钝化剂可以使土壤重金属由活性态向稳定态转化,降低重金属的迁移和生物可利用性,实现重金属污染土壤的修复.有机碳是反映土壤质量和健康的重要指标,其转化过程对大气化学、全球碳循环起到决定性作用,受到利用方式、农艺措施和治理修复活动的影响.钝化剂的施用一方面会改变土壤结构、团聚体组成和pH、阳离子交换率(CEC)等理化性质,影响土壤有机碳的动态变化;另一方面可以调控土壤微生物群落结构、多样性,改变有机碳转化酶的活性,从而影响土壤有机碳的转化.上述影响受到钝化剂种类、施用量及施用时间等多方面因素的调控.本文论述了不同钝化剂施用条件下,土壤有机碳组分及其变化情况,并探讨了钝化剂对土壤有机碳转化影响的作用机制.未来应基于作用机制,开发兼具固碳增汇与重金属钝化功能的新型钝化剂,并揭示钝化剂施用后土壤有机碳周转及稳定性有机碳的时空分布规律.

目的 建立糖尿病(DM)合并新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染小鼠模型,研究DM合并SARS-CoV-2感染病程发展中的重要病理生理变化.方法 将野生型(WT)小鼠和由细胞角蛋白18基因启动子驱动的人血管紧张素转化酶2受体(K18-hACE2,简称hACE2)的转基因小鼠分别随机分为溶剂对照组、DM组、SARS-CoV-2病毒刺突蛋白感染(S)组以及DM合并S蛋白感染(DM+S)组,每组10～12只.除溶剂对照组及S组外,其余组通过10周高脂饮食后连续3dip给予链脲佐菌素(STZ)40 mg·kg-1诱导DM症状,溶剂对照组及S组给予等体积0.1 mol·L-1柠檬酸钠缓冲液.在此基础上,S组及DM+S组小鼠经鼻腔滴入15 μg SARS-CoV-2 S蛋白与1 g·L-1聚肌胞苷酸(Poly[I:C])的混合溶液50 μL,溶剂对照组滴鼻给予等体积无菌水.在高脂喂养第6周和ip给予STZ 1周后,以口服葡萄糖耐量实验评价小鼠糖耐量水平及胰岛β细胞功能.高脂喂养第6周至ip给予STZ 2周后,每周用血糖仪检测小鼠随机血糖及空腹血糖.DM小鼠S蛋白感染前及感染24,48和120 h后,每组取3只小鼠颌下静脉取血后处死并取肺组织,采用苏木精-伊红染色法观察合并S蛋白感染前后的肺组织病理改变.S组小鼠在感染S蛋白前及感染6,24,48,72和120 h后采血,Luminex液相芯片技术检测小鼠血浆细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)、IL-2、IL-6、IL-10、IL-17、干扰素诱导蛋白10(IP-10)、干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)水平,ELISA检测血浆硫酸乙酰肝素(HS)水平;将细胞因子水平、HS水平与小鼠感染S蛋白后的肺部病理损伤程度进行Spearman相关性分析.结果 STZ合并高脂饮食可诱导小鼠DM样表现,hACE2-DM组随机血糖(P<0.01)和1周后的空腹血糖(P<0.05)均显著高于WT-DM组,且hACE2-DM小鼠胰岛功能损伤程度显著高于WT-DM小鼠(P<0.05).与DM组相比,DM+S组小鼠均表现出更严重的肺部病理变化,并伴有大量炎症浸润和肺间质增厚.与溶剂对照组相比,S蛋白感染6 h,WT-S组小鼠血浆中促炎细胞因子G-CSF,IL-6和IP-10均显著升高(P<0.01),S蛋白感染24 h,促炎细胞因子IL-17和抗炎细胞因子IL-10均显著升高(P<0.05);S蛋白感染6 h,hACE2-S组血浆中促炎细胞因子IL-1β,IL-6,TNF-α,MCP-1,G-CSF和IP-10均显著升高(P<0.05,P<0.01);WT-DM+S组和hACE2-DM+S组IL-17分别在S蛋白感染24 和6h显著升高(P<0.01,P<0.05),hACE2-DM+S组IFN-γ和IL-1β延迟至48h显著升高(P<0.05,P<0.01),MCP-1延迟至72h显著升高(P<0.05).与溶剂对照组相比,S蛋白感染6和24h后,WT-S组血浆中HS水平显著升高(P<0.05,P<0.01),48 h开始降低;同时,与WT-S组相比,感染6h后,WT-DM+S组HS水平略升高,24 h出现降低;hACE2-S组HS水平于24h显著升高(P<0.01),且在S蛋白感染24,48和120 h后与WT-S组基本持平;S蛋白感染6,24 和48h后,hACE2-DM+S组血浆HS水平均显著升高(P<0.01,P<0.05),升高持续时间较其S组长.小鼠血浆中IL-1β,IL-10,MCP-1,IP-10,G-CSF以及HS水平与DM+S小鼠肺损伤程度呈正相关(P<0.05,P<0.01).结论 本研究建立的DM合并SARS-CoV-2 S蛋白感染小鼠模型能成功模拟临床患者的部分病理生理特征,主要表现为较单纯感染免疫反应钝化,HS水平升高且持续时间较长.IL-1β,IL-10,MCP-1,IP-10,G-CSF以及HS可能有助于及时了解DM合并SARS-CoV-2感染患者的病程.

为寻找新型植物病毒抑制剂,以烟草花叶病毒(TMV)为供试病毒,研究发现入侵植物椴叶鼠尾草提取物具有抗TMV活性.通过半叶枯斑法不同施药方式筛选发现,在质量浓度为 1mg/mL时,石油醚萃取物的保护作用和钝化作用最强,抑制率为40.95％和52.85％;乙酸乙酯萃取物的治疗作用最强,抑制率为52.85％,与阳性对照药剂宁南霉素无显著差异.石油醚萃取物各馏分中,Fr7的保护作用和治疗作用最好,抑制率为40.51％和45.52％,Fr6的钝化作用最好,抑制率为74.63％.乙酸乙酯萃取物各馏分中,Fr1'的保护作用最强,抑制率为61.77％,Fr3'的治疗作用最强,抑制率为55.02％,Fr4'的钝化作用最强,抑制率为60.22％.运用现代色谱波谱技术分离鉴定了 5个化合物分别为tilifodiolide、eupatoric acid、熊果酸、齐墩果酸和2-甲基-5,7-二羟基色原酮.

目的 观察慢性心力衰竭(CHF)大鼠室旁核内大电导钙激活钾通道(BKCa)的变化及其与交感神经活动的关系.方法 雄性Wistar大鼠,6～7周龄,随机数字表法分为2组,即假手术组和CHF组.通过结扎冠状动脉左前降支的方法建立大鼠CHF模型,假手术组仅穿线不结扎.建模术后2周,对大鼠行下丘脑室旁核慢性灌注BKCa选择性阻断剂IBTX术,取假手术组和CHF组大鼠各24只,进一步分成8个亚组,即假手术+溶剂人工脑脊液(aCSF)组、CHF+aCSF组、假手术+IBTX低剂量组、CHF+IBTX低剂量组、假手术+IBTX中剂量组、CHF+IBTX中剂量组、假手术+IBTX高剂量组和CHF+IBTX高剂量组,每组6只大鼠,IBTX低、中、高剂量分别为0.125、1.25、12.5 nmol/nl.另取建模术后2周大鼠,行下丘脑室旁核微量注射病毒术,取假手术组和CHF组大鼠各12只,进一步分成4个亚组,即假手术病毒对照组、假手术基因敲减KCNMB4组、CHF病毒对照组和CHF基因敲减KCNMB4组,每组6只大鼠.超高分辨率小动物超声实时影像系统测定各组大鼠心功能指标,包括左心室射血分数(LVEF)、左心室舒张末期容积(LVEDV)和左心室舒张末期内径(LVEDD)等.进一步对大鼠行右侧颈总动脉插管,通过PowerLab生物信号采集与分析系统,采集大鼠的平均动脉压(MAP)、左心室收缩压(LVSP)和左心室舒张末期压(LVEDP)等指标.在肾脏部位游离出肾交感神经,记录肾交感神经放电(RSNA),心电图采用标Ⅱ导联记录,同步得到心率.分别记录在药物或病毒干预后4周上述各指标变化.待超声心动图、血液动力学和肾交感神经记录结束后,经大鼠腹主动脉采血,ELISA法测定大鼠血浆去甲肾上腺素(NE)及血清N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)水平.取血结束后取大鼠心脏及肺脏称重,计算右心室体重比和肺重比.对大鼠心脏进行伊文思蓝染色,计算大鼠心肌梗死面积.免疫荧光和Western blot法检测大鼠室旁核内KCNMB4蛋白表达量.实时荧光定量聚合酶链反应检测大鼠下丘脑室旁核BKCa基因表达量.结果 (1)抑制下丘脑室旁核BKCa功能对大鼠心功能、血液动力学、交感驱动和组织解剖学指标的影响:CHF+aCSF组及CHF+IBTX低剂量、中剂量和高剂量组大鼠LVEF和左心室短轴缩短率均明显低于相应的假手术各组(P均＜0.05),LVEDP均明显高于相应的假手术各组(P均＜0.05),左心室最大收缩速率(+dp/dt)均明显低于相应的假手术各组(P均＜0.05).假手术+IBTX中剂量和高剂量组大鼠肾交感神经放电和心率均明显高于假手术+aCSF组,假手术+IBTX低剂量、中剂量和高剂量组大鼠MAP和血浆NE水平均明显高于假手术+aCSF组(P均＜0.05).CHF+IBTX低剂量、中剂量和高剂量组大鼠肾交感神经放电和血浆NE水平明显高于CHF+aCSF组(P均＜0.05),CHF+IBTX中剂量和高剂量组大鼠MAP和心率均明显高于CHF+aCSF组(P均＜0.05).CHF+aCSF组及CHF+IBTX低剂量、中剂量和高剂量组大鼠右心室体重比和肺重比均明显高于相应的假手术各组(P均＜0.05).(2)CHF组大鼠下丘脑室旁核内KCNMB4基因及蛋白亚基表达量:CHF组大鼠下丘脑室旁核内KCNMB4 mRNA和蛋白表达量以及KCNMB4阳性神经元数量均明显少于假手术组(P均＜0.05).(3)下丘脑室旁核内KCNMB4敲减对大鼠交感驱动、心功能和组织解剖学指标的影响:微量注射病毒后4周,假手术基因敲减KCNMB4组和CHF病毒对照组大鼠的LVEDD均明显大于假手术病毒对照组(P均＜0.05),而CHF基因敲减KCNMB4组则进一步大于CHF病毒对照组(P＜0.05),假手术基因敲减KCNMB4组和CHF病毒对照组大鼠的LVEF和左心室短轴缩短率则均低于假手术病毒对照组(P均＜0.05),而CHF基因敲减KCNMB4组则进一步低于CHF病毒对照组(P＜0.05).假手术基因敲减KCNMB4组和CHF病毒对照组大鼠的LVSP和+dp/dt均明显低于假手术病毒对照组(P均＜0.05),而CHF基因敲减KCNMB4组上述指标则进一步低于CHF病毒对照组(P＜0.05),假手术基因敲减KCNMB4组和CHF病毒对照组大鼠的LVEDP明显高于假手术病毒对照组(P＜0.05),而CHF基因敲减KCNMB4组则进一步高于CHF病毒对照组(P＜0.05).假手术基因敲减KCNMB4组大鼠的MAP、肾交感神经放电、心率和血浆NE水平均明显高于假手术病毒对照组(P均＜0.05),而CHF基因敲减KCNMB4组上述指标则均高于假手术病毒对照组和CHF病毒对照组(P均＜0.05).假手术基因敲减KCNMB4组和CHF病毒对照组大鼠右心室体重比和肺重比均明显高于假手术病毒对照组(P均＜0.05),而CHF基因敲减KCNMB4组上述指标则进一步高于CHF病毒对照组(P均＜0.05).(4)下丘脑室旁核内KCNMB4敲减对KCNMB4蛋白亚基表达量的影响:假手术基因敲减KCNMB4组、CHF病毒对照组和CHF基因敲减KCNMB4组大鼠下丘脑室旁核内KCNMB4蛋白表达水平均明显低于假手术病毒对照组(P均＜0.05),且CHF基因敲减KCNMB4组进一步低于CHF病毒对照组(P＜0.05).结论 CHF大鼠室旁核内BKCa表达下调、功能钝化,而其可能参与介导了交感传出神经活动增强,与心衰状态下心功能进一步恶化有关.

目的 通过海藻多糖(SP)与锌离子(Ⅱ)络合成一种新型的海藻多糖锌(SPZC),在比较SP和SPZC二者理化性质、结构组成基础上,对锌离子的多糖螯合物在单核细胞THP-1细胞耗氧的影响做了初步的研究.方法:用苯酚法法测定SP和SPZC的总多糖含量、Hodgson法测定二者的硫酸根含量和Folin酚试剂法等化学法测定二者主要作用成分,气相色谱(GC)分析了二者所含的主要单糖及摩尔比,红外光谱(IR)分析多糖二者的主要成分基团等.用ESR自旋捕捉法检测了二者对细胞的呼吸爆发作用(respiratory burst,RB)下耗氧量的影响,以及利用活性氧(reactiveoxygen species,ROS)的荧光探针(2,7-二氢二氯荧光素,DCFH-DA)分析了PMA激活THP-1细胞后ROS产生的变化.结果 SP络合上锌离子成为SPZC后也具有很好的稳定性,二者之间的主要成分含量变化明显,多糖含量、蛋白质含量、硫酸根离子下降明显;而SPZC中Zn(Ⅱ)的含量为15％.通过GC分析,表明锌离子的配位反应,使得SP的单糖组成也有改变;IR图谱可以发现SP结合上锌离子后,图谱上的特征性峰发生位移、钝化或消失,而代之有SPZC核的类型峰.RB结果,提示在细胞受到激发的短暂时间内,SPZC比SP更能维持细胞的RB在一个更高水平;而同样细胞激发后的较长时间内,ROS产生的荧光染色,相较SP对ROS产生有一定的淬灭作用,而SPZC则能触发ROS产生更多.结论 SP同锌离子(Ⅱ)络合产生的SPZC,增加了新的有机锌来源;同时,SPZC对比SP,其抗氧化性能有所减弱.

本研究利用石灰、磷酸钠、高分子钝化剂及其复配钝化剂对重金属pb2+污染土壤进行稳定化处理,并通过浸出试验、老化实验、土壤连续浸提实验及淋溶试验研究单一钝化剂与复配钝化剂稳定重金属Pb2+污染土壤效率.最终表明,有机钝化剂TEPA-CSSNa投加量为2％时,其稳定土壤重金属pb2+效率为94.8％,而复配钝化剂稳定土壤重金属Pb2+效率接近98％;复配钝化剂基本上可将土壤中有效态重金属pb2+转化为铁锰氧化态等稳定态Pb2+;且相比较单一钝化剂,老化时间对复配钝化剂稳定土壤Pb2+效率的影响更小.相比单一传统无机钝化剂、高分子有机钝化剂,复配钝化剂稳定污染土壤Pb2+效果更好.

目的:酶联免疫分析常用底物对硝基苯磷酸盐分解后产生对硝基苯酚(PNP),该物质对电极具有钝化作用,限制了该体系在电化学免疫分析领域的应用.因此,需要开发一种具有抗钝化作用的电极浆料.创新点:石墨烯-子液体-壳聚糖(rGO/IL/Chi)电极浆料不仅具有抗钝化作用,且拥有良好的电化学性能,制备过程中无需使用任何有机溶剂,安全环保.方法:制备rGO/IL/Chi复合浆料,涂布于单面导电金箔上,75°C,10 min,将其作为工作电极;背面涂布自制的银浆,作为参比电极和对电极;0.03 g/ml壳聚糖溶液作为绝缘浆料.结论:本研究表明,在比较商品化的玻碳电极、自制丝网印刷电极、石墨烯修饰的丝网印刷电极和rGO/IL/Chi电极对PNP的循环伏安响应时,rGO/IL/Chi电极具有最大的峰电流响应和最小的峰电位.同时,对四种电极进行性能表征时,rGO/IL/Chi电极具有最小的峰电位差和最大的峰电流.这表明rGO/IL/Chi电极具有较好的电化学性能,且对PNP有较大的响应.比较四种电极对PNP的安培响应之后,发现只有rGO/IL/Chi电极具有抗钝化作用.可将该电极用于肌钙蛋白I的检测,其检测限为0.05 ng/ml.

目的 通过动物模型与实验方法探究产前全氟辛酸(PFOA)暴露对新生鼠肺组织细胞免疫功能的影响.方法 建立产前PFOA暴露(1、5、10 mg/kg)孕鼠模型,并设置正常对照组,持续每天灌胃至分娩.出生d1的小鼠(PND1)断尾检测血糖值,并收集新鲜肺组织用于生化法测定肺匀浆中乳酸脱氢酶(LDH)水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定肺匀浆中白细胞介素6(IL-6)和干扰素γ(IFN-γ)含量,免疫荧光法检测分析肺组织细胞中CD29和CD73阳性细胞数量,蛋白免疫印迹(western blotting)法检测肺组织细胞中CD29和CD73蛋白水平的表达.结果 与对照小鼠比较,产前PFOA干预组中PND1小鼠的血糖有升高趋势(P＞0.05),肺匀浆中LDH,IL-6,IFN-γ含量增加(P＜0.05),肺组织细胞中CD29和CD73阳性细胞显著减少(P＜0.05),同时肺组织细胞中CD29和CD73蛋白表达相应下调(P＜0.05),体现出剂量依赖性.结论 产前PFOA暴露对新生鼠肺组织细胞免疫功能有抑制效应,其分子机制可能与钝化血糖依赖性的CD29/73信号通路有关.

通过室内盆栽试验,在生活垃圾堆肥中按质量比添加1％氧化石墨烯(GO)和不同比例的纳米铁(nZVI,1％、3％、5％),研究了GO和nZVI对高羊茅生长和生理特性的影响.结果表明:单独添加GO及共同添加GO和nZVI促进了高羊茅种子萌发,发芽率和发芽指数均在GO+5％ nZVI处理达到最大.除1％ nZVI处理外,其他添加剂处理显著提高了高羊茅地上生物量和叶绿素含量,在GO+5％ nZVI处理达到最大,较对照分别提高25％和31％.添加3％、5％ nZVI显著提高了超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性,且随nZVI添加比例的增加而升高.与对照相比,单独添加nZVI以及联合GO处理过氧化氢酶(CAT)与丙二醛(MDA)含量显著降低,随nZVI添加比例的增加而减少,分别在GO+5％ nZVI和GO+3％ nZVI处理中达到最低,较对照分别降低52％和48％.高羊茅地上部重金属含量随nZVI添加比例的增加而降低,在共同添加GO和nZVI的处理中效果显著,均显著低于对照.可见,nZVI和GO两种材料对堆肥重金属具有固定作用,减少了植物对重金属的吸收,促进了草坪植物的生长.

目的 观察SonoVue在经皮注入兔肝组织后的弥散规律、超声变化特点及生物学效应.方法 30只新西兰健康大白兔分为注射造影剂0.1 mL组、0.2 mL组、0.3 mL组、0.4 mL组、0.5 mL组和注射生理盐水的对照组.各实验组经皮穿刺兔肝组织注射相应剂量造影剂,对照组注射生理盐水.观察造影剂消退情况.造影剂消退后处死兔子,取造影区肝组织行HE染色,观察肝组织损伤情况.结果 注射区平均灰度值较周围肝组织明显增高,随剂量增加平均灰度值增高,超声造影剂代谢缓慢,造影时间显著延长.重复测量资料方差分析显示,不同注射组不同时间点平均灰度值变化值差异具有统计学意义(P =0.000).实时超声动态观察发现动静脉灌注增强现象、造影增强区边缘钝化现象、造影区繁星征.病理结果显示,肝细胞形态正常,未见肿胀变形,周围组织结构排列整齐.肝组织间质内见淋巴细胞聚集.结论 超声造影剂经皮穿刺注入兔肝组织增强时间显著延长,造影安全可行.