目的 观察电针"百会""大椎"穴对缺血性脑卒中小鼠脑血流量及运动功能的影响,揭示腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine 5′-monophosphate-activated protein kinase,AMPK)/谷氨酰胺-6-磷酸果糖转氨酶-1(glutamine-fruc-tose-6-phosphate aminotransferase-1,GFAT-1)/血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)分子通路参与电针减轻血管损伤,改善肢体运动功能的作用机制.方法 将C57雄性小鼠随机分为假手术组、模型组、电针组,每组6只.采用光栓法制备缺血性脑卒中小鼠模型.采用走格子测试和爬杯实验评估小鼠运动功能;TTC染色和激光散斑血流成像仪评估脑梗死体积与脑血流灌注量变化;Western blot法检测AMPK、磷酸化AMPK(phosphorylated AMPK,p-AMPK)、GFAT-1、VEGF的表达水平.结果 与假手术组比较,模型组小鼠运动功能受损(P<0.05),脑梗死体积增加(P<0.05),脑血流灌注量减少(P<0.05),AMPK、p-AMPK、VEGF蛋白表达水平显著降低(P<0.05),GFAT-1蛋白表达水平显著升高(P<0.05).与模型组比较,电针组小鼠运动功能显著改善(P<0.05),脑梗死体积显著减小(P<0.05),脑血流灌注量显著增加(P<0.05),AMPK、p-AMPK、VEGF蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),GFAT-1蛋白表达水平显著降低(P<0.05).结论 电针可能通过介导AMPK/GFAT-1/VEGF分子通路,参与改善脑皮质缺血所致脑血管损伤和运动功能障碍.

目的 研究胰腺癌组织中甲基转移酶 14(methyltransferase 14,METTL14)及谷氨酰胺-果糖-6-磷酸转氨酶 1(glutamine-fructose-6-phosphate transaminase 1,GFPT1)的表达及其临床意义.方法 选取 2017 年 4 月～2019年 4 月上海交通大学附属第六人民医院诊治的 86 例胰腺癌患者为研究对象.利用实时定量PCR检测癌和癌旁组织中METTL14 和GFPT1 mRNA水平表达.利用免疫组织化学检测癌和癌旁组织中METTL14 和GFPT1 蛋白表达.相关性分析采用Pearson相关分析及Spearman秩相关分析.比较不同胰腺癌患者METTL14 和GFPT1 蛋白表达与临床病理参数的关系.Kaplan-Meier生存分析胰腺癌组织中METTL14 和GFPT1 蛋白表达与患者生存预后的关系.单因素及多因素COX模型评价影响胰腺癌预后的因素.结果 胰腺癌组织中METTL14 mRNA(5.442±0.437),GFPT1 mRNA(6.521±0.516)表达高于癌旁组织(0.992±0.203,0.895±0.212),差异具有统计学意义(t=85.644,93.525,均P＜0.05).胰腺癌组织中METTL14(73.26%),GFPT1(69.77%)蛋白表达阳性率高于癌旁组织(8.14%,9.30%),差异具有统计学意义(χ2=75.545,65.765,均P＜0.05).胰腺癌组织中METTL14 mRNA与GFPT1 mRNA的表达呈明显正相关性(r=0.569,P＜0.05);METTL14蛋白与GFPT1 蛋白表达呈明显正相关性(r=0.664,P＜0.05).低分化程度(92.31%,88.46%)、AJCC分期Ⅱ～Ⅲ期(89.13%,86.96%)及有淋巴结转移(95.12%,92.68%)胰腺癌组织中METTL14,GFPT1 蛋白表达阳性率分别高于高中分化程度(65.00%,61.67%)、AJCC分期Ⅰ期(55.00%,50.00%)及无淋巴结转移(53.33%,48.89%),差异具有统计学意义(χ2=6.174～19.507,均P＜0.05).METTL14 阳性表达组和GFPT1阳性表达组患者三年累积生存率分别低于METTL14阴性表达组,GFPT1阴性表达组(χ2=15.232,18.054,均P＜0.05).肿瘤AJCC分期Ⅱ～Ⅲ期(OR=2.552,95%CI=1.420～4.455)、伴淋巴结转移(OR=1.754,95%CI=1.125～2.534)、METTL14阳性(OR=2.797,95%CI=1.233～5.876)、GFPT1 阳性(OR=1.635,95%CI=1.030～2.506)是影响胰腺癌预后的独立危险因素.结论 胰腺癌组织中METTL14,GFPT1 表达升高,两者与肿瘤AJCC分期、肿瘤分化程度和淋巴结转移有关,可用于评价胰腺癌患者生存预后.

PPP2R2A是PP2A磷酸酶的调控亚基之一,以往的研究报道显示,PPP2R2A可促进肿瘤细胞生存和生长.本研究通过串联亲和纯化联合HPLC-Chip-ESI/MS/MS筛选PPP2R2A的相互作用蛋白质,分析结果显示,L-谷氨酰胺-D-果糖-6-磷酸转氨酶l(Glutamine-fructose-6-phosphate transaminase 1,GFPTl)和L-谷氨酰胺-D-果糖-6-磷酸转氨酶2 (Glutamine-fructose-6-phosphate transaminase 2,GFPT2)是PPP2R2A可能的结合蛋白.通过免疫荧光共定位、GST Pull-down和免疫共沉淀等方法,进一步确认了PPP2R2A和GFPT1及GFPT2的相互结合.通过shRNA下调PPP2R2A后,GFPT2的磷酸化水平显著增加,但GFPT1的磷酸化水平改变不明显.GFPT2是O-GlcNAC糖基化修饰通路中的一个限速酶,在乳腺癌细胞MDA-MB-231中下调PPP2R2A后,蛋白质O-GlcNAC糖基化修饰水平增加.这些结果表明,PPP2R2A可直接结合GFPT2,并导致其去磷酸化,进而影响细胞内O-GlcNAC糖基化修饰.

目的:探讨肝细胞肝癌(HCC)组织G蛋白信号调节蛋白2(GPSM2)、谷氨酰胺果糖-6-磷酸转氨酶2(GFPT2)、核仁小RNA 51(SNORA51)mRNA表达与临床病理特征的关系及对预后的影响.方法:选择2017年1月～2018年12月于内蒙古医科大学附属医院诊断并经手术切除治疗的HCC患者60例.采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测HCC组织、癌旁组织中GPSM2、GFPT2、SNORA51 mRNA表达情况,分析GPSM2、GFPT2、SNORA51的mRNA表达与HCC患者临床病理特征的关系.随访3年,应用Kaplan-Meier生存曲线分析不同分组HCC患者预后情况,并应用单因素和多因素Logistic回归分析HCC患者预后的影响因素.结果:HCC组织中GPSM2、GFPT2、SNORA51 mRNA表达水平显著高于癌旁组织(P＜0.05).HCC组织中GPSM2mRNA高表达组、GFPT2mRNA高表达组、SNORA51mRNA高表达组血管侵犯、TNM分期Ⅲ期比例显著高于GPSM2 mRNA低表达组、GFPT2 mRNA低表达组、SNORA51mRNA低表达组(P＜0.05).Kaplan-Meier法分析显示GPSM2 mRNA低表达组、GFPT2 mRNA低表达组、SNORA51mRNA低表达组3年生存率显著高于GPSM2 mRNA高表达组、GFPT2 mRNA高表达组、SNORA51mRNA高表达组(P＜0.05).多因素Logistic回归分析模型结果显示,血管侵犯、TNM分期Ⅲ期、GPSM2 mRNA高表达、GFPT2 mRNA高表达、SNORA51 mRNA高表达是HCC患者死亡的危险因素(P＜0.05).结论:GPSM2、GFPT2、SNORA51在HCC组织中异常高表达,且与血管侵犯、TNM分期等临床病理特征有关,GPSM2、GFPT2、SNORA51高表达是HCC患者死亡的危险因素.

报告1例谷氨酰胺-果糖-6-磷酸转氨酶1(glutamine-fructose-6-phosphate aminotransferase 1,GFPT1)基因复合杂合变异致先天性肌无力综合征患者及家系的临床资料.先证者为14岁男性,表现为运动后易疲劳、肢带型肌无力.基因检测发现患者GFPT1存在2个复合杂合突变.患者外公、母亲存在5-20号外显子杂合缺失,为新发现突变位点;患者爷爷、父亲存在c.331C>T点突变,为已报道的突变位点.予溴吡斯的明和沙丁胺醇治疗后肌无力症状稍好转.GFPT1相关先天性肌无力综合征可出现与重症肌无力相似的肌无力、运动不耐受,重复电刺激可见低频递减,患者可能没有典型肌电图及肌活检改变,胆碱酯酶抑制剂治疗有一定效果,早期行遗传学检测具有重要意义.