目的 报告1例无输血史但产生高频抗体抗-Jra的孕妇抗体特异性鉴定过程.方法 采用盐水介质法和间接抗人球蛋白法(微柱凝胶卡、PEG)进行抗体筛选及抗体鉴定;检测患者除ABO血型外其他血型来排除相应的高频抗体;采用各种酶处理过的细胞与患者血浆反应,进一步判定抗体类型;采用人源抗-Jra检测患者Jra抗原,MAL-DI-TOF质谱检测体系对患者进行JR血型基因分型;测定抗体效价.结果 患者血型为O型RhD(+)、CcDEe,患者血浆与抗筛细胞以及抗体鉴定细胞盐水介质反应均阴性,抗人球蛋白介质反应均阳性,自身对照为阴性;患者Jra抗原血清学检测和质谱血型基因分型阴性;患者血浆抗-Jra效价为 1∶2.质谱发现其 4 号外显子存在纯合无义突变(c.376C＞T).结论 该患者因妊娠免疫产生同种高频抗原抗体抗-Jra.

目的:通过对一例女性高频抗原抗体(抗-Ku)病例进行血清学鉴定及血型基因测序分析,为高频抗原抗体的鉴定提供一定思路.方法:运用血型鉴定、患者红细胞抗原鉴定、抗体筛选、抗体鉴定等方式检测该患者的血型及抗体.以巯基试剂处理后的血清与筛选细胞反应、患者血清与酶或巯基试剂处理的筛选细胞反应的方式来判断该抗体的类型及特点,采用基因测序的方法确定患者血型的基因型.结果:该患者血型为O型RhD+,其血清与抗体筛选细胞及抗体鉴定细胞在间接抗人球及盐水介质中的反应呈强反应性,且强度一致,自身阴性,直接抗人球蛋白弱阳性;其他血型为 CcEe、Jk(a+b-)、P1-、Le(a-b-)、Lu(a-b+)、K-、k-、Kp(a-b-).血清经 2-ME处理后,在间接抗人球介质中仍与3组筛选细胞反应;血清与经木瓜酶、菠萝酶修饰后的筛选细胞反应强度不变,与巯基试剂DTT、2-ME处理后的筛选细胞反应为阴性.基因测序显示该患者KEL基因型为KEL*02N.24,为罕见的K0表型.结论:血清学试验和分子生物学实验鉴定出该患者为罕见的Kell-null血型(又称K0),该患者体内产生了 IgG及IgM性质的高频抗原抗体抗-Ku.血清学方法及分子生物学方法在此类稀有血型及高频抗原抗体的鉴定中具有重要意义.

目的 对1例高频抗体导致的胎儿新生儿溶血病(hemolytic disease of the fetus and newborn,HDFN)进行检测、鉴定及配血.方法 对患儿进行新生儿溶血试验,对母亲进行血清学意外抗体鉴定,并对母亲红细胞进行常见高频抗原鉴定;对检出抗体进行IgG分型检测,并用流式细胞术进行单核细胞体外吞噬致敏红细胞试验,以检测抗体相关的吞噬率;对患儿母亲、父亲及舅舅进行相关红细胞血型基因测序;利用稀释的母亲血浆和抗人球卡法,在献血者中进行大规模相合血液的筛选.结果 产妇鉴定为Di(b-)稀有血型,产生了抗-Dib(效价512)并导致了严重的HDFN:抗-Dib亚型分型为IgG1和IgG2型,单核细胞体外吞噬效率为88.83％(74.7/84.09);产妇亲属中没有相合献血者,后续从5 520名献血者中筛选到2例Di(b-)相合血液,患儿接收输血治疗后康复出院.后续在51 334名献血者中筛查到17名Di(b-)献血者,该数据表明Di(b-)在广州地区献血者中的分布频率约为三千分之一(0.033％,17/51 334).结论 综合利用血型血清学及分子生物学方法诊断了抗-Dib所致的严重HDFN,建立了 1种有效大规模筛查Di(b-)稀有血型的方法并找到相合血液,为建立Di(b-)稀有血型库奠定了基础.

Colton血型系统(CO,ISBT 015)包含一个高频等位基因和一个低频等位基因,分别表现为Coa和Cob抗原[1-2].第三个抗原Co3存在于除缺失型Co(a-b-)之外所有的细胞上.Colton抗体多为免疫抗体,因输血或怀孕所诱发.抗-Coa抗体可导致严重的新生儿溶血病和迟发性溶血性输血反应.抗-Cob 抗体常与其他血型抗体形成补体结合型抗Cob,引起速发性和迟发性溶血性输血反应[3-5].本研究对314名初次献血者Colton血型系统进行基因表型检测,并对扩增产物进行测序.现将结果报道如下.

目的 利用血型基因检测技术辅助鉴定1例高频抗原抗体.方法 采用血清学试验进行血型鉴定、特异性抗体鉴定及交叉配血,采用分子生物学技术进行Diego血型基因检测.结果 血清学试验结果提示患者血清中存在高频抗原抗体抗-Dib;基因测序结果显示患者Diego基因型为Di(a+b-);从856名献血者中筛选到2名献血者血液与患者相配合,基因型均为Di(a+b-).结论 以血清学试验为主、分子生物学技术为辅的联合检测手段,有助于高频抗原抗体的检出,对保障临床输血安全具有至关重要的意义.

目的 分析1例胎儿新生儿溶血病(hemolytic disease of the fetus and newborn,HDFN)产生的原因,初步探讨产妇Rh缺失型D--形成的遗传背景.方法 使用血清学方法对患儿及其母亲进行ABO血型、Rh分型,血液抗体细胞,谱细胞分析,探讨导致胎儿溶血的抗体以及Rh缺失型D-的血型血清学特点,对产妇进行RH基因序列分析.结果 患儿母亲血型为0型,血清学试验结果显示Rh缺失型D--,怀疑为多次妊娠产生针对Rh高频抗原的抗-Hr0,抗体通过胎盘屏障,使患儿获得针对Rh高频抗原的抗-Hr0,导致HDFN,基因检测结果为RHCE*Ce/RHCE*Ce.结论 对产妇开展Rh缺失型D--的形成机制进行深入研究,为HDFN换血治疗提供临床价值,也为特殊血型人群输血提供临床依据.

目的 调查有关RA病因学研究的医学文献,得出近期RA病因学研究热点.方法 应用美国国立医学图书馆开发的PubMed数据库进行近5年有关RA病因学的文献检索,应用书目共现分析系统(BICOMB)进行文献计量分析,SPSS 19.0软件进行聚类分析.结果 通过对RA病因学高频关键词聚类分析绘制树状图,总结得出了4大类研究热点:①抗风湿制剂的治疗及不良反应在RA疾病进展中的多方面效应;②RA的遗传学机制及其并发症的病因学研究;③血清自身抗原、抗体在RA病因中的免疫学作用;④免疫细胞及微RNA在RA病因学中的作用.并绘制战略坐标图分析各研究热点的发展现状和趋势.结论 近5年来,RA病因学研究的年度研究成果相对稳定,但各研究热点的发展现状及趋势有所不同,为研究人员了解RA病因学领域的现状及开展相关研究提供参考.

目的:采用多种生物信息学手段,提取并分析前期获得的重组炭疽疫苗免疫人体产生的抗体基因序列的特征信息,探究与抗体进化规律和功能预测相关的线索.方法:利用R、Perl等语言编写了一系列数据处理和接口程序,整合集成Change-O等相关程序集和R语言包构建抗体基因序列分析平台,对抗体重链基因的VDJ基因使用频率、聚类分布、CDR3区理化特性及体细胞高频突变模式进行信息提取,并通过在线服务器得到部分数据可视化结果.结果:前期获得的抗体基因序列中IGHV3、IGHD3和IGHJ4的使用频率最高,而IGHV3和IGHD5、IGHD6和IGHJ4、IGHV3和IGHJ4的组合是序列中出现频率最高的组合方式;23.3％的保护性抗原(PA)结合抗体都出现在同一个抗体聚类(239号克隆组)中;中和抗体HCDR3区较其他抗体对于碱性和酸性氨基酸使用频率较低,偏向于使用疏水性氨基酸;抗体的体细胞高频突变多发生在AAAAC、GTTAA、AGCTC、AAGTA等热点motif.结论:相关生物信息学手段能够有效处理和分析大量的抗体基因序列,研究结果和方法可为重组疫苗评价以及抗体鉴定和改造提供信息和方法学帮助.

世界范围内,宫颈癌是妇女第二位高发肿瘤.高危型人乳头瘤病毒(human papilloma-virus,HPV)持续感染是引发宫颈癌的主要原因,在所有高危型HPV中,HPV16流行最广泛.HPV主要衣壳蛋白(major capsid protein,L1)可以自组装成病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs),其形态及抗原性与天然病毒类似,可以刺激机体产生高效价保护性中和抗体.中和表位是HPV VLPs疫苗的结构基础,疫苗的效力主要取决于中和表位的完整性.目前基于中和单抗的HPV16表位研究取得了极大进展.随着免疫压力的增加,HPV16的型内变异株越来越多.1204条HPV16 L1氨基酸序列构建的进化树可以分为4个进化分支.同时,将其与114K参考序列相比,共挑选出8个"高频突变位点",6个"特有突变位点"和20个"表位相关位点".HPV诱导的中和抗体绝大多数都是型特异性的,但同一型别内的HPV所诱导的中和抗体对型别内的所有L1变异株是否都能保护尚无定论.剖析HPV16型的抗原表位及型内变异情况对设计高效价、高覆盖率的预防性疫苗至关重要.

目的 对罕见的抗-Jk3合并抗-cE的标本进行鉴定.方法 对被检标本分别做ABO血型、Rh血型和Kidd血型鉴定,并作Kidd血型的基因分型;尿素溶血实验以辅助鉴定Jk(a-b-)表型;血清学实验包括自身对照实验、直接抗人球蛋白实验和不规则抗体筛查;因实验室抗体鉴定用Jk(a-b-)表型红细胞为A型,故采用吸收放散实验鉴定标本是否有抗-Jk3.结果 被检患者血型为B型,DCCee,自身对照阴性,抗体筛查阳性,直接抗人球蛋白实验阴性;血清学和基因分型鉴定标本kidd血型为Jk(a-b-);尿素溶血实验结果为尿素抵抗.标本检出有抗-Jk3合并抗-cE抗体.结论 对罕见的抗高频抗原抗体,应采用灵活的血清学技术手段并细致分析,以达到鉴定的目的.