目的:评价富氢液对创伤性颅脑损伤(TBI)大鼠急性肺损伤的影响及核因子E2相关因子2/血红素氧合酶-1(Nrf2/HO-1)信号通路在其中的作用。方法:成年雄性SD大鼠48只，体重220~250 g，采用随机数字表法分为4组( n＝12)：假手术组(S组)、TBI组(T组)、TBI+富氢液组(T+H组)和TBI +富氢液+鸦胆子苦醇组(T+H+B组)。采用控制型皮质撞击损伤法制备TBI模型。T+H+B组于造模前10 d开始隔天腹腔注射Nrf2抑制剂鸦胆子苦醇0.4 mg/kg；T+H组和T+H+B组于造模后1和6 h时腹腔注射富氢液10 ml/kg。造模后24 h时，收集支气管肺泡灌洗液(BLAF)测定蛋白浓度，取右颈总动脉血和肺组织，采用ELISA法测定血清和肺组织TNF-α、IL-10和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的水平，测定肺组织湿重/干重(W/D)比值，HE染色后观察肺组织病理学结果并进行评分，采用Western blot法检测肺组织核Nrf2、总Nrf2和HO-1表达，RT-PCR法检测肺组织HO-1 mRNA表达。 结果:与S组相比，T组和T+H组BALF蛋白浓度、肺组织W/D比值和肺组织病理评分升高，血清和肺组织TNF-α、HMGB1和IL-10水平升高，肺组织核Nrf2、总Nrf2、HO-1及其mRNA表达上调( P<0.05)；与T组相比，T+H组BALF蛋白浓度、肺组织W/D比值和肺组织病理评分降低，血清和肺组织TNF-α和HMGB1水平降低，IL-10水平升高，肺组织核Nrf2、总Nrf2、HO-1及其mRNA表达上调( P<0.05)，T+H+B组上述指标差异无统计学意义( P>0.05)；与T+H组相比，T+H+B组BALF蛋白浓度、肺组织W/D比值和肺组织病理评分升高，血清和肺组织TNF-α和HMGB1水平升高，IL-10水平降低，肺组织核Nrf2、总Nrf2、HO-1及其mRNA表达下调( P<0.05)。 结论:富氢液可减轻TBI大鼠急性肺损伤，其机制与激活肺组织Nrf2/HO-1信号通路，抑制炎症反应有关。

目的:评价核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路在右美托咪定减轻大鼠脓毒症相关性脑病中的作用。方法:清洁级健康成年雄性SD大鼠90只，3～4月龄，体重300～400 g，采用随机数字表法分为5组( n＝18)：假手术组(Sham组)、脓毒症相关性脑病组(SAE组)、右美托咪定组(D组)、Nrf2抑制剂鸦胆子苦醇组(B组)和鸦胆子苦醇＋右美托咪定组(BD组)。采用盲肠结扎穿孔法(CLP)制备大鼠脓毒症相关性脑病模型，D组和BD组于造模前30 min时腹腔注射右美托咪定30 μg/kg，Sham组、SAE组和B组腹腔注射等容量生理盐水。B组和BD组于模型制备前10 d，隔天腹腔注射鸦胆子苦醇0.4 mg/kg。于CLP后24 h时处死大鼠取脑组织，观察病理学结果，计数存活神经元，计算神经元存活率，采用ELISA法测定TNF-α、IL-1β和IL-6含量，采用Western blot法测定Nrf2和HO-1的表达。 结果:与Sham组比较，SAE组脑组织TNF-α、IL-1β和IL-6含量升高，Nrf2和HO-1表达上调，神经元存活率降低( P<0.05)；与SAE组比较，D组脑组织TNF-α、IL-1β和IL-6含量降低，Nrf2和HO-1表达上调，神经元存活率升高( P<0.05)；与B组比较，BD组脑组织TNF-α、IL-1β和IL-6含量降低，Nrf2和HO-1表达差异无统计学意义( P>0.05)，神经元存活率升高( P<0.05)；与D组比较，BD组脑组织TNF-α、IL-1β和IL-6含量升高，Nrf2和HO-1表达下调，神经元存活率降低( P<0.05)。 结论:Nrf2/HO-1信号通路参与了右美托咪定减轻大鼠脓毒症相关性脑病的过程。

目的 探究鸦胆子素A对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞凋亡和侵袭的影响及相关分子机制.方法 CCK-8法和克隆形成实验分别检测鸦胆子素A对NSCLC细胞增殖和克隆形成影响;3D基质胶球侵袭和流式细胞术分别检测其对细胞侵袭和凋亡影响;Western blot检测上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)和凋亡关键蛋白表达;荷瘤裸鼠体内验证鸦胆子素A抗肿瘤作用;在线数据库、分子对接,DARTS实验分别预测和筛选鸦胆子素A作用靶点.结果 鸦胆子素A明显抑制NSCLC细胞增殖和克隆形成能力、诱导细胞凋亡、抑制细胞侵袭,上调 c-caspase3、c-PARP、Bax、E-cadherin 蛋白表达,下调 Bcl-2、N-cadherin、Vimentin、Snail 蛋白表达(P＜0.05);裸鼠荷瘤实验表明,注射鸦胆子素A后肿瘤体积和质量均明显减小(P＜0.05).靶点预测、分子对接结合DARTS综合分析发现,鸦胆子素A可增加HSP90α蛋白稳定性.结论 鸦胆子素A通过激活EMT信号引起NSCLC细胞EMT水平降低、诱导细胞凋亡,其可能是通过与HSP90α结合来调控细胞功能,发挥抗癌作用.

肿瘤是一类严重威胁人类生命健康的疾病,已经成为世界范围内的主要公共卫生问题,且在我国致死率居高不下[1-2].失控的细胞增殖和生长是引起肿瘤最主要原因.

目的 评价抗寄生虫中药水提物和有机溶剂粗提物体外对细粒棘球蚴的作用效果.方法 从感染绵羊肝脏细粒棘球蚴包囊中分离原头节,体外培养24h后,取活性大于95％的原头节(100 μl,约100个)加入96孔板,分别加入终浓度为0.8 mg/ml(低浓度组)、1.6 mg/ml(中浓度组)、3.2 mg/ml(高浓度组)的鸦胆子、苦楝皮、辣蓼、石榴皮、使君子、槟榔、贯众、鱼藤、马蔺子、五倍子和仙鹤草等11种抗寄生虫中药的水提物,体外作用72 h后,伊红染色法检测原头节活性,倒置显微镜观察下观察原头节的形态,计算死亡率;同时设相同浓度的阿苯达唑组和空白对照组.从具有体外抗原头节作用的中药中提取黄酮、多糖、皂苷和生物碱等粗提物,分别以终浓度1.00 mg/ml体外作用于原头节72 h后,观察原头节形态,计算死亡率;同时设空白对照组.对体外抗原头节效果明显的粗提物进行液相色谱与串联质谱联用分析.组间比较采用单因素ANOVA分析,两两比较采用LSD-t检验.结果 中药水提物作用72h后,鸦胆子、苦楝皮、辣蓼水提物高浓度组原头节边缘模糊,结构松散,基质溶解;其余8种中药水提物高浓度组原头节形态正常,各部分结构清晰;阿苯达唑组原头节生发层有轻微损伤;空白对照组原头节形态正常.体外培养72 h后,鸦胆子、苦楝皮和辣蓼水提物高浓度组原头节的死亡率分别为(99.63±0.57)％、(90.89±1.10)％和(51.93±0.60)％,中浓度组分别为(85.97±1.50)％、(81.14±1.19)％、(42.46±0.56)％,低浓度组分别为(78.34±1.35)％、(77.27±0.92)％、(36.66±0.60)％,与空白对照组[(0.62±0.51)％]相比差异均有统计学意义(F=180 678.22、41 488.99、44 346.38,19 543.86、27 887.32、34 590.79,20 059.467、41 953.68、17 993.77,均 P＜0.01),与阿苯达唑组[(30.03±2.02)％]比较差异均有统计学意义(F=6 585.72、4 210.84、646.46,2 956.80、2 849.68、210.83,2 365.92、2 712.28、58.12,均 P＜0.01);其余8种中药水提物高、中、低浓度组原头节的死亡率与对照组比较差异均无统计学意义(均P＞0.05).鸦胆子黄酮、苦楝皮黄酮、鸦胆子皂苷、辣蓼皂苷和辣蓼生物碱组原头节皱缩、结构松散、基质溶解,原头节死亡率分别为(98.33±2.89)％、(96.67±5.77)％、100％、(99.33±1.15)％和(56.67±2.11)％,与空白对照组[(10.33±2.51)％]比较差异均有统计学意义(F=1 584.00、563.71、3 808.47、3 099.52、14.65,均P＜0.01);其余中药粗提物组原头节的死亡率与对照组比较差异均无统计学意义(均P＞0.05).液相色谱与串联质谱联用分析结果显示,正、负离子模式下分别鉴定出741、398种代谢产物,其中正离子模式下从鸦胆子黄酮粗提物中鉴定出差异显著的黄酮类化合物4种,分别为漆黄素、5-甲基-7-甲氧基异黄酮、儿茶素和甜橙黄酮;负离子模式下鉴定出8种,分别为原花青素B2、槲皮素-3β-D-葡萄糖苷、枸桔苷、橙皮素、槲皮素、木犀草素、芹菜素和黄豆黄素.结论 鸦胆子、苦楝皮和辣蓼水提物,鸦胆子黄酮、苦楝皮黄酮、鸦胆子皂苷和辣蓼皂苷有明显体外抗细粒棘球蚴的作用,且效果优于阿苯达唑.

目的 基于网络药理学研究外用派特灵治疗尖锐湿疣(CA)的作用机制.方法 基于网络药理学的方法,经研究表明派特灵是主要由金银花、苦参、白花蛇舌草、鸦胆子、五倍子、蛇床子和大青叶等组成的中药复方制剂,通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库获取派特灵主要组成中药的活性成分与相应靶点;通过GeneCards数据库获得与CA相关的疾病靶点,取其基因与靶点交集制作韦恩图;通过STRING数据库和Cytoscape3.7.1软件共同构建蛋白互作网络(PPI),应用R语言下载安装Bioconductor数据库中的相关R包对交集得到的核心靶点进行相应的基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析.结果 在TCMSP数据库共获取109个活性化合物,主要为β谷甾醇、鸦胆甙、槲皮素等,GeneCards数据库共获取疾病靶点74个,PPI网络分析显示共涉及前列腺素内过氧化物合酶-2(PTGS-2)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(BCL-2)、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)、血管内皮生长因子-A(VEGF-A)、同期蛋白D1(CCND1)等15个核心蛋白,GO、KEGG富集分析显示派特灵可以通过各类癌症通路、人乳头状瘤病毒(HPV)感染、磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)、人巨细胞病毒感染信号通路等多途径、多靶点作用于CA.结论 派特灵通过抗HPV病毒、调节免疫等方面达到治疗CA的目的.

目的 探讨KCNQ1OT1基因敲除联合鸦胆子素D对乳腺癌MDA-MB-231细胞生物学行为的影响及其机制.方法 CCK8、划痕和Transwell侵袭实验分别检测鸦胆子素D和siKCNQ1OT1对MDA-MB-231细胞活力、迁移和侵袭能力的影响;qRT-PCR检测鸦胆子素D、siKCNQ1OT1对MDA-MB-231细胞中KCNQ1OT1表达的影响;Western blot法检测EMT相关蛋白及CDC42、p-MKK7、MKK7蛋白的表达情况.结果 鸦胆子素D和siKCNQ1OT1处理的MDA-MB-231 细胞活力、迁移和侵袭能力受到显著抑制,且二者联用时抑制作用更强( 均P < 0 . 0 5 ) ; 鸦胆子素D 处理后KCNQ1OT1在MDA-MB-231细胞中的表达下调(均P<0.05);鸦胆子素D联合siKCNQ1OT1处理组MDAMB-231细胞中CDC42、p-MKK7、N-cadherin和Vimentin的表达显著下调,E-cadherin的表达上调(均P<0.05).结论 鸦胆子素D联合siKCNQ1OT1抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移、侵袭和EMT,其分子机制可能与CDC42/MKK7信号通路的阻断有关.

目的 探讨金雀异黄酮对糖尿病肾病大鼠肾组织损伤的影响及其可能的分子机制.方法 取雄性SD大鼠55 只,随机选择10 只作为正常组,其余大鼠采用一次性腹腔注射链脲佐菌素60 mg/kg的方法复制糖尿病肾病模型.将40 只成模大鼠随机分为模型组、金雀异黄酮组、鸦胆子苦醇组和金雀异黄酮+鸦胆子苦醇组,每组10 只.金雀异黄酮组给予30 mg/kg金雀异黄酮灌胃,鸦胆子苦醇组给予鸦胆子苦醇2mg/kg灌胃,金雀异黄酮+鸦胆子苦醇组给予30 mg/kg金雀异黄酮和鸦胆子苦醇2 mg/kg灌胃,均1 次/d,连续灌胃6 周.检测各组大鼠空腹血糖(FPG)水平及肾功能指标[血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)和 24h尿微量白蛋白(24h U-mAlb)],计算肾脏指数,HE染色、PAS染色、Masson染色观察肾组织形态,透射电子显微镜观察肾细胞超微结构,分光光度法检测肾组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量,ELISA法检测肾组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-8(IL-8)含量,Western blot法检测肾组织中E2 相关因子2(Nrf2)、p-Nrf2、血红素加氧酶1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO1)、总核因子κB(NF-κB)、胞核NF-κB蛋白表达情况.结果 与正常组比较,模型组大鼠FPG、SCr、BUN、24hU-mAlb水平和肾脏指数均明显升高(P均<0.05);肾小球肥大、硬化,炎性浸润,胶原沉积,肾小球细胞可见足突肿胀或消失、基底膜弥漫性增厚、线粒体嵴断裂或消失;肾组织中T-SOD、CAT活性均明显降低(P均<0.05),MDA、TNF-α、IL-1β、IL-8含量均明显升高(P均<0.05);肾组织中p-Nrf2、HO-1、NQO1 蛋白相对表达量及p-Nrf2/Nrf2比值均明显降低(P均<0.05),胞核NF-κB蛋白相对表达量及胞核NF-κB/总NF-κB比值均明显升高(P均<0.05).与模型组比较,金雀异黄酮组和金雀异黄酮+鸦胆子苦醇组大鼠FPG、SCr、BUN、24hU-mAlb水平和肾脏指数均明显降低(P均<0.05);肾组织病理改变和肾小球细胞超微结构病变均明显减轻;肾组织中T-SOD、CAT活性均明显升高(P均<0.05),MDA、TNF-α、IL-1β、IL-8 含量均明显降低(P均<0.05);肾组织中p-Nrf2、HO-1、NQO1 蛋白相对表达量及p-Nrf2/Nrf2 比值均明显升高(P均<0.05),胞核NF-κB蛋白相对表达量及胞核NF-κB/总NF-κB比值均明显降低(P均<0.05).鸦胆子苦醇组上述指标变化趋势与模型组相同且更加严重,鸦胆子苦醇可明显逆转金雀异黄酮对上述指标的调控作用.结论 金雀异黄酮能够抑制糖尿病肾病大鼠肾组织氧化应激和炎症反应,减轻肾组织病变和肾细胞超微结构病变,其机制可能与促进Nrf2/HO-1 通路活化、抑制NF-κB核转位有关.

目的 探讨鸦胆子油乳注射液联合丝裂霉素和氟尿嘧啶治疗肝癌的临床疗效.方法 选取2012年1月—2014年7月在咸阳市第一人民医院治疗的肝癌患者102例,根据用药的差别分为对照组(51例)和治疗组(51例).对照组静脉注射注射用丝裂霉素,4 mg加入250 mL生理盐水,1次/周;对照组患者同时静脉注射氟尿嘧啶注射液,500 mg/m2加入250 mL生理盐水,1次/d,第1～14天给药;治疗组在对照组的基础上静脉注射鸦胆子油乳注射液,20 mL加入250 mL生理盐水,1次/d,第1～14天给药.3周为1个疗程,两组均治疗2个疗程.观察两组患者临床疗效,比较治疗前后两组患者血清学指标、QLQ-C30评分和生存率差别.结果 治疗后,对照组客观缓解率(ORR)和临床获益率(CBR)分别为54.90％、76.47％,均显著低于治疗组的70.59％、94.12％,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05).治疗后,两组血清血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子-1A(HIF-1A)、结缔组织生长因子(CTGF)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)水平均明显降低(P<0.05);且治疗组比对照组降低更显著(P<0.05).治疗后,两组患者躯体、认知、情绪、角色和社会功能评分均明显升高(P<0.05);且治疗组比对照组升高更明显(P<0.05).治疗组1、2、3年生存率分别为88.24％、78.43％、64.71％,均分别高于同时期对照组患者(62.75％、56.86％、41.18％),两组比较差异具有统计学意义(P<0.05).结论 鸦胆子油乳注射液联合丝裂霉素和氟尿嘧啶治疗肝癌可有效改善患者生活质量,提高生存率,有效抑制肿瘤新生血管生成,具有一定的临床推广应用价值.

目的 探讨鸦胆子素D对结肠癌细胞株HT29增殖的抑制及诱导其凋亡的机制.方法 人结肠癌细胞株HT29经不同浓度鸦胆子素分别作用24、48、72h后,应用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法检测鸦胆子素D对HT29细胞的增殖抑制作用;流式细胞术检测鸦胆子素D对HT29凋亡的影响;Western blot法检测HT29细胞株经不同浓度鸦胆子素D处理24h后以及20μmol/L的鸦胆子素D处理24、48、72h后,细胞中JNK、p-JNK的表达.结果 不同浓度鸦胆子素D分别作用结肠癌HT29细胞24、48、72h后,细胞存活率随药物浓度升高,细胞存活率降低,细胞的凋亡率增加.HT29细胞株经不同浓度鸦胆子素D处理24h后以及20μmol/L的鸦胆子素D处理24、48、72h后,JNK蛋白表达随鸦胆子素D作用时间延长而下调,p-JNK则相应上调.结论 不同浓度的鸦胆子素D随着浓度的增加及时间的延长,结肠癌HT29细胞的存活率降低、凋亡率增高,呈明显的作用-时间-药物浓度依赖性.