检出率较高。感染存在明显的季节性，寒冷季节易感。结论:杭州地区病毒性腹泻病原谱复杂多样。NV和RV是引起本地区儿童病毒感染性腹泻的主要病原体。

目的:了解北京市某区札如病毒引起的聚集性疫情的流行病学及基因特征分析，为疫情防控提供技术支撑。方法:收集2019—2023年北京市某区急性胃肠炎聚集性疫情流行病学调查资料和病例粪便样本，使用实时荧光PCR对A组轮状病毒、GⅠ组诺如病毒、GⅡ组诺如病毒、札如病毒、肠道腺病毒和星状病毒进行检测，对札如病毒阳性样本进行VP1区的基因测序和系统进化分析。结果:29起急性胃肠炎聚集性疫情中检出了札如病毒，阳性检出率为12.66%。疫情在5—6月和11月有两个高峰，场所主要集中在幼儿园和小学。共检出5个基因型，分别为GⅠ.6、GⅠ.1、GⅡ.3、GⅠ.2和GⅠ.3。结论:GⅠ.6是北京某区聚集性疫情主要流行优势株，应对其进行持续监测，进一步了解札如病毒的分子流行特征。