目的:通过网络药理学、分子对接技术及细胞实验探讨西洋参-红花有效成分治疗早期糖尿病肾病(DN)的作用机制.方法:运用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)获得西洋参-红花活性成分的干扰靶点,再与GeneCards、TTD等数据库中早期DN基因靶点相映射即为交集靶点.采用STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,运用Cytoscape 3.8.2软件筛选出核心靶点;通过DAVID数据库进行基因本体(GO)富集分析和京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析,运用Cytoscape 3.8.2软件进行"有效成分-关键靶点-通路-疾病"网络图展示;通过Autodock Tools软件进行分子对接,采用MTT法检测有效成分对脂多糖(LPS)诱导的人肾小球系膜细胞(HMC)活性,利用酶联免疫吸附试验检测有效成分对炎症介质的影响.结果:得到西洋参-红花治疗早期DN的活性成分有24个,对应的药物靶点207个,其中72个和早期DN相关.网络拓扑参数分析得出了肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-6(IL-6)、IL-1β等15个关键靶点,KEGG通路分析筛选出晚期糖基化终末产物(AGE)-AGE受体(RAGE)、TNF、低氧诱导因子-1(HIF-1)、IL-17、核因子κB等20个信号通路;分子对接表明IL-6与槲皮素、木犀草素、黄芩素、人参皂苷rh2稳定结合.细胞实验得出西洋参-红花活性成分槲皮素、木犀草素、黄苓素能显著抑制IL-6、TNF-α和IL-1 β表达.结论:本研究初步证实西洋参-红花有效成分能有效抑制早期DN炎症,对肾脏具有保护作用,为后期深入研究提供了依据.

目的 对栀子姜炙过程中的外观性状、含量变化进行客观量化,以此优选出姜栀子的最佳炮制工艺.方法 建立Box-Behnken 设计-响应面法(Box-Behnken design-response surface methodology,BBD-RSM)考察炒制火力、炒制时间、姜汁用量3因素对姜炙过程的影响;采用CM-5型分光测色计(电子眼)从外在角度测定栀子姜炙后的颜色变化(同时辅以姜炙后的气味变化综合得分);选取栀子苷与西红花苷Ⅰ 2个指标性成分的含量作为内在指标,结合醇溶性浸出物的含量变化进行组合加权评分,以评分作为响应值,在此基础上优选出姜栀子的最佳炮制工艺并用试验进行验证.结果 姜栀子的最佳炮制工艺为炒制功率400 W、炒制时间4.5 min、姜汁用量10％.最佳工艺的色度范围为L*:44.600～45.500,a*:21.800～22.700,b*:23.500～23.700,Eab*:55.300～56.600.含量测定结果表明,栀子饮片经姜炙后京尼平龙胆双糖苷、栀子苷的含量均有上升,西红花苷Ⅰ、Ⅱ的含量显著降低.结论 成功优化了姜栀子的炮制工艺参数,以仿生技术对栀子姜炙过程中的色泽变化进行研究,为基于外观性状研究中药饮片炮制工艺提供了参考.

[目的]基于网络药理学和分子对接,探究中药西红花(Saffron)对帕金森病(Parkinson's disease,PD)的治疗作用及分子机制.[方法]通过中药系统药理学数据库和文献调研,确定纳入分析的西红花药效成分;借助化合物靶点数据库和疾病靶点数据库,分别预测西红花成分对应的靶点和PD靶点;使用R程序和引用相关R包,对化合物-疾病的交集靶点进行富集分析;构建蛋白互作网络,分析节点相关拓扑参数;模拟分子对接过程,验证代表性化合物和关键靶点的结合特性.通过实验初步评估西红花酸对关键靶点作用的药效学性质.[结果]西红花具有成药潜力的8种成分对应279个靶点,PD对应的疾病靶点有2 183个,获得化合物和疾病的交集靶点共98个.富集分析提示化合物-疾病交集靶点参与活性氧自由基的合成与代谢、神经炎症等生物过程和涉及丝裂原活化蛋白激酶信号通路等.蛋白互作网络分析确认的关键靶点为肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)和信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3).分子对接显示,西红花苷类和西红花酸类成分与TNF具有更强的结合活性.实验表明,西红花酸能降低脂多糖诱导的细胞炎性因子TNF、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)以及诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的转录水平.[结论]西红花可作为PD治疗的候选中药,其神经保护作用可能涉及众多靶点和信号通路的交互协同,西红花酸抗中枢神经炎症的活性特别值得关注.

目的 观察西红花苷对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠的作用,并探讨相关机制.方法 将30只DN大鼠随机分为DN组、西红花苷组、西红花苷联合脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)[Toll样受体4(toll like receptor 4,TLR4)/核转录因子KB(nuclear transcription factor κB,NF-κB)p65通路激活剂]组,各10只;另取10只大鼠,设为对照组.西红花苷联合LPS组灌胃西红花苷(40 mg·kg-1),尾静脉注射LPS(0.4 mg·kg-1);西红花苷组灌胃西红花苷(40 mg·kg-1),尾静脉注射等量生理盐水;对照组、DN组分别灌胃、尾静脉注射等量生理盐水.每日1次,干预2周.检测糖脂指标及肾功能指标;检测血清炎症因子水平;Western blotting 检测肾组织 TLR4、髓样分化因子 88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)、p-NF-κB p65、NF-κB p65蛋白的表达量.结果 与DN组比较,西红花苷组血液空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、空腹胰岛素(fasting serum lisu-lin,FINS)、三酰甘油(triglycerides,TG)和总胆固醇(triglycerides,TC)水平、24 h尿蛋白、微量白蛋白与尿肌酐比值(albumin/creatinine ratio,UACR)、血清肌酐(serum creatinine,Scr)和尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平、血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)水平及肾组织 TLR4、MyD88 蛋白表达量及 p-NF-κB p65/NF-κBp65均降低(P＜0.05);与西红花苷组比较,西红花苷联合LPS组上述指标均升高(P＜0.05).结论 西红花苷可改善糖脂代谢及肾功能,减轻炎症反应,从而抑制DN进展,推测其作用机制与抑制TLR4/NF-κB p65信号通路有关.

目的 建立栀子Gardenia jasminoides的UPLC指纹图谱,比较栀子及其炮制品之间的差异.方法 收集2个产地10批栀子,使用不同方法炮制,采用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm),栀子及其炮制品用甲醇超声提取制备溶液,以乙腈-0.2％磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,进样量1μL,柱温30 ℃,体积流量0.2mL/min,检测波长为239 nm与440 nm,建立其UPLC指纹图谱.运用总量统计矩相似度、灰色关联度、TOPSIS和主成分分析(principal component analysis,PCA)对栀子的UPLC特征指纹图谱进行数据分析.结果 栀子及其炮制品的UPLC特征指纹图谱的共有标志峰20个,其中4个鉴定为栀子苷、京尼平龙胆双糖苷、西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ.2产地的栀子经炮制成焦栀子后,栀子苷、西红花苷Ⅰ与西红花苷Ⅱ含量有所减少.湖南湘乡地区栀子经炮制后其京尼平龙单双糖苷含量有一定增加.结论 所建立的栀子不同炮制品特征指纹图谱共有20个标志峰,不同炮制品之间标志峰峰面积和含量存在差异,为栀子的不同炮制品的质量控制与评价提供了依据.

目的 研究马钱科醉鱼草属植物密蒙花花蕾及花序的化学成分.方法 利用硅胶,Sephadex LH-20凝胶等柱色谱分离纯化技术对密蒙花花蕾及花序的化学成分进行分离纯化.结果 从该植物花蕾及花序中分离并鉴定了16个化合物,分别为刺槐素(1),芹菜素(2),木犀草素(3),刺槐素-7-O-葡萄糖苷(4),秋英苷(5),木犀草素-7-O-葡萄糖苷(6),刺槐素-7-O-葡萄糖醛酸苷(7),芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷(8),蒙花苷(9),木犀草素-7-O-芸香糖苷(10),密蒙花新苷(11),毛蕊花糖苷(12),西红花苷Ⅲ(13),西红花苷Ⅱ(14),西红花苷Ⅰ (15),和N1,N5,N10-(E)-tri-p-coumaroylspermidine(16).结论 化合物4,7,8,14～16为首次从该药用植物中分离得到,其中7,8,14 ～16为首次从马钱科中分离得到.

目的:明确清热泻火组干预大鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的功效成分.方法:通过拆方配伍分析及多指标平行比较,选出清热泻火组进行功效成分研究.运用偏最小二乘回归法,将各提取物的HPLC图谱信息与其对应的药效学数据进行谱-效相关性分析,计算药效贡献率,筛选出贡献最大的功效成分.结果:各组提取物对ALI大鼠均有一定的干预作用,以50％乙醇提取物对蛋白浓度和肺湿干比干预作用最强.谱-效分析西红花苷-1药效贡献率最大.结论:西红花苷-1可能是清瘟败毒饮干预内毒素性ALI大鼠的功效成分.

目的 研究不同浓度的西红花苷对核因子κB受体活化因子配体(RANKL)诱导的破骨细胞分化的影响.方法 常规培养小鼠巨噬细胞RAW264.7,经0、6.25、12.5、25、50、100、200、400 μmol/L浓度的西红花苷处理后,采用CCK-8法检测细胞生长活力的变化,筛选出合适的实验浓度.RAW264.7细胞经RANKL(100 ng/L)诱导形成破骨细胞系后,分别经0、12.5、50、100 μmol/L的西红花苷处理,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察各浓度组破骨细胞的生成数量;实时定量PCR(real-time PCR)检测破骨细胞的特异性基因降钙素受体(CTR)、活化T细胞核因子1 (NFATC1)、C-fos、TRAP mRNA的表达水平变化.结果 在0~100 μmol/L范围内,西红花苷对RAW264.7细胞的生长无明显影响(P>0.05).当西红花苷浓度≥100 μmol/L时,细胞增殖活力下降,显示出明显的抑制增殖作用(P<0.05),选取0~100 μmol/L西红花苷进行实验.随着西红花苷的处理浓度的升高,RAW264.7分化成破骨细胞的数量明显减少,同时破骨细胞的特异性基因CTR、NFATC1、C-fos和TRAP mRNA的表达水平也明显下降(P<0.05).结论 在一定浓度范围内(0~100 μmol/L),高水平的西红花苷可明显抑制破骨细胞的分化.

西红花苷来源于传统中药栀子和名贵药材西红花,是天然界存在的唯一水溶性类胡萝卜素,主要包括西红花苷-1、西红花苷-2、西红花苷-3、西红花苷-4和顺式西红花苷-1.多年来的研究显示,这类成分具有显著的抗心血管疾病药理活性.综合近10年来相关文献报道,从降血脂、抗动脉粥样硬化、降血压与心脏保护、心肌缺血再灌注损伤、心肌缺血、抗血小板聚集及心肌肥厚等方面对西红花苷保护心血管疾病进行概述并汇总相关文献,为西红花苷的药理学研究及开发利用提供参考依据.

目的 建立HPLC波长切换联合梯度洗脱法(HPLC-DVD法)同时测定双参龙胶囊(SSLC)中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、鲁斯可皂苷元、苦杏仁苷、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、阿魏酸、西红花苷-I、丹酚酸B、11-羰基-β-乙酰乳香酸和丹参酮ⅡA 10种指标成分的方法.方法 采用HPLC-DVD法,Hypersil ODS C18(150 mm×4.0 mm,3 μm)色谱柱;甲醇-水(8∶2,A)-0.1％磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,体积流量0.6 mL/min;毛蕊异黄酮葡萄糖苷的检测波长为260 nm,鲁斯可皂苷元的检测波长为280 nm,苦杏仁苷的检测波长为210nm,人参皂苷Rb1和人参皂苷Re的检测波长为203 nm,阿魏酸的检测波长为320 nm,西红花苷I的检测波长为440 nm,丹酚酸B的检测波长为286 nm,11-羰基-β-乙酰乳香酸的检测波长为250 nm,丹参酮ⅡA的检测波长为270 nm;进样量为10μL.结果 10种指标成分毛蕊异黄酮葡萄糖苷在3.88～69.86mg/L (r=0.999 2)、鲁斯可皂苷元在22.1～397.8 mg/L (r=0.999 1)、苦杏仁苷在37.43～673.5 mg/L (r=0.999 4)、人参皂苷Rb1在45.15～812.72 mg/L (r=0.999 6)、人参皂苷Re在4.55～81.95 mg/L (r=0.999 5)、阿魏酸在3.06～55.15 mg/L (r=0.999 4)、西红花苷-I在1.93～34.76 mg/L (r=0.999 5)、丹酚酸B在15.68～282.15 mg/L (r=0.999 6)、11-羰基-β-乙酰乳香酸在11.31～203.58 mg/L (r=0.999 1)、丹参酮ⅡA在1.89～34.16 mg/L (r=0.999 6)质量浓度与峰面积具有较好的线性关系;精密度良好,RSD≤1.27％;重复性良好,RSD≤1.28％;供试品溶液在室温条件下8h内稳定,RSD≤0.96％;平均加样回收率和相应的RSD分别为99.61％、1.21％,100.11％、0.76％,101.52％、0.62％,101.22％、1.03％,100.83％、1.14％,98.94％、0.53％,101.04％、1.09％,100.05％、1.25％,99.81％、0.68％,101.94％、1.31％.9批次供试品中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、鲁斯可皂苷元、苦杏仁苷、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、阿魏酸、西红花苷-I、丹酚酸B、11-羰基-β-乙酰乳香酸和丹参酮ⅡA量分别为0.142～0.158、0.747～0.764、1.578～1.619、2.163～2.185、0.235～0.251、0.557～0.580、0.105～0.122、0.311～0.328、0.605～0.624、0.062～0.079 mg/粒.结论 建立的HPLC-DVD法同时测定SSLC中的10种成分,方法操作简便、快速、准确,可作为SSLC质量控制的分析方法.