目的:建立醋芫花标准汤剂高效液相色谱法(HPLC)特征图谱,在全面表征其成分特征的同时,能够区别于芫花标准汤剂.方法:采用Kromasil Cl8 色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以甲醇(A)-0.05%磷酸水溶液(B)为流动相梯度洗脱,流速为 1.0 mL·min-1,柱温为 35℃,进样量为 20 μL,检测波长为 238 nm.将得到的21 批芫花标准汤剂和 21 批醋芫花标准汤剂特征图谱经"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2004A版)进行峰匹配,分别明确共有峰个数,并生成对照特征图谱.通过对比,明确芫花标准汤剂与醋芫花标准汤剂特征图谱的区别点,指认共有特征峰,并对比指认的特征峰峰面积的变化情况.结果:通过对比生成的芫花标准汤剂和醋芫花标准汤剂对照特征图谱,发现其中tR在 27.0 min的特征峰是关键区别点,推测该成分可能为醋芫花挥发油中新生成的烯类化合物.指认 7 个特征峰成分,分别为芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷、芫花素-5-O-茜草苷、木犀草素、椴树苷、芹菜素、羟基芫花素和芫花素,其含量在炮制前后并没有明显的变化.结论:该方法简单可行,能够较好地区分芫花标准汤剂与醋芫花标准汤剂,从源头加强样品质量控制的同时,可为醋芫花标准汤剂及其配方颗粒质量控制提供参考.

该实验以大鼠小肠隐窝上皮细胞IEC-6为研究对象,比较醋炙前后芫花二氯甲烷部位对IEC-6细胞的毒性差异,初步探讨芫花醋炙减毒的机制.通过MTT法筛选芫花各极性部位对于IEC-6细胞毒性,比较醋炙前后芫花毒性部位对IEC-6细胞活性的影响;通过测定IEC-6细胞中的乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、Na+-K+-ATP酶,Ca2+-Mg2+-ATP酶等酶的活力和谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的含量评价IEC-6细胞氧化损伤程度;使用流式细胞术检测IEC-6细胞的细胞周期和细胞凋亡情况.结果表明芫花二氯甲烷部位为致IEC-6细胞的毒性部位,醋炙后二氯甲烷部位毒性显著降低(P＜0.01).与空白组相比,芫花二氯甲烷部位可显著降低IEC-6细胞中Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶、SOD活力(P＜0.01),显著提高细胞上清液LDH,MDA含量,显著降低细胞中GSH的含量(P＜0.01).同时,芫花二氯甲烷部位能显著提高IEC-6细胞的早期与晚期凋亡率,显著降低G1期细胞百分比,增加S与M期细胞百分比(P＜0.01).醋炙后,与相应芫花生品二氯甲烷组相比,醋芫花二氯甲烷组可显著提高IEC-6细胞内Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2-ATP酶、SOD活力(P＜0.01),显著降低细胞中LDH,MDA含量(P＜0.01),显著提高细胞中GSH含量(P＜0.01).显著降低IEC-6细胞的早期凋亡率、晚期凋亡率(P＜0.01),显著增加G1期细胞百分比,减少S与M期细胞百分比(P＜0.01).提示醋炙可降低芫花二氯甲烷部位致IEC-6细胞的毒性,其可能机制为提高细胞中抗氧化酶的活性与细胞膜的通透性,降低氧化损伤而实现.

目的:建立HPLC法同时测定不同产地芫花药材中7个具有抗肿瘤活性的瑞香烷型二萜[yuanhuadine(1),yuanhua-fine(2),genkwadaphnine(3),yuanhuacine(2),yuanhuahine(5),yuanhualine(6),isoyuanhuadine(7)]的含量.方法:芫花以75％乙醇水溶液提取;色谱柱为ZorbaxEelipse SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙睛-0.1％冰醋酸水,检测波长:230 nm,柱温:40℃,流速:0.8 mL/min,进样量:10μL,洗脱梯度:采用二元梯度洗脱系统,溶剂A(乙睛),B(水、0.1％冰醋酸).结果:上述7个瑞香烷型二萜的线性关系良好(r≥0.9941),平均加样回收率为98.1％～104.5％.不同生长环境的芫花中的7个成分各自含量有所差别.结论:该方法可用于中药芫花中瑞香烷型二萜的含量测定研究.

目的 研究益母草中的活性物质芫花素对小鼠凝血及抗炎的药理作用.方法 采用毛细玻管法及玻片法考察芫花素对小鼠凝血功能的影响;采用醋酸致小鼠疼痛扭体、二甲苯致小鼠耳廓肿胀及血管通透性模型研究芫花素的抗炎镇痛作用.结果 芫花素中剂量、大剂量组小鼠凝血时间均较空白对照组明显缩短(P<0.05);芫花素中剂量组和模型对照组相比,小鼠凝血时间显著缩短(P<0.05);芫花素大剂量组与模型对照组相比较,扭体次数显著减少(P<0.01).芫花素对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响结果表明,阳性对照阿司匹林组与模型对照组比较,左右耳片重差值差异有统计学意义(P<0.01),芫花素大剂量组与模型对照组相比差异有统计学意义(P<0.05).在芫花素对小鼠腹腔毛细血管通透性影响的试验中,阳性对照阿司匹林组与模型对照组比较,A值减小(P<0.01);芫花素小剂量组与模型对照组相比,A值无明显改变(P>0.05);芫花素中剂量组与模型对照组比较,A值显著减小(P<0.05);芫花素大剂量组较模型对照组A值显著减小(P<0.01).结论 芫花素可促进小鼠凝血功能;减少醋酸致小鼠扭体疼痛次数,有一定的镇痛作用;抑制二甲苯致小鼠耳廓肿胀及降低小鼠腹腔毛细血管通透性,具有一定的抗炎作用.这为其治疗痛经及子宫内膜炎等疾病提供了临床依据.

目的:比较醋炙前后芫花二氯甲烷提取物对于大鼠正常肝细胞BRL及大鼠正常肾细胞NRK的细胞毒性变化.方法:选择BRL及NRK细胞为研究对象,采用噻唑蓝(MTT)比色法评价生、醋芫花二氯甲烷部位对BRL与NRK活性的影响;测定NRK细胞中尿素氮(BUN),乳酸脱氢酶(LDH),谷胱甘肽(GSH)的含量,以及BRL细胞中丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),碱性磷酸酶(ALP),LDH,GSH的含量,用于评价生、醋芫花二氯甲烷部位对BRL和NRK的氧化损伤作用.结果:与空白组相比,生芫花二氯甲烷部位对NRK和BRL细胞具有显著毒性,显著提高NRK细胞中BUN和LDH的含量(P＜0.05,P＜0.01);显著提高BRL细胞中AST,ALT,ALP和LDH的含量(P＜0.05,P＜0.01);降低NRK和BRL细胞中的GSH含量.与生芫花二氯甲烷部位相应剂量组相比,醋芫花二氯甲烷部位相应剂量组能提高NRK和BRL的细胞活性,降低NRK细胞中BUN和LDH的含量,降低BRL细胞中ALT,AST,ALP和LDH的含量;提高NRK和BRL细胞中GSH的含量.结论:醋炙可降低芫花二氯甲烷部位对大鼠肝肾细胞的毒性,提高大鼠肝肾细胞功能与抗氧化能力.

目的 研究巴西甘菊花Achyrocline satureioides的化学成分.方法 应用多种色谱技术对巴西甘菊花进行分离纯化,并通过光谱方法鉴定化合物的结构.结果 从巴西甘菊花醋酸乙酯部位中分离得到21个化合物,分别鉴定为香树脂醇(1)、豆甾-4,6,8,22-四烯-3-酮(2)、豆甾-4-烯-3,6-二酮(3)、clovandiol (4)、caryolane-l,9β-diol (5)、lepidissipyrone (6)、5,7-二羟基-3,6-二甲氧基黄酮(7)、槲皮素-7-O-β-D-葡萄糖苷(8)、5,7-二羟基二氢黄酮(9)、二氢槲皮素(10)、槲皮素-4'-O-β-D-葡萄吡喃糖苷(11)、helichrysetin (12)、3-[5,7-dihydroxy-2,2-dimethyl-8-(2-(S)-methyl-butanoyl)-2H-chromen-6-yl-methyl]-6-ethyl-4-hydroxy-5-methyl-pyran-2-one (13)、槲皮素(14)、原儿茶酸(15)、(+)-(3R)-3-hydroxyl-4,4-dimethyl-4-butyrolactone(16)、(4S,5R)-5-(4'-methyl-3'-pentenyl)-4-hydroxy-5-methyldihydrofuran-2-one (17)、芫花素(18)、槲皮素-3-甲醚(19)、高良姜素(20)、新野樱苷(21).结论 化合物1、4、5、16、17、21为首次从该属植物中分离得到,化合物1～12、16～18、21为首次从该植物中分离得到.

目的:对芜花及醋制芫花的挥发性成分进行分析和比较.方法:使用顶空固相微萃取(HS-SPME)法与气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)相结合来分析鉴定芫花与醋制芫花的挥发成分,用面积归一化法计算各成分的相对百分含量.结果:共检测出74种成分,鉴定出53种成分,从芫花中检测出34个峰,鉴定出30个成分,占挥发性成分的91.46％;从醋制芫花中检测出40个峰,鉴定出31个成分,占挥发性成分的92.59％.两者的共有挥发性成分有8种,与芫花相比,醋制芫花中新增了23种成分,减少了22种成分.结论:芫花的挥发性成分组成和含量经过醋制后发生了明显的变化.

目的:建立祖师麻色谱指纹图谱,探究祖师麻抗炎、镇痛作用的谱效关系,为祖师麻抗炎、镇痛作用的物质基础研究提供参考.方法:采用高效液相色谱(HPLC)法建立祖师麻的指纹图谱,利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》进行色谱图相似度评价;与对照品比对确定7-羟基香豆素、木犀草素、芫花素、紫丁香苷、祖师麻甲素、7、8-二甲氧基香豆素在色谱指纹图谱中的位置.利用耳肿胀试验和冰醋酸扭体试验分别得到祖师麻的肿胀抑制率和疼痛抑制率,采用偏最小二乘回归分析法和灰色关联法分析祖师麻抗炎、镇痛作用的物质基础.结果:从祖师麻指纹图谱中共指认出19个共有峰.其中4号峰为7-羟基香豆素,9号峰为祖师麻甲素,11号峰为紫丁香苷,15号峰为7、8-二甲氧基香豆素,16号峰为木犀草素,19号峰为芫花素.偏最小二乘法分析表明,祖师麻发挥抗炎作用的物质是1、6、9、10、19号峰所代表的化合物,发挥镇痛作用的物质是1、7、9、12、16、17、18、19号峰所代表的化合物;灰色关联法分析表明,祖师麻发挥抗炎作用的物质是11和19号峰所代表的化合物,发挥镇痛作用的物质是8、9、11、14、18、19号峰所代表的化合物.结论:祖师麻发挥抗炎作用的主要物质基础为19号峰(芫花素),发挥镇痛作用的主要物质基础为9(祖师麻甲素)、19(芫花素)和18号峰化合物所代表的化合物.