目的:制备载顺铂抗前胃泌素释放肽(ProGRP)单抗靶向纳米微泡，并研究其对小细胞肺癌(SCLC)增殖抑制效果及抗癌的分子机制。方法:应用薄膜水化法制备载顺铂抗ProGRP单抗靶向纳米微泡，研究其理化性质；建立10只SCLC裸鼠皮下移植瘤模型，以空白纳米微泡作对照，分析载顺铂靶向纳米微泡的超声分子靶向显影效果；另建24只SCLC荷瘤裸鼠模型，随机分为4组：空白纳米微泡组、顺铂组、载顺铂纳米微泡组、载顺铂靶向纳米微泡组，计算抑瘤率。采用CCK8法检测其对SCLC增殖的影响；运用RT-PCR和Western blotting分析4个处理组SCLC增殖相关基因P53、Rb、c-myc的mRNA和蛋白水平变化。结果:成功制备载顺铂抗ProGRP单抗靶向纳米微泡，粒径为(467.3±42.3)nm，结构稳定；载顺铂靶向纳米微泡在SCLC裸鼠移植瘤体内具有良好的超声分子显影效果，可明显抑制SCLC增殖；RT-PCR和Western blotting显示，与对照组相比，载顺铂靶向纳米微泡组的增殖相关基因P53、Rb的mRNA和蛋白水平显著上调，c-myc的mRNA和蛋白水平显著下调(均 P<0.05)。 结论:载顺铂靶向纳米微泡对SCLC具有抑制增殖的作用，可作为一种治疗SCLC的新型潜在靶向药物。

目前肿瘤的治疗方式包括手术治疗、放疗、化疗、基因治疗、免疫治疗和中医中药治疗等，化疗是其中一种极其重要的治疗方式。然而，无论口服还是静脉等给药方式，化疗药物进入血液循环后导致药物利用率低、不良反应明显。超声联合微泡介导药物释放是一种有效的非侵入性、靶向给药传递技术，在超声波脉冲驱动下，微泡以每秒几十到几百米的速度振荡，可以偏转到血管壁或破碎成纳米量级的颗粒。同时，在聚焦的超声束作用下数百万的微泡发生爆破，可以增加细胞膜的通透性，靶向、无创、可逆地开放血脑屏障或血肿瘤屏障，从而有利于提高化疗药物的利用率、降低化疗药物的不良反应。本文主要对超声联合微泡介导药物靶向治疗肿瘤的研究进展进行综述。

目的:制备靶向递送Toll样受体4（Toll-like receptor 4，TLR4）激动剂的细胞膜包被纳米囊泡，探讨其诱导肿瘤相关巨噬细胞极化治疗骨肉瘤的作用及其机制。方法:通过聚碳酸酯膜挤出器制备载TLR4激动剂的细胞膜包被纳米囊泡，利用透射电镜和粒度仪检测其形状及粒径，并测量和计算纳米囊泡对TLR4激动剂的载药性能。将载TLR4激动剂纳米囊泡应用DiD红色荧光染料标记后与巨噬细胞体外共孵育培养，通过共聚焦荧光显微镜检测纳米囊泡对巨噬细胞的靶向性及调控巨噬细胞功能的作用。体外细胞实验中构建细胞共培养体系，未处理组、TLR4激动剂组、载TLR4激动剂纳米囊泡组分别处理上层巨噬细胞后，收集下层骨肉瘤细胞进行CCK-8、克隆形成实验，评估对骨肉瘤细胞活力、增殖等功能的影响。动物实验中构建小鼠骨肉瘤皮下移植瘤模型，将小鼠随机分为未处理组、TLR4激动剂组、载TLR4激动剂纳米囊泡组。尾静脉注射后利用小动物活体成像实验观察纳米囊泡的体内肿瘤靶向性，连续检测计算肿瘤组织的体积。取皮下移植瘤切片染色标记巨噬细胞相关标志物，评估其对巨噬细胞极化的作用；切片行TUNEL荧光染色观察骨肉瘤细胞凋亡水平。结果:透射电镜显示载TLR4激动剂纳米囊泡呈圆形，粒径约200 nm。0.05 mg TLR4激动剂与0.1 mg纳米囊泡共孵育是制备载药纳米囊泡的最佳条件，包封率约35%，载药量约0.11 mg/mg，可高效装载递送TLR4激动剂。共聚焦荧光显微镜显示DiD标记的载TLR4激动剂纳米囊泡在巨噬细胞中明显聚积，且M1型巨噬细胞标志物（iNOS）荧光明显增强，可诱导巨噬细胞发生M1型极化。体外细胞实验光镜下可见载TLR4激动剂纳米囊泡组骨肉瘤细胞数量明显减少，细胞皱缩、变圆；CCK-8、克隆形成实验显示，相比未处理组和TLR4激动剂组，载TLR4激动剂纳米囊泡组骨肉瘤细胞活力、增殖能力明显降低。小动物活体成像实验显示载TLR4激动剂纳米囊泡在体内肿瘤组织局部富集，而在全身其他脏器无分布。载TLR4激动剂纳米囊泡组肿瘤组织生长明显被抑制，取皮下移植瘤切片染色显示M1型巨噬细胞标志物（iNOS）荧光明显增强（iNOS相对荧光强度为3.27±0.19），而M2型巨噬细胞标志物（CD163）荧光明显下降（CD163相对荧光强度为0.14±0.04）。TUNEL荧光染色显示骨肉瘤细胞凋亡水平明显升高（TUNEL相对荧光强度为9.53±0.21）。结论:细胞膜包被纳米载TLR4激动剂囊泡可靶向递送TLR4激动剂至骨肉瘤肿瘤组织，诱导肿瘤相关巨噬细胞极化，重塑肿瘤免疫抑制微环境，促进骨肉瘤细胞凋亡，从而杀伤骨肉瘤。

目的:制备肿瘤识别与人类表皮生长因子受体2(HER2)识别的双靶向纳米级超声造影剂，体外实验比较单靶性(肿瘤靶向/HER2靶向)与双靶向(肿瘤＋HER2)纳米微泡(nanobubbles，NBs)对HER2阳性乳腺癌细胞的靶向结合能力。方法:改良型薄膜水化法制备纳米级超声造影剂NBs，直接吸附法或"亲和素－生物素法"将近红外荧光染料(IR783)和生物素化的抗HER2分子(Affibody)与NBs结合，制备单靶向纳米超声造影剂(NBs-Affibody，NBs-IR783)和双靶向纳米超声造影剂(IR783-NBs-Affibody)，测量其粒径分布、稳定性和生物安全性等理化性质，通过流式细胞技术与免疫荧光成像技术比较以上造影剂对HER2阳性乳腺癌细胞的体外靶向识别能力。结果:NBs-Affibody、NBs-IR783、IR783-NBs-Affibody粒径分别为(538.4±95.8)nm、(551.8±114.8)nm、(482.7±54.3)nm。体外靶向结合实验显示NBs-Affibody、NBs-IR783、IR783-NBs-Affibody对HER2阳性乳腺癌细胞的靶向结合率分别为26.6%、97.6%、84.5%; HER2阴性乳腺癌细胞的靶向结合率分别为5.4%、99.9%、99.3%。双标流式细胞检测显示IR783-NBs-Affibody对HER2阳性乳腺癌细胞的IR783介导的肿瘤靶向结合率为79.5%，Affibody介导的HER2靶向结合率为19.4%；而NBs-IR783对HER2阳性乳腺癌细胞仅表现出IR783介导的肿瘤靶向结合，HER2靶向结合率仅为2.3%。结论:所制备的IR783-NBs-Affibody兼具肿瘤细胞及HER2分子的双靶向识别能力，可以更好地实现肿瘤异质性的靶向结合要求，优于单一靶向造影剂NBs-Affibody与NBs-IR783。

外泌体作为稳定存在于体液且富含遗传物质的双层脂质小泡，携载蛋白、核酸、脂质等活性物质，在细胞间进行信息传递并进而影响靶细胞的生物学行为。胰腺肿瘤细胞与间质细胞均可释放外泌体，存在交叉对话机制，在介导胰腺癌细胞恶性表型、耐药、免疫抑制微环境等方面具有重要作用。作为液体活检的手段之一，外泌体在胰腺癌诊断方面具有广阔的潜在应用前景。此外，外泌体表面分子具有可编辑性，作为纳米级微粒具有穿透生物屏障的能力，有望成为胰腺癌靶向及免疫治疗的载体。

目的:制备载miR-33反义核苷酸(ANM33)的双靶标脂质超声微泡(HA-PANBs)，体外评价其分阶段靶向泡沫细胞并实现细胞内精准释药的可行性。方法:设计以纳米泡NBs为微泡核心，透明质酸(hyaluronic acid，HA)第一阶段靶向受损内皮细胞，适配子PM1第二阶段靶向泡沫细胞，ANM33为治疗因子的双靶标脂质超声微泡。完成脂质泡表征的同时检测其稳定性及体外造影能力；随后建立受损人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和巨噬细胞(RAW264.7，MΦ)共培养模型，结合流式细胞术、油红O染色和小动物活体成像仪等评价HA-PANBs体外精准定位泡沫细胞并释放ANM33的能力。结果:制备的双靶标脂质超声微泡HA-PANBs形态规则，稳定性好，粒径为(1 357.53±140.20)nm，表面电位为(－5.61±0.73)mV，HA、PM1及ANM33均有效连接。在受损HUVEC/MΦ共培养模型中，HA-PANBs靶向下层泡沫细胞的效果最佳，且有效摄取量高达(80.65±2.12)%，较NBs组高56.74%；油红O染色显示HA-PANBs组泡沫细胞的胆固醇外排能力明显优于NBs组，差异有统计学意义[(629.80±21.99)a.u.比(1 071.00±55.49)a.u.， P<0.05]。 结论:构建的双靶标脂质超声微泡HA-PANBs能精准靶向泡沫细胞并显著增强其胆固醇外排能力，为实现动脉粥样硬化的早期无创诊疗提供了新策略。

目的:制备一种由肿瘤归巢穿膜肽(tLyP-1)修饰并携载金属多酚网络(TA-Fe 3+)工程化紫杉醇(PTX)的相变型脂质纳米粒，并评价其体外肿瘤靶向能力、超声/光声成像及光热联合化疗的治疗效果。 方法:采用溶剂置换法、薄膜水化法和双乳化法制备由tLyP-1介导的载TA-Fe 3+工程化的PTX的相变型脂质纳米粒(t-P@TFP)。检测其表征、体外靶向能力、光热转化能力、体外光声和超声成像能力；CCK-8法、细胞活死双染法、流式细胞术法检测纳米粒的安全性和不同纳米粒对4T1细胞的杀伤效果。 结果:成功制备t-P@TFP纳米粒，透射电镜显示纳米粒呈大小均一的球形，粒径为(209.8±1.56) nm，电位为(-25.9±1.36) mV。激光共聚焦显示t-P@TFP纳米粒能靶向聚集到4T1细胞周围；具有高效的光热转换效果，经近红外激光辐照后纳米粒能迅速变为微泡，增强体外超声成像效果；纳米粒光声信号随着浓度的升高而增强。CCK-8法、细胞活死双染法、流式细胞术检测均显示t-P@TFP的光热联合化疗的抗肿瘤效果最好。结论:成功制备t-P@TFP纳米粒，该纳米粒具有良好的靶向能力，可用于光声和超声成像，有良好的光热效应，对乳腺癌细胞有杀伤作用，有望实现诊疗一体化。

目的:探讨应用纳米脂质体结合超声靶向微泡爆破(UTMD)技术介导改构型酸性成纤维细胞生长因子(MaFGF)对糖尿病(DM)早期大鼠左心室收缩功能的影响。方法:采用逆相蒸发法制备包载MaFGF的纳米脂质体。60只健康雄性SD大鼠随机挑选50只经腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立DM模型，其余10只作为对照组。将DM大鼠随机分为DM模型组、单纯MaFGF溶液组、MaFGF纳米脂质体组及MaFGF纳米脂质体＋UTMD组。DM模型诱导成功后每周干预两次，共计12周。各组于干预结束后行常规超声心动图及速度向量成像(VVI)检查，常规超声心动图测量左室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS)，VVI测定乳头肌水平左室短轴观各节段平均峰值速度(Vs)、径向应变(Sr)及径向应变率(SRr)。处死大鼠，取心脏组织，用天狼星红染色法和TUNEL染色测定各组大鼠心肌胶原容积分数(CVF)和心肌细胞凋亡指数(AI)，并通过透射电子显微镜观察心肌超微结构的变化。结果:本研究所制备的MaFGF纳米脂质体形态较圆整，分散均匀、稳定性好且包封率高。干预12周后，DM模型组LVEF、LVFS、Vs、Sr及SRr较对照组明显降低(均 P<0.05)，而MaFGF纳米脂质体＋UTMD组LVEF、LVFS、Vs、Sr及SRr较DM模型组及其他各干预组明显升高(均 P<0.05)。天狼星红染色及TUNEL染色结果显示，DM模型组CVF、AI明显高于对照组(均 P<0.05)；MaFGF纳米脂质体＋UTMD组CVF、AI较DM模型组及其他各干预组显著减低(均 P<0.05)。透射电镜结果显示，与DM模型组相比，MaFGF纳米脂质体＋UTMD组心肌超微结构改善最为明显。 结论:应用纳米脂质体结合微泡靶向技术介导MaFGF可有效改善DM大鼠左心室收缩功能，其机制主要是MaFGF通过抑制心肌间质纤维化和减少心肌细胞的凋亡，从而实现心脏的保护作用。

目的:探讨自制的诊疗一体化相变纳米液滴"IR780/叶酸－纳米液滴－多西紫杉醇(IR780/FA-Nds-DTX)"作为分子靶向超声造影剂，对胰腺癌荷瘤裸鼠的精准诊断和联合靶向治疗效果。方法:体外培养胰腺癌细胞系，建立异位皮下移植胰腺癌荷瘤裸鼠模型50只，双模态靶向成像分实验组(IR780/FA-Nds-DTX)和4个对照组[生理盐水、Nds(FITC)、FA-Nds(FITC)、IR-780]。小动物活体成像验证IR780/FA-Nds-DTX对肿瘤的体内高效靶向探测能力及近红外荧光成像，低强度聚焦超声诱导相变及进一步超声造影成像验证IR780/FA-Nds-DTX在肿瘤局部的高效聚集及对肿瘤轮廓的精准评估。治疗效果观察分实验组(IR780/FA-Nds-DTX)和4个对照组(FA-Nds-IR780、FA-Nds-DTX、FA-Nds和生理盐水)。低强度聚焦超声辐照30 s诱导各组相变后的微泡爆破后，808 nm光热治疗仪分组辐照肿瘤局部，治疗前及治疗后3 d、9 d、15 d分别用二维超声监测各组荷瘤裸鼠肿瘤体积变化并记录，对比各组肿瘤体积变化率及抑制率。结果:IR780/FA-Nds-DTX在肿瘤局部靶向聚集的量最多，实验组肿瘤平均荧光强度明显高于对照组：IR780/FA-Nds-DTX组比Nds(FITC)组[(5.12±0.69)×10 7比(1.06±0.23)×10 7， P<0.05]，IR780/FA-Nds-DTX组比FA-Nds(FITC)组[(5.12±0.69)×10 7比(2.98±0.34)×10 7， P<0.05]，IR780/FA-Nds-DTX组比IR-780组[(5.12±0.69)×10 7比(1.54±0.42)×10 7， P<0.05]，生理盐水组肿瘤局部无荧光显示。进一步液滴相变后形成的超声增强显影能更精准定位肿瘤边界。光热消融联合化疗后第15 d，IR780/FA-Nds-DTX治疗组肿瘤体积增长率较各对照组明显减低：IR780/FA-Nds-DTX组比FA-Nds-IR780组[(0.105±0.075)比(0.405±0.175)， P<0.05]，IR780/FA-Nds-DTX组比FA-Nds-DTX组[(0.105±0.075)比(1.385±0.035)， P<0.05]，IR780/FA-Nds-DTX组比FA-Nds组[(0.105±0.075)比(2.255±0.105)， P<0.05]，IR780/FA-Nds-DTX组比生理盐水组[(0.105±0.075)比(2.185±0.155)， P<0.05]。而肿瘤体积抑制率明显增高：IR780/FA-Nds-DTX组比FA-Nds-IR780组[(0.93±0.06)比(0.48±0.17)， P<0.05]，IR780/FA-Nds-DTX组比FA-Nds-DTX组[(0.93±0.06)比(－0.51±0.105)， P<0.05]，IR780/FA-Nds-DTX组比FA-Nds组[(0.93±0.06)比(－1.63±0.115)， P<0.05]，IR780/FA-Nds-DTX组比生理盐水组[(0.93±0.06)比(－1.35±0.245)， P<0.05]。 结论:自制的诊疗一体化双模态相变纳米液滴超声造影剂IR780/FA-Nds-DTX在胰腺癌微小病灶甚至转移灶的精准靶向探测与联合靶向治疗中具有较好的潜在临床应用价值。

铜是生命体重要的微量元素之一,铜缺乏和铜过载均会对细胞造成损害,因此,细胞内的铜含量维持在一个合理的范围内十分重要.铜死亡是被确立的一种新型独立的程序性细胞死亡方式,主要是线粒体功能受损,细胞中铜过载会导致三羧酸循环中的酯酰化蛋白异常寡聚,铁-硫簇蛋白丢失,造成蛋白毒性应激反应,从而破坏细胞内稳态引发铜死亡.肝细胞癌(HCC)中的铜浓度高于正常是铜死亡发生的条件之一.铜死亡在HCC发生发展中至关重要,对促进血管生成、免疫逃逸、调节经典信号通路以及诱导其他细胞死亡方式等方面发挥了重要作用.铜死亡影响细胞稳态、参与调节多种生物学过程;在HCC免疫微环境中,生物信息学分析揭示了铜死亡与CD8+T细胞、滤泡树突细胞、T辅助细胞等免疫细胞浸润具有相关性,其分子调控机制在克服靶向药物的耐药性中具有潜力,包括抗PD-L1的免疫逃逸、抗索拉非尼耐药性等.铜离子载体双硫仑可激活其他细胞死亡程序,增强了 HCC治疗的敏感性及克服耐药性,铜纳米颗粒联合铜离子载体的抗肿瘤策略具有发展前景.基于铜死亡相关基因建立HCC预后模型存在优势,但仍需要进一步的机制研究和临床验证.综上,笔者就铜死亡在HCC发病机制中的重点进展和关注点进行总结和论述,以期为相关研究提供参考.