目的:探讨hsa_circ_0001776与miR-1265在肺鳞状细胞癌（鳞癌）中的作用及机制。方法:收集2020—2022年于唐山市人民医院治疗的肺鳞癌患者血浆和健康人血浆。肺鳞癌组织芯片和癌旁正常组织芯片于2022年购自上海芯超生物科技有限公司。采用实时定量聚合酶链式反应检测hsa_circ_0001776在肺鳞癌血浆、组织及细胞中的表达情况，荧光原位杂交验证hsa_circ_0001776在肺鳞癌细胞NCI-H1703中的定位。体外培养肺鳞癌细胞NCI-H1703、NCI-H226，分为circ-NC组、过表达hsa_circ_0001776组、miR-NC组、miR-1265 mimic组、过表达hsa_circ_0001776+miR-NC组和过表达hsa_circ_0001776+miR-1265 mimic组，采用细胞计数试剂盒8法、细胞克隆形成实验、Transwell实验和划痕实验以及流式细胞术分别检测过表达hsa_circ_0001776、过表达miR-1265以及过表达hsa_circ_0001776和miR-1265 mimic的挽救实验对肺鳞癌细胞NCI-H1703和NCI-H226的增殖、克隆、侵袭、迁移和凋亡的影响。通过circular RNA Interactome网站预测hsa_circ_0001776下游的miR-1265，双荧光素酶报告基因实验确定hsa_circ_0001776、miR-1265之间的相互作用，裸鼠皮下成瘤实验检测稳定过表达hsa_circ_0001776的NCI-H1703细胞对移植瘤生长的影响。结果:荧光原位杂交结果显示，肺鳞癌组织中hsa_circ_0001776的荧光强度低于癌旁组织，肺鳞癌组织中miR-1265荧光强度高于癌旁组织（均 P＜0.05）。肺鳞癌患者血浆中hsa_circ_0001776的表达水平低于健康人血浆，miR-1265表达水平高于健康人血浆（均 P＜0.05）。肺鳞癌细胞NCI-H1703、NCI-H226和SK-MES-1中hsa_circ_0001776的表达水平均低于支气管上皮细胞BEAS-2B（均 P＜0.05），miR-1265在NCI-H1703、NCI-H226中的相对表达水平高于人支气管上皮细胞BEAS-2B（均 P＜0.05）。hsa_circ_0001776低表达与肺鳞癌患者的年龄、淋巴结转移、临床分期以及肿瘤分期有关（均 P＜0.05）。荧光原位杂交结果显示，hsa_circ_0001776主要在细胞质中表达。双荧光素酶报告实验结果表明，miR-1265与hsa_circ_0001776存在互补结合位点。过表达hsa_circ_0001776组NCI-H1703、NCI-H226细胞吸光度值均低于circ-NC组（均 P＜0.05）。过表达hsa_circ_0001776组细胞克隆数为（52±3）个、（53±4）个，迁移细胞数为（476±17）个、（113±7）个，侵袭细胞数为（100±2）个、（184±2）个，细胞迁移率为（25.00±4.36）%、（36.02±5.55）%，均低于circ-NC组［分别为（104±4）个和（106±2）个，（783±29）个和（517±16）个，（657±45）个和（473±9）个，（48.95±8.69）%和（48.70±1.57）%，均 P＜0.05］。过表达hsa_circ_0001776组细胞凋亡率分别为（24.77±2.30）%和（19.67±1.16）%，均高于circ-NC组［分别为（11.83±1.15）%和（9.50±0.66）%，均 P＜0.05］。miR-1265 mimic组NCI-H1703、NCI-H226细胞吸光度值均高于miR-NC组（均 P＜0.05）。miR-1265 mimic组细胞克隆数为（56±13）个和（51±8）个，迁移细胞数为（556±13）个、（405±6）个，侵袭细胞数为（486±6）个、（359±7）个，细胞迁移率为（68.56±5.51）%、（81.74±8.04）%，均高于miR-NC组［分别为（31±4）个和（21±8）个，（154±19）个和（186±5）个，（227±6）个和（176±7）个，（25.83±4.26）%和（53.12±4.14）%，均 P＜0.05］。miR-1265 mimic组细胞凋亡率分别为（11.83±2.55）%、（17.50±1.05）%，均低于miR-NC组［分别为（32.67±4.44）%、（39.90±2.88）%，均 P＜0.05］。过表达hsa_circ_0001776+miR-1265 mimic组中NCI-H1703、NCI-H226吸光度值均高于过表达hsa_circ_0001776+miR-NC组（均 P＜0.05）。过表达hsa_circ_0001776+miR-1265 mimic组细胞克隆数为（128±15）个和（133±8）个，迁移细胞数为（623±10）个和（310±7）个，侵袭细胞数为（643±16）个和（420±7）个，细胞迁移率为（66.39±4.46）%和（68.60±3.53）%，均高于过表达hsa_circ_0001776+miR-NC组［分别为（86±7）个和（80±16）个，（380±11）个和（115±5）个，（152±7）个和（94±4）个，（31.41±5.91）%和（30.94±0.67）%，均 P＜0.05］。过表达hsa_circ_0001776+miR-1265 mimic组细胞凋亡率分别为（19.27±0.15）%和（11.53±0.75）%，均低于过表达hsa_circ_0001776+miR-NC组［分别为（27.77±1.29）%和（18.43±0.71）%，均 P＜0.05］。裸鼠皮下成瘤实验结果显示，过表达hsa_circ_0001776组肿瘤的体积低于circ-NC组（ P＜0.05）。 结论:肺鳞癌中hsa_circ_0001776呈低表达，hsa_circ_0001776通过靶向miR-1265可抑制肺鳞癌的发展。

目的:构建体外分区囊袋模型，探讨不同类型360°连续直角边缘人工晶状体(IOL)对晶状体上皮细胞(LECs)迁移的抑制作用。方法:使用Transwell小室、细胞爬片、人源Ⅳ型胶原、IOL建立后发性白内障(PCO)体外分区囊袋模型作为模型组，并设置一个空白处理的Transwell小室作为对照组。人LECs细胞系SRA01/04培养于各组Transwell小室中，应用倒置显微镜观察各组中PCO早期病理表现；采用苏木精-伊红染色观察各组细胞形态改变。根据体外分区囊袋模型植入的IOL类型分为平台板式袢HydroSmart组、C型袢HydroSmart组、C型补偿袢Hydrophobic组，并设置不植入IOL为空白对照组。应用Transwell法检测各组IOL前囊膜区迁移细胞数目并计算前囊膜细胞迁移抑制率；应用细胞排斥区分析法检测各组IOL后囊膜区细胞迁移数目并计算后囊膜细胞迁移抑制率。结果:模型组细胞培养48 h后体外分区囊袋模型后囊膜区可见细胞形成类似早期Soemmering环和小型Elschnig珍珠样小体等PCO特征性病理表现；苏木精-伊红染色显示模型组迁移的细胞呈纤维状。对照组中均未见类似细胞分布及形态改变。平台板式袢HydroSmart组、C型袢HydroSmart组、C型补偿袢Hydrophobic组前囊膜区域单位面积迁移细胞计数分别为18.80±5.53、24.67±9.80和34.47±10.80，后囊膜袢光学部移行区迁移细胞计数分别为56.43±9.00、162.20±16.38和121.30±12.01，IOL前囊膜细胞迁移抑制率分别为(92.02±1.94)%、(89.76±3.10)%和(86.27±4.54)%；后囊膜细胞迁移抑制率分别为(91.60±3.65)%、(70.14±5.35)%和(78.43±3.48)%。平台板式袢HydroSmart组前囊膜区迁移细胞数目明显少于C型补偿袢Hydrophobic组，细胞迁移抑制率明显高于C型补偿袢Hydrophobic组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；平台板式袢HydroSmart组后囊膜袢光学部移行区迁移细胞数、细胞迁移抑制率明显高于C型袢HydroSmart组和C型补偿袢Hydrophobic组，差异均有统计学意义(均 P<0.001)。 结论:成功构建体外分区囊袋模型。与C型袢HydroSmart IOL、C型补偿袢Hydrophobic IOL相比，HydroSmart平台板式袢IOL能更有效抑制LECs的迁移。

目的:探讨miR-340/高迁移率组蛋白盒1（HMGB1）轴在肝纤维化形成过程中的作用机制。方法:腹腔注射四氯化碳构建大鼠肝纤维化模型；基因芯片筛选正常和肝纤维化大鼠差异表达的miRNA后选择其中可靶向HMGB1的miRNA并验证，qPCR检测miRNA表达变化对HMGB1水平的影响；双荧光素酶报告基因实验（LUC）验证miR-340和HMGB1间的靶向关系；miRNA mimics和HMGB1过表达载体共转染后，噻唑蓝（MTT）法检测肝星状细胞系HSC-T6的增殖活性，蛋白质印迹法检测细胞外基质（ECM）标志物I型胶原、α-平滑肌肌动蛋白（SMA）的表达。采用方差分析和LSD- t检验进行统计学分析。 结果:苏木精-伊红及Masson染色结果表明大鼠肝纤维化模型构建成功；芯片分析和生物信息学预测得到8个可能靶向HMGB1的miRNA，动物模型验证得到miR-340；qPCR检测结果表明miR-340可抑制HMGB1表达，荧光素酶互补实验提示miR-340可靶向结合HMGB1；功能实验结果表明HMGB1过表达可增强细胞增殖活性和I型胶原、α-SMA的表达，而miR-340 mimics不仅可抑制细胞增殖活性和HMGB1、I型胶原、α-SMA的表达，还可部分逆转HMGB1对细胞增殖和ECM合成的促进作用。结论:miR-340靶向HMGB1抑制肝星状细胞增殖和ECM沉积，在肝纤维化进程中发挥保护作用。

目的:观察Wiskoot-Aldrich综合征蛋白家族成员3(WASF3)对乳腺癌细胞增殖、迁移侵袭及伪足形成的影响。方法:利用免疫蛋白印迹(Western blot)法检测乳腺癌细胞(BT-549、HCC-1937、BT-474、MDA-MB-231、MCF-7、T-47D)及乳腺正常细胞(MCF-10A)中WASF3蛋白的表达量；获取WASF3互补脱氧核糖核苷酸(cDNA)，构建过表达及干扰的重组载体SB-16-WASF3和pHB-U6-MCS-PGK-PURO-shWASF3(pHB-shWASF3)。重组干扰质粒经慢病毒包装，感染MDA-MB-231细胞，经抗性筛选建立WASF3基因静默的稳转细胞株。经实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)及Western blot法验证WASF3的静默及过表达效率；通过克隆形成实验和迁移侵袭实验分别验证细胞克隆形成能力和迁移侵袭能力的变化；过表达载体SB-16-WASF3转染MDA-MB-231细胞，经WASF3抗体和鬼笔环肽(Phalloidin)双染色，观察WASF3过表达对细胞伪足形成的影响。采用单因素方差分析，组内进一步两两比较采用LSD- t检验，两两比较采用 t检验。 结果:Western blot结果显示，不同乳腺癌细胞WASF3蛋白的相对表达量分别为1.07±0.00、0.54±0.11、0.60±0.14、1.36±0.02、0.65±0.05和0.79±0.18，均高于乳腺正常细胞(0.38±0.01， t＝134.864、21.289、24.883、55.397、8.892、37.363， P值均<0.05)，差异均有统计学意义；且MDA-MB-231和BT-549细胞的表达量相对较高。细胞增殖实验显示WASF3静默组(pHB-shWASF3-1)在24、48、72、96、120 h的增值率均低于对照组pHB-shNegetive Control组(pHB-shNC)及空白对照(Control)(0.92±0.06比1.18±0.05比1.14±0.03、1.42±0.05比1.90±0.12比1.77±0.14、2.02±0.03比2.83±0.08比2.70±0.10、2.78±0.02比3.78±0.03比3.70±0.17、3.22±0.04比4.10±0.12比4.02±0.10， t24 h＝7.983、 t48 h＝9.024、 t72 h＝23.491、 t96 h＝66.348、 t120 h＝17.114； t24 h＝8.453、 t48 h＝5.843、 t72 h＝15.813、 t96 h＝13.479、 t120 h＝19.142， P值均<0.01)，差异均有统计学意义，但后两组间差异无统计学意义。pHB-shWASF3-1组克隆形成率[(25.50±2.00)%]低于pHB-shNC组及Control组[(62.33±2.57)%、(64.17±3.21)%， F＝204.754]。迁移实验结果显示pHB-shWASF3-1组穿过小室的细胞数低于pHB-shNC组和Control组[(212.33±14.01)个比(357.33±8.02)个比(364.33±9.07)个， F＝193.200， P<0.01]，差异均有统计学意义，但后两组间差异无统计学意义。侵袭实验结果显示pHB-shWASF3-1组穿过小室的细胞数低于pHB-shNC组和Control组[(151.33±5.51)个比(212.33±14.01)个比(215.00±6.08)个， F＝44.269， P值均<0.01]，差异均有统计学意义，但后两组间的差异无统计学意义。免疫荧光结果可见，WASF3过表达组的红色信号(WASF3染色)明显高于对照组，绿染的肌动蛋白(F-actin)在细胞边缘明显聚集，细胞伪足伸展更明显。 结论:WASF3在乳腺癌细胞中呈高表达，静默WASF3后可抑制乳腺癌细胞的增殖、克隆形成及迁移侵袭能力；过表达WASF3后可促进乳腺癌细胞F-action蛋白的堆积，促进细胞片状伪足的形成。

腹股沟疝无张力修补术后补片侵蚀导致的内脏并发症是一类少见且易被忽视的长期并发症。开放腹膜前修补术和腹腔镜修补术后至发生补片相关内脏并发症的间隔时间较短，疝环填充式修补术和经腹腹膜前疝修补术报道率最高，Lichtenstein疝修补术间隔时间最长，且报道率低。补片侵蚀的常见器官是乙状结肠、膀胱和小肠。补片侵蚀乙状结肠常见临床表现是便血、腹壁瘘管形成及结肠炎，侵蚀膀胱常见临床表现是血尿及反复尿道感染，侵蚀小肠常见的临床表现是肠梗阻及腹壁瘘管形成，侵蚀多器官临床表现是结肠膀胱瘘和小肠膀胱瘘。多数患者行补片取出联合相应器官切除或修补术疗效较好。笔者总结、分析1994—2021年腹股沟疝无张力修补术后补片相关内脏并发症的相关文献并综述其研究进展，以提高临床医师对此类并发症的认识。

目的:探讨长链非编码RNA（lncRNA）LEF1-AS1对皮肤鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响及其机制。方法:通过干扰皮肤鳞状细胞癌SCC13细胞LEF1-AS1的表达和过表达、抑制miR-612的表达，将SCC13细胞分为转染LEF1-AS1干扰序列、无义序列的干扰LEF1-AS1组、干扰对照组，转染miR-612过表达序列、无义序列的miR-612过表达组、过表达对照组，以及转染LEF1-AS1干扰序列与miR-612抑制序列的干扰抑制组，和转染LEF1-AS1干扰序列与miR-612抑制无义序列的干扰抑制对照组。采用qRT-PCR法检测各组细胞miR-612的相对表达，CCK8法检测细胞增殖，流式细胞仪分析细胞的凋亡情况，Transwell试验检测细胞的迁移、侵袭能力，Western印迹检测细胞周期蛋白依赖激酶1（cyclinD1）、细胞周期蛋白依靠性激酶抑制剂（p21）、Bcl-2家族蛋白（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）的表达。用LncBase Predicted v.2在线预测网站预测lncRNA LEF1-AS1与miR-612之间的互补序列，将互补/非互补序列用于构建荧光素酶报告基因质粒，分别与miR-612过表达及过表达对照基因共转染SCC13细胞，验证lncRNA LEF1-AS1与miR-612的结合能力。两组间比较采用 t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD- t检验。 结果:miR-612过表达组细胞增殖能力、迁移及侵袭细胞数均低于过表达对照组（均 P < 0.05），凋亡率高于过表达对照组（ P < 0.05）。干扰LEF1-AS1组、干扰对照组、干扰抑制组、干扰抑制对照组miR-612的相对表达差异有统计学意义（ F = 150.78， P < 0.001），24、48、72 h时的增殖能力差异有统计学意义（均 P < 0.05），凋亡率、迁移及侵袭细胞数差异均有统计学意义（均 P < 0.05）。干扰LEF1-AS1组细胞中miR-612表达、凋亡率高于干扰对照组，48、72 h细胞增殖能力、迁移细胞数和侵袭细胞数低于干扰对照组（均 P < 0.05），而干扰抑制组细胞中miR-612表达、细胞凋亡率低于干扰抑制对照组，48、72 h细胞增殖能力、迁移细胞数和侵袭细胞数高于干扰抑制对照组（均 P < 0.05）。Western印迹显示，4组细胞cyclinD1、p21、Bcl-2、Bax、MMP-2、MMP-9蛋白相对水平差异均有统计学意义（均 P < 0.001），干扰LEF1-AS1组cyclinD1、Bcl-2、MMP-2、MMP-9蛋白相对水平均高于干扰对照组，p21、Bax蛋白相对水平低于干扰对照组（均 P < 0.05）；而干扰抑制组cyclinD1、Bcl-2、MMP-2、MMP-9蛋白相对水平均高于干扰抑制对照组，p21、Bax蛋白相对水平低于干扰抑制对照组（均 P < 0.05）。共转染互补序列后，miR-612过表达组细胞荧光活性低于过表达对照组（ t = 21.19， P < 0.001）；而共转染非互补序列后，miR-612组细胞荧光活性与过表达对照组差异无统计学意义（ t = 0.28， P = 0.78）。 结论:lncRNA LEF1-AS1调控皮肤鳞状细胞癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭，机制与靶向miR-612相关。

目的:探究miR-769-3p在膀胱癌组织中的表达水平，通过下调膀胱癌J82细胞中miR-769-3p表达水平，观察沉默miR-769-3p对J82细胞迁移能力和细胞周期的影响。方法:采用OncomiR数据库分析miR-769-3p在膀胱癌组织和癌旁组织中的表达差异。通过Lipofectamine 2000转染试剂转染J82细胞，分为si-miR-769-3p组(转染miR-769-3p小分子干扰片段)和对照组(转染无意义序列)。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测转染后miR-769-3p相对表达水平。通过细胞划痕实验和流式细胞仪检测比较两组J82细胞迁移能力和细胞周期的差异性。采用生物信息学软件MicroRNAdb预测miR-769-3p的靶基因。双荧光素酶报告基因实验验证miR-769-3p与靶基因的互补结合。qRT-PCR和Western blotting分别检测miR-769-3p的靶基因表达水平。计量资料以均数±标准差( ± s)表示，两组间比较采用 t检验。 结果:与癌旁组织相比，miR-769-3p在膀胱癌组织中表达显著升高，差异具有统计学意义( P<0.01)。si-miR-769-3p组miR-769-3p相对表达水平(1.02±0.16)明显低于对照组(4.50±0.60)，差异具有统计学意义( P<0.01)。si-miR-769-3p组细胞迁移率[(26.67±3.98)%]明显低于对照组[(61.86±4.70)%]，差异具有统计学意义( P<0.01)。si-miR-769-3p组处于G 0~G 1期的细胞比例[(57.66±5.74)%]显著多于对照组[(31.26±3.24)%]，差异具有统计学意义( P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证实内皮素3( EDN3)是miR-769-3p的靶基因。对照组和si-miR-769-3p组J82细胞中EDN3 mRNA相对表达水平为1.99±0.66和6.98±0.76，与对照组比较，si-miR-769-3p组EDN3 mRNA相对表达水平明显高于对照组，差异具有统计学意义( P<0.01)。 结论:低表达miR-769-3p可以通过促进 EDN3基因表达抑制膀胱癌J82细胞迁移能力，阻滞J82细胞周期。

目的 系统性预测续苓健骨方治疗骨质疏松症(osteoporosis,OP)的作用机制并实验验证.方法 利用整合生物信息学方法分析药物的化合物信息及抗OP靶点、前20(TOP20)关键靶点及相关作用机制和信号通路.基于去卵巢(ovariectomy,OVX)大鼠模型,骨密度(bone mineral density,BMD)、生物力学、Micro CT、HE染色等指标验证疗效;转录组学及GO和KEGG分析初步验证机制和相关靶点;qRT-PCR和Western blot方法进一步验证关键靶点.结果 药物的144个有效成分作用于242个靶点,主要参与血管发生;刺激应答;细胞增殖、分化、凋亡、迁移和黏附;骨重建和破骨分化;物质代谢等.其中TOP20关键靶点对应10种中药的55种化学成分,骨碎补和续断的活性成分居多.药物治疗可明显改善OVX大鼠骨组织的BMD、生物力学、Micro CT下骨质量参数及骨组织形态;转录组学检测获差异表达基因679个,GO和KEGG分析其机制与整合生物信息学结果基本相符,在代谢相关信号通路方面有明显富集,TOP20靶点的表达水平均发生相应改变;qRT-PCR和Western blot结果进一步证实了Gapdh、Tnf、Spp1、Mmp2、Mmp1、Mapk3、Hif1a、Esr1等基因表达水平在造模及药物治疗前后发生了相反变化.结论 续苓健骨方药效与骨碎补和续断具有密切关系,Gapdh、Hif1a等代谢相关基因调控的代谢信号通路可能在其中发挥重要作用.

目的:基于生物信息学方法分析原发性高血压(EHT)的关键基因,预测潜在的治疗中药及靶向中药活性成分.方法:在GEO数据库选取GSE75940数据集,筛选EHT差异表达基因(DEGs)后,进行富集分析,构建蛋白互作网络,筛选关键基因.利用cBioPortal数据库对关键基因进行基因突变及生存分析,在Coremine Medical、CTD数据库中筛选潜在中药及有效活性成分.结果:筛选出1 832个DEGs,富集结果主要与突触、神经肽、神经活性、G 蛋白偶联受体、中性粒细胞迁移等相关.7个关键基因是表皮生长因子受体(EGFR)、趋化因子受体4(CXCR4)、白细胞介素17A(IL17A)、整合素αM(ITGAM)、细胞质蛋白-酪氨酸激酶(BTK)、阿片黑素促皮质激素原(POMC)、CD86.预测的潜在中药可分为清热解毒凉血、祛湿化痰、补肝益肾三大类,与EHT火、饮、虚的病机相符,中药有效成分包括白藜芦醇、木黄酮、槲皮素、姜黄素、辣椒素、鱼藤酮、紫杉醇等,与EHT发生发展均有一定联系.结论:本研究筛选出7个EHT关键基因,预测出其靶向中药及有效活性成分,可为后续研究提供新的生物标志物,促进中医药防治EHT.

目的 探讨环状RNA(circRNA)circZNF652在前列腺癌(PCa)组织及PCa细胞系中的表达及其对增殖和迁移的影响和可能机制.方法 通过基因芯片技术检测在PCa和良性前列腺增生(BPH)患者血浆组织中差异表达的circRNA.实时荧光定量PCR(qPCR)测定circZNF652在PCa细胞系(22RV1、LNCaP、DU145、PC3)和正常前列腺上皮细胞(RWPE-1)中的表达情况.分析circZNF652不同表达水平与PCa患者总生存(OS)时间及临床病理特征的相关性.细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验、克隆形成实验、Transwell实验、细胞划痕实验、EdU细胞增殖实验分析干扰circZNF652对PCa细胞增殖、克隆形成、侵袭和迁移能力的影响.在线数据库TargetScan预测circZNF652和miR-140-3p之间的结合位点,双荧光素酶报告基因实验,RNA pull-down实验验证circZNF652和miR-140-3p的相互作用,并通过在PC3和DU145细胞中干扰circZNF652,以及在PCa和BPH患者血浆中进一步验证;starBase2.0预测miR-140-3p和高迁移率族蛋白 B1(HMGB1)之间的结合位点;在PC3和DU145细胞中检测过表达 miR-140-3p后 HMGB1表达水平变化.Western blot检测PCa、BPH患者血浆,PC3、DU145、RWPE-1细胞中HMGB1表达水平,双荧光素酶报告基因实验、RNA免疫共沉淀(RIP)和RNA pull-down实验验证 miR-140-3p和 HMGB1的相互作用;并检测转染不同构建物(si-NC、si-circZNF652#1、si-circZNF652#1+inhibitor NC、si-circZNF652#1+miR-140-3p inhibitor)后的PC3和DU145细胞中HMGB1的表达,以进一步证实 miR-140-3p直接调控 HMGB1.结果 基因芯片技术及qPCR结果表明,PCa患者血浆中circZNF652的表达水平较BPH患者升高,与低级别PCa和BPH患者比较,高级别PCa患者血浆中circZNF652表达水平上调(P<0.001、P<0.01).和RWPE-1细胞比较,22RV1、LN-CaP、DU145、PC3细胞中circZNF652表达水平上调(P<0.05、P<0.05、P<0.001、P<0.01);circZNF652高表达的PCa患者OS时间较circZNF652低表达的PCa患者更短.临床病理特征分析显示,circZNF652表达与PCa分期(T分期和N分期)和Gleason评分相关.敲低circZNF652的表达可抑制DU145、PC3细胞增殖、侵袭和迁移.在线数据库TargetScan预测circZNF652与miR-140-3p具有互补序列,双荧光素酶报告基因实验及RNA pull-down实验证实circZNF652在PCa细胞中充当miR-140-3p的海绵;PC3和DU145细胞中,干扰circZNF652实验也证明了这一点;miR-140-3p在PCa患者血浆中的表达较BPH 患者血浆明显降低(P<0.05);PCa患者中miR-140-3p表达水平与circZNF652表达水平呈负相关(r=-0.888,P<0.001).数据库starBase2.0分析结果显示,HMGB1 mRNA 3'-UTR与miR-140-3p存在互补序列,miR-140-3p的下游靶基因为HMGB1.双荧光素酶报告基因实验、RIP和pull-down实验证实了miR-140-3p与HMGB1之间直接结合.Western blot实验发现过表达miR-140-3p导致DU145、PC3细胞中HMGB1表达水平降低.沉默circZNF652的表达导致DU145和PC3细胞中HMGB1表达水平下降,而抑制miR-140-3p则能逆转这种下降.结论 cir-cZNF652的过表达可通过调控miR-140-3p/HMGB1通路促进PCa的进展和转移.