研究乳源性外泌体与脂质体进行膜融合得到的杂化外泌体装载青藤碱(sinomenine,SIN)后对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的治疗效果.通过蔗糖密度梯度离心法从鲜牛乳中提取外泌体,采用乳化蒸发-低温固化法制备脂质体,共孵育法进行膜融合后对杂化外泌体进行表征:透射电镜检测形貌,纳米粒度电位仪检测粒径与电位,蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测膜融合前后外泌体膜表面特征蛋白CD63和TSG101的表达.超声法装载青藤碱后,酶标仪检测其载药量与包封率.胶原抗体诱导法建立CIA大鼠模型,药效实验设对照组、模型组、SIN组、SIN-脂质体组、SIN-乳外泌体组、SIN-杂化外泌体组及阳性药(地塞米松)组.记录给药期间大鼠体质量变化,以足肿胀度、免疫器官指数、关节炎指数、微循环指标变化、滑膜组织病理学检查、血清炎症因子水平变化为指标进行药效学研究.透射电镜结果显示,杂化外泌体与乳外泌体外观均呈茶托状,共孵育后外泌体粒径由(97.92±3.42)nm 增长到(132.70±4.07)nm,Zeta 电位由(-2.01±0.33)mV 变为(-17.90±2.13)mV,WB结果显示CD63与TSG101蛋白在乳外泌体及杂化外泌体中均正常表达.酶标仪测定乳外泌体包封率31.64％±2.48％、载药量2.35％±0.52％,杂化外泌体包封率48.21％±3.12％、载药量3.17％±0.36％.药效学结果显示,与模型组相比,各给药组一般情况及足肿胀度、关节炎指数及免疫器官指数均得到显著改善(P＜0.05,P＜0.01),微血管综合评分及血管阻力显著下降(P＜0.05,P＜0.01),血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)炎症因子水平显著降低(P＜0.01),滑膜组织的病变得到一定程度的改善.同时与SIN组、SIN-脂质体组及SIN-乳外泌体组相比,SIN-杂化外泌体组具备更平稳持久的药效.该研究将乳源性外泌体与脂质体共孵育得到的杂化外泌体成功改善了外泌体载药量小与脂质体生物相容性差等问题,负载青藤碱的杂化外泌体对CIA大鼠有着良好的疗效,可有效解决青风藤等疗效佳但生物半衰期短的问题,为传统中药的新发展及类风湿性关节炎等疾病的治疗提供了新思路.

目的 建立体外透皮实验方法,研究不同基质软膏对红花溶剂提取物透过率的影响,为红花资源开发提供理论依据.方法 2023年1—4月采用超声波辅助提取红花有效成分,并使用立式扩散池体外透皮吸收法研究红花提取物的透皮效果,采取紫外分光光度法进行测定含量.结果 红花在乙醇、甲醇、二氯甲烷中的溶剂提取物的无基质浸膏透过率分别是13.84％、15.26％、18.24％,对应乳剂型基质软膏透过率分别为35.9％、44.69％、40.9％,对应水溶性基质软膏的透过率分别为55.8％、69.8％、67.8％.结论 红花溶剂提取物在不同基质中的透过率为:无基质浸膏<乳剂基质软膏<水溶性基质软膏,同种剂型下不同溶剂的红花溶剂提取物透过率差异无统计学意义.

目的 探讨深度学习超声组学列线图评估浸润性乳腺癌侵袭转移生物学特性指标的价值.资料与方法 回顾性收集2021年1月—2022年12月茂名市人民医院180例经病理证实浸润性乳腺癌患者的超声影像资料,且病理报告了淋巴结转移(LNM)或淋巴血管间隙浸润(LVSI)或神经侵犯(PNI)状态,依据LNM/LVSI/PNI状态,3个指标均以8∶2划分为训练队列和验证队列.基于Pyradiomics影像组学和ResNet50深度学习提取器分别提取1 316个影像组学特征和2 048个深度学习特征.采用随机森林机器学习算法开发评估模型,并计算模型评分.基于影像组学和深度学习模型评分开发深度学习超声组学列线图.使用受试者工作特征曲线评估模型的性能,Delong检验分析不同模型的性能差异.结果 在LNM、LVSI、PNI状态评估中,所有队列列线图曲线下面积均表现中度以上评估性能(≥0.73),准确度均>0.70,LNM评估中,训练队列的曲线下面积为0.97,准确度为0.93,敏感度为0.88,特异度为0.96.Delong检验显示列线图评估性能在训练队列中优于影像组学模型(LNM,Z=2.04,P=0.04;LVSI,Z=2.80,P=0.01;PNI,Z=3.52,P<0.01),优于或与深度学习模型相似(LNM,Z=4.52,P<0.01;LVSI,Z=1.86,P=0.06;PNI,Z=0.31,P=0.76).结论 深度学习超声组学列线图可有效评估浸润性乳腺癌侵袭转移生物学特性指标.列线图整合影像组学与深度学习特征信息提高了评估性能.

目的 通过超声刺激脂肪间充质干细胞后,收集其分泌的细胞外囊泡,与正常脂肪间充质干细胞分泌的细胞外囊泡(Extracellular vesicles,EVs)进行比较,探究经超声刺激后分泌的细胞外囊泡对脂肪间充质干细胞生物学特性(包括细胞增殖、细胞迁移和成脂分化能力)的影响.方法 首先,通过低强度超声处理部分脂肪间充质干细胞,收集细胞培养上清并采用超滤法提取细胞外囊泡(U-EVs),部分间充质干细胞正常培养,并收集其细胞外囊泡(N-EVs).在不同浓度细胞外囊泡处理下对脂肪间充质干细胞进行CCK-8实验检测细胞活力,选取提升细胞活力的最佳浓度,在这一浓度下采用划痕实验检测细胞迁移,EdU法检测细胞增殖,并使用成脂诱导培养基诱导并比较脂肪间充质干细胞成脂分化能力.结果 超声刺激后产生的细胞外囊泡符合国际外囊泡协会的鉴定标准,对脂肪间充质干细胞作用的最适浓度约为150 μg/mL.在这一浓度下,U-EVs的细胞增殖率(19.2%±1.8%)显著高于N-EVs(11.9%±3.4%),并且U-EVs组的油红O染色面积是对照组的(2.78±0.23)倍,显著高于N-EVs组的(2.11±0.18)倍,但N-EVs组(16.3%±2.0%)和U-EVs组(21.5%±2.3%)的细胞迁移率没有显著差异.结论 经超声刺激的脂肪间充质干细胞分泌的细胞外囊泡显著促进脂肪间充质干细胞的活力,提高细胞增殖、迁移和成脂分化的能力.

目的 建立并验证基于超声影像组学的诺模图预测T1期乳腺癌同侧腋窝淋巴结转移的价值.资料与方法 回顾性收集2012 年 1 月—2021 年 6 月皖南医学院第一附属医院(弋矶山医院)经病理证实的T1 期乳腺癌 443 例,按 7∶3 随机分为训练组310例和验证组133例.使用ITK-SNAP勾画肿瘤边缘感兴趣区,利用Pyradiomics软件提取特征,筛选特征后构建影像组学模型及标签得分Rad-score.分别建立临床模型、影像组学模型及联合诊断模型,并构建联合模型的预测诺模图,采用受试者工作特征曲线评价各模型的预测价值.结果 多因素分Logistic回归析显示,腋窝超声检查阳性、高回声晕及病灶内部血供丰富是预测腋窝淋巴结转移的独立危险因素,构建临床诊断模型.通过特征筛选构建影像组学模型.基于临床、影像组学特征构建联合诊断模型,训练组联合模型的曲线下面积为0.822,大于临床模型及影像组学模型的0.765、0.723(P=0.002 1、0.001 8);验证组中联合模型的曲线下面积大于影像组学模型(0.846比0.686,P=0.001 8),与临床模型(0.783)差异无统计学意义(P=0.111 3).结论 基于超声影像组学构建的联合诊断模型,能够有效预测T1期乳腺癌同侧腋窝淋巴结转移,具有很高的临床预测效能.

目的:探讨基于深度学习对被遮挡的甲状腺超声图像进行修复的可行性。方法:回顾性收集自2020年1月至2021年10月于浙江大学医学院附属邵逸夫医院采集的甲状腺结节图像共358张，对图片进行随机遮挡后，使用DeepFillv2方法对上述图像被遮挡部分进行修复，比较修复前后图像的灰度值差异。邀请6位不同年资医师(主任医师、主治医师、住院医师各2位)比较修复前后图片是否存在形态差异，比较不同医师组判断的正确率及对图像差异的检出率。根据2020甲状腺结节超声恶性危险分层中国指南(C-TIRADS)对甲状腺结节图像进行超声特征提取(垂直位、实性、极低回声、可疑微钙化、边缘模糊及彗星尾伪像)，比较修复前后图像中甲状腺结节超声特征的一致性。结果:图片修复前后的灰度值均方误差范围为0.274~0.522，各组医师的正确率及检出率之间差异具有统计学意义(均 P<0.001)，总体正确率为51.95%，总体检出率为1.79%，其中主任医师与住院医师组内的正确率及检出率差异同样具有统计学意义(均 P<0.001)。图像修复前后图像中各超声特征的一致性均高于70%，实性、彗星尾伪像的一致性均高于90%。 结论:基于深度学习的甲状腺超声图像修复算法可以有效修复被遮挡的甲状腺超声图像，同时可以保留甲状腺超声图像特征，有望扩大深度学习图像数据库规模，促进深度学习在超声领域的发展。

目的:观察银杏叶提取物对急性心肌梗死大鼠凋亡水平的影响。方法:60只SD大鼠随机数字表法分为对照组，模型组和实验组，其中模型组和实验组采用结扎左冠状动脉前降支的方法复制AMI大鼠模型，对照组大鼠不结扎处理。建模成功后，实验组大鼠给予每天150 mg/kg银杏叶提取物，对照组和模型组给予等体积生理盐水。连续给药6 d后，采用超声影像检测3组大鼠心肌功能；采用苏木精-伊红(HE)染色法观察心肌组织病理学变化及进行损伤评分，采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)分析心肌细胞凋亡指数；采用蛋白质印迹法(Western blot)分析3组大鼠心肌组织凋亡相关蛋白表达水平。计量资料分析采用单因素方差分析。结果:实验组大鼠舒张末期左室内径(LVEDD)和收缩末期左室内径(LVESD)[(7.28±0.30)、(5.00±0.28) mm ]低于模型组[(8.01±0.36)、(7.15±0.34) mm]，而射血分数(EF)水平[(58.41±5.09)%]高于模型组[(43.27±5.69)%]，差异有统计学意义( t＝2.781、3.017、3.001， P<0.05)。实验组大鼠心肌损伤评分[(4.02±0.57)分]显著低于模型组[(6.75±0.79)分]，差异有统计学意义( t＝3.793， P<0.05)。实验组大鼠心肌组织凋亡指数[(15.73±3.25)%]显著低于模型组[(33.97±3.96)%]，差异有统计学意义( t＝4.116， P<0.05)。实验组大鼠B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3表达水平(1.31±0.18、2.09±0.19)低于模型组(1.98±0.21、3.15±0.28)，差异有统计学意义( t＝3.011、3.158， P<0.05)。 结论:银杏叶提取物可显著下调凋亡相关蛋白表达，抑制心肌组织细胞凋亡，进而保护急性心肌梗死大鼠心脏功能。

目的:探讨1例超声提示四肢发育异常的胎儿的遗传学病因。方法:在知情同意后对孕妇进行羊膜腔穿刺术，采集胎儿羊水及其父母外周血标本，提取DNA后通过全外显子测序技术筛选疑似致病变异，用Sanger测序进行家系验证。结果:胎儿 COL1A1基因存在c.1291G>A(p.G431S)杂合变异，为可能致病性变异，相关疾病为成骨发育不全(osteogenesis imperfecta，OI)。此变异来源于母亲，母亲此基因存在嵌合突变，嵌合比例为26.84%。 结论:应用全外显子测序技术明确了1例胎儿四肢发育异常的遗传学原因，为临床咨询及孕妇再生育提供了指导。

目的:分析卵泡周围血流参数与体外受精-胚胎移植（ in vitro fertilization and embryo transfer，IVF-ET）卵泡发育、胚胎质量和妊娠结局的相关性。 方法:回顾性病例对照研究分析2020年10月至2022年10月期间驻马店市中心医院生殖医学科收治的112例接受IVF-ET的不孕患者资料。使用阴道彩色多普勒超声测量卵泡周围血流参数，即动脉收缩期峰值流速/舒张末期血流速度比值（peak systolic velocity/end diastolic velocity，S/D）、阻力指数（resistance index，RI）、搏动指数（pulsatility index，PI）、收缩期最大血流速度（peak systolic velocity，PSV）。共提取1 156个卵泡，依照卵泡发育情况划分为优质卵泡组（ n=208）和非优质卵泡组（ n=948），依照胚胎质量划分为优质胚胎组（ n=161）和非优质胚胎组（ n=995），依照妊娠结局划分为妊娠组（ n=37）和未妊娠组（ n=75），比较不同组间的S/D、RI、PI、PSV。对比不同卵泡周围血流PSV峰速间相关指标，以Pearson法分析非优质卵泡组、非优质胚胎组、未妊娠组中PSV与卵泡发育、胚胎质量、妊娠结局的相关性。 结果:优质卵泡组PSV［（11.26±0.94）cm/s］明显较非优质卵泡组高［（10.31±0.78）cm/s， P<0.001］，两组间S/D、RI、PI差异均无统计学意义（均 P>0.05）。优质胚胎组PSV［（13.38±1.19）cm/s］明显较非优质胚胎组高［（12.02±0.85）cm/s， P<0.001］，优质胚胎组、非优质胚胎组间S/D、RI、PI比较，差异均无统计学意义（均 P>0.05）。妊娠组PSV［（15.14±1.25）cm/s］明显较未妊娠组［（8.27±0.75）cm/s， P<0.001］高，妊娠组、未妊娠组间S/D、RI、PI比较，差异均无统计学意义（均 P>0.05）。不同卵泡周围血流PSV峰速间年龄、不孕年限、体质量指数、基础卵泡刺激素水平、促性腺激素（gonadotropin，Gn）用量、Gn使用时间对比差异均无统计学意义（均 P>0.05），而优质卵泡数、优质胚胎数、血β-人绒毛膜促性腺激素（β-human chorionic gonadotropin，β-hCG）水平组间比较差异有统计学意义［PSV<9 cm/s：（1.05±0.23）个、（0.73±0.14）个、（3.05±0.61）U/L；PSV 9~10 cm/s：（1.35±0.35）个、（0.85±0.16）个、（22.14±5.78）U/L；PSV>10 cm/s：（2.01±0.41）个、（1.12±0.20）个、（71.33±8.63）U/L；均 P<0.001］；采用Pearson进行相关性分析，结果显示非优质卵泡组、非优质胚胎组、未妊娠组中PSV与卵泡直径、胚胎质量评分、血β-hCG水平呈正相关（ r=0.767， P<0.001； r=0.750， P<0.001； r=0.700， P<0.001）。 结论:卵泡周围血流参数PSV与IVF-ET卵泡发育、胚胎质量、妊娠结局具有相关性，可为临床评定卵泡发育、胚胎质量、妊娠结局提供重要参考。

目的:对1例新发46，X，der(X)t(X；Y)(q26；q11)胎儿进行产前遗传学分析。方法:选取2021年5月22日就诊于连云港市妇幼保健院的1例孕妇作为研究对象。收集孕妇的临床资料，采集夫妇的外周静脉血样以及胎儿的脐血样本，进行常规的G显带核型分析。提取羊水DNA，对其进行染色体微阵列分析(CMA)，并对变异的致病性进行分析。结果:孕25周超声检查提示胎儿为永存左上腔静脉，二、三尖瓣少量反流。G显带核型分析显示，胎儿Y染色体pter-q11片段易位至X染色体长臂q26处，孕妇夫妇核型均未见明显异常。CMA检测显示，胎儿X染色体长臂末端存在约21 Mb的缺失[arr[hg19]Xq26.3q28(133912218_154941869)×1]，Y染色体长臂存在约42 Mb的重复[arr[hg19]Yq11.221qter(17405918_59032809)×1]。结合DGV、OMIM、DECIPHER、ClinGen及PubMed等数据库的检索结果，根据美国医学遗传学与基因组学学会(ACMG)相关指南，判断上述Xq26.3q28缺失为致病性，Yq11.221qter重复为临床意义不明。结论:Xq-Yq相互易位可能是胎儿的遗传学病因，预测可导致卵巢功能障碍与发育迟缓。联合应用G显带核型分析与CMA检测能够及时诊断胎儿染色体结构异常的类型与来源、区分平衡和不平衡易位，对孕妇妊娠结局的选择具有重要的参考价值。