目的:基于细胞代谢组学分析炙淫羊藿炮制前后对小鼠黑色素瘤细胞（B16细胞）内源性代谢物的影响，探讨炙淫羊藿炮制前后的药性变化。方法:采用超高效液相色谱串联四级杆轨道阱质谱（UHPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS）技术，对淫羊藿、炙淫羊藿干预的B16细胞内源性小分子进行代谢组学分析，获取组间差异代谢产物，并基于MetaboAnalyst 5.0数据库分析相关代谢通路。结果:经炙淫羊藿及其生品干预后，B16细胞中13个细胞内源性差异性代谢物发生变化，分别为丙氨酸、肉毒碱C3∶0、谷氨酸-1、乳酸、异亮氨酸、胆碱、磷脂酰胆碱（34∶2、36∶2）、游离脂肪酸、柠檬酸、肉毒碱C4∶0、溶血磷脂酰胆碱16∶0、苹果酸，且炮制品对差异代谢物的影响强于生品。涉及的主要通路有瓦博格效应、丙酮酸代谢、苹果酸-天冬氨酸穿梭、丙酮醛降解等。结论:淫羊藿、炙淫羊藿对细胞代谢途径有一定影响，可能与淫羊藿炮制前后药效作用、寒热药性变化有关。

目的 采用超高效液相色谱串联四级杆轨道阱质谱(UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS)的技术和方法,以餐后不适综合征(PDS)型功能性消化不良(FD)患者为载体,定量研究针刺合募配穴存在的拮抗作用.方法 30例FD患者,随机被分为下合穴(双侧足三里穴)针刺组、募穴(中脘穴)针刺组和合募配穴(双侧足三里及中脘穴)针刺组.每次电针治疗30min,连续治疗5天后休息2天,共治疗20次.设健康组10例.以健康组的血浆标志物的均值含量为参考标准,比较针刺合募配穴、下合穴、募穴治疗前、治疗10次、治疗20次后血浆中各潜在生物标志物的均值含量.结果 患者血浆中的亚硝酸盐、2-苯乙酰胺、D-脯氨酸、4-羟基-L-谷氨酸以及质荷比为86.09、94.04的未知代谢物的平均含量均随治疗时间的延长而呈现向健康组水平变化的趋势,但是其平均含量在合募配穴组中治疗前、后的变化率明显小于在下合穴组或(和)募穴组中的变化率.结论 合募配穴对FD患者某些血浆代谢物的调节作用不及单穴,可能是穴位配伍间拮抗作用存在的物质基础.

目的 应用固相萃取结合超高效液相色谱-线性离子阱-静电场轨道质谱(UHPLC-LTQ-Orbitrap MS)技术对黄精发酵前后的化学成分进行分析鉴定.方法 采用Waters HSS T3(100 mm×2.1 mm,1.7 μm)色谱柱,以0.1％甲酸水溶液和的乙腈为流动相梯度洗脱,体积流量0.3 mL/min,在电喷雾正离子模式下进行检测,四级杆飞行时间串联质谱法对各主要色谱峰进行归属.结果 根据所获得的精确相对分子质量,同时结合色谱保留行为、质谱裂解规律、特征碎片离子、对照品比对以及相关文献报道,共鉴定发酵前后黄精中的69个化学成分,包括57个甾体皂苷类成分、5个黄酮类成分、4个三萜皂苷类成分、2个生物碱类及1个有机酸类成分.其中,从发酵前黄精提取液中鉴定了62个化学成分,从发酵后黄精提取液中鉴定了18个化学成分.结论 发酵对黄精中的化学成分影响很大,如成分异构化、原生苷种类以及含量减少、次生苷或苷元含量的增多等,可为黄精的进一步开发利用提供科学依据.

目的 建立一种全新的基于高效液相色谱与四级杆静电场轨道阱串联质谱联用技术的中药保健品中114种非法添加药物的定性定量筛查方法.方法 以0.1％甲酸水溶液-乙腈为流动相,采用SHISEIDO CAPCELL PAK C18色谱柱(3.0 mm×100mm,3μm),HPLC进行梯度洗脱(0～18 min,乙腈从2％到100％,18～23 min,乙腈为100％,23.1～25 min,乙腈为2％),柱温40℃,流速0.3 mL·min-;质谱采用电喷雾离子源进行扫描,四级杆静电场轨道阱串联质谱作为质量分析器进行采集,扫描范围m/z 120～750,喷雾电压3.5 kV,鞘气压(N2) 275.8 kPa,辅助气压(N2) 68.95 kPa,一次进样即同时获得母离子和碎片子离子的高分辨率高质量精度质谱数据.通过二级质谱精确质量数,对筛查到的非法添加进一步结构确认.结果 本方法在25 min内可同时检测安神类、减肥类、降压类、降脂类、降糖类、抗病毒类、止咳类、止痛类、激素类、精神类、壮阳类共11类114种非法添加化学药物,线性范围、灵敏度、重复性、回收率均满足分析要求.结论 使用高效液相色谱-四级杆静电场轨道阱质谱建立的筛查方法具有快速、便捷、准确的优点,能够满足目标和非目标非法添加的筛查确证需求.

研究防风不同极性部位指纹图谱与抗流感病毒活性的谱效关系,推断防风中具有抗流感病毒活性的有效成分.本实验采用细胞病变效应(cytopathic effect,CPE)法检测防风不同极性部位的抗流感病毒活性;建立防风不同极性部位的UPLC-Q-Exactive Orbitrap/MS指纹图谱;采用Spearman分析、灰色关联度分析(GRA)及偏最小二乘回归(PLSR)分析法分析防风不同极性部位的UPLC特征指纹峰与其抗流感病毒活性之间的谱效关系.在标定的28个特征指纹峰中,确定了1、5、7、11、13、20、24号峰与抗流感病毒活性呈正相关,其对应的物质依次是焦谷氨酸、divaricatacid、升麻苷、亥茅酚苷、补骨脂素、异嗪皮啶、5-羟基-8-甲氧基补骨脂素,为深入研究防风抗流感病毒活性物质基础提供实验基础.

目的 应用超高效液相色谱串联四级杆轨道阱质谱(UHPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS)技术鉴定补阳还五汤及其在人血浆和尿液中药物化学成分.方法 采集补阳还五汤及其临床患者口服给药后的血浆和尿液样本,样本经80％甲醇水处理后,采用Hyperil Gold C18色谱柱(1.0 mm×50 mm,1.9 μm),流动相为水(A)-乙腈(B)(各含0.1％甲酸和5 mmol·L-1醋酸铵)进行梯度洗脱,流速0.3 mL·min-1,柱温40℃.通过对比分析补阳还五汤、给药后人血浆和给药后人尿液样本,同时结合化合物的质谱碎裂规律,表征其制剂、含药血浆和尿液中药物化学成分.结果 在汤剂中共鉴定了55个化合物;在给药后患者的血浆中共鉴定了34个化合物;在尿液中鉴定了23个化合物.这些成分主要是黄酮类、苯酸类、苯酞类和皂苷类化合物.结论 本研究全面阐明了补阳还五汤及其在人血浆和尿液药物化学成分,为揭示补阳还五汤真正治疗脑卒中的药效物质基础提供了参考.

通脉颗粒是由丹参、川芎、葛根三味中药的水提物制成的用于治疗心血管疾病的复方制剂,主要成分为异黄酮苷、异黄酮及酚酸类.低极性化合物如丹参酮和酚酞类也可能对活性有贡献,但很难检测到.因此,本研究建立了正向×反相离线二维液相色谱方法对通脉颗粒中的有效成分进行富集和分离.采用正向SEP-PAK硅胶固相萃取柱分离通脉颗粒的乙酸乙酯萃取物,分别以石油醚、乙酸乙酯-甲醇(6∶1,v/v)、甲醇洗脱获得三个流分,然后采用超高效液相反向色谱串联四级杆-静电场轨道阱质谱对其进行检测.葛根中黄酮类成分,丹参中酚酸类成分及川芎中酚酞类成分分布于不同流分中.从通脉颗粒中初步鉴定了131个化合物,其中葛根59个,丹参26个,川芎43个,丹参和川芎的共有成分3个.26个化合物经过对照品比对鉴定.本研究为中药复方成分的全面分析提供了有效方法.

目的 建立湖南新冠2号方的超高效液相色谱串联四级杆轨道阱质谱(UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS)定性分析方法,系统阐明湖南新冠2号方中的化学成分.方法 使用ACQUITY UPLC R○BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以0.1％甲酸水(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,流速0.3 mL/min,柱温35℃,进样量2μL,采用电喷雾离子源,在Full Scan MS/dd-MS2扫描模式下采集数据.结果 通过分析质谱数据、查阅相关文献以及参考相关数据库,从湖南新冠2号方中共鉴定出64个化学成分,其中包括34个黄酮类化合物、10个有机酚酸类化合物、10个三萜类化合物、3个环烯醚萜苷类、3个核苷类、2个氨基酸类化合物和2个脂肪酸类.结论 UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS技术可全面快速分析湖南新冠2号方中的化学成分,为进一步研究湖南新冠2号方抗新型冠状病毒肺炎的药效物质基础及质量控制提供一定的理论依据.

目的 建立超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱串联质谱(UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS/MS)技术对川乌中生物碱类化学成分进行快速鉴定的方法.方法 采用ACQUITY UHPLC BEHC18柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱,以0.1％氨水(A)-乙腈(B)为流动相;洗脱程序为 0～3 min,0～15％B;3～10 min,15％～40％B;10～16 min,40％～70％B;16～20 min,70％～90％进行梯度洗脱,柱温35℃,流速为0.3 mL·min-1,进样量2μL,正离子模式扫描.结果 最终从川乌中鉴定了 141种生物碱类成分.其中单酯型生物碱37种,双酯型生物碱21种,三酯型生物碱2种,醇胺型生物碱80种及其他类生物碱1种.结论 该研究所建立的定性分析方法可系统快速地识别川乌中生物碱类化学成分,并为川乌的作用机制研究和产业开发提供一定的参考依据.

目的 基于超高效液相色谱串联四级杆轨道阱质谱(UHPLC-Q-Orbitrap-MS)技术,建立芬太尼类新精神活性物质的非靶向筛查方法.方法 使用数据依赖采集(Data Dependent Acquisition,DDA)模式获取10种芬太尼类化合物的MS/MS谱图,找出特征子离子.建立隔离窗口为m/z 10的数据非依赖采集(Data Independent Acquisition,DIA)方法,探究特征子离子在血浆、尿液、唾液和毛发样本中的特异性.结果 获得8种芬太尼类化合物的高分辨率和高灵敏度特征子离子m/z 105.0699和m/z 188.1435,发现m/z 188.1435在血浆、尿液、唾液和毛发样本中均具有更好的特异性,可作为芬太尼类新精神活性物质的标志离子.构建了复杂样品中非靶向筛查新型芬太尼类化合物的流程,通过测试血液样品中非靶向筛查出芬太尼的可行性,对该流程进行了验证.结论 建立了基于高分辨质谱的芬太尼类新精神活性物质非靶向筛查方法,为执法部门及时发现未知结构的芬太尼类新精神活性物质打下坚实基础.