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一种动态观察大鼠胰腺腺泡细胞Ca 2+浓度的流式检测方法
编辑人员丨5天前
目的:探索一种简便的动态检测胰腺腺泡细胞内钙离子浓度的方法。方法:无菌采集大鼠胰腺,去除脂肪和淋巴组织,37 ℃预热的胶原酶消化胰腺组织,分离大鼠胰腺腺泡细胞。加入钙离子荧光探针Fluo-3/AM负载腺泡细胞,流式细胞仪动态监测腺泡细胞内钙离子浓度变化。结果:对照组腺泡细胞处于静息状态,钙离子荧光强度稳定,8只大鼠胰腺腺泡细胞内钙离子浓度随时间变化趋势一致,平均荧光强度值为307.75±36.45( n=8);刺激组加入牛磺胆酸钠后腺泡细胞钙离子荧光强度升高,第27.76秒达峰值,检测结果稳定。 结论:流式细胞仪为腺泡细胞钙离子浓度和细胞功能研究、及后续急性胰腺炎发病机制的研究提供另一简便易行的方法。
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编辑人员丨5天前
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超声治疗用于脓毒症大鼠模型的效果初探
编辑人员丨5天前
目的:将超声治疗方法用于脓毒症模型大鼠,并初步探讨其可能的作用机制。方法:选择78只雄性SD大鼠,按随机区组法分为假手术组(Sham组, n=12)、脓毒症模型组( n=22)、超声治疗组( n=22)、柠檬酸甲基卡可尼丁(MLA)联合超声治疗组( n=22)。Sham组仅开腹、找到盲肠、游离盲肠,但不进行盲肠结扎穿孔术(CLP);脓毒症模型组采用CLP复制脓毒症大鼠模型。术毕,每组大鼠皮下注射预热好的37℃生理盐水。超声治疗组大鼠给予超声治疗〔用飞利浦IU22 L9-3超声仪、9 MHz探头,在脾区每6 s进行击破序列1次,每次1 s,机械指数(MI) 0.72,治疗时间10 min〕。MLA联合超声治疗组于术前30 min腹腔注射α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)特异性阻断剂MLA 4 mg/kg,术后2 h进行超声治疗。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠术后24 h血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL-1β、IL-6)的含量;记录各组大鼠10 d存活率,并用临床疾病评分(CDS)评估各组大鼠表现;光镜下观察各组大鼠肺和结肠组织的病理学改变。 结果:与Sham组比较,脓毒症模型组大鼠10 d存活率降低〔40%(4/10)比100%(6/6)〕,术后24 h CDS显著升高(分:10.73±2.19比6.17±0.58),TNF-α、IL-6和IL-1β含量均明显增加〔TNF-α(ng/L):42.00±8.92比13.16±3.19,IL-6(ng/L):129.37±25.04比63.99±12.92,IL-1β(ng/L):254.98±67.27比76.83±25.39,均 P<0.01〕。与脓毒症模型组比较,超声治疗组大鼠存活率升高〔70%(7/10)比40%(4/10)〕,但差异无统计学意义( P>0.05),术后24 h CDS显著降低(分:7.64±2.68比10.73±2.19),TNF-α、IL-6和IL-1β含量明显减少〔TNF-α(ng/L):16.93±6.02比42.00±8.92,IL-6(ng/L):73.65±24.38比129.37±25.04,IL-1β(ng/L):111.86±14.08比254.98±67.27,均 P<0.01〕。与超声治疗组比较,MLA联合超声治疗组大鼠存活率有所降低〔60%(6/10)比70%(7/10)〕,但差异无统计学意义( P>0.05),术后24 h CDS显著升高(分:9.55±2.72比7.64±2.68),TNF-α、IL-6和IL-1β含量明显增加〔TNF-α(ng/L):34.61±7.89比16.93±6.02,IL-6(ng/L):112.92±10.42比73.65± 24.38,IL-1β(ng/L):212.57±32.16比111.86±14.08,均 P<0.01〕。光镜下可见,脓毒症模型组大鼠肺泡间隔增厚,大量炎性细胞浸润,正常肺组织网状结构消失,肺间质表现出明显的出血和水肿;结肠绒毛组织结构明显异常,细胞水肿、炎性细胞浸润明显,排列紊乱,并可见上皮下间隙及顶端脱落。经过超声治疗后大鼠肺泡间隔与Sham组厚度相当,无明显炎性细胞浸润,并可观察到肺组织网状结构较完整;结肠绒毛形态基本正常,排列有序,细胞水肿不明显,未见明显皮下间隙及顶端脱落。通过MLA拮抗后大鼠肺组织表现为肺泡间隔增厚、炎性细胞浸润,肺网状结构不完整,间质出现出血和水肿;结肠绒毛结构依稀可见,细胞水肿、炎性细胞浸润明显,排列不规整。 结论:超声治疗可改善脓毒症大鼠预后,MLA通过拮抗α7nAChR可逆转超声治疗的抗炎效应,提示超声对脓毒症的保护机制可能与激活α7nAChR介导的胆碱能抗炎通路有关。
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编辑人员丨5天前
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亚低温对脓毒症小鼠肺组织高迁移率族蛋白B1表达的影响
编辑人员丨5天前
目的:探讨自发性亚低温和干预性亚低温对脓毒症小鼠肺组织高迁移率族蛋白B1 (high mobility group box 1,HMGB1)表达的影响。方法:120只BALB/C小鼠(SPF级),随机编号,将号码为10的整数倍的小鼠共12只作为对照(normal control,NC)组,其余108只小鼠作为脓毒症组,以腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)10 mg/kg的方法建立脓毒症小鼠模型,NC组给予同等剂量的生理盐水。脓毒症组造模成功1 h后测量肛温,按T≤36℃和>36℃脓毒症小鼠分为自发性亚低温组和非亚低温组;在自发性亚低温组中,T<34℃的小鼠予以剔除,将剩余的脓毒症小鼠随机分成自发性亚低温观察(naturally occurring mild hypothermia,NOMH)组和保持正常体温(keep normothermia,KN)组,其中NOMH组不给予预热干预,而KN组放在保温箱保持肛门温度在36.0~37.5℃之间;非亚低温组脓毒症小鼠随机分成非亚低温观察(nonhypothermia,NH)组和人工获得性亚低温(artificial mild hypothermia,ATMH)组,NH组不给予降温治疗,而ATMH组给予物理降温法降温,使小鼠肛温维持在34~36℃。各组中分别在建模后6、12 h随机选取4只小鼠,采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测小鼠血清肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、HMGB1浓度。在12 h时,观察各组小鼠的生存率;选取4只小鼠处死后取肺组织,常规苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察肺组织病理变化,免疫组化染色观察HMGB1在肺组织中的表达;实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹法法分别从mRNA和蛋白水平检测HMGB1的相对表达变化。结果:(1)建模后12 h,NOMH组、ATMH组、KN组及NH组生存只数分别为36(40)、6(11)、27(40)、4(11),4组间比较,差异有统计学意义(χ 2=32.286, P=0.002),与另外3组脓毒症小鼠相比,NOMH组的生存率最高(与ATMH组:χ 2=5.222, P=0.022;与KN组:χ 2=6.050, P=0.013;与NH组:χ 2=11.672, P=0.001),但其余各两组之间比较,差异均无统计学意义( P均>0.05);(2)与NC组相比,各组脓毒症小鼠在6 h、12 h的血清TNF-α、IL-6及HMGB1浓度均明显升高( P均<0.05);与NOMH组相比,ATMH组、KN组、NH组小鼠在6 h、12 h的TNF-α、IL-6及HMGB1浓度均明显升高( P均<0.05);NH组在各时间点的TNF-α、IL-6、HMGB1浓度均为最高( P均<0.05);各组脓毒症小鼠组内不同时间点比较,12 h TNF-α浓度较6 h时下降( P均<0.05),而IL-6、HMGB1浓度在12 h时较6 h时上升( P均<0.05);(3)HE染色显示NOMH组肺组织损伤程度最轻,其次为ATMH组;(4)免疫组化染色显示HMGB1蛋白表达由少至多依次为NOMH、ATMH组、KN组和NH组;(5)NOMH组、ATMH组、KN组、NH组脓毒症小鼠肺组织HMGB1蛋白含量分别为0.280±0.013、0.320±0.016、0.340±0.018、0.380±0.014,HMGB1 mRNA相对表达量分别为4.86±0.22、6.02±0.18、6.26±0.20、7.98±0.28,分别较NC组(HMGB1蛋白含量:0.240±0.013,HMGB1 mRNA相对表达量:2.21±0.12)明显升高( P均<0.05);与NOMH组相比较,ATMH组、KN组、NH组肺组织中HMGB1蛋白、HMGB1 mRNA相对表达量均明显升高( P均<0.05),而NH组表达水平为最高( P均<0.05)。 结论:亚低温可能通过下调脓毒症小鼠肺组织HMGB1的表达,减轻肺组织损伤,自发性亚低温的改善更为显著。
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编辑人员丨5天前
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多中心质量改进循证实践降低极低出生体重儿的入院低体温发生率
编辑人员丨5天前
目的:探讨质量改进方法对降低多中心新生儿重症监护病房(neonatal intensive care unit,NICU)中极低出生体重儿(very low birth weight infant,VLBWI)的入院低体温发生率的有效性。方法:本研究为前瞻性队列研究,纳入2018年1月1日至2019年12月31日山东省共12家参与单位NICU的VLBWI,根据2018年12月为低体温质量改进预实验阶段,分为改进前组(2018年1月至11月)和改进后组(2019年1月至12月)。主要结局指标是入院低体温发生率;次要结局指标是入院体温;过程指标包括:环境(产房或手术室)温度提高至25 ℃、戴预热绒帽、塑料薄膜包裹、转运暖箱转运、记录生后10 min体温等措施的实施率。比较质量改进前后入院低体温发生率的变化情况。采用 χ 2检验或Fisher精确概率法、 t检验或秩和检验对数据进行分析。过程指标实施率与入院低体温发生的相关性采用Spearman分析。 结果:研究共纳入1 570例VLBWI,其中改进前组701例(44.6%),改进后组869例(55.4%)。质量改进后,VLBWI入院低体温发生率降低[93.7%(657/701)与75.9%(660/869), χ 2=90.68, P<0.001],入院体温升高[(35.7±0.6) ℃与(36.0±0.7) ℃, t=-3.35, P=0.001]。12家单位的过程指标总体实施率与入院低体温发生率呈负相关( r=-0.81, P<0.01),且12家单位的过程指标实施率各不相同,比如环境温度提高至25 ℃的实施率>90%和<80%各6家单位,不擦干塑料薄膜包裹的实施率>90%和<80%分别为5家和7家单位等。 结论:规范实施质量改进方法可以有效降低VLBWI的入院低体温发生率,提高参与单位各过程指标的实施率,有望进一步降低VLBWI入院低体温发生率。
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编辑人员丨5天前
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保存温度和保存时间对核事故剂量重建中贴片电阻光释光特性的影响
编辑人员丨1个月前
目的 为探索贴片电阻用于核事故后的回顾性剂量重建的可行性,分析保存温度和保存时间对贴片电阻光释光(OSL)特性的影响,探索降低二者影响的方法.方法 在不同参数条件下,利用丹麦Ris?公司的热释光和光释光自动测量仪对贴片电阻进行测量,分析不同保存温度和保存时间对贴片电阻OSL信号的影响.结果 贴片电阻在辐照后短时间(10 min)内OSL信号呈指数规律衰减,放置 2~7 d,测量计数的变化趋于稳定(计数变化<10%).在0.1~2 Gy辐照后保存 1~3 d贴片电阻的剂量线性响应良好.贴片电阻的OSL信号随保存温度的增加而减少,但采用 130℃预热 1 min可有效消除保存温度在 25~45℃范围内对贴片电阻OSL信号的差异.结论 贴片电阻样品的保存温度和保存时间均会影响其OSL信号,但采用 130℃预热 1 min的测量方法可使保存时间在 1~7 d和保存温度在 25~45℃的贴片电阻的OSL信号误差在 10%以内,证明了实际应用中预热测量的必要性,为贴片电阻可用于回顾性剂量重建提供了较为科学的测量方法和依据.
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编辑人员丨1个月前
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深圳市24家医院极/超早产儿产房过渡期管理的横断面调查
编辑人员丨2024/5/11
目的 了解深圳市极/超早产儿产房过渡期管理实施现状.方法 2022年1I月对深圳新生儿数据协作网的24家三级医院的极/超早产儿产房过渡期管理实施情况进行横断面调查,调查内容包括产前准备、产房复苏实施和新生儿重症监护室复苏后管理.根据胎龄将所纳入早产儿分为4组:<26周、26~28+6周、29~30+6周和31~31+6周组,对结果进行描述性分析.结果 共纳入140例极/超早产儿,其中<26周组10例,26~28+6周组45例,29~30+6周组49例,31~31+6周组36例.140例极/超早产儿中,99例(70.7%)接受了产前咨询,提供产前咨询的人员以产科医生为主,占比为79.8%;产时参与复苏的人员主要为助产士(96.4%)和新生儿科住院医师(62.1%);52例(37.1%)实施了延迟脐带结扎,平均延迟时间为(45±17)s;137例(97.9%)生后采用了预热辐射台保暖;110例(78.6%)需要正压通气,其中67例(60.9%)采用T组合复苏器,42例(38.2%)应用了空氧混合仪;119例(85.0%)复苏中进行了血氧饱和度监测;完成过渡期各项措施至关闭温箱门时间的中位数为87 min.结论 在深圳新生儿数据协作网医院中,极/超早产儿的产房过渡期管理实施与我国相应专家共识的要求存在不同程度的差异,需要通过多中心协作的持续质量改进缩小差距,从而改善极/超早产儿产房过渡期管理的质量和结局.[中国当代儿科杂志,2024,26(3):250-257]
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编辑人员丨2024/5/11
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大剂量静脉注射维生素C在危重症中的应用
编辑人员丨2024/2/3
维生素C是人类所必需的一种微量营养素.过去认为,维生素C缺乏可导致坏血病,而近年来大剂量静脉注射维生素C(high dose intravenous vitamin C,HDIVC)作为一种新的治疗手段在危重症领域受到广泛关注.本文从研究历史、应用合理性、研究争议和前景、存在问题和展望对HDIVC在脓毒症等危重症的应用进展进行综述.HDIVC在危重症中的应用大致经历了三个时期,即前期、预热期和爆发期.其应用合理性在于,危重症时人体中维生素C的水平降低,需经静脉迅速补充.笔者分别证实了HDIVC在新型冠状病毒肺炎(新冠肺炎)和重症急性胰腺炎中的治疗效果.HDIVC有抑制炎症反应、稳定循环和增强免疫的作用机制.但目前,HDIVC在危重症中的应用尚存争议.多项大规模随机对照试验存在相反的研究结果.今后的研究可能要在维生素C应用剂量和时间及浓度监测等方面进一步关注.
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编辑人员丨2024/2/3
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造影剂温度对输卵管超声造影不良反应的影响
编辑人员丨2023/10/28
目的 探讨造影剂温度对经阴道四维子宫输卵管超声造影检查(TVS 4D-Hycosy)以疼痛为主不良反应的影响情况.方法 双盲随机对照试验.纳入220例接受TVS 4D-Hycosy检查患者随机分配(1∶1),分别接受预热造影剂(38℃)和常温造影剂(22~26℃)检查,使用Stacey评分量表综合评价疼痛、恶心、呕吐等不良反应及使用NRS评分量表单独评价疼痛,对比两组宫腔置管后、检查过程中不良反应发生情况;检查结束后对比两组持续疼痛0 h、<0.5 h、<1 h、1~24 h、>24 h各时间段人数比例.结果 宫腔置管后两组Stacey不良反应评分及NRS疼痛评分差异无统计学意义(Z = 0.231、-0.341,均P>0.05);检查过程中预热组患者Stacey不良反应评分及NRS疼痛评分均低于室温组(Z = 2.906、3.837,均P<0.05),且中重度不良反应比例预热组低于室温组(χ2 = 7.502,P<0.05),两组差异有统计学意义;检查结束后两组持续疼痛0 h、<0.5 h、<1 h、1~24 h、>24 h各时间段人数比例差异无统计学意义(χ2 = 0.141、0.566、0.697、0.373,均P>0.05).结论 恒温预热造影剂可减少TVS 4D-Hycosy检查过程中的不良反应,是一种简单有效减轻患者痛苦的方法.
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编辑人员丨2023/10/28
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预热碘克沙醇在冠状动脉造影和PCI术中的应用
编辑人员丨2023/9/16
目的:探讨预热碘克沙醇在冠状动脉造影(CAG)和经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术中的安全性.方法:选取2014年1月—2019年12月于浙江省某三级甲等医院行CAG和PCI术中应用预热碘克沙醇的285例病人为研究对象,将其分为预热组和常温组,预热组将造影剂提前预热,常温组给予常温保存,比较两组注入药物即刻至术后7 d变态反应事件的发生率、术前2 h至术后48 h肌酐差值.结果:注入药物即刻至术后7 d内,预热组与常温组的变态反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05);预热组与常温组的手术前后肌酐差值比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论:预热碘克沙醇在CAG和PCI术中应用安全性较好,在围术期至7 d随访期内安全性良好.
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编辑人员丨2023/9/16
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泌尿外科腰麻微创手术患者术中低体温发生情况及其影响因素分析
编辑人员丨2023/8/6
目的 探讨泌尿外科腰麻微创手术患者术中低体温发生情况及其影响因素,为其术中采取保暖措施提供理论依据.方法 选取川南某三级甲等医院2016年7—12月泌尿外科腰麻微创手术患者227例作为研究对象,术前运用焦虑自评量表对其进行术前心理评估,术中监测患者体温的变化情况,并采用Logistic多元回归进行低体温的影响因素分析.结果 227例泌尿外科腰麻微创手术患者发生低体温92例,低体温发生率为40.5%.单因素分析结果显示:患者的年龄、每周运动次数、心理因素、手术时间、输液量、灌注量(输尿管管腔、输尿管肾盂内、膀胱内)相比,差异有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示:心理因素、手术时间、灌注量(输尿管管腔、输尿管肾盂内、膀胱内)是术中低体温的独立危险因素.结论 泌尿外科腰麻微创手术患者术中低体温发生率较高,心理因素、手术时间、灌注量是术中低体温的独立危险因素.对焦虑的患者术前访视应做好心理疏导,对长时间手术患者应采取综合保暖措施防护低体温,提前在恒温箱对灌注液进行预热,从而降低低体温的发生率,确保手术治疗效果及安全性.
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编辑人员丨2023/8/6
