-
蛋白激酶B1基因介导内质网类似激酶/真核细胞翻译启始子2α信号通路参与肺癌细胞增殖及细胞凋亡进程的机制
编辑人员丨5天前
目的:探讨蛋白激酶B1(Akt1)基因介导内质网类似激酶(PERK)/真核细胞翻译启始子2α(eIF2α)信号通路参与肺癌细胞增殖及细胞凋亡的机制。方法:选择人肺腺癌细胞系A549按实验转染方案随机分组,分为空白(Blank)组、沉默Akt1(si-Akt1)阴性对照(NC)组、si-Akt1组、过表达Akt1(OE-Akt1) NC组、OE-Akt1组、CCT020312(PERK选择性激动剂)组和OE-Akt1+CCT020312组。应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞中相关基因的mRNA和蛋白表达水平;同时分别应用噻唑蓝(MTT)法和流式细胞术检测各组细胞增殖和凋亡水平。两组间比较为 t检验,多组间比较采用单因素方差分析。 结果:Si-Akt1组的Akt1的mRNA(0.99±0.05比0.45±0.03, t=16.04, P<0.05)和蛋白表达(0.32±0.03比0.12±0.01, t=10.95, P<0.05)低于si-Akt1 NC组。si-Akt1组PERK/p-PERK、eIF2α/p-eIF2α、GRP78和CHOP的mRNA(PERK:0.97±0.04比1.77±0.07, t=17.190, P<0.05;eIF2α:1.01±0.06比1.53±0.06, t=10.610, P<0.05;GRP78:1.06±0.03比1.98±0.08, t=18.650, P<0.05;CHOP:0.94±0.04比1.63±0.06, t=16.570, P<0.05)和蛋白表达(p-PERK:1.15±0.05比2.23±0.11, t=15.480, P<0.05;p-eIF2α:1.69±0.07比3.12±0.19, t=12.230, P<0.05;GRP78:0.84±0.05比2.87±0.15, t=22.650, P<0.05;CHOP:1.46±0.07比2.65±0.13, t=14.400, P<0.05)明显高于si-Akt1 NC组;细胞增殖能力明显低于si-Akt1 NC组(48 h:0.48±0.03比0.31±0.02, t=8.167, P<0.05;72 h:0.78±0.04比0.60±0.03, t=6.235, P<0.05),细胞凋亡率明显高于si-Akt1 NC组(8.58±1.34比23.4±2.4, t=9.250, P<0.05)。同时,CCT020312组PERK/p-PERK、eIF2α/p-eIF2α、GRP78和CHOP的mRNA(PERK:1.00±0.04比1.87±0.08, t=26.940, P<0.05;eIF2α:1.00±0.05比1.57±0.07, t=11.640, P<0.05;GRP78:1.00±0.03比2.02±0.10, t=41.640, P<0.05;CHOP:1.00±0.06比1.66±0.07, t=20.210, P<0.05)和蛋白表达(p-PERK:1.12±0.05比2.30±0.11, t=16.910, P<0.05;p-eIF2α:1.65±0.05比3.20±0.18, t=13.260, P<0.05;GRP78:0.80±0.04比2.74±0.15, t=21.640, P<0.05;CHOP:1.44±0.06比2.61±0.13, t=14.150, P<0.05)明显高于Blank组;细胞增殖能力明显低于Blank组(48 h:0.46±0.03比0.29±0.02, t=8.167, P<0.05;72 h:0.80±0.04比0.57±0.03, t=7.967, P<0.05),细胞凋亡率明显高于Blank组和相应NC组(8.71±1.44比23.43±2.36, t=9.222, P<0.05)。然而,OE-Akt1组的Akt1的mRNA(0.99±0.05比1.88±0.09, t=14.970, P<0.05)和蛋白表达(0.31±0.03比0.87±0.04, t=19.400, P<0.05)明显高于OE-Akt1 NC组,PERK/p-PERK、eIF2α/p-eIF2α、GRP78和CHOP的mRNA(PERK:0.98±0.05比0.65±0.05, t=8.656, P<0.05;eIF2α:1.03±0.05比0.47±0.04, t=12.970, P<0.05;GRP78:1.2±0.04比0.32±0.03, t=30.210, P<0.05;CHOP:0.99±0.03比0.55±0.04, t=11.940, P<0.05)和蛋白表达(p-PERK:1.16±0.05比0.99±0.05, t=4.164, P<0.05;p-eIF2α:1.69±0.07比1.23±0.07, t=8.642, P<0.05;GRP78:0.86±0.04比0.34±0.02, t=20.140, P<0.05;CHOP:1.48±0.06比0.71±0.04, t=19.880, P<0.05)明显低于OE-Akt1 NC组,细胞增殖能力(48 h:0.45±0.03比0.60±0.02, t=7.206, P<0.05;72 h:0.76±0.04比0.97±0.05, t=5.681, P<0.05)明显高于OE-Akt1 NC组,细胞凋亡率(8.62±1.32比4.36±0.75, t=4.860, P<0.05)明显低于OE-Akt1 NC组(均值 P<0.05)。 结论:沉默Akt1表达可通过促进PERK/eIF2α信号通路的激活,进而抑制肺癌细胞增殖,促进其凋亡。
...不再出现此类内容
编辑人员丨5天前
-
乙型肝炎病毒前基因组RNA选择性翻译聚合酶蛋白的机制
编辑人员丨5天前
乙型肝炎病毒(HBV)是导致肝炎、肝硬化等肝脏疾病的重要病原体。HBV前基因组RNA(pgRNA)在其生命周期中发挥着重要作用,它既是翻译病毒核心蛋白和聚合酶蛋白(polymerase,P)的信使RNA,也是病毒进行逆转录的模板。作为HBV的重要结构蛋白,P蛋白和core蛋白的比例在HBV复制中受到严格调控。由于二者均由pgRNA翻译产生,且P蛋白的开放阅读框(ORF)位于核心蛋白ORF的下游,P蛋白的翻译如何启动是一个十分关键的科学问题。既往研究认为,P蛋白可能通过泄露扫描、翻译再起始等机制来启动翻译。本文通过文献阅读与推演,对HBV pgRNA选择性翻译P蛋白的机制进展进行综述,并尝试总结了起始P蛋白翻译的可能机制。
...不再出现此类内容
编辑人员丨5天前
-
长链非编码RNA在皮肤鳞状细胞癌中的作用机制进展
编辑人员丨5天前
长链非编码RNA(lncRNA)主要通过表观遗传修饰、mRNA选择性剪接调控、结合微小RNA等机制参与皮肤鳞状细胞癌(cSCC)的发生发展。本文综述近年来lncRNA在cSCC中调控的研究,探讨其作用机制,寻找cSCC潜在治疗靶点及生物标志物。
...不再出现此类内容
编辑人员丨5天前
-
转录后选择性多聚腺苷酸化调控与糖尿病肾病
编辑人员丨2023/12/9
选择性多聚腺苷酸化(alternative polyadenylation,APA)作为重要的转录后调控机制,是真核细胞mRNA成熟过程中,由于不同多聚腺苷酸化信号位点的选择导致一个基因产生多个3'UTR序列长度不同的转录异构体,其中pre-mRNA序列中的顺式调控元件、对应的反式作用因子,例如细胞核中多种酶和蛋白因子等共同参与APA调控.研究发现,APA机制参与多种生理、病理进程,主要通过改变3'UTR序列长度影响对应反式作用因子的调控作用,进而调节mRNA定位、稳定性、翻译效率及蛋白的定位等.本文将系统阐述转录后APA的作用机制和研究现状,并结合新近研究进展,探讨APA在糖尿病肾病研究中的前景.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2023/12/9
-
长链非编码RNA在皮肤鳞状细胞癌中的作用机制进展
编辑人员丨2023/11/4
长链非编码RNA(lncRNA)主要通过表观遗传修饰、mRNA选择性剪接调控、结合微小RNA等机制参与皮肤鳞状细胞癌(cSCC)的发生发展.本文综述近年来lncRNA在cSCC中调控的研究,探讨其作用机制,寻找cSCC潜在治疗靶点及生物标志物.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2023/11/4
-
m6A甲基化修饰在生殖相关疾病中的研究进展
编辑人员丨2023/10/21
N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)甲基化修饰是真核生物最常见的RNA修饰,通过控制RNA代谢、选择性剪接、降解和翻译等过程调控基因表达和生物学功能.近年研究发现m6A甲基化修饰在生殖系统中发挥重要的调节作用,参与多囊卵巢综合征、子宫内膜异位症、早发性卵巢功能不全、子宫腺肌病等多种女性生殖内分泌疾病和女性生殖系统肿瘤的发生、发展.此外,m6A甲基化修饰还可以调节人类精子发生和睾丸功能,与男性少弱精子症和男性生殖系统肿瘤相关.提示m6A甲基化修饰可能是生殖相关疾病调控的新靶点.综述m6A甲基化修饰的作用机制及其在生殖相关疾病中的研究进展,对生殖相关疾病的诊断和治疗具有一定指导意义.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2023/10/21
-
环状RNA及其作为疾病标志物的潜能
编辑人员丨2023/8/6
环状RNA(circular RNA,circRNA)是一种共价闭合环状结构的内源性非编码RNA分子,不具有5’端帽子和3’端poly(A)尾巴结构,具有广泛性、保守性、组织特异性以及稳定性等特性;根据序列来源的不同可分为3种类型:外显子circRNA、内合子circRNA、外显子-内含子circRNA;随着生物信息学的快速发展和高通量测序技术的不断革新,目前已经在真核细胞中发现大量内源性circRNA,主要分布于细胞质中,其独特的序列结构,使它具有microRNA海绵、调节选择性剪接或转录、与RNA结合蛋白结合、滚动翻译和衍生假基因等功能;它参与癌症、糖尿病、神经系统疾病和动脉粥样硬化等疾病发生、发展过程.众多研究显示circRNA会成为新型的疾病临床诊断标志物或人类疾病治疗的潜在靶点,该评述较为详细地从circRNA的形成、特性、生物学功能、研究方法、研究数据库以及和疾病的关系等方面来阐述circRNA的最新研究进展,方便研究人员进行circRNA研究.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2023/8/6
-
微RNA与心肌缺血/再灌注损伤
编辑人员丨2023/8/6
背景 微RNA(microRNA,miRNA)是一类长度大约22个核苷酸的内源性非编码小RNA分子,通过降解靶基因或抑制其翻译对基因表达进行调控.大量研究表明miRNA在心肌缺血/再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury,I/RI)的信号通路中发挥了重大的调节作用,通过参与细胞的分化、增生、电传导、血管再生和凋亡,产生生理或病理适应性反应. 目的 综述miRNA在心肌I/RI和缺血预处理(ischemic preconditioning,IPC)心脏保护机制中的潜在调节作用. 内容 综述miRNA在心肌I/RI相关改变(包括心律失常、心肌细胞的存亡和血管再生)中的作用.研究已证实miRNA可通过干扰电位传导,影响血管紧张素的作用,引起钙离子紊乱,造成心律失常,并且作用于细胞死亡信号途径,受到氧自由基的影响,从而决定心肌细胞存亡.另一方面,miRNA从促进和抵抗两方面调节血管再生.多种miRNA在缺氧预处理的心肌保护机制中发挥重要作用. 趋向 选择性上调或下调特定miRNA表达可作为未来治疗心肌I/RI的新型工具和诊断心血管疾病的敏感生物标记物.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2023/8/6
-
HDAC6在消化系统原发恶性肿瘤中的研究进展
编辑人员丨2023/8/6
恶性肿瘤已成为继心血管疾病外全球第二大死亡原因.消化系统恶性肿瘤的发病率和死亡率在我国恶性肿瘤排名中均位居前列.肿瘤的发生发展是一个多因素参与、多阶段的过程,蛋白质的乙酰化和去乙酰化在肿瘤的发生发展中起着重要作用.蛋白质的去乙酰化由组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases,HDACs)调控.目前共发现1 8个HDACs,其中HDAC6是该家族中研究最广泛的一类亚型.HDAC6已被证实在多种肿瘤组织中呈高表达状态,并与患者临床病理特征密切相关,HDAC6选择性抑制剂可抑制多种肿瘤细胞生长.本文就HDAC6在消化系统原发恶性肿瘤中的作用及潜在应用价值进行作一述评.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2023/8/6
-
RBM4a基因表达与功能研究进展
编辑人员丨2023/8/6
RNA结合基序4(RNA-binding motif4,RBM4)是一个参与不同细胞生物学过程的RNA结合蛋白(RNA-binding pro-tein,RBP),其结构包含两个RNA识别基序和一个CCHC型锌指结构.RBM4表达于多种组织,参与前体mRNA的选择性剪接、翻译控制和RNA沉默等转录后基因调控过程.RBM4具有多种生物学功能,包括维持胚胎和性腺发育、控制昼夜节律及介导细胞分化等.RBM4的表达异常可导致多种疾病的发生,特别是与肿瘤的关系密切,但具体分子机制尚需进一步研究.文章就RBM4的相关研究进展作一综述.
...不再出现此类内容
编辑人员丨2023/8/6
