目的:评价Ras同源家族成员A(RhoA)在氢减轻脂多糖(LPS)致小鼠肺微血管内皮细胞屏障功能损伤中的作用。方法:小鼠肺微血管内皮细胞培养于含10%胎牛血清和1%青链双抗的DMEM/F12培养基中，传代至第4～6代的细胞用于实验，采用随机数字表法分为6组( n＝36)：对照组(A组)、富氢液组(B组)、LPS组(C组)、LPS＋富氢液组(D组)、LPS＋RhoA抑制剂C3酶组(E组)和LPS＋富氢液＋RhoA激活剂U-46619组(F组)。A组、C组和E组采用正常培养基培养，B组、D组和F组采用含饱和氢气培养基培养，C组、D组、E组和F组加入LPS，终浓度1 μg/ml；E组于加入LPS前2 h加入C3酶，终浓度3 μg/ml；F组于加入LPS前3 h加入U-46619，终浓度10 mg/ml。分别于LPS孵育后6、12和24 h时采用Western blot法检测血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)和紧密连接蛋白(occludin)的表达；于LPS孵育后24 h时采用LDH法测定细胞LDH释放率，MTT法测定细胞活力，GST pull-down法测定RhoA活性。 结果:与A组比较，C组孵育6、12和24 h时occludin和VE-cadherin表达下调，孵育24 h时细胞活力降低，LDH释放率和RhoA活性升高( P<0.05)；与C组比较，D组孵育6、12和24 h时occludin和VE-cadherin表达上调，孵育24 h时细胞活力升高，LDH释放率和RhoA活性降低( P<0.05)；与C组比较，E组孵育6、12和24 h时occludin和VE-cadherin表达上调，孵育24 h时细胞活力升高，LDH释放率和RhoA活性降低( P<0.05)；与D组比较，F组孵育6、12和24 h时occludin和VE-cadherin表达下调，孵育24 h时细胞活力降低，LDH释放率和RhoA活性升高( P<0.05)。 结论:RhoA参与了氢减轻LPS致小鼠肺微血管内皮细胞屏障功能损伤的过程。

目的:研究芍药苷干预对脓毒症大鼠心肌损伤的影响。方法:采用随机数字表法将SD大鼠分为4组，每组10只。（1）对照组：大鼠腹腔注射1.4 ml生理盐水；（2）二甲基亚砜组：大鼠腹腔注射5%二甲基亚砜溶液1.4 ml；（3）脓毒症模型组：大鼠腹腔注射1.4 ml生理盐水，1 h后腹腔注射0.1 ml（5 mg/kg）脂糖造模；（4）芍药苷干预组：大鼠腹腔注射1.4 ml芍药苷（70 mg/kg），1 h后腹腔注射0.1 ml（5 mg/kg）脂多糖造模。24 h后处死4组大鼠。酶联免疫吸附测定（ELISA）法测4组大鼠血清心肌肌钙蛋白I（cTnI）及心肌组织中肿瘤坏死因子α（TNFα）、白细胞介素（IL）-6、IL-1β、趋化因子C-X-C基序配体1（CXCL1）、趋化因子C-X-C基序配体2（CXCL2）、血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）水平，伊文思蓝法测4组大鼠心肌组织中伊文思蓝含量；实时荧光定量聚合酶链式反应法测4组大鼠心肌组织中TNFα、IL-6、IL-1β、CXCL1、CXCL2、VCAM-1mRNA表达；Western-Blot法测血管内皮钙黏蛋白、丝裂原活化蛋白激酶p38（p38MAPK）、磷酸化p38MAPK（P-p38MAPK）、磷酸化Src蛋白（P-Src）、Ras相关C3肉毒素底物1（Rac1）蛋白表达。结果:与对照组比，脓毒症模型组cTnI增高［（312.9±17.9）pg/ml比（174.4±17.7）pg/ml， P<0.05］，伊文思蓝含量上升［（23.8±2.9）μg/g 比（5.2±2.0）μg/g， P<0.05］，心肌炎性细胞浸润明显；与脓毒症模型组比，芍药苷干预组cTnI明显降低［（227.7±15.9）pg/ml， P<0.05］，伊文思蓝含量显著下降［（13.2±2.3）μg/g， P<0.05］，心肌炎性细胞浸润减轻。与对照组比，脓毒症模型组TNFα、IL-6、IL-1β、CXCL1、CXCL2、VCAM-1增高；与脓毒症模型组比，芍药苷干预组TNFα［（63.39±9.55）pg/ml 比（126.54±19.17）pg/ml， P<0.05］、IL-6［（64.03±8.82）pg/ml 比（85.60±9.52）pg/ml， P<0.05］、IL-1β［（69.52±9.23）pg/ml比（130.45±15.10）pg/ml， P<0.05］、CXCL1［（2 600.19±379.54）pg/ml比（4 903.89±533.42）pg/ml， P<0.05］、CXCL2［（93.71±10.83）pg/ml比（127.24±13.92）pg/ml， P<0.05］、VCAM-1［（112.22±13.49）pg/ml 比（149.32±15.65 pg/ml）， P<0.05］显著下降。与对照组比，脓毒症模型组TNFα、IL-6、IL-1β、CXCL1、CXCL2、VCAM-1 mRNA表达增高；与脓毒症模型组比，芍药苷干预组IL-6（相对表达量1.271±0.139 比 1.920±0.191， P<0.05）、IL-1β（相对表达量1.180±0.130 比 1.817±0.191， P<0.05）、VCAM-1（相对表达量1.088±0.144 比 1.460±0.166， P<0.05）mRNA表达降低。与对照组比，脓毒症模型组P-p38MAPK、P-Src表达增加，血管内皮钙黏蛋白表达降低。与脓毒症模型组比，芍药苷干预组p38MAPK（相对表达量1.125±0.078 比 1.520±0.164， P<0.05）、P-p38MAPK（相对表达量 1.639±0.133 比 2.112±0.227， P<0.05）表达均明显下降，血管内皮钙黏蛋白表达升高。 结论:芍药苷能改善脓毒症大鼠心脏微血管内皮通透性，抑制炎症相关蛋白及基因的分泌和表达，可能与芍药苷抑制Src/血管内皮钙黏蛋白通路有关。

目的:观察介入取栓联合静脉溶栓治疗脑梗死对患者血管内皮功能和神经功能的影响。方法:回顾性选取本院2018年11月至2020年11月收治的脑梗死患者108例，根据治疗方法不同分为两组，每组54例。对照组采用静脉溶栓治疗，观察组采用静脉溶栓联合神经介入取栓术治疗。比较两组血管再通率和不良事件发生率，以及两组血管内皮功能指标及美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、改良的Rankin量表(mRS)评分。结果:术后48 h复查颅脑CT，观察组血管再通率高于对照组(90.74% vs 75.93%)，差异有统计学意义( P<0.05)。术后3个月，两组一氧化氮(NO)较术前上升( P<0.05)，内皮素(ET)、血管内皮钙黏蛋白较术前下降(均 P<0.05)，且观察组术后NO高于对照组( P<0.05)，ET、血管内皮钙黏蛋白低于对照组(均 P<0.05)。两组术后7 d的NIHSS评分、术后3个月的mRS评分较术前下降(均 P<0.05)，且观察组NIHSS评分、mRS评分均低于同时点的对照组(均 P<0.05)。两组不良事件发生率比较差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:介入取栓联合静脉溶栓治疗脑梗死可改善血管内皮功能，减轻神经功能缺损，提高血管再通率，改善预后。

目的:观察白细胞介素6（IL-6）对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）表型和功能的影响，探索IL-6在内皮-间充质转化（EndMT）过程中的作用。方法:采用实验研究方法。取产妇行分娩手术后弃用的新鲜正常胎儿脐带，分离培养原代细胞的第2天在倒置相差显微镜下观察细胞形态；免疫荧光法鉴定第4代细胞是否为HUVEC后，取2批第3～5代HUVEC，用于后续实验。将第1批细胞按随机数字表法（下同）分为6组：空白对照组、5 ng/mL IL-6组、10 ng/mL IL-6组、25 ng/mL IL-6组、50 ng/mL IL-6组、100 ng/mL IL-6组，将第2批细胞分为4组：空白对照组、10 ng/mL IL-6组、25 ng/mL IL-6组、50 ng/mL IL-6组；空白对照组仅加入完全培养液，其余各组细胞还加入相应终质量浓度的IL-6。第1批细胞，分组培养后72 h，倒置相差显微镜下观察6组HUVEC形态；免疫荧光法检测6组HUVEC凝血因子Ⅷ和α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的阳性表达，并计算双阳性细胞数占凝血因子Ⅷ阳性细胞数的比值（以下简称双阳性细胞数的比值），样本数为6；实时荧光定量反转录PCR法检测6组HUVEC 血管内皮钙黏蛋白和α-SMA蛋白的mRNA表达量，样本数为3。第2批细胞，分组培养后72 h，蛋白质印迹法检测4组HUVEC 血管内皮钙黏蛋白、α-SMA和Ⅰ型胶原的蛋白表达量，样本数为3。对数据行单因素方差分析、Bonferroni校正。结果:原代分离培养的第2天细胞呈短梭形或多边形，免疫荧光法鉴定第4代细胞为HUVEC。第1批细胞，分组培养后72 h，6组细胞随IL-6浓度的逐渐增加，其形态向长梭形变化，细胞间连接减少或消失、间隙变大。分组培养后72 h，与空白对照组双阳性细胞数的比值相比，25 ng/mL IL-6组、50 ng/mL IL-6组、100 ng/mL IL-6组显著增高（ P<0.01）；与5 ng/mL IL-6组双阳性细胞数的比值相比，25 ng/mL IL-6组、50 ng/mL IL-6组和100 ng/mL IL-6组显著升高（ P<0.01）；与10 ng/mL IL-6组双阳性细胞数的比值相比，50 ng/mL IL-6组和100 ng/mL IL-6组显著升高（ P<0.01）；100 ng/mL IL-6组双阳性细胞数的比值均显著高于25 ng/mL IL-6组、50 ng/mL IL-6组（ P<0.01）。分组培养后72 h，与空白对照组细胞血管内皮钙黏蛋白的mRNA表达量比，25 ng/mL IL-6组、50 ng/mL IL-6组和100 ng/mL IL-6组明显下降（ P<0.05或 P<0.01）；与5 ng/mL IL-6组细胞血管内皮钙黏蛋白的mRNA表达量比较，50 ng/mL IL-6组和100 ng/mL IL-6组均明显下降（ P<0.01）；与10 ng/mL IL-6组细胞血管内皮钙黏蛋白的mRNA表达量比较，50 ng/mL IL-6组和100 ng/mL IL-6组明显下降（ P<0.01）；与25 ng/mL IL-6组细胞血管内皮钙黏蛋白mRNA的表达量比较，50 ng/mL IL-6组和100 ng/mL IL-6组明显下降（ P<0.01）。分组培养后72 h，5 ng/mL IL-6组、10 ng/mL IL-6组、25 ng/mL IL-6组、50 ng/mL IL-6组、100 ng/mL IL-6组细胞 α-SMA的 mRNA表达水平显著高于空白对照组（ P<0.05或 P<0.01）。第2批细胞分组培养后72 h，与空白对照组细胞血管内皮钙黏蛋白的蛋白表达量1.391±0.026比较，10 ng/mL IL-6组（1.185±0.063）、25 ng/mL IL-6组（0.717±0.078）、50 ng/mL IL-6组（0.293±0.064）显著降低（ P<0.05）；与10 ng/mL IL-6组细胞血管内皮钙黏蛋白的蛋白表达量比较，25 ng/mL IL-6组、50 ng/mL IL-6组显著降低（ P<0.01）；与25 ng/mL IL-6组细胞血管内皮钙黏蛋白的蛋白表达量比较，50 ng/mL IL-6组显著降低（ P<0.01）。分组培养后72 h，与空白对照组细胞α-SMA的蛋白表达量比较，10 ng/mL IL-6组、25 ng/mL IL-6组、50 ng/mL IL-6组显著升高（ P<0.01）；与10 ng/mL IL-6组细胞α-SMA的蛋白表达量比较，25 ng/mL IL-6组、50 ng/mL IL-6组显著增加（ P<0.01）。分组培养后72 h，与空白对照组细胞Ⅰ型胶原的蛋白表达量比较，25 ng/mL IL-6组、50 ng/mL IL-6组显著增加（ P<0.05）。 结论:IL-6作用于HUVEC后，细胞的表型和功能呈浓度依赖性表现为间质细胞的特征。炎症因子可促进EndMT进程，成为调控组织纤维化机制的重要因子之一。

目的:研究蛋白激酶D-1(PKD-1)在神经内分泌肿瘤(NEN)中的表达以及PKD-1信号调控NEN细胞上皮-间充质转化(EMT)的机制，探讨其与NEN转移的相关性。方法:通过免疫荧光染色和免疫组织化学染色的方法，检测人胰腺NEN组织中PKD-1以及波形蛋白(Vimentin)、白细胞共同抗原(CD45)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达及分布，分析转移性肿瘤细胞中PKD-1的表达；通过体外培养BON细胞，分别激活和阻断PKD-1信号，或以表皮生长因子(EGF)处理细胞，以免疫荧光染色、蛋白质印迹法(Western blot)和反转录实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)的方法，检测BON细胞中EMT相关标志物的表达，分析PKD-1信号对BON细胞EMT的调控机制。两样本间比较采用 t检验，多样本间比较采用单因素方差分析(ANOVA)。 结果:NEN组织中Vimentin +转移性肿瘤细胞有在小动脉周围聚集现象，且PKD-1在NEN肿瘤细胞转移过程中呈动态变化；PKD-1信号能够促进BON细胞Vimentin的表达[(56.67±1.93)%比(35.55±2.22)%， t＝7.178， P<0.01]并升高PKD-1和细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)的磷酸化水平，EGF能刺激BON细胞发生间质样形态变化，并降低E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达(0.517±0.005比1.000±0.004， t＝74.63， P<0.001)而增加Vimentin的表达(9.632±0.646比1.004±0.061， t＝13.29， P<0.001)。 结论:NEN中PKD-1信号是调控肿瘤细胞EMT的重要机制；血管内皮细胞分泌EGF可能通过PKD-1信号诱导肿瘤细胞EMT，促进肿瘤转移。

目的:探讨微小RNA(miRNA，miR)-30a通过诱导血管内皮细胞间质化(EndMT)，促进血管内膜增生，影响下肢动脉硬化闭塞症(ASO)进程。方法:苏木精-伊红染色法(HE)检测ASO病变动脉形态、内膜中膜厚度；免疫荧光检测EndMT标志物表达。肿瘤坏死因子-α(TNF-α)处理人脐静脉内皮细胞(HUVECs)，构建EndMT细胞模型。将体外培养的HUVECs分为转染miR阴性对照(miR-NC组)和转染miR模拟物(miR-30a组)。实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹法(Western blot)检测EndMT标志物表达。细胞增殖实验检测HUVECs(EndMT)增殖能力、小室细胞迁移实验、划痕实验检测其迁移能力。采用GraphPad Prism 7进行统计学分析， t检验分析实验结果。 结果:ASO动脉内膜增生且呈间质化改变[内膜厚度，对照组(178.40±29.61) μm，ASO (422.10±39.47) μm， t＝4.940， P<0.01， n＝6；中膜厚度，对照组 (315.80±48.46) μm，ASO (656.80±43.91) μm， t＝5.200， P<0.01， n＝6]，差异有统计学意义，miR-30a在HUVECs(EndMT)和ASO内膜中高表达，miR-30a表达上调能够抑制HUVECs的内皮标志物表达，同时促进其间质标志物表达[CD31，对照：3.535±0.116，miR-30a：1.360±0.185， t＝9.966， P<0.01， n＝3；人血管内皮钙黏蛋白(VE-Cadherin)，对照：2.453±0.075，miR-30a：0.793±0.106， t＝12.830， P<0.01， n＝3；α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)，对照：0.792±0.121，miR-30a：6.296±0.380， t＝13.820， P<0.01， n＝3；Ⅰ型胶原(COL1)，对照：0.2413±0.063，miR-30a：2.859±0.142， t＝16.840， P<0.01， n＝3]，差异有统计学意义，并促进HUVECs(EndMT)的增殖迁移能力[细胞迁移率，对照：(50.160±1.210)%，miR-30a：(68.560±1.918)%， t＝8.115， P<0.01， n＝6]，差异有统计学意义。 结论:miR-30a在ASO增生内膜中表达上调，miR-30a能够诱导内皮细胞间质化，增强其增殖迁移能力，导致ASO内膜增生、促进ASO病情进展。

目的:探讨复方芪参提取物对糖尿病足溃疡(DFU)大鼠创面的愈合能力。方法:选取6～8周龄无特定病原体(SPF)级成年SD大鼠(河北省实验动物中心)，体重200～250 g，共110只。其中36只作为对照组，其余74只进行高糖高脂饲料喂养，并注射低剂量链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病。成功建立糖尿病足溃疡模型的72只大鼠按随机数字表法分为模型组和复方芪参提取物组，每组36只。通过在大鼠背侧后足打孔形成溃疡创面伤口。复方芪参提取物组大鼠口服复方芪参提取物，模型组和对照组分别口服生理盐水。观察溃疡创面愈合率，并使用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平。免疫组织化学检测溃疡创面组织中表皮生长因子(EGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达。计量资料组间差异比较采用单因素方差分析或LSD- t检验，计数资料指标组间比较使用 χ2检验。 结果:模型组大鼠创面愈合率显著低于对照组[(16.84±3.01)%比(43.36±4.42)%， t＝8.49， P<0.05]；复方芪参提取物组大鼠创面愈合率显著高于模型组[(28.50±2.62)%比(16.84±3.01)%， t＝12.48， P<0.05]。在第3、6、9天的时间点上，模型组IL-6水平显著高于对照组(21.29±3.42比15.78±3.06， t＝－6.23， P<0.05；22.36±2.98比15.69±3.12， t＝－4.26， P<0.05；22.58±3.06比15.38±2.86， t＝－5.45， P<0.05)；复方芪参提取物组IL-6水平显著低于模型组(17.99±1.95比21.29±3.42， t＝4.23， P<0.05；17.95±1.87比22.36±2.98， t＝3.45， P<0.05；18.02±1.82比22.58±3.06， t＝4.62， P<0.05)；模型组TNF-α水平显著高于对照组(17.18±2.42比8.38±0.69， t＝－8.44， P<0.05；18.06±3.41比8.60±1.09， t＝－7.29， P<0.05；17.38±2.69比8.53±1.06， t＝－6.52， P<0.05)；复方芪参提取物组TNF-α表达水平显著低于模型组(13.51±2.08比17.18±2.42， t＝4.25， P<0.05；14.02±2.05比18.06±3.41， t＝3.36， P<0.05；14.56±2.50比17.38±2.69， t＝5.28， P<0.05)；模型组的EGF表达水平显著低于对照组(0.235±0.002比0.272±0.001， t＝1.24， P<0.05；0.237±0.001比0.268±0.002， t＝2.40， P<0.05；0.240±0.003比0.275±0.001， t＝1.20， P<0.05)；复方芪参提取物组EGF表达水平显著高于模型组(0.252±0.001比0.235±0.002， t＝－1.26， P<0.05；0.251±0.003比0.237±0.001， t＝－2.24， P<0.05；0.255±0.002比0.240±0.003， t＝－1.40， P<0.05)；模型组VEGF表达水平显著低于对照组(0.205±0.001比0.226±0.002， t＝2.23， P<0.05；0.212±0.001比0.239±0.002， t＝1.47， P<0.05；0.217±0.001比0.243±0.002， t＝2.26， P<0.05)；复方芪参提取物组VEGF表达水平显著高于模型组(0.216±0.002比0.205±0.001， t＝－2.90， P<0.05；0.225±0.002比0.212±0.001， t＝－1.43， P<0.05；0.230±0.003比0.217±0.001， t＝－1.63， P<0.05)；模型组bFGF表达水平显著低于对照组(0.192±0.002比0.228±0.003， t＝1.25， P<0.05；0.216±0.002比0.235±0.004， t＝1.09， P<0.05；0.220±0.002比0.245±0.001， t＝2.06， P<0.05)；复方芪参提取物组bFGF表达水平显著高于模型组(0.215±0.001比0.192±0.002， t＝－1.37， P<0.05；0.228±0.001比0.216±0.002， t＝－1.36， P<0.05；0.235±0.002比0.220±0.002， t＝－1.06， P<0.05)；模型组E-cadherin表达水平显著低于对照组(0.286±0.002比0.325±0.001， t＝1.69， P<0.05；0.293±0.003比0.352±0.002， t＝1.50， P<0.05；0.298±0.001比0.360±0.003， t＝1.23， P<0.05)；复方芪参提取物组E-cadherin水平显著高于模型组(0.301±0.002比0.286±0.002， t＝－1.03， P<0.05；0.314±0.003比0.293±0.003， t＝－1.34， P<0.05；0.325±0.004比0.298±0.001， t＝－1.23， P<0.05)。 结论:复方芪参提取物具有抗炎、促进血管再生和创面再上皮化，能够显著促进糖尿病足溃疡大鼠创面的愈合。

目的:探究纳布啡（NAL）对胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响，以及对缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）/血管内皮生长因子（VEGF）信号通路的调控机制。方法:培养人胶质瘤细胞U251并将其随机分为U251组、NAL低浓度（NAL-L）组、NAL中浓度（NAL-M）组、NAL高浓度（NAL-H）组和NAL-H＋HIF-1α激活剂（NAL-H＋DMOG）组。采用CCK-8法检测各组U251细胞存活率；采用克隆平板实验检测各组U251细胞的克隆形成能力；采用Transwell实验检测各组U251细胞的迁移及侵袭细胞数；采用蛋白质印迹法（Western blot）检测各组细胞中HIF-1α/VEGF信号通路以及上皮-间充质转化相关蛋白上皮E-钙黏蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）和N-钙黏蛋白（N-cadherin）的相对表达水平。采用GraphPad Prism 9.0软件岁数据进行统计、分析，采用单因素方差分析多组间指标差异，采用Tukey’s事后检验进行两两组间的多重比较分析。结果:与U251组比较，NAL-L组、NAL-M组及NAL-H组细胞存活率[（62.33±4.51）%、（41.06±3.37）%、（31.32±2.09）%]、克隆形成数量[（162.38±4.97）、（146.03±3.66）、（127.59±2.96）]、迁移及侵袭细胞数[（106.33±2.57，69.60±2.44）、（92.37±2.09，54.70±2.03）、（80.91±1.76，41.66±1.62）]以及细胞中HIF-1α（0.78±0.07、0.61±0.05、0.48±0.04）、VEGF（0.72±0.06、0.60±0.05、0.43±0.03）、Vimentin（0.80±0.07、0.68±0.05、0.47±0.03）、N-cadherin（0.71±0.06、0.56±0.04、0.40±0.03）的相对表达水平均低于U251组（ P<0.05），而E-cadherin表达水平（1.21±0.09、1.47±0.13、1.67±0.17）高于U251组（ P<0.05）。在高浓度NAL处理U251细胞的基础上加入HIF-1α激活剂DMOG则逆转了以上指标的变化趋势（ P<0.05）。 结论:NAL能够通过抑制HIF-1α/VEGF信号通路来抑制胶质瘤细胞的增殖、迁移及侵袭过程。

目的:探讨脑出血后血红蛋白对脑组织蛋白酪氨酸磷酸酶Shp2表达及血脑屏障黏着连接的影响。方法:将80只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组和脑出血6 h、24 h、3 d、7 d组，每组16只，其中后4组大鼠于脑内注射20 μL血红蛋白制备成脑出血模型。采用Longa评分法对各组大鼠进行神经功能评估，采用干湿重法检测脑组织含水量和脑系数，采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测 Shp2 mRNA的表达，采用免疫组化染色检测Shp2阳性表达情况，采用Western blotting检测Shp2及黏着连接蛋白α-连环蛋白、β-连环蛋白、血管内皮钙黏蛋白、磷酸化α-连环蛋白、磷酸化β-连环蛋白、磷酸化血管内皮钙黏蛋白的表达。 结果:与假手术组比较，脑出血6 h、24 h、3 d、7 d组大鼠的Longa评分均明显升高，差异均有统计学意义( P<0.05)。与假手术组比较，脑出血24 h、3 d、7 d组大鼠的脑组织含水量和脑系数均明显升高，Shp2 mRNA、免疫组化染色阳性表达及蛋白表达均明显降低，磷酸化α-连环蛋白、磷酸化β-连环蛋白及磷酸化血管内皮钙黏蛋白表达均明显升高，差异均有统计学意义( P<0.05)。 结论:脑出血后血红蛋白可下调脑组织中Shp2的表达并促进黏着连接蛋白磷酸化，诱导黏着连接破坏，从而导致血脑屏障破坏和脑水肿形成。

目的:探讨芍药苷对脓毒症心脏微血管内皮细胞（CMECs）通透性的影响及机制。方法:体外分离并原代培养大鼠CMECs细胞，待细胞进入对数生长期用于实验。采用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）筛选出芍药苷的安全有效浓度10、20、40 μmol/L。将细胞分为空白对照组、脂多糖（LPS）组及低、中、高浓度芍药苷预处理组。空白对照组用完全培养基培养；LPS组在完全培养基中加入1 mg/L的LPS刺激细胞；芍药苷预处理各组分别于LPS刺激前4 h加入10、20、40 μmol/L芍药苷进行预处理。各组细胞于LPS刺激后继续培养24 h，采用辣根过氧化物酶（HRP）法检测大鼠CMECs细胞通透性；采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞上清液中CXC趋化因子配体（CXCL1、CXCL2）水平；采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）检测细胞中CXCL1、CXCL2的mRNA表达；采用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测细胞中磷酸化Src（p-Src）、血管内皮-钙黏蛋白（VE-cadherin）、磷酸化丝裂素活化蛋白激酶（p-MAPK）的蛋白表达。结果:与空白对照组相比，LPS组大鼠CMECs细胞通透性明显增加；经不同浓度芍药苷预处理后细胞通透性均有一定程度改善，以40 μmol/L芍药苷组改善最明显，与LPS组比较差异有统计学意义（ A值：1.61±0.07比2.13±0.06， P<0.01）。ELISA结果显示，空白对照组大鼠CMECs细胞上清液中有适量CXCL1、CXCL2分泌；但在LPS诱导下，细胞上清液中CXCL1、CXCL2分泌量明显增加；给予不同浓度芍药苷预处理后细胞上清液中CXCL1、CXCL2的分泌量均明显减少，其中40 μmol/L芍药苷对CXCL1的抑制作用最佳，20 μmol/L芍药苷对CXCL2的抑制作用最佳，与LPS组比较差异均有统计学意义〔CXCL1（ng/L）：337.51±68.04比829.86±65.06，CXCL2（ng/L）：4.48±0.11比9.41±0.70，均 P<0.01〕。RT-qPCR结果显示，大鼠CMECs细胞中CXCL1、CXCL2的mRNA表达与ELISA结果一致，表现为LPS能够诱导大鼠CMECs细胞中CXCL1、CXCL2的mRNA表达增加；而不同浓度芍药苷预处理后能够明显降低CXCL1、CXCL2的mRNA表达，40 μmol/L芍药苷对CXCL1 mRNA表达的抑制效果最佳，20 μmol/L芍药苷对CXCL2 mRNA表达的抑制效果最佳，与LPS组比较差异均有统计学意义〔CXCL1 mRNA（2 -ΔΔCt）：0.543±0.004比0.812±0.089，CXCL2 mRNA（2 -ΔΔCt）：10.52±0.71比17.68±1.09，均 P<0.01〕。Western Blot结果显示，空白对照组大鼠CMECs细胞中有适量p-Src、VE-cadherin和p-MAPK蛋白表达；LPS刺激后大鼠CMECs细胞中p-Src、p-MAPK蛋白表达明显增加，而VE-cadherin蛋白表达明显下降；经不同浓度芍药苷预处理后，细胞中p-Src、p-MAPK蛋白表达有不同程度降低，但VE-cadherin蛋白表达则呈升高趋势，以40 μmol/L芍药苷组效果最佳，与LPS组比较差异均有统计学意义〔p-Src蛋白（p-Src/GAPDH）：1.02±0.09比1.29±0.05，p-MAPK蛋白（p-MAPK/GAPDH）：0.24±0.02比0.62±0.02，VE-cadherin蛋白（VE-cadherin/GAPDH）：0.64±0.03比0.31±0.02，均 P<0.01〕。 结论:芍药苷能够通过调节CMECs细胞中Src/VE-cadherin通路，抑制炎症相关蛋白及趋化因子的表达和分泌，改善LPS诱导的CMECs细胞通透性。