我国非新生儿破伤风防控形势严峻，强化含破伤风类毒素疫苗（TTCV）的主动免疫是非新生儿破伤风防控的关键。通过破伤风抗体（TAB）检测可以明确个体的TTCV免疫状态，从而正确实施TTCV主动免疫。国外对TAB检测技术的研究呈现停滞状态，而国内有现实的TAB检测需求，破伤风抗体检测技术仍然处于动态发展过程中。本文收集国内也相对有限的TAB检测技术资料，对国内应用和发展的小鼠毒素中和试验（MTNT）、间接血凝法（IHA）、凝胶双向扩散试验或Rubin法、酶联免疫吸附试验（ELISA）、胶体金（CG）法等TAB检测技术进行总结，以期为国内TAB检测提供较全面的依据。由于缺乏国内TAB检测和国际机构、参考试剂的对比研究，我国的TAB检测技术尚未实现国际化认可。我国特殊的破伤风防控形势使得TAB检测技术研究在国内有一定的现实意义，ELISA、CG法等快速检测试剂具备一定的应用价值。

目的:调查确定云南省玉龙县鼠疫自然疫源地的流行范围，并评估其流行风险，为鼠疫监测及防控工作提供依据。方法:2017年，在玉龙县8个乡镇，每个乡镇根据地理景观、海拔、人口、面积等各选取2 ~ 3个自然村作为调查样点，10 - 11月采用夹（笼）夜法捕获小型兽类宿主动物及其寄生蚤，采集宿主动物脏器等分离鼠疫菌，并用胶体金试纸条检测鼠疫F1抗原和抗体，自毙小型兽类标本同时进行反向间接血凝试验（RIHA）检测鼠疫特异性抗原；采集犬、猫、鼠等指示动物血清使用间接血凝试验（IHA）进行鼠疫F1抗体检测。结果:共获包括自毙小型兽类在内的宿主动物1 019只，隶属4目6科12属22种。其中工具捕获小型兽类1 016只，室外996只，室外捕获率为25.28%（996/3 940），其构成为齐氏姬鼠占30.32%（302/996）、斯氏家鼠占22.09%（220/996）、大绒鼠占17.37%（173/996）、灰麝鼩占12.35%（123/996），均是调查区小型兽类的优势种；社鼠占8.13%（81/996）、大足鼠占4.02%（40/996）、褐家鼠占1.81%（18/996），均为常见种。居民区室内共捕获小型兽类9种20只，捕获率为1.11%（20/1 800）。其中褐家鼠占30.00%（6/20）、大足鼠占25.00%（5/20）、小家鼠占10.00%（2/20），均为居民区优势鼠种。8种18只小型兽类染带寄生蚤67匹，隶属3科5属5种，总染蚤率为1.77%（18/1 019），总蚤指数为0.070。居民区室内获寄生蚤49匹，3种4只小型兽类染带寄生蚤，染蚤率为19.05%（4/21），蚤指数为2.333。其中缓慢细蚤染蚤率最高，为9.52%（2/21），蚤指数为0.571；猫栉首蚤指名亚种蚤指数最高，为1.571，染蚤率为4.76%（1/21），二者为居民区小型兽类体表主要寄生蚤种。室外5种14只小型兽类染带寄生蚤18匹，染蚤率为1.40%（14/998），蚤指数为0.018。其中缓慢细蚤染蚤率最高，为0.50%（5/998），蚤指数为0.005；特新蚤指名亚种染蚤率次之，为0.40%（4/998），蚤指数为0.004；方叶栉眼蚤的蚤指数最高，为0.007，染蚤率排第三，为0.30%（3/998）；棕形额蚤指名亚种的染蚤率和蚤指数均最低，分别为0.20%（2/998）和0.002。方叶栉眼蚤、缓慢细蚤和特新蚤指名亚种为室外小型兽类体表主要寄生蚤种。共采集指示动物血清419份，其中犬血清402份，IHA检测结果阳性1份，阳性率为0.25%（1/402）；猫、鼠血清共17份，IHA检测结果均为阴性。小型兽类脏器分离培养鼠疫菌、胶体金试纸条检测均为阴性；自毙小型兽类RIHA检测阴性。结论:玉龙县鼠疫自然疫源地新增一个鼠疫指示动物阳性点，应加强该区域的鼠疫疫情监测和防控。

目的:构建新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2)和甲型流感病毒双价DNA疫苗，并在小鼠模型中评价其免疫原性。方法:将SARS-CoV-2 Beta突变株S1蛋白编码序列和甲型流感病毒Cambodia (H3N2)株HA蛋白编码序列进行密码子优化合成，采用Over-lapping PCR方法，将两个编码基因通过自裂解2A肽(self-cleaving 2A peptides)序列连接成S1-2A-HA片段，构建能同时表达S1蛋白和HA蛋白的双价DNA疫苗，命名为pVRC-S1-2A-HA，间接免疫荧光和Western blot验证S1蛋白和HA蛋白的表达。将DNA疫苗以肌肉注射加电转途径(IM＋EP)免疫BALB/c小鼠，间接ELISA、假病毒中和试验和血凝抑制试验检测小鼠体液免疫应答，IFN-γ ELISPOT、胞内细胞因子染色(intracellular cytokine staining，ICS)和CBA法检测小鼠细胞免疫应答。结果:双价DNA疫苗pVRC-S1-2A-HA可以同时表达S1蛋白和HA蛋白，初次免疫后能够显著诱导小鼠产生针对S1蛋白的特异性细胞免疫和针对HA蛋白的特异性IgG结合抗体；加强免疫后特异性免疫应答都显著增强，针对S1蛋白的特异性IgG结合抗体几何平均滴度(geometric mean titer，GMT)提高至3 251，细胞免疫提高至1 238 SFC/10 6个细胞，针对HA蛋白的特异性IgG结合抗体GMT达到45 407。ICS法检测到疫苗加强免疫可诱导小鼠CD4 ＋和CD8 ＋T细胞产生IL-2、IFN-γ、TNF-α；CBA结果显示单针免疫后小鼠脾细胞分泌多种细胞因子(IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ)。 结论:本研究成功构建能同时表达SARS-CoV-2 S1蛋白和甲型流感病毒H3N2亚型HA蛋白的双价DNA疫苗，该疫苗可诱导产生针对S1蛋白和HA蛋白的特异性体液免疫和细胞免疫应答，具有较好的研发与应用前景。

目的:探究新疆荒漠肉苁蓉粗多糖(crude polysaccharides from Cistanche deserticola Y．C.Ma, CPCD)配伍流感病毒疫苗(influenza virus vaccine，IVV)的抗原节约作用。 方法:一定剂量的CPCD配伍低剂量(0.01 μg)或高剂量(0.1 μg)的IVV皮下途径免疫小鼠，血凝抑制(hemagglutinin inhibition, HI)试验检测血清中HI抗体滴度；间接ELISA法检测血清中特异性抗体及亚型的水平；MTT法检测脾脏淋巴细胞增殖水平；流式细胞术检测脾脏细胞中T淋巴细胞亚群及胞内细胞因子IFN-γ的表达水平。结果:CPCD可以显著增强血清中HI抗体滴度(234.67±47.70 vs 149.33±47.70, P<0.05)，促进特异性IgG( A450值：1.16±0.63 vs 0.30±0.21, P<0.05)和IgG1( A450值：1.09±0.60 vs 0.26±0.21, P<0.05)抗体水平的提高，并促进脾脏淋巴细胞增殖( P<0.05)。CPCD还可显著提高CD4 +[(41.97±4.58)% vs (25.43±1.48)%, P<0.05]、CD8 +[(12.67±0.33)% vs (9.02±1.07)%, P<0.05]及CD4 +CD44 +[(11.77±0.69)% vs (8.64±0.71)%, P<0.05]、CD8 +CD44 +[(6.70±0.67)% vs (4.66±0.39)%, P<0.05] T淋巴细胞亚群的比例及胞内细胞因子IFN-γ[CD4 +：(1.36±0.07)% vs (0.87±0.06)%, CD8 +：(2.09±0.20)% vs (1.42±0.08)%, P均<0.05]的分泌水平。CPCD配伍IVV的低剂量组和IVV高剂量组之间差异无统计学意义( P>0.05)，显示可以节约10倍IVV抗原用量。 结论:CPCD配伍IVV可以显著增强体液免疫应答和细胞免疫应答，具有抗原节约作用，为IVV新型佐剂的研究提供实验参考，并具有应用于季节性流感和流感大流行防治的潜力。

目的:分析呼伦贝尔高原蒙古旱獭鼠疫自然疫源地鼠疫监测结果，掌握该疫源地鼠疫疫情的发展和变化特点。方法:2009 - 2020年，每年5 - 9月在满洲里市、陈巴尔虎旗、新巴尔虎左旗、新巴尔虎右旗开展监测，采用一日弓形夹法调查达乌尔黄鼠密度，5 m夹线法调查其他小型啮齿类动物；对达乌尔黄鼠体外寄生蚤，于低倍光镜下进行分类鉴定，对获取的鼠、蚤可检材料，按照《鼠疫诊断标准》（WS 279-2008），进行鼠疫耶尔森菌（鼠疫菌）分离培养；采集捕获的活鼠血清，采用间接血凝试验进行鼠疫抗体检测。结果:2009 - 2020年，呼伦贝尔高原蒙古旱獭鼠疫自然疫源地达乌尔黄鼠平均密度为0.45只/hm 2；其他小型啮齿类动物捕获率为1.25%（787/63 091），共获鼠类4科8属9种；达乌尔黄鼠总染蚤率为28.37%（1 945/6 856），蚤指数为1.04，共获蚤类2科3属3种；共剖检达乌尔黄鼠6 674只，培养各种蚤类2 537组6 787只，鼠疫菌检测结果均为阴性；共检测达乌尔黄鼠血清6 795份，检出阳性血清11份，阳性检出率为0.16%，阳性血清最高滴度为1∶1 280。2010 - 2014年连续5年均发现间接血凝试验阳性血清，且均分布在满洲里市、新巴尔虎右旗。 结论:呼伦贝尔高原蒙古旱獭鼠疫自然疫源地多个年度检出达乌尔黄鼠鼠疫菌抗体阳性血清，值得高度警惕，今后应持续开展监测工作，加强检菌工作，以及时发现可能存在的鼠疫疫情，做好各项鼠疫防控工作。

森林脑炎是经硬蜱叮咬传播的自然疫源性疾病，其病原为黄病毒科中蜱传脑炎病毒。森林脑炎病死率较高，实验室检测对此病诊断有重要意义。本文对森林脑炎的病原学诊断方法及研究新进展进行阐述。森林脑炎实验室检测主要为常规检查、血清学检测、病毒分离、分子生物学检测。森林脑炎病毒血清特异性IgM抗体对早期诊断有重要价值，特异性IgG抗体可作为与其他疾病鉴别的"金标准"。酶联免疫吸附试验或间接免疫荧光法测血清和/或脑脊液中特异性IgM抗体，血清血凝抑制试验或血清补体结合试验，双份血清血凝抑制试验或补体结合试验均有助于早期诊断。分子技术检测方法发展迅速，代谢组学、数字PCR、基质金属蛋白酶亦应用于森林脑炎的早期诊断。

目的 对青海省同仁县喜马拉雅旱獭血清中鼠疫耶尔森菌(Yersinia pestis)相关抗体进行检测,为鼠疫流行病学调查和鼠疫菌在自然界保存机制研究提供参考依据.方法 以 2021 年青海省同仁县采集的 200 份喜马拉雅旱獭血清为样本,利用鼠疫间接血凝试验检测旱獭血清中鼠疫菌F1 抗体;以青藏高原鼠疫疫源地分离的 1 株野生型鼠疫噬菌体 476 和实验室诊断用鼠疫噬菌体作为抗原,利用微量板法和双层琼脂平板法检测旱獭血清中的特异性鼠疫噬菌体免疫抗体.结果 喜马拉雅旱獭血清中鼠疫菌F1 抗体检测结果为阴性;2株鼠疫噬菌体分别与 200 份喜马拉雅旱獭血清进行中和试验,通过点滴法均未检测到与鼠疫噬菌体抗原反应的特异性噬菌体免疫抗体.结论 青海省同仁县喜马拉雅旱獭血清中既未发现鼠疫菌F1 抗体,也未发现特异性鼠疫噬菌体抗体,二者均间接说明同仁县采样地点的鼠疫疫源地正处于静息期状态.

目的 分析2011-2020年北京市鼠疫人间及动物间监测情况,为制订针对北京市的鼠疫防控措施提供基础资料.方法 在全市发热门诊和门、急诊室进行鼠疫人间病例的相关症状监测工作;动物间监测采用5 m夹线法进行捕鼠,捕到的小型鼠类进行鉴定、解剖、实验室检测后将信息记录汇总.收集2011-2020年北京市鼠疫监测数据进行回顾性描述分析.结果 2011-2020年,北京市人间鼠疫监测共发现2例人间病例,均为肺鼠疫,为内蒙古自治区来京就医人员,其中1例病例死亡;动物间监测方面,10年来共布夹(笼)46053次,捕获小型鼠类4科9属10种共计1585只,总鼠密度为3.44/100夹次.优势鼠种为社鼠(37.22％,590/1 585)、褐家鼠(24.10％,382/1585)、岩松鼠(15.52％,246/1585)及大林姬鼠(13.25％,210/1585),占总捕获数的89.97％.通过间接血凝试验对采集的1175份血清进行检测,未发现鼠疫F1抗体阳性标本.结论 2011-2020年北京市鼠种较为稳定,鼠密度处于较低水平,但北京市周边动物鼠间疫情较为活跃,应加强鼠疫人间及动物间疫情监测工作,做好健康教育,严防输入性鼠疫疫情.

目的 调查、证实新疆维吾尔自治区(新疆)阿勒泰山地是否存在鼠疫自然疫源地.方法 2021-2022年在阿勒泰山地(青河县、福海县、阿勒泰市)开展鼠疫疫源性调查,采用鼠疫细菌学、血清学、分子生物学对捕获和捡拾的啮齿类动物脏器、血清、心脏浸液、媒介寄生蚤进行实验室检验检测,鉴定分离鼠疫耶尔森菌株的生化表型.结果 鼠疫细菌学检验阿勒泰山地青河县、福海县和阿勒泰市捕获和捡拾的自毙啮齿动物合计115只,其中长尾黄鼠和灰旱獭为优势种,分别占总数的60.87％和20.87％,宿主寄生蚤9组136只,其中长尾黄鼠和灰旱獭寄生蚤的优势种分别为方形黄鼠蚤阿勒泰亚种和谢氏山蚤,分别占宿主寄生蚤的67.74％和100.00％.血清学检测血清样本86份、小型鼠心脏浸液21份、自毙啮齿动物脏器研磨液8份,荧光定量PCR方法检测自毙啮齿动物脏器组织提取核酸DNA 8份.1份长尾黄鼠血清鼠疫F1抗体阳性[间接血凝试验(IHA)滴度为1∶128,酶联免疫吸附试验(ELISA)滴度为1∶256].1份自毙灰旱獭脏器研磨液鼠疫Fl抗原阳性[反相间接血凝试验(RIHA)滴度为1∶64,ELISA滴度为1∶128].2份自毙长尾黄鼠脏器研磨液鼠疫F1抗原阳性(RIHA滴度分别为1∶512和1∶1 024;ELISA滴度分别为1∶2 048和1∶4 096).2份脏器组织鼠疫特异核酸阳性.分离到鼠疫耶尔森菌2株,生化鉴定为古典型,不具有酵解鼠李糖的特性.结论 新疆阿勒泰山地存在鼠疫自然疫源地,菌株生化鉴定为古典型.

目的 调查分析内蒙古自治区乌海市长爪沙鼠鼠疫疫源地2013-2022年长爪沙鼠密度、鼠类种类构成变化及鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)携带情况,为鼠疫监测和防控工作提供科学依据.方法 长爪沙鼠密度监测采用公顷夹日法,夜行鼠密度监测采用5 m夹线法,扩大检索采用逐日捕鼠法和主动踏查法,实验室采用显微镜涂片检查、细菌培养、噬菌体试验、间接血凝试验、反向血凝试验、PCR检测核酸方法检测鼠疫菌,采用描述性流行病学方法进行统计分析.结果 2013-2022年,公顷夹日法调查显示乌海市鼠疫疫源地长爪沙鼠平均鼠密度为0.65只/hm2;3种方法共捕鼠9种839只(含主动踏查收捡的2只自毙鼠),其中长爪沙鼠为优势鼠种,占57.21％;2020年检出鼠疫菌2株,PCR核酸检测鼠疫菌阳性2份,其他年份未检出阳性.结论 预计乌海市海南区长爪沙鼠鼠疫疫源地今后几年将处于弱流行期,但仍应持续加强鼠及鼠疫监测预警,加强疫源地内新建企业员工和农牧民的鼠疫健康教育和行为干预,及时发现动物间鼠疫疫情,防止人间鼠疫的发生.