目的:探究落新妇苷(AST)调节低氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)轴对乳腺癌细胞增殖、迁移和血管生成拟态(VM)的影响.方法:用不同浓度的AST(0、5、25、50、100、150、200、300 μmol/L)处理乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231,采用CKK-8法检测细胞活力.将MCF-7、MDA-MB-231细胞分为对照组、AST低剂量(AST-L)组、AST中剂量(AST-M)、AST高剂量(AST-H)组、AST-H+DMOG(HIF-1α/VEGF通路激活剂)组,EdU法检测AST处理对乳腺癌细胞增殖的影响,流式细胞术检测其对细胞凋亡的影响,Transwell小室实验检测其对细胞迁移、侵袭能力的影响,Matrigel管型形成实验检测其对细胞VM形成的影响,WB法检测对细胞中HIF-1α、VEGF、VE-cadherin、E-cadherin、N-cadherin、MMP-2表达的影响.结果:与0 μmol/L AST相比,5、25、50、100、150、200、300 μmol/L AST处理的细胞活力显著下降,呈剂量依赖性(P<0.05).与对照组相比,AST-L、AST-M、AST-H组细胞EdU阳性率、细胞迁移数、细胞侵袭数、VM管腔数目、HIF-1α、VEGF、VE-cadherin、N-cadherin、MMP-2 表达均显著下降,而细胞凋亡率、E-cadherin蛋白表达显著升高(均P<0.05);与AST-H组相比,AST-H+DMOG组细胞EdU阳性率、细胞迁移数、细胞侵袭数、VM管腔数目、HIF-1α、VEGF、VE-cadherin、N-cadherin、MMP-2表达均显著升高,而细胞凋亡率、E-cadherin蛋白表达均显著下降(均P<0.05).结论:AST能抑制乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和VM形成,促进凋亡,其作用机制可能与抑制HIF-1α/VEGF信号通路有关.

目的:探讨肿瘤内皮细胞(TECs)来源CXC趋化因子配体8(CXCL8)在肝细胞癌(HCC)血管生成拟态(VM)中的作用。方法:收集2018年9月到2019年9月在北京朝阳医院行手术切除的HCC组织，免疫磁珠法分离TECs；慢病毒感染TECs，敲低其CXCL8表达，分为对照组和敲低组，收集其条件培养基；酶联免疫吸附试验检测TECs条件培养基中CXCL8的表达；小管形成实验观察HCC细胞VM；蛋白质印迹法观察HCC细胞中相关蛋白水平变化。组间比较采用独立样本 t检验或单因素方差分析。 结果:TECs敲低组中CXCL8蛋白表达水平较对照组明显降低。对照组条件培养基中CXCL8水平[(1 076.00±88.80) pg/ml]较敲低组明显升高[(787.50±63.43) pg/ml]，差异有统计学意义( t＝5.920， P<0.01)。对照组和敲低组条件培养基处理HepG2细胞后相对小管长度分别为(9 814.0±692.8)和(6 434.0±1272.0)，差异有统计学意义( t＝4.042， P<0.05)；在SMMC7721细胞中，对照组和敲低组分别为(22 317.0±3 121.0)和(9 834.0±1 534.0)，差异有统计学意义( t＝6.217， P<0.01)。CXC趋化因子受体1(CXCR1)中和性抗体预处理HCC细胞后，TECs促进HCC细胞的VM能力减弱。对照组条件培养基较敲低组明显促进HCC细胞中波形蛋白(Vimentin)和Snail的表达。HepG2细胞中Vimentin的表达量为0.178±0.020和0.094±0.023( t＝4.707， P<0.01)，Snail的表达量为0.273±0.020和0.188±0.033( t＝3.755， P<0.05)；SMMC7721细胞中Vimentin的表达量为0.342±0.020和0.242±0.035( t＝4.270， P<0.05)，Snail的表达量为0.189±0.014和0.139±0.021( t＝3.354， P<0.05)。 结论:TECs通过旁分泌CXCL8方式结合HCC细胞表面CXCR1，调节上皮-间充质转化(EMT)来促进HCC细胞VM。

竞争性内源RNA(CeRNA)是纵横交错的调控网络，该网络可介导恶性肿瘤细胞表型，包括增殖和抑制、自噬、无限生长、诱导血管生成和血管生成拟态、免疫逃逸等。了解CeRNA介导恶性肿瘤表型调控及其功能，有望为恶性肿瘤提供新的诊断标志物和治疗靶点。

目的:从蛋白质泛素/类泛素化修饰平衡角度探讨白藜芦醇抑制皮肤鳞状细胞癌新生血管形成的内在机制。方法:以人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株为研究对象，分别给予培养基中加入50 μmol/L和100 μmol/L白藜芦醇处理对数生长期A431细胞作为实验组，以不加白藜芦醇培养基处理为对照组。按照上述实验分组，培养48 h采用3-（4，5-二甲基噻唑-2）-2，5-二苯基四氮唑溴盐（MTT）实验检测各组细胞增殖活性；采用血管模拟形成实验检测白藜芦醇处理12 h对A431细胞血管拟态形成能力的影响；采用Western印迹检测白藜芦醇处理48 h各组细胞泛素（ubiquitin）、小泛素相关修饰蛋白1（SUMO1）、缺氧诱导因子1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子受体（VEGFR）相对表达水平。将24只8周龄BALB/c雄性去胸腺小鼠随机均分3组，于腹股沟皮下接种A431细胞，治疗组予1 mg/kg或2 mg/kg白藜芦醇腹腔注射给药，对照组注射相同体积的生理NaCl溶液，每3天注射1次，第21天处死小鼠，解剖肿瘤称重；采用免疫组化检测各组肿瘤组织中CD31的表达。多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD- t检验。 结果:对照组、50 μmol/L组、100 μmol/L组A431细胞增殖率差异有统计学意义（ F = 17.75， P = 0.017），50 μmol/L组、100 μmol/L组低于对照组（66.53% ± 5.09%、35.88% ± 4.28%比100%，LSD- t = 21.17、29.04， P = 0.011、0.004）；3组A431细胞血管管壁样细胞嵴的总长度差异有统计学意义（ F = 21.37， P = 0.004），50 μmol/L组、100 μmol/L组低于对照组[（102.73 ± 11.36）μm、（37.83 ± 4.19）μm比（185.26 ± 8.02）μm，均 P < 0.05]；3组细胞泛素、SUMO1、HIF-1α、VEGFR相对表达差异均有统计学意义，50 μmol/L组、100 μmol/L组泛素相对表达均高于对照组（2.09 ± 0.13、3.53 ± 0.16比0.68 ± 0.11，均 P < 0.05），SUMO1、HIF-1α、VEGFR的相对表达均低于对照组（SUMO1：1.87 ± 0.13、1.02 ± 0.11比3.10 ± 0.11，HIF-1α：0.81 ± 0.06、0.45 ± 0.06比0.97 ± 0.08，VEGFR：0.73 ± 0.09、0.39 ± 0.05比0.98 ± 0.07，均 P < 0.05）。动物试验中，对照组、1 mg/kg组、2 mg/kg组小鼠皮下肿瘤质量[（3.29 ± 0.57）g、（2.91 ± 0.49）g、（2.55 ± 0.52）g]、肿瘤组织CD31细胞阳性率（76.24% ± 5.51%、39.45% ± 5.48%、12.07% ± 3.54%）差异均有统计学意义（ F = 14.33、15.34， P = 0.019、0.021），1 mg/kg组、2 mg/kg组均低于对照组（均 P < 0.05）。 结论:白藜芦醇能够抑制肿瘤生长与肿瘤组织新生血管形成，可能与通过降低HIF-1α蛋白泛素/类泛素化修饰途径抑制皮肤鳞癌新生血管形成有关。

目的:筛选恶性胶质瘤患者血清外泌体中差异的微小RNA（microRNA），探讨小非编码RNA-376b-3p（miR-376b-3p）对胶质瘤细胞的增殖、侵袭和肿瘤血管生成拟态的影响，并验证其对同源框蛋白D10（HOXD10）的靶向作用。方法:通过HiSeq/MiSeq高通量测序技术筛选恶性胶质瘤患者血清外泌体中差异的microRNA表达谱及其靶基因和作用途径。小样本评估候选microRNA在高级别胶质瘤血清外泌体中的表达。采用U87胶质瘤细胞株分别转染对照抑制物、miR-376b-3p抑制物、对照模拟物和miR-376b-3p模拟物后，通过四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）实验、细胞迁移实验、血管形成拟态实验检测miR-376b-3p对胶质瘤细胞的增殖率、细胞侵袭能力和肿瘤血管生成拟态的影响。检测HOXD10的信使RNA（mRNA）和蛋白表达水平，评估miR-376b-3p对HOXD10的调控作用。结果:测序筛选到高级别胶质瘤血清外泌体与正常对照之间的差异microRNA个数为144个。在京都基因和基因组百科全书（KEGG）数据库富集到局灶性黏附、肿瘤蛋白多糖等参与胶质瘤调节的通路。小样本验证发现miR-376b-3p在高级别胶质瘤中下调（ P<0.01），对高级别胶质瘤的诊断的曲线下面积为0.85（ P<0.01）。MTT实验显示转染后48~96 h，miR-376b-3p抑制物组增殖能力高于对照组，转染后48、72 h时，miR-376b-3p模拟物组增殖能力低于对照组。Transwell迁移实验显示，miR-376b-3p抑制物组穿膜细胞数量高于对照抑制物组，miR-376b-3p模拟物组穿膜细胞数量低于对照模拟物组。miR-376b-3p模拟物组的血管形成数低于对照模拟物组。miR-376b-3p抑制物下调了HOXD10的mRNA和蛋白的表达水平，miR-376b-3p模拟物上调了HOXD10的mRNA和蛋白的表达水平。 结论:miR-376b-3p在高级别胶质瘤患者血清外泌体中下调，而上调miR-376b-3p后能够降低胶质瘤细胞的增殖和侵袭能力，抑制血管形成拟态的形成，同时能增加HOXD10的表达，有望同时抑制两种形式的血管形成，成为高级别胶质瘤的抗血管生成新的治疗靶点。

目的:探讨福瑞替尼对三阴性乳腺癌血管生成、肿瘤生长及跨膜蛋白肌醇需求酶1（IRE1）-细胞凋亡信号调节激酶1（ASK1）-c-Jun氨基端激酶（JNK）通路的影响。方法:取三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231，将其分为生理盐水（NS）组、低剂量福瑞替尼（LD）组、中剂量福瑞替尼（MD）组、高剂量福瑞替尼（HD）组，NS组加入100 μmol/L的生理盐水，LD组、MD组、HD组分别加入25、50、100 μmol/L的福瑞替尼。MTT法检测细胞增殖，流式细胞仪检测细胞凋亡，细胞三维培养观察细胞形成拟态血管能力，蛋白质印迹法检测血管生成及IRE1-ASK1-JNK通路相关指标。将20只三阴性乳腺癌大鼠模型采用随机数字表法分为对照组、实验组，每组10只，对照组给予生理盐水灌胃，实验组给予100 μmol/L福瑞替尼灌胃，观察并记录两组大鼠肿瘤瘤体生长情况。结果:NS组、LD组、MD组、HD组的48 h细胞增殖率分别为（85.44±5.58）%、（73.24±4.95）%、（61.53±4.07）%、（50.23±2.97）%（ F=4.01， P=0.002），与NS组相比，LD组、MD组、HD组细胞增殖率显著降低，且呈剂量依赖性（均 P<0.05）；NS组、LD组、MD组、HD组的细胞凋亡率分别为（3.41±0.39）%、（18.75±1.94）%、（24.97±2.58）%、（38.62±3.27）%（ F=18.99， P<0.001），与NS组相比，LD组、MD组、HD组细胞凋亡率显著升高，且呈剂量依赖性（均 P<0.05）；NS组、LD组、MD组、HD组的拟态血管数目分别为19.58±2.11、15.67±2.02、11.57±1.73、5.20±1.23（ F=3.28， P=0.008），与NS组相比，LD组、MD组、HD组拟态血管数目显著降低，且呈剂量依赖性（均 P<0.05）；NS组、LD组、MD组、HD组的血管内皮生长因子（VEGF）蛋白相对表达量分别为2.36±0.21、1.79±0.17、1.48±0.14、0.94±0.10（ F=5.17， P<0.001），IRE1蛋白相对表达量分别为1.18±0.12、1.67±0.18、2.03±0.24、2.39±0.28（ F=5.55， P<0.001），ASK1蛋白相对表达量分别为1.09±0.11、1.46±0.13、1.81±0.18、2.33±0.21（ F=5.32， P<0.001），JNK蛋白表达分别为1.01±0.09、1.48±0.14、1.86±0.21、2.28±0.24（ F=6.92， P<0.001），与NS组相比，LD组、MD组、HD组细胞VEGF蛋白表达显著降低，IRE1、ASK1、JNK蛋白表达显著升高，且呈剂量依赖性（均 P<0.05）；与对照组相比，实验组瘤体质量、体积明显降低[（0.55±0.10）g比（1.37±0.15）g， t=14.38， P<0.001；（77.39±3.21）mm 3比（118.26±5.34）mm 3， t=20.74， P<0.001]，抑瘤率显著升高[（71.23±3.85）%比（32.56±3.08）%， t=24.80， P<0.001]。 结论:福瑞替尼对三阴性乳腺癌细胞活性具有抑制作用，可显著减少其血管生成，抑制肿瘤生长，可能与激活IRE1-ASK1-JNK通路相关。

目的:探讨miR-23b对人肝癌细胞恶性表型及其对仑伐替尼敏感性的影响。方法:人肝癌细胞株HepG2、SMMC-7721和QGY-7703细胞分别转染miR-23b mimic及其对照，CCK-8与EdU实验检测细胞增殖能力，Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力的变化情况，管腔形成实验检测细胞的血管生成拟态情况。组间均数比较采用 t检验进行分析。 结果:CCK-8结果显示，转染120 h后miR-23b mimic组的肝癌细胞HepG2和SMMC-7721，其 A值分别为0.325±0.011和0.537±0.026，明显低于对照组的0.430±0.017和0.752±0.051（ P值均< 0.05）。Transwell实验结果显示，miR-23b mimic组肝癌细胞HepG2和SMMC-7721的细胞迁移数为（517.220±32.873）个和（242.327±20.793）个，显著低于对照组的（724.130±15.142）个和（424.432±27.212）个（ P值均< 0.01）；同时miR-23b mimic组的细胞侵袭数为（55.671±7.514）个和(64.670±6.011)个，显著低于对照组的（124.320±11.782）个和（156.204±12.501）个（ P值均< 0.01）。管腔形成实验显示，miR-23b mimic组肝癌细胞QGY-7703和SMMC-7721的成管分支数为（489.824±42.035）个和（435.201±44.143）个，明显低于对照组的（878.620±31.618）个和（785.430±38.723）个（ P值均< 0.01）。并且，EdU结果显示miR-23b与仑伐替尼联合用药后，miR-23b mimic组肝癌细胞HepG2和SMMC-7721的EdU染色阳性率为32.905%±1.342%和24.811%±0.820%，显著低于对照组的52.623%±2.441%和38.702%±1.312%（ P值均< 0.05）。 结论:miR-23b可抑制人肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭和血管拟态形成，并增强人肝癌细胞对仑伐替尼的药物敏感性。

血管生成拟态是一种不依赖内皮细胞的新的肿瘤血管生成方式，是肿瘤微循环的重要组成部分。脑胶质瘤中血管生成拟态的形成机制复杂多变，多种分子及信号通路(如缺氧诱导因子、基质金属蛋白酶家族等)在其形成过程中相互作用，共同调控血管生成拟态形成。对分子机制的深入研究可为抗血管生成拟态形成的药物研发提供理论基础。

胶质母细胞瘤是中枢神经系统肿瘤中恶性程度及致死性最高的肿瘤，但目前针对其治疗效果却不尽人意。其中最重要的原因是在胶质母细胞瘤中存在一种被称为微血管拟态的进程，这种生物学进程保证了肿瘤发生、发展中充足的血液及营养供应，也解释了目前主流认知中针对抗肿瘤血管生成靶向治疗效果不佳的原因。目前，获得广泛认同的微血管拟态形成的机制包括：上皮－间充质转化、肿瘤局部缺氧、相关细胞因子及多种信号通路介导微血管拟态的形成。本文将针对胶质母细胞瘤中微血管拟态形成的上述机制进行综述，以期对该病的临床治疗提供帮助。