目的 考察醋柴胡水提液(VBRB)对大鼠肝细胞BRL3A以及人胚肾细胞HEK293内多种药物转运蛋白的影响以及对相应底物的摄取,进一步确定醋柴胡引经增效的作用靶点,为全面解析醋柴胡引经增效的作用机制提供数据支撑.方法 分别选用牛磺胆酸钠为Ntcp、Oatp2的共同底物,秋水仙碱、罗丹明B作为MRP1以及Pgp的底物,通过HPLC法或流式细胞术测定细胞内各底物含量;同时采用BCA法测定蛋白浓度,按蛋白质浓度归一化法计算摄取量;另分别采用Western blot法和RT-PCR法分析VBRB对细胞中的多种转运蛋白的蛋白表达以及mRNA水平的影响.结果 VBRB促进BRL3A细胞对牛磺胆酸钠摄取,并升高摄入型转运蛋白Ntcp和Oatp2的蛋白及mRNA水平.与MRP1抑制剂MK571类似,经谷胱甘肽刺激后的HEK293细胞,VBRB显著增加细胞对秋水仙碱摄取并降低MRP1蛋白表达;同时,VBRB显著促进Pgp过表达的HEK293细胞对罗丹明B摄取,并显著抑制Pgp蛋白表达和mRNA水平.结论 醋柴胡可增强细胞对多种底物的摄取,与其同时激活细胞内多种摄取型药物转运蛋白和抑制外排型药物转运蛋白活性有关.

目的 考察醋柴胡不同部位对大黄酸在大鼠体内的分布及其对肝核因子1α和4α的影响,初步探讨醋柴胡肝靶向增强作用的活性部位和调控环节.方法 大黄酸分别联用醋柴胡多糖(PSS)、正丁醇(BUF)、小分子部位(MHE)灌胃大鼠,给药后分别于5、15、30、90、210 min腹主动脉取血和各组织;测定血浆及组织中大黄酸和Ⅱ相代谢酶的含量,以相对靶向率(RTE)和相对摄取率(Re)评价醋柴胡各部位对大黄酸组织靶向作用的影响.结果 醋柴胡3个部位均可增加大黄酸的肝靶向性,顺序为MHE＞PSS＞BUF.大黄酸给药后30 min,PSS和BUF部位显著降低了 SULT 1A的活性,MHE显著升高了肝核因子HNF1α/HNF4α含量.结论 3个部位均为醋柴胡活性部位,不同部位具有不同作用机制,有待进一步探讨.

目的 以周仲瑛教授治疗甲状腺功能亢进(甲亢)的临床病案为研究对象,探索运用基于神经网络的TabNet模型发现甲亢的诊疗规律,为传承名老中医学术思想、辅助临床诊疗提供方法参考.方法 基于周仲瑛教授及其团队的临床甲亢诊疗医案,构建标准化、结构化训练数据,研究基于注意力机制和稀疏特征选择机制的算法,通过输入标准化临床表现,标准化舌象、脉象构建病机预测模型,分析核心症状、病机和药物以及三者之间的联系.结果 通过训练好的预测模型对肝郁、肝火、痰饮、肾虚、阴虚、瘀血 6 个病机进行预测,与决策树、随机森林等经典算法构建的多标签分类模型相比,本模型分类和预测指标均较好.通过决策树算法进行挖掘,总结 6 个核心病机对应中药社团:醋柴胡、夏枯草、牡蛎、炙鳖甲、玄参、天冬、麦冬等.结论 在临床医案数据上运用TabNet算法,构建基于临床表现、舌象和脉象的病机预测模型,可有效地预测核心病机,进而发现"症-机-药"之间的联系,为名老中医学术思想的传承和临床辅助诊疗决策提供方法学参考.

目的 基于Wnt/β-catenin信号通路探讨双术抗纤方(黄芪、麸炒白术、柴胡、醋莪术、丹参、荔枝核)改善四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化的作用及机制.方法 采用皮下注射 3.0 mL·kg-1 质量分数为 40%的CCl4 复制肝纤维化大鼠模型,每周注射 2 次,共注射 8 周.将SD大鼠随机分为空白对照组(8 只)、模型组(7 只)、阳性对照组(7 只,灌胃 43.19 mg·kg-1 水飞蓟宾)、中药低剂量组(6 只,灌胃 4.3 g·kg-1 双术抗纤方颗粒)、中药中剂量组(6 只,灌胃 8.6 g·kg-1 双术抗纤方颗粒)、中药高剂量组(7 只,灌胃 17.2 g·kg-1 双术抗纤方颗粒);每日 1 次,连续灌胃给药 4 周,除空白对照组外,余各组在给药同时继续皮下注射CCl4.采用HE、Masson染色法观察肝脏组织病理变化;ELISA法检测血清Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)、Ⅲ型前胶原(PC Ⅲ)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)水平;Western Blot法检测肝脏组织Wnt1、β-catenin、PPAR-γ蛋白表达水平;qPCR法检测肝脏组织Wnt1、β-catenin、PPAR-γ mRNA表达水平.结果 与空白对照组比较,模型组大鼠肝脏出现肝细胞部分坏死,正常的肝小叶结构被破坏,肝细胞索排列紊乱,中央静脉或汇管区增大,炎症细胞大量浸润,形成桥接坏死;肝脏中央静脉或汇管区胶原纤维增生明显,形成纤维间隔,纤维化评分明显升高(P＜0.05);血清Col Ⅳ、PCⅢ、HA、LN水平明显升高(P＜0.05);肝脏组织Wnt1、β-catenin蛋白及mRNA表达水平明显升高(P＜0.05),PPAR-γ蛋白及mRNA表达水平明显降低(P＜0.05).与模型组比较,阳性对照组以及中药中、高剂量组大鼠肝细胞脂肪变性情况有所改善,坏死、炎性细胞浸润减少;肝脏纤维化程度有所改善,肝脏胶原纤维减少,纤维化评分明显降低(P＜0.05);血清ColⅣ、PCⅢ、HA、LN水平明显降低(P＜0.05);肝脏组织Wnt1、β-catenin蛋白及mRNA表达水平明显降低(P＜0.05),PPAR-γ蛋白及mRNA表达水平明显升高(P＜0.05).结论 双术抗纤方有抗CCl4 诱导大鼠肝纤维化的作用,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路及上调PPAR-γ表达有关.

李郑生教授继承"肝常郁、脾常虚、胃常滞"的学术思想,从肝、脾、胃三者动态关系出发认识脾胃疾病,以疏肝、健脾、和胃为治则,善用药对治疗.如治肝郁用醋郁金-乌药、柴胡-炒黄芩、黄连-制吴茱萸,治脾虚用炒白术-茯苓、陈皮-砂仁、藿香-佩兰、麸炒苍术-麸炒白术,治胃滞用姜厚朴-麸炒枳壳、焦山楂-焦麦芽-焦神曲.盐小茴香-盐知母、刘寄奴-浙贝母、醋香附-干姜为李教授临证特色药对.附验案一则.

消化性溃疡是临床常见病、多发病,易反复发作,严重影响患者的生活质量.葛惠男教授根据消化性溃疡的病因病机及临床表现,善于应用以下8组角药:炙黄芪、桂枝、炒白芍以健脾助阳、补中气;炒白术、茯苓、炒薏苡仁以健渗燥利、祛湿邪;柴胡、醋香附、枳壳以疏肝理脾、畅气机;黄连、煅赭石、制半夏以降逆燥湿、清胃热;北沙参、石斛、知母以清热生津、养胃阴;川楝子、延胡索、徐长卿以疏肝泻热、止疼痛;醋乳香、铁树叶、土鳖虫以活血化瘀、通络脉;黄芩、海螵蛸、仙鹤草以抑酸护胃、促修复.验之临床,疗效满意.附验案1则以佐证.

目的 研究柴胡醋制前后水提组分对L02细胞的增殖作用.方法 采用CCK8法分别检测柴胡与醋柴胡水提组分对L02细胞生长的影响.采用生化法测定细胞上清液中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH)的含量.结果 CCK8法显示柴胡与醋柴胡水提组分均能抑制L02细胞的生长增殖,且细胞抑制作用与剂量呈正相关,与正常组比较作用显著,且作用强度为柴胡水提组分>醋柴胡水提组分.柴胡水提组分与醋柴胡水提组分作用于细胞24 h后,半数抑制浓度(IC50)分别为1173.87和1205.59 mg·L-1;生化法测定结果显示ALT、AST与LDH含量升高.结论 柴胡醋制前后水提组分均对L02细胞产生毒性作用,且毒性作用强度柴胡水提组分>醋柴胡水提组分.

目的:观察消脂清肝方治疗非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver,NAFLD)痰湿内阻证的临床疗效.方法:将248例NAFLD患者按随机数字表法分为对照组和观察组,每组124例.对照组给予复方甘草酸苷治疗,每天3次,每次2片;观察组在对照组基础上给予清肝消脂方(茯苓、醋柴胡、薏苡仁、黄芪、白芍、香附、山楂、法半夏、茵陈、甘草)治疗,清肝消脂方由医院制剂室按照处方比例煎煮成汤剂,并包装成每袋200 mL,每天2次,每次1袋,两组患者均治疗8周.治疗后评价两组患者的临床疗效、肝功能和血脂指标.结果:观察组有效率为90.32％,对照组有效率为68.55％,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).两组患者治疗后肝功能和血脂指标均优于治疗前,差异均有统计学意义(P＜0.05);治疗后两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:消脂清肝方是治疗非酒精性脂肪肝痰湿内阻证的有效复方,能达到健脾祛湿之功效,临床疗效显著,且安全性好.

柴胡是常用中药,醋炙后其化学成分及药理活性均有较大改变.柴胡醋炙后3个主要原生皂苷转化为次生皂苷,挥发油类成分中的β-蒎烯等10个成分消失,新生成糠醛、1,3-辛二烯等15种成分,正辛醛等9种成分含量增加,正庚醛等5种成分含量降低;醋炙柴胡疏肝解郁和消炎利胆作用增强,而解热镇痛作用有所减弱.而醋炙柴胡通常作为引经药与其他药物配伍使用,其引经增效的机制可能与醋炙柴胡影响转运蛋白的表达以及诱导或抑制β-葡萄糖醛酸酶等代谢酶有关,具体作用机制有待进一步研究.

目的:建立柴胡HPLC-ELSD指纹图谱,分析柴胡主要成分在提取和炮制过程中的变化规律.方法:色谱条件为Phenomenex Kinetex(R) C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相乙腈(A)-水(B)梯度洗脱(0～60 min,25％～58％A),柱温30℃,流速1.0 mL· min-,进样量10μL,检测器为蒸发光检测器,氮气流速3.0 mL· min-;以此色谱条件分别对4种样品(柴胡水提液、柴胡醇提液、醋柴胡水提液、醋柴胡醇提液)进行指纹图谱研究,并测定柴胡皂苷a,d,b1,b2的含量.结果:得到4种柴胡样品指纹图谱,共指认23个色谱峰,各样品的指纹图谱共有模式图不尽相同,成分色谱峰存在较大差异.柴胡经水提加热回流或醋炙后会使原生皂苷向次生皂苷转化,其中醋柴胡水提液中的原生皂苷含量最少,次生皂苷含量最多,柴胡醇提液中次生皂苷含量最少.结论:所建立的HPLC-ELSD指纹图谱可作为柴胡化学成分分析测定的方法;柴胡经水提或醋炙后化学成分变化较大,含柴胡制剂的临床使用及质量评价应充分考虑到柴胡皂苷类成分的转变情况.