目的:探索羟基红花黄色素A(HSYA)联合透明质酸酶(HAase)治疗透明质酸(HA)动脉栓塞的效果。方法:32只雄性白色家兔采用随机数字表法分为4组，每组8只，其中A、B、C组为试验组，D组为对照组。建立HA动脉栓塞模型：于兔耳背侧面以中央动脉为轴，距耳根部4.0 cm，蒂宽1.0 cm，切开大小为2.0 cm × 5.0 cm的矩形复合组织瓣(深度达耳腹侧软骨膜)，原位连续缝合，自近端向远端分3等分(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ区)；距组织瓣近端1 cm与中央动脉交点为进针点，注入HA 50 μl。在栓塞60 min后，对各组进行治疗。A组：于大腿隐静脉缓慢注入HSYA溶液20 ml(HSYA按10 mg/kg计算用量)；B组：于耳进针点注入HAase溶液0.5 ml(400 U/ml)；C组：于耳进针点注入HAase溶液0.5 ml，大腿隐静脉缓慢注入HSYA溶液20 ml，药物剂量同A、B组；D组大腿隐静脉、耳进针点及A、B组除给药途径的另一注射部位给予等量生理盐水。腿部注药每日1次，共14 d。于术后即刻和第1、7、14天观察组织瓣情况，并拍摄兔耳背侧照和逆光照，计算术后第14天组织瓣成活面积百分比。术后第14天，对兔耳组织瓣Ⅱ区取材，做HE和Masson染色，并检测超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。符合正态分布计量数据以 ± s表示，多组间比较采用单因素方差分析，采用LSD检验分析两组间差异， P < 0.05认为差异有统计学意义。 结果:术后即刻各组组织瓣均呈苍白色。术后第1天，各组远端出现暗淡的缺血区。术后第7天，各组缺血区不同程度坏死、发黑，非坏死区肿胀明显。术后第14天，各组缺血区进一步坏死、发黑、卷曲、边界清；C组组织瓣缺血坏死情况最轻，D组最重，A、B组介于其间，A、C组非坏死区基本消肿。HE染色示：D组血管内形成大量血栓，大量炎性细胞浸润；B组次之；A、C组血栓少见。Masson染色示：C组胶原纤维排列规则；D组大量胶原纤维崩解断裂；A、B组介于其间。A、B、C、D各组组织瓣成活面积百分比分别为(69.87±5.04)%、(85.03±6.58)%、(93.93±4.25)%、(49.22±9.64)%，组间两两比较差异均有统计学意义( P均< 0.01)。A、B、C、D各组SOD活性分别为(49.83±8.08)、(36.65±5.49)、(55.61±7.93)、(22.45±5.47)U/mg prot，除A组与C组差异无统计学意义外，其余组间两两比较差异均有统计学意义( P均< 0.01)。A、B、C、D各组MDA含量分别为(0.77±0.17)、(1.03±0.16)、(0.68±0.12)、(0.41±0.09)nmol/mg prot，除A组与C组差异无统计学意义外，其余组间两两比较差异均有统计学意义( P均< 0.01)。 结论:动物实验条件下，与单独应用HAase相比，HSYA联合HAase能明显增强HA动脉栓塞的治疗效果，增加组织瓣成活面积比例。

眼的非视觉功能包括生物昼夜节律的调节以及生物感磁。生物感磁是指各种生物包括人类可通过地磁场获取方向位置信息。具有视网膜结构的生物可能是以视网膜隐花色素蛋白作为磁受体，完成生物感磁过程。生物感磁的假说分别是基于化学反应和自由基对的磁感应假说以及光磁耦合的生物指南针假说。这2个假说都认为视网膜上的分子可能是生物感磁的受体蛋白，眼可能是生物感磁的器官。但基于化学反应和自由基对的磁感应假说认为是通过自由基电子自旋方式的改变，影响了视网膜隐花色素蛋白的分子结构，引起下游化学反应产生不同的化学产物，从而感受到磁场的变化；光磁耦合的生物指南针假说指出隐花色素蛋白作为光受体，与另一种磁受体蛋白经过多聚反应形成棒状小体，光信号和磁信号的耦合影响了棒状的复合体指向的变化。这些视网膜上的改变再通过某种途径传输至大脑，从而产生方向感。研究生物感磁有助于从新的角度诊断和治疗眼脑疾病，并且带来磁敏材料领域的革新。本文就眼非视觉功能、生物感磁过程的机制假说和眼非视觉功能在生物感磁过程中可能的作用机制进行综述。

目的:探讨节律基因隐花色素2（CRY2）在银屑病小鼠模型及HaCaT细胞中的表达变化及其机制。方法:咪喹莫特诱导小鼠模型实验：12只C57BL/6雌鼠随机均分为咪喹莫特组（连续外用咪喹莫特乳膏5 d诱导构建银屑病小鼠模型，6只）和对照组（不予任何处理，6只），第6天处死小鼠，取其背部皮肤组织，免疫荧光染色检测表皮中CRY2的表达。HaCaT细胞转染实验：使用小干扰RNA（siRNA）技术在HaCaT细胞中敲减CRY2的表达（siRNA-CRY2组），以siRNA-NC组作为对照，5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷（EdU）染色检测HaCaT细胞增殖活力，实时荧光定量PCR（qPCR）检测HaCaT细胞中趋化因子mRNA表达水平，Western印迹检测细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）蛋白的磷酸化水平。肿瘤坏死因子α（TNF-α）刺激动物和细胞实验：12只C57BL/6雌鼠随机均分为TNF-α组（小鼠耳部皮下连续注射TNF-α溶液6 d，6只）和磷酸盐缓冲液（PBS）组（注射等量的PBS，6只），第7天处死小鼠，取其耳部皮肤组织，免疫荧光染色检测表皮中CRY2的表达；用50 ng/ml TNF-α刺激CRY2基因敲减的HaCaT细胞12 h（siRNA-CRY2 + TNF-α组），以siRNA-NC + TNF-α组作为对照，qPCR检测各组细胞中趋化因子mRNA的表达。统计分析采用两独立样本 t检验。 结果:免疫荧光染色显示，咪喹莫特组小鼠背部表皮层中CRY2蛋白的表达（0.94 ± 0.23）显著低于对照组（2.30 ± 0.25， t = 3.99， P = 0.016）。HaCaT细胞转染实验：siRNA-CRY2组EdU阳性细胞比例（48.13% ± 10.97%）显著高于siRNA-NC组（38.23% ± 0.81%， t = 5.00， P = 0.007），且siRNA-CRY2组趋化因子CXCL1、CXCL8 mRNA相对表达量及p-ERK1/2蛋白相对表达量均显著高于siRNA-NC组（均 P < 0.05），但两组间CCL20 mRNA表达量及ERK1/2蛋白表达量差异无统计学意义（均 P > 0.05）。TNF-α刺激实验：免疫荧光染色显示，TNF-α组鼠耳表皮组织中CRY2蛋白表达水平（0.37 ± 0.34）显著低于PBS组（2.04 ± 0.17， t = 4.38， P = 0.012）；siRNA-CRY2 + TNF-α组HaCaT细胞趋化因子CXCL1、CXCL8、CCL20 mRNA相对表达量均显著高于siRNA-NC + TNF-α组（均 P < 0.05）。 结论:CRY2在银屑病小鼠模型中表达降低，促进了角质形成细胞的增殖以及趋化因子CXCL1、CXCL8和CCL20的表达，且TNF-α可能是下调CRY2表达的上游细胞因子。

目的 探究铁硫簇结合蛋白1(ISCA1)磁场刺激后对细胞钙内流的影响.方法 ① 制备携带ISCA1基因的质粒、携带Magneto 2.0序列的质粒和空载质粒,且3种质粒均携带mCherry基因,包装成慢病毒感染HEK293A细胞,荧光显微镜观察慢病毒感染效率.②免疫共沉淀技术检测ISCA1与隐花色素1(CRY1)和CRY2蛋白之间的结合.③在磁场(40 mT,0.1 Hz,90%占空比)条件下,活细胞钙成像技术检测高表达ISCA1或Magneto 2.0细胞的钙内流.结果 ①在HEK293A细胞中观察到红色荧光,表明慢病毒转染成功.②外源ISCA1蛋白与内源CRY1或CRY2蛋白不结合.③与加磁前相比,加磁后Magneto 2.0组细胞的绿色荧光强度增加(1.8±0.5)倍(P<0.05),即发生显著的钙内流;而ISCA1组及细胞对照组细胞的绿色荧光强度与加磁前相比无显著差异.结论 外源高表达ISCA1的细胞在此磁场条件刺激后未引起细胞钙内流,无明显磁感应性.

目的:探索羟基红花黄色素A（HSYA）联合透明质酸酶（HAase）能否增强透明质酸（HA）动脉栓塞的治疗效果。方法:32只雄性白色家兔采用随机数字表法分为4组，每组8只，其中A、B、C组为试验组，D组为对照组。建立HA动脉栓塞模型：于兔耳背侧面以中央动脉为轴，距耳根部4.0 cm，蒂宽1.0 cm，切开大小为2.0 cm × 5.0 cm的矩形复合组织瓣（深度达耳腹侧软骨膜），原位连续缝合，自近端向远端分3等分（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ区）；距组织瓣近端1 cm与中央动脉交点为进针点，注入HA 50 μl。在栓塞60 min后，对各组进行治疗。A组：于大腿隐静脉缓慢注入HSYA溶液20 ml（HSYA按10 mg/kg计算用量）；B组：于耳进针点注入HAase溶液0.5 ml（400 U/ml）；C组：于耳进针点注入HAase溶液0.5 ml，大腿隐静脉缓慢注入HSYA溶液20 ml，药物剂量同A、B组；D组大腿隐静脉、耳进针点及A、B组除给药途径的另一注射部位给予等量生理盐水。腿部注药每日1次，共14 d。于术后即刻和第1、7、14天观察组织瓣情况，并拍摄兔耳背侧照和逆光照，计算术后第14天组织瓣成活面积百分比。术后第14天，对兔耳组织瓣Ⅱ区取材，做HE和Masson染色，并检测超氧化物歧化酶（SOD）活力和丙二醛（MDA）含量。符合正态分布计量数据以 ± s表示，多组间比较采用单因素方差分析，采用LSD检验分析两组间差异， P<0.05认为差异有统计学意义。 结果:术后即刻各组组织瓣均呈苍白色。术后第1天，各组远端出现暗淡的缺血区。术后第7天，各组缺血区不同程度坏死、发黑，非坏死区肿胀明显。术后第14天，各组缺血区进一步坏死、发黑、卷曲、边界清；C组最轻，D组最重，A、B组介于其间，A、C组非坏死区基本消肿。HE染色示：D组血管内形成大量血栓，大量炎性细胞浸润；B组次之；A、C两组血栓少见。Masson染色示：C组胶原纤维排列规则；D组大量胶原纤维崩解断裂；A、B组介于其间。A、B、C、D各组组织瓣成活面积百分比分别为（69.87±5.04）%、（85.03±6.58）%、（93.93±4.25）%、（49.22±9.64）%，组间两两比较差异均有统计学意义（ P均<0.05）。A、B、C、D各组SOD活力分别为（49.83 ± 8.08）、（36.65 ± 5.49）、（55.61±7.93）、（22.45±5.47）U/mg prot，除A组与C组差异无统计学意义外，其余组间两两比较差异均有统计学意义（ P均<0.05）。A、B、C、D各组MDA含量分别为（0.77±0.17）、（1.03±0.16）、（0.68±0.12）、（0.41±0.09）nmol/mg prot，除A组与C组差异无统计学意义外，其余组间两两比较差异均有统计学意义（ P均<0.05）。 结论:动物实验条件下，与单独应用HAase相比，HSYA联合HAase能明显增强HA动脉栓塞的治疗效果，增加组织瓣成活面积比例。

油茶(Camellia oleifera Abe.)是我国重要木本油料树种,具有重要的经济价值和社会效益.隐花色素(Cryptochrome)是植物蓝光受体之一,参与植物开花调控、光形态建成等生长发育过程.本研究从油茶华硕中克隆到CoCRY1基因,通过生物信息学分析发现,其CDS序列长度为2262 bp,编码的蛋白质序列包含684个氨基酸,蛋白分子式为C3454H5281N971O1027S18,分子量77.42 kDa,是一种不稳定的疏水蛋白,进一步分析表明其蛋白序列包含3个结构域,分别为DNA_photolyase、FAD_binding_7和Cryptochrome_C,可证明CoCRY1蛋白属于隐花色素家族.同源序列及系统发育树分析发现CoCRY1蛋白与茶树(Camellia sinensis)CsCRY1序列相似性最高.组织表达分析显示,CoCRY1的表达量在茎中最高,在花中最低.通过农杆菌转化得到CoCRY1基因异源表达的拟南芥(Arabidopsis thaliana)植株,并且从DNA水平及RNA水平鉴定到阳性植株,对CoCRY1异源表达的拟南芥进行表型分析发现,CoCRY1基因的过量表达导致拟南芥提前开花,并对下胚轴伸长具有光特异性的抑制作用.本研究通过生物信息学、定量分析及异源表达发现,油茶CoCRY1基因在油茶开花等生物学过程中具有重要作用.

目的 同时测定肤痒颗粒中新绿原酸、咖啡酸、绿原酸、隐绿原酸、羟基红花黄色素A、阿魏酸、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、洋川芎内酯A的含量,并进行化学模式识别.方法 UHPLC分析采用Waters Acquity UPLC? BEH C18色谱柱(150 mm×2.1 mm,1.7 μm);流动相乙腈-0.01%磷酸,梯度洗脱;体积流量 0.4 mL/min;柱温35℃;检测波长 278、322、325、390 nm.再进行热图聚类分析、主成分分析.结果 9 种成分在各自范围内线性关系良好(r>0.999 0),平均加样回收率 93.89%～102.25%,RSD 0.85%～2.88%.同一企业不同批次样品整体质量一致,而不同企业样品之间整体质量差异较大.2 个主成分累积贡献率大于 64%.结论 该方法简便准确,可为肤痒颗粒质量评价提供参考.

光照是影响植物生长发育的重要环境因子,开花是高等植物生活史上最重要的事件.植物通过光受体感知外界环境中的光照变化,激活一系列信号转导过程从而适时开花.该文介绍了高等植物光受体的种类、结构特征和生理功能的研究进展,并系统阐述了红光/远红光受体光敏色素、蓝光受体隐花色素以及FKF1/ZTL/LKP2等介导光信号调控植物开花的分子机制,包括光受体对CO转录及转录后水平调控和对FT转录水平的调控等.此外,还介绍了光受体整合光信号与温度和赤霉素等信号调控植物开花的研究进展,并展望了未来的研究方向.

目的 观察扁平不规则RPE脱离(FIPED)患眼脉络膜新生血管(CNV)发生情况.方法 回顾性病例分析.频域OCT检查发现FIPE而未能确定诊断的45例患者49只眼纳入研究.其中,男性25例28只眼,女性20例21只眼.平均年龄(61.02±9.29)岁.患者均行FFA、ICGA、频域OCT以及OCTA检查.FIPED定义为OCT B-scan图像中RPE呈不规则状隆起,同时Bruch膜清晰可见.OCTA的CNV诊断标准:视网膜深层至脉络膜层出现异常血管信号.根据OCT图像特征将CNV分为1型CNV、2型CNV.根据FFA影像特征将CNV分为典型性、隐匿性CNV.49只眼中,眼底血管造影检查发现伴CNV 18只眼(36.7％),未见CNV特征性表现31只眼(63.3％).FFA检查发现典型CNV1只眼,隐匿型CNV7只眼,OCT确诊均为1型CNV;透见荧光等41只眼.ICGA检查,CNV样强荧光斑、晚期可疑强荧光斑、脉络膜高通透性等分别为18、20、11只眼;18只CNV眼OCT确诊为1型CNV.对比观察OCTA、眼底血管造影对CNV的检出情况.结果 49只FIPED患眼中,OCTA检出1型CNV 36只眼(73.5％),FIPED内可见完全或部分强反射信号;未伴CNV 13只眼(26.5％),其中FIPED内呈部分强反射信号9只眼,呈弱反射信号4只眼.FFA检查为经典型及隐匿型CNV的1、7只眼,OCTA均检出1型CNV.ICGA检出CNV的18只眼中,OCTA同样发现1型CNV.ICGA晚期可疑强荧光斑20只眼中,OCTA检查发现1型CNV 17只眼;脉络膜高通透性等11只眼中,OCTA检查发现1型CNV 1只眼.OCT检查,伴CNV的36只眼中,神经上皮脱离(SRD)、未见SRD及视网膜层间囊腔分别为32、2、2只眼.结论 OCTA可发现73.5％的FIPED患眼伴CNV;与传统眼底血管造影比较,OCTA对FIPED下CNV的检出率更高.内部强反射信号的FIPED对1型CNV有一定的诊断价值.

自由基过度引起的氧化应激是多种疾病发生的因素.连翘花黄色素(forsythia flower yellow pigment,FFYP)中含有大量的抗氧化活性物质,但其对氧化应激的抵抗性仍不清楚.本文首先通过化学方法检测FFYP的体外抗氧化活性;用细胞内抗氧化活性(cellular antioxidant activity,CAA)方法检测FFYP细胞内抗氧化活性;然后以秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,C.elegans)为模型,检测FFYP对线虫氧化应激抵抗力及体内抗氧化指标的影响;用Daf-16和Skn-1突变体线虫和qRT-PCR实验探究其作用机制.研究结果表明,FFYP具有1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力,铁离子还原能力和活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)清除能力,并且具有浓度依赖性.用500 μmol/L的胡桃醌提供氧化应激压力时,FFYP能显著提高线虫在氧化应激下的寿命,表明FFYP可以提高线虫对氧化应激的抵抗力.进一步研究发现,FFYP可显著降低线虫体内ROS自由基含量,提高超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)活性,增加还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量,表明FFYP通过提高线虫体内抗氧化防御系统活性清除自由基来提高线虫对氧化应激的抵抗力.突变体线虫实验显示,FFYP对线虫延长氧化应激下寿命的效应在Skn-1突变体线虫中完全消失,在Daf-16突变体中效应被减弱.qRT-PCR实验也显示,Daf-16和Skn-1靶基因的表达量均被提高.表明FFYP对线虫氧化应激抵抗力提高的作用是通过Daf-16和Skn-1共同作用.这预示着FFYP具有很好的抗氧化及抗应激药用价值,有潜力成为一种新的有生物活性的天然色素.