目的:探讨酪氨酸羟化酶缺陷病（THD）患儿的临床特征，从而对本病进行早期识别、优化治疗并改善预后。方法:回顾性分析2018年5月至2020年5月于复旦大学附属儿科医院就诊且确诊为THD的9例患儿的临床资料，包括患儿姓名、性别、年龄、发病年龄、就诊年龄、确诊年龄、临床表现、头颅影像学、酪氨酸羟化酶基因变异、治疗随访等结果，依据Willemsen方法进行分型，总结其临床特点并进行文献复习。结果:9例THD患儿中男性5例，女性4例，发病年龄为新生儿期至2岁6个月（中位年龄3个月），确诊病程为4个月至5年7个月（中位病程9个月），其中A型THD患儿6例，B型THD患儿3例；7例患儿首发症状为运动发育迟缓，其余临床表现包括运动减少8例，四肢肌张力障碍5例，躯干肌张力低4例，吞咽/构音障碍4例，动眼危象4例，震颤3例，肌强直3例，表情僵硬3例，眼睑下垂2例，过度流涎/出汗2例，昼夜波动2例，肌阵挛1例，肌张力障碍持续状态1例。7例患儿头颅磁共振成像正常，2例非特异性异常（1例髓鞘化落后，1例双侧脑室扩大、白质减少）。对患儿进行基因检测共发现8个酪氨酸羟化酶变异，分别为4个错义变异，2个移码变异，1个剪切变异，1个无义变异，其中3个变异既往未见报道［c.1505_1518dup（p.R507Afs *23）、c.1128_1138del（p.Q377Gfs *12）、c.1058A>G（p.H353R）］。所有患儿均服用多巴丝肼片，A型THD患儿起始剂量及维持剂量分别为1.7~8.3 mg·kg -1·d -1及4.5~20.0 mg·kg -1·d -1；B型THD患儿起始剂量及维持剂量分别为1.7~12.5 mg·kg -1·d -1及4.6~12.0 mg·kg -1·d -1；A型THD患儿中4例有异动症，通过下调左旋多巴剂量或延缓加量，异动症均缓解。B型THD患儿中1例有异动症，未处理自行缓解。 结论:THD虽临床表现多样，但1岁以内首发症状多为运动发育迟缓，临床表现以运动减少、躯干肌张力低、四肢肌张力障碍多见。推荐THD患儿（无论临床分型）在1.0~5.0 mg·kg -1·d -1范围内按便于分割的最小剂量起始，维持剂量可根据患儿个体化反应进行调整。本病异动症发生率不低，通过下调用药起始剂量、延缓加量速度多数可以中止。

回顾性收集山东大学齐鲁医院神经内科于2017年3月至2022年2月收治的6例经基因确诊的酪氨酸羟化酶缺陷（THD）患者的临床及分子遗传学资料并汇总分析。6例患者分别来自5个家系；其中有5例出现持久或发作性行走姿势异常，4例有头面部肌张力障碍，包括口周及眼咽部肌肉痉挛、多动及双眼上视；4例有明显的晨轻暮重现象；2例患者有肢体的姿位性震颤；2例患者有自幼精神运动发育迟滞；1例仅表现为肢体及颈项肌无力；1例患者伴有癫痫发作。6例患者中仅1例成年期起病，其余均为幼年起病；有4例患者对小剂量多巴制剂反应良好，同一家族中的2例患者多巴治疗反应差，需要极低剂量多巴起始、多频次滴定治疗，但长期治疗效果差，有明显异动现象。5个家系基因检测发现8处TH基因变异，c.698G>A（p.R233H）为热点突变位点。THD临床表现复杂多样，除发作性或持久性肌张力障碍外，还可伴有动眼危象、肌无力、癫痫及精神运动发育迟滞，大多数患者对低剂量多巴制剂反应良好，但少部分患者需极低剂量多巴制剂滴定治疗，且长期效果欠佳。

目的:分析Citrin缺陷致新生儿肝内胆汁淤积症(neonatal intrahepatic cholestasis caused by citrin deficiency，NICCD)的临床特征及SLC25A13基因突变情况。方法:收集2014年1月至2018年12月西安市儿童医院确诊NICCD的病例资料，分析其临床表现、生化指标、SLC25A13基因突变和预后。结果:18例患儿均来自北方地区，初诊日龄为(63.4±19.5)d，临床表现包括黄疸(100%)、浅色大便(38.9%)、生长落后(27.8%)等。所有患儿均存在胆汁淤积，谷氨酰转肽酶、总胆汁酸和甲胎蛋白均升高，血清白蛋白均降低，伴天冬氨酸氨基转移酶升高(94.4%)、丙氨酸氨基转移酶升高(72.2%)、凝血酶原时间延长(88.9%)、高乳酸血症(83.3%)、低血糖(77.8%)、贫血(66.7%)等多种生化异常。血串联质谱均以瓜氨酸等多种氨基酸升高为特点，70%(7例/10例)尿气相色谱存在4-羟基苯乳酸和4-羟基苯丙酮酸升高。年龄与总胆汁酸呈负相关( r＝-0.469， P＝0.049)，与血氨、苏氨酸、甲硫氨酸、鸟氨酸、酪氨酸呈正相关( r分别为0.472、0.690、0.698、0.678、0.769， P均<0.05)。共检出16种SLC25A13基因突变，c.851_854del(33.3%)和c.1638_1660dup(19.4%)最常见，c.1841+3_1841+4del、c.980_981del(p.E327Vfs*45)和c.602A>T(p.E201V)是未报道的新突变。随访的17例患儿中1例死亡、16例生化指标在1岁内正常。 结论:特征性生化改变有助于NICCD的早期识别。该病尽早治疗预后多良好。c.851_854del和c.1638_1660dup是北方地区SLC25A13基因的高频突变。

目的 探讨脑蛋白水解物-Ⅰ(CH-Ⅰ)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)小鼠神经保护的作用和机制.方法 成年健康雄性C57BL/6小鼠36只,按照随机对照原则,将小鼠分为对照组(Ctrl),模型组(MPTP)和CH-Ⅰ组,应用MPTP诱导小鼠PD模型.通过腹腔注射CH-Ⅰ干预治疗,爬杆实验检测小鼠的行为功能,免疫组织化学检测酪氨酸羟化酶(TH)表达水平,基因测序和生物信息学分析法检测肠道细菌群落的组成和多样性.结果 行为学结果显示,模型制作后与Ctrl组相比,MPTP可诱导PD小鼠出现行为学缺陷(P＜0.05),经CH-Ⅰ处理后与MPTP组相比,PD小鼠的行为学缺陷有所改善(P＜0.05).免疫组织化学结果显示,MPTP使多巴胺合成中的限速酶TH表达水平降低,CH-Ⅰ处理后TH表达水平升高.微生物多样性结果显示,MPTP处理后小鼠肠道微生物多样性降低(P＜0.05);在"门"水平上,ε-变形菌门及脱硫杆菌门的数量骤降,疣微菌门菌群的数量显著增加;在"科"水平上,弧菌科、毛螺菌科、螺旋杆菌科及理研菌科菌群的数量减少,而艾克曼菌科菌群与丹毒丝菌科的数量增加,提示肠道微生物菌群原有稳态被破坏;经CH-Ⅰ处理后各菌群数量趋于正常,其减少了致病性微生物群的丰度并增加了有益细菌的相对丰度.结论 CH-Ⅰ可通过降低病原微生物的丰度和增加有益细菌的相对丰度,改善肠道微生物的组成,改善PD小鼠的行为功能.

目的:探究百里醌(thymoquinone,TQ)抑制NLRP3炎症小体对帕金森病(parkinson's disease,PD)模型神经炎性损伤的干预机制.方法:体内实验建立1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶诱导的PD小鼠模型,随机分为对照组、对照+TQ组、模型组、模型+TQ组;采用旷场、转棒实验评估TQ对PD小鼠运动缺陷的影响;Western blot法检测TQ对PD小鼠中脑组织酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)、α-突触核蛋白(α-Synuclein,α-Syn)和NLRP3炎症小体表达的影响.体外实验用脂多糖和 1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium,MPP+)先后诱导小胶质细胞(BV-2),收集细胞上清作为条件培养液,作用于人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞,构建PD神经炎性损伤模型.采用MTT法测定TQ和MPP+干预的最适浓度,以及各干预组细胞的存活率;TUNEL染色检测细胞凋亡情况;Western blot法检测TQ处理后SH-SY5Y细胞Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白的表达情况;ELISA检测IL-1β水平;Western blot法分析经TQ作用后BV-2细胞NLRP3、ASC、IL-1β、Caspase-1、Tubulin蛋白的表达.结果:模型组小鼠的运动功能显著低于对照组(P<0.01),TQ组小鼠的运动功能显著高于模型组(P<0.01);Western blot结果显示,与对照组相比,模型组α-Syn水平显著增加(P<0.01);与模型组小鼠相比,TQ显著降低了PD小鼠脑内α-Syn的表达水平(P<0.01);与模型组相比,TQ给药后,TH蛋白表达显著增加(P<0.01).进一步研究发现,TQ抑制PD小鼠NLRP3、Caspase-1、IL-1β、ASC蛋白表达的上调(P<0.01).MTT检测发现,100 μmol/LMPP+对条件培养SH-SY5Y细胞的增殖有显著抑制作用,TQ干预后可减轻SH-SY5Y细胞损伤(P<0.01).TUNEL染色结果显示,MPP+条件培养液作用SH-SY5Y细胞导致凋亡发生,TQ预处理后可显著降低细胞凋亡率(P<0.01).Western blot检测发现Bcl-2/Bax的表达在MPP+条件培养液后显著下调,而TQ可以促进Bcl-2/Bax比值的表达.同时,条件培养液引起SH-SY5Y细胞Caspase-3 的激活,TQ预处理可降低MPP+诱导的Caspase-3蛋白表达(P<0.01).ELISA检测发现TQ可显著抑制MPP+诱导的IL-1β分泌(P<0.01).Western blot结果显示,TQ抑制MPP+诱导BV-2细胞NLRP3、Caspase-1、IL-1β、ASC蛋白表达的上调(P<0.01).结论:TQ通过抑制PD模型NLRP3炎症小体激活,缓解PD模型神经元的炎性损伤,进而对多巴胺能神经元起到保护作用.

目的 分析Citrin缺陷致新生儿胆汁淤积症(NICCD)患儿的临床表现、实验室检查及预后.方法 对2012年1月至2017年6月中山市博爱医院经血串联质谱和/或基因检测诊断的7例NICCD患儿临床表现、实验室检查进行回顾性分析,电话随访患儿一般情况、喂养方式、生长发育及肝功能等.结果 7例NICCD患儿均因生后黄疸不退入院,4例为足月小样儿;实验室检查提示7例患儿的天门冬氨酸氨基转移酶、总胆汁酸、总胆红素、结合胆红素、γ-谷氨酰转肽酶、血氨、甲胎蛋白均有升高;总蛋白及血清白蛋白均有下降;6例患儿的丙氨酸氨基转移酶升高及凝血功能障碍.7例患儿均进行了肝脏穿刺病理学检查,所有病理改变均提示有肝细胞内胆汁淤积,其中3例合并胆管内胆栓形成;肝细胞明显水肿变性者5例(合并脂肪变性2例)、空泡样变性1例、气球样变1例.血串联质谱提示甲硫氨酸、瓜氨酸、苏氨酸、酪氨酸以及长链酰基肉碱C16、C18升高为主,尿气-相色谱主要表现为4-羟基苯乳酸升高.7例随访患儿中6例患儿予无乳糖+高中链甘油三酯奶粉喂养后1岁内症状缓解,肝功能恢复正常,4例年龄超过2岁的患儿有明显喜食肉类、拒食或少食高碳水化合物食物偏好,1例患儿未行饮食调整,于7个月大时确诊癫痫.结论 NICCD患儿主要表现为早期黄疸;对合并甲胎蛋白升高、低蛋白血症、高氨血症、凝血功能异常者,应及早完善串联质谱及基因检查;NICCD患儿的肝脏病理改变主要为肝细胞变性及胆汁淤积.进行饮食干预后,多数NICCD患儿预后良好,但也可能早期出现神经系统症状,对NICCD患儿进行长期随访非常重要.

目的 探讨1例无家族史的多巴反应性肌张力障碍患者的基因突变及临床特征.方法 收集1例无家族史的多巴反应性肌张力障碍患者的临床资料,并应用二代测序技术对其进行基因分析.结果 患者临床表现为轻中度缺陷型(A型)的酪氨酸羟化酶缺乏症;基因测序结果发现,患者酪氨酸羟化酶基因存在1个复合杂合突变:c.457C＞T导致氨基酸改变p.R153X,为已报道的致病无义突变;c.734G＞T导致氨基酸改变p.R245M,为未报道的错义突变,软件预测c.734G＞T很可能具有致病性.结论 c.734G＞T可能是1个酪氨酸羟化酶基因新的致病突变.

目的 分析Citrin缺陷致新生儿肝内胆汁淤积症(NICCD)患儿的临床表现、实验室检查特点及预后.方法 对2012年7月至2015年2月重庆医科大学附属儿童医院经血串联质谱和/或基因检测诊断的29例NICCD患儿临床表现、实验室检查结果进行回顾性分析,随访患儿一般情况、喂养方式、肝功能、生长发育、饮食偏好等.结果 29例NICCD患儿黄疸出现时间早,伴肝大(20/29例)、脾大(13/29例)、贫血(14/29例)、生长发育落后(9/29例)等主要临床表现.实验室检查提示29例患儿结合胆红素、总胆红素、碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转肽酶升高,28例天门冬氨酸氨基转移酶明显升高,大部分患儿(20/22例)有凝血功能障碍,伴血氨(20/25例)、乳酸(22/26例)、血脂(9/20例)、甲胎蛋白(14/14例)升高,清蛋白(24/29例)、血糖(17/22例)、铜蓝蛋白(4/4例)降低等异常改变.1例肝脏病理学检查提示肝细胞水肿变性、胆汁色素沉着及汇管区少量纤维组织增生.血串联质谱示甲硫氨酸、酪氨酸、苏氨酸、瓜氨酸、精氨酸及游离肉碱、长链酰基肉碱升高,尿气相-色谱以4-羟基苯乳酸、4-羟基苯丙酮酸升高为主.20例随访患儿中,18例患儿予无乳糖+高中链甘油三酯奶粉喂养后1岁内症状缓解,肝功能明显好转或恢复正常,1例因肝硬化死亡.3例＞1岁的患儿有喜食高蛋白低碳水化合物的饮食偏好.结论 对于黄疸出现早,以肝脾大、贫血、生长发育落后、凝血功能异常、低血糖、低蛋白血症、高氨血症、高脂血症、高乳酸及甲胎蛋白异常升高为特点的患儿,应及时鉴别NICCD,完善血串联质谱、尿气相-色谱及基因检查.

目的 分析常染色体隐性多巴反应性肌张力障碍(AR-DRD)的临床特点及基因突变情况,探讨其治疗效果、随访结果及分子遗传学机制.方法 应用高通量测序技术对2016年4月至2017年9月首都儿科研究所附属儿童医院门诊收治的6例否认家族史的运动障碍疾病患儿进行全外显子基因检测,并采用Sanger测序技术进行家系验证分析突变来源.结果 1.临床特点:6例患儿均为婴儿期起病,伴肌力下降、肌张力异常,其中以肌张力减低为著.2.基因突变:6例患儿均存在酪氨酸羟化酶(TH)基因突变,5例息儿为复合杂合突变,1例患儿为纯合突变,共检测到5种突变:c.605 G＞A、c.601 C＞T、c.364C＞T、c.1412_1413insCCCCCAGGCCGTGC和c.646G ＞A.3.治疗效果:6例患儿经多巴胺治疗后运动功能改善,表现为肌张力及肌力均有不同程度改善.结论 携带c.605 G＞A突变AR-DRD患儿对多巴胺治疗效果较好,该突变可能为国内外轻中度缺陷型AR-DRD常见变异位点.c.1412_1413insCCCCCAGGCCGTGC移码突变尚未被报道,为本研究新发现的TH基因致病性突变位点.

目的 探讨遗传代谢筛查对婴儿胆汁淤积性肝病诊治的意义,并分析其中基因检测异常患儿的临床生化改变特征.方法 收集2016年1月至2017年1月就诊于中国医科大学附属盛京医院小儿消化内科的69例胆汁淤积性肝病患儿的临床资料,回顾性分析患儿的临床表现、体检特征、生化检验及遗传代谢筛查和基因检测结果.结果 69例患儿中,67例完善了血串联质谱分析和尿气相色谱‐质谱检测,遗传代谢筛查异常组患儿与正常组患儿相比碱性磷酸酶、总胆红素、直接胆红素、总胆汁酸水平升高,差异有统计学意义(P<0. 05).血串联质谱分析中最常见的异常是游离肉碱升高及精氨酸、瓜氨酸、甲硫氨酸升高,尿气相色谱‐质谱检测最常见的是3‐羟基丙酸、4‐羟基苯乳酸、4‐羟基苯乙酸等多种有机酸的升高. 6例基因检测结果为阳性的患儿中,4例Citrin缺陷引起的新生儿肝内胆汁淤积症患儿血尿串联质谱分析提示高氨基酸血症(瓜氨酸、酪氨酸)和尿有机酸升高;共有5种SLC25A13基因突变:IVS6+5G>A、851del4、IVS11+1G>A、851 854del以及852 855del. 1例进行性家族性肝内胆汁淤积症2型患儿表现为黄疸持续未退、重度瘙痒,化验血γ‐谷氨酰转肽酶正常,ABCB11基因的突变类型是c. 667C>T. 1例转醛醇酶缺乏症患儿TALDO1基因突变类型是c. 716G>A和c. 854dupA杂合突变.结论 血串联质谱分析和尿气相色谱‐质谱检测对遗传性胆汁淤积性肝病的早期筛查具有重要意义,基因检测可以为少见遗传代谢性疾病提供精确诊断.