鹿茸作为传统名贵中药材,医用历史悠久,功效广泛,针对肾阳不足、精血亏虚、阳痿滑精、宫冷不孕、腰脊冷痛、筋骨痿软、崩漏等症状均有良好疗效.研究发现鹿茸的多重功效与其最主要的活性成分鹿茸多肽密切相关.作为代表性动物源中药多肽,鹿茸多肽的相关研究揭示了鹿茸的物质基础和作用机制,不断为我们展现传统中药的现代奥秘.鹿茸多肽的提取方式需要保证活性和营养的最大保存,主要采用酶解法、溶液萃取法、CO2超临界提取法等.笔者通过查阅国内外相关文献,系统性地归纳与总结了鹿茸多肽在人体多个系统中重要的治疗作用和保健价值,对鹿茸多肽修复神经、改善血管心肌、减轻肝细胞损伤、调节骨骼活动等多重功效进行重点介绍.为进一步挖掘开发动物药资源宝库提供理论参考,为源自动物药多肽创新药的研发提供新思路.

目的:探讨鹿茸多肽(VAP)对绝经后骨质疏松症(PMOP)模型大鼠的保护作用,并阐明其可能的作用机制.方法:60只12周龄SD雌性大鼠随机分为假手术组、模型组、阿仑膦酸钠组(1 mg·kg-1·d-1阿仑膦酸钠灌胃)、低剂量VAP组(100 mg·kg-1·d-1 VAP灌胃)、中剂量VAP组(200 mg·kg-1·d-1 VAP灌胃)和高剂量VAP组(300 mg·kg-1·d-1 VAP灌胃),每组10只.除假手术组外,其余各组大鼠摘除双侧卵巢,复制PMOP大鼠模型.双能X射线骨密度仪检测各组大鼠股骨骨密度(BMD),酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组大鼠血清中血钙(Ca2+)、血磷(P)、骨碱性磷酸酶(BALP)和Ⅰ型前胶原N端前肽(PINP)水平,采用相关试剂盒检测各组大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平,HE染色法观察各组大鼠骨组织病理形态表现,Western blotting法检测各组大鼠骨组织中磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(AKT)和磷酸化AKT(p-AKT)蛋白表达水平.结果:与假手术组比较,模型组大鼠股骨BMD降低(P＜0.01);与模型组比较,阿仑膦酸钠组、中剂量VAP组和高剂量VAP组大鼠股骨BMD升高(P＜0.05或P＜0.01).与假手术组比较,模型组大鼠血清中Ca2+、P、BALP及PINP水平和SOD活性降低(P＜0.05或P＜0.01),MDA水平升高(P＜0.01);与模型组比较,中剂量VAP组大鼠血清中P水平升高(P＜0.01),阿仑膦酸钠组和高剂量VAP组大鼠血清中Ca2+、P、BALP及PINP水平和SOD活性升高(P＜0.05或P＜0.01),MDA水平降低(P＜0.05).HE染色,与假手术组比较,模型组大鼠骨组织中骨小梁纤细,大片断裂,髓腔扩大;与模型组比较,阿仑膦酸钠组、中剂量VAP组和高剂量VAP组大鼠骨组织中骨小梁粗壮,排列紧密,骨细胞数量多.Western blotting法,与假手术组比较,模型组大鼠骨组织中p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT比值降低(P＜0.01);与模型组比较,各剂量VAP组大鼠骨组织中p-PI3K/PI3K比值升高(P＜0.05或P＜0.01),阿仑膦酸钠组和高剂量VAP组大鼠骨组织中p-AKT/AKT比值升高(P＜0.01).结论:VAP对大鼠PMOP具有改善作用,其机制可能与VAP调控骨组织中PI3K/AKT信号通路及降低骨组织氧化应激有关.

目的:探讨鹿茸多肽(VAP)对顺铂(DDP)致卵巢早衰模型大鼠的影响及机制.方法:取动情周期正常的雌性大鼠并将其随机分为对照组、模型组、VAP干预组,每组各10只.模型组和VAP干预组通过连续20 d腹腔注射DDP(4 mg·kg-1·d-1)建立卵巢早衰大鼠模型,干预组同时连续20 d灌胃VAP(400 mg·kg-1·d-1).HE染色观察卵巢形态学表现,并对各级发育卵泡计数.ELISA检测血清雌二醇(E2)、促卵泡生成素(FSH)、抗穆勒管激素(AMH)水平.生化法检测卵巢组织中谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)水平.探针标记法检测卵巢组织中活性氧(ROS)水平.普鲁士蓝染色观察卵巢组织中铁蓄积情况并检测亚铁离子(Fe2+)水平.免疫组化和Western blot检验卵巢组织中溶质载体家族7成员11(SCL7A11)、谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)和酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)的表达.通过生育力监测观察各组大鼠生育能力.结果:与对照组相比,模型组卵巢萎缩,铁蓄积(P<0.01),各级发育卵泡和总卵泡减少(P<0.05),闭锁卵泡增多(P<0.01),产仔数减少(P<0.01),血清E2、AMH水平降低(P<0.01),FSH水平提高(P<0.01),卵巢组织中GSH水平、SCL7A11和GPX4蛋白表达均降低(P<0.05),Fe2+、MDA和ROS水平及ACSL4蛋白表达均升高(P<0.01).与模型组相比,VAP能改善DDP导致的上述指标改变(P<0.01).结论:鹿茸多肽可改善顺铂致卵巢早衰大鼠的卵巢功能、维持正常的卵泡发育并提高其生育能力,机制可能与脂质过氧化反应和铁死亡有关.

鹿茸因具有抗氧化、抗炎、抗骨损伤、抗神经疾病和免疫调节等各种生物学特性而受到了广泛的关注,在精神及神经性疾病治疗中发挥重要作用,包括对如轻度认知障碍、缺血性脑病、阿尔茨海默病、帕金森病、抑郁症及神经损伤等相关疾病的预防和治疗.该文综述了鹿茸及鹿茸多肽治疗精神及神经性疾病的研究进展,重点介绍了其干预作用及调控机制.研究发现鹿茸及其成分可以有效改善轻度认知障碍、抑制神经损伤、减轻缺血性脑病、缓解阿尔茨海默病、改善帕金森病,并显著减少抑郁样行为和保护神经元,其调控机制可能涉及抗炎、抗氧化、细胞焦亡、Rho/ROCK通路、Akt/mTOR信号、Nrf-2/HO-1/NF-κB通路等多种途径.该文的整理分析为拓宽鹿茸的应用和发掘神经系统疾病的治疗方法提供理论依据和新思路,并揭示一种潜在的治疗药物.

目的:探索鹿茸多肽通过基质细胞衍生因子(SDF-1α)/趋化因子受体(CXCR4)轴对磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶 B(AKT)通路促进下肢动脉硬化性闭塞症(PAD)大鼠血管新生的作用机制.方法:采用结扎并离断大鼠股动脉及分支造成肢体缺血、给予高脂饲料喂养制作大鼠下肢动脉硬化闭塞症模型.将 100只雄性 Sprague Dawley(SD)大鼠随机分为 10组,分别为空白组、模型组、假手术组,鹿茸多肽低剂量组、鹿茸多中剂量肽组、鹿茸多肽高剂量组、抑制剂 LY294002 组、鹿茸多肽低剂量+抑制剂LY294002组、鹿茸多肽中剂量+抑制剂LY294002组、鹿茸多肽高剂量+抑制剂LY294002组.将空白组、模型组及假手术组灌胃等容量蒸馏水.鹿茸多肽低、中、高剂量组+抑制剂LY294002组先行腹腔注射再灌胃,于造模完第 1天开始给药,每日 1次,28d后处死.采用流式细胞术检测给药后外周血、骨髓中造血干细胞(CD34+细胞)比例;免疫荧光法检测给药后患侧腓肠肌 SDF-1α、PI3K的阳性细胞数比例.结果:造血干细胞(CD34+细胞)比例模型组均显著高于空白组(P<0.05);其中鹿茸多肽低剂量组较鹿茸多肽低剂量+抑制剂 LY294002组阳性细胞比例升高,鹿茸多肽中剂量组较鹿茸多肽中剂量+抑制剂 LY294002 组阳性细胞比例升高,鹿茸多肽高剂量组较鹿茸多肽高剂量+抑制剂 LY294002组阳性细胞比例升高(P<0.05);给药组 SDF-1α、PI3K的阳性细胞数高于模型组及抑制组(P<0.05),鹿茸多肽中剂量组高于鹿茸多肽低剂量组(P<0.05),鹿茸多肽高剂量组高于鹿茸多肽高剂量组+ LY294002组(P<0.05).结论:鹿茸多肽通过 SDF-1α/CXCR4轴影响 PI3K/AKT信号通路促进了内皮祖细胞的增殖及分化、PAD血管新生.

目的:研究鹿茸多肽调节核因子E2 相关因子 2(Nrf-2)/血红素加氧酶-1(HO-1)/核转录因子κB(NF-κB)信号通路减轻非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠小肠黏膜屏障损伤的机制.方法:将SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、鹿茸多肽低剂量(14 mg/kg)组、鹿茸多肽高剂量(28 mg/kg)组、鹿茸多肽(28 mg/kg)+Nrf-2 抑制剂ML385(30 mg/kg)组,每组 12 只,除正常对照组外其余各组大鼠通过饲喂高脂饲料 12 w诱导建立NAFLD模型,正常对照组大鼠饲喂普通饲料 12 w,经分组给药处理后,检测大鼠血脂及肝功能指标、肝组织病理学变化及脂肪变性、NAFLD活动度评分(NAS)、小肠黏膜组织病理形态及血清DAO、I-FABP、IL-17、IL-6、IL-18、SOD、CAT、MDA水平和小肠组织Nrf-2/HO-1/NF-κB信号通路相关蛋白表达.结果:与正常对照组比较,模型组大鼠肝组织病理损伤及脂肪变性明显,小肠黏膜组织发生明显的病理损伤,NAS、油红O染色阳性面积及血清TG、FFA、ALT、AST、DAO、I-FABP、IL-17、IL-6、IL-18、MDA水平和小肠组织p-NF-κB P65/NF-κB P65 水平显著升高,绒毛高度及血清SOD、CAT水平和小肠组织Nrf-2、HO-1蛋白表达显著降低(P<0.05).与模型组比较,鹿茸多肽低、高剂量组大鼠肝组织病理损伤、脂肪变性及小肠黏膜组织病理损伤明显减轻,NAS、油红O染色阳性面积及血清TG、FFA、ALT、AST、DAO、I-FABP、IL-17、IL-6、IL-18、MDA水平和小肠组织 p-NF-κB P65/NF-κB P65 水平显著降低,绒毛高度及血清SOD、CAT水平和小肠组织Nrf-2、HO-1蛋白表达显著升高(P<0.05),高剂量鹿茸多肽的作用更强.ML385 可逆转高剂量鹿茸多肽对模型大鼠各指标的作用(P<0.05).结论:鹿茸多肽可通过激活Nrf-2/HO-1 信号从而降低NF-κB磷酸化,进而改善NAFLD大鼠脂代谢,抑制炎症及氧化应激,修复其小肠黏膜屏障功能,最终减轻NAFLD大鼠肝组织脂肪变性及小肠黏膜组织损伤.

目的:探讨鹿茸多肽(VAP)对骨质疏松(OP)模型大鼠的保护作用,并阐明其可能的作用机制.方法:60只12周龄SD大鼠随机分为对照组、模型组、阳性药组(1 mg·kg-1·d-1 阿仑膦酸钠灌胃)、低剂量(100 mg·kg-1·d-1)VAP组、中剂量(200 mg·kg-1·d-1)VAP组和高剂量(300 mg·kg-1·d-1)VAP组,每组10只.除对照组外,其余各组大鼠肌肉注射地塞米松(2 mg·kg-1)复制OP大鼠模型,对照组大鼠肌肉注射等体积生理盐水,每周2次,连续11周.双能X射线骨密度仪检测各组大鼠股骨骨密度(BMD),酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组大鼠血清中血钙(Ca2+)、血磷(P)、骨保护素(OPG)、碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(OCN)水平,生化法检测各组大鼠血清中丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性,HE染色观察各组大鼠骨组织病理形态表现,Western blotting法检测各组大鼠骨组织中沉默信息调节因子 1(SIRT1)、过氧化氢酶(CAT)、Runt相关转录因子2(RUNX2)和叉头框蛋白O1(FOXO1)蛋白表达水平.结果:与对照组比较,模型组大鼠股骨BMD明显降低(P<0.05);与模型组比较,阳性药组、中剂量VAP组和高剂量VAP组大鼠股骨BMD明显升高(P<0.05 或P<0.01).与对照组比较,模型组大鼠血清中Ca2+、P和OPG水平及SOD活性明显降低(P<0.05),ALP、OCN和MDA水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,低剂量VAP大鼠血清中OPG水平明显升高(P<0.05),阳性药组、中剂量VAP组和高剂量VAP组大鼠血清中Ca2+、P和OPG水平及SOD活性明显升高(P<0.05 或P<0.01),阳性药组和各剂量VAP组大鼠血清中ALP、OCN和MDA水平明显降低(P<0.05或 P<0.01).HE染色,与对照组比较,模型组大鼠骨组织中骨细胞数量减少且排列混乱,骨小梁纤细,出现大片断裂,髓腔扩大;与模型组比较,阳性药组、中剂量VAP组和高剂量VAP组大鼠骨组织中骨小梁粗壮,排列紧密.Western blotting法,与对照组比较,模型组大鼠骨组织中SIRT1、CAT、RUNX2和FOXO1蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与模型组比较,阳性药组、中剂量VAP组和高剂量VAP组大鼠骨组织中SIRT1、CAT、RUNX2和FOXO1蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01).结论:VAP对OP模型大鼠具有保护作用,其作用机制可能与介导SIRT1/FOXO1信号通路抗氧化应激作用有关.

目的:对马鹿茸多肽A的表面结构进行分析,并探讨其结构对药效的作用.方法:采用原子力显微镜观察马鹿茸多肽A的表面结构.结果:马鹿茸多肽A表面呈三维的曲面、板状结构;其基部为不规则网格状结构,3D结构显示其网格边缘具有粗细不均、长短不等的支链形成椎体状突起,呈栅状或片状.质量浓度为 0.50、0.25、0.10 μg·mL-1 的马鹿茸多肽A的粗糙度分别为 0.667 2、0.700 0 和 0.790 0,表面高度分别为 14.510 5、39.458 8、6.139 7 nm.在相同波长下,一维各向同性功率谱密度越大,则二维各向同性功率谱密度越大,样品对于测定的响应越灵敏.结论:马鹿茸多肽A的曲面板状结构可增加与作用靶点的接触面积,其栅状或片状椎体支链结构则更有利于和作用靶点的相互接触或渗入而易发挥药效作用.随着质量浓度的增大,其粗糙度逐渐变小;而表面高度没有随质量浓度的变化呈现出规律性的变化.

目的 研究微波辐射对于小鼠学习记忆的影响,并观察鹿茸多肽(pilose antler peptide)的干预作用.方法 将50只小鼠随机分为对照组、辐射组、鹿茸多肽低、中、高剂量组.采用2 450 MHz平均表面功率10.0 mW·cm-2微波照射小鼠90 min·d-1,连续28 d,建立学习记忆障碍模型.鹿茸多肽低、中、高剂量组每天皮下注射鹿茸多肽(25、50、100mg·kg-),每天1次,连续28 d,进行预防治疗.实验结束后采用避暗实验、Y迷宫实验检测小鼠的学习记忆能力,并检测脑组织中S100B、肿瘤坏死因子α(TN F-α)、白细胞介素-1O(IL-1O)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的水平变化.结果 与对照组比较,辐射组小鼠在避暗实验中潜伏期缩短,错误次数增多,在Y迷宫实验中错误逃逸次数增加,脑组织中S1OOB、TNF-α、IL-10、MDA、NO的含量增高;与辐射组比较,鹿茸多肽中、高剂量组避暗实验潜伏期延长、错误次数减少,Y迷宫错误逃逸次数减少,脑组织中S100B、TNF-α、MDA、NO含量降低,1L-10的含量升高(P＜0.05或P＜O.01).结论 鹿茸多肽对微波辐射所致的小鼠学习记忆障碍有一定的改善作用,机制可能与鹿茸多肽通过抗炎作用从而具有抗氧化作用,进而降低NO引起的神经毒性有关.

目的 探讨从鹿茸中提取鹿茸多肽的最佳提取方法.方法 分别采用匀浆法和超声破碎法在新鲜鹿茸中提取鹿茸多肽(velvet antler polypeptiddes,VAP),对提取时间及提取后鹿茸多肽的蛋白质浓度进行比较分析.结果采用胶体磨匀浆法所得数据为:当匀浆6h后,提取得到的鹿茸多肽蛋白质浓度为0.42 mg/mL;采用超声破碎的方法时,当超声40min时,鹿茸多肽蛋白质浓度为1.61 mg/mL,其蛋白质浓度是应用匀浆法提取时的4倍.结论 2种方法相比,采用超声破碎的方法提取鹿茸多肽,不仅可以节约时间,而且提高了鹿茸多肽的提取量,是较为理想的鹿茸多肽的提取方式.