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外泌体负载枸杞miR2911调控Wnt/β-catenin信号通路促进非梗阻性无精子症大鼠生精功能恢复
编辑人员丨5天前
目的:研究外泌体负载的枸杞miRNA(Lb-miR2911)药物通过跨界调控Wnt/β-catenin信号通路对非梗阻性无精子症(NOA)大鼠模型生精功能恢复的影响.方法:4 周龄雄性SD大鼠30 只,采用白消安腹腔注射方法构建NOA模型,造模5 周后将模型大鼠随机分为模型组(MC)、Lb-miR2911EXO治疗组(Lb-miR2911EXO)、外泌体空载治疗组(Sham),每组10 只.MC组NOA模型大鼠自然恢复,无特殊处理;Lb-miR2911EXO组NOA模型大鼠,睾丸生精小管注射外泌体包被Lb-miR2911 药物(0.1 mg/kg),1 次/周,共治疗 3 次;Sham组NOA模型大鼠,睾丸生精小管注射外泌体空载药物(0.1 mg/kg),1 次/周,共治疗3 次.另取10 只同龄正常健康SD大鼠作为正常对照组(NC).治疗后第2、6 周采用RNA FISH技术观察Lb-miR2911 药物在睾丸组织中的摄取及代谢变化;治疗后 12周采用转录组测序分析结合 Western 印迹、RT-PCR 方法检测各组大鼠睾丸组织中细胞增殖、精子发生及Wnt/β-catenin信号通路的基因表达;睾丸组织形态学及精子质量分析比较各组大鼠生精功能恢复情况;通过组织形态学分析结合血清TNF-α、IL-1β、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)等指标检测评估Lb-miR2911 外泌体药物对大鼠组织器官毒性.结果:治疗12 周后睾丸组织形态学分析发现Lb-miR2911EXO组大鼠睾丸组织各层次生精细胞排列规则,管腔中可见大量成熟精子,与Sham组比较,Johnsen评分显著增加(P<0.05),睾丸重量、睾丸指数、精子浓度和精子活力显著增加(P<0.05);转录组测序分析结合Western 印迹、RT-PCR方法证实,与MC组相比,Lb-miR2911EXO组DACT3 基因表达下调(P<0.05),而DVL2、β-catenin表达上调,同时p-DVL2及β-catenin(nucleus)蛋白含量增加(P<0.05);细胞增殖相关基因CCND1、CCNE1、CCNE2 mRNA表达上调(P<0.05);精子发生相关基因 DMC1、CCR6、JAM2、KLC3 表达上调(P<0.05);组织器官毒性检测表明:治疗后Lb-miR2911EXO组大鼠肺部、肝脏、肾脏组织未见病理性变化,与NC组比较血清TNF-α、IL-1β、AST、ALT、肌酐或尿素氮等水平未见升高(P>0.05).结论:外泌体负载的Lb-miR2911 药物通过跨界调节DACT3/Wnt/β-Catenin信号通路促进了NOA大鼠生精功能恢复.
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编辑人员丨5天前
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基于指纹图谱的化学模式识别法和多指标测定评价枸杞不同部位的差异性
编辑人员丨5天前
目的 研究枸杞植株不同部位中主要化学成分的整体信息和含量差异,综合评价枸杞不同部位的质量和合理应用.方法 以 3 个主产区的枸杞子、枸杞叶和地骨皮药材为研究对象,建立HPLC指纹图谱,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统进行相似度评价;结合SIMCA 14.1 软件进行主成分分析等;采用分光光度比色法测定枸杞多糖和总黄酮含量;并利用HPLC方法对甜菜碱进行含量测定.结果 枸杞不同部位化学成分的种类和含量均存在明显差异,叶和果实含有更丰富的化学成分,枸杞多糖、总黄酮和甜菜碱的含量均为枸杞叶>枸杞子>地骨皮.结论 枸杞叶含有更丰富的营养成分,其药理功能和营养价值可能优于枸杞子.因此,可考虑多产地开发枸杞叶作为枸杞药材来源之一,以促进枸杞资源的多途径、多层次开发利用.
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编辑人员丨5天前
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基于"固本开渠"理论辨证施膳对肝硬化腹水患者中医证候积分的影响
编辑人员丨5天前
目的:探讨基于中医"固本开渠"理论实施辨证施膳对肝硬化腹水患者中医证候积分的影响。方法:选择2019年3月至2020年1月收治入上海中医药大学附属曙光医院的84例肝硬化腹水患者,采取2×3析因设计方法,以是否进行辨证施膳与药膳类别作为处理因素,根据研究对象的辨证分型不同,采取随机区组方法进行入组,每组14例。3个非辨证施膳组采用肝硬化腹水常规护理;3个辨证施膳组在常规护理的基础上,基于中医"固本开渠"理论辨证选择相应的药膳:脾肾阳虚证选择参芪瘦肉汤,肝肾阴虚证选择枸杞麦冬排骨汤,气滞血瘀证选择当归三七排骨汤,采用肝病中医证候积分量表、肝硬化腹水疗效评定进行效果评价。结果:纳入有效病例80例。入院第1天、第14天和出院2周3个时间点肝病中医证候积分:脾肾阳虚证辨证施膳组(a1b1)分别为(46.38 ± 8.56)、(34.20 ± 8.42)、(31.40 ± 4.22)分,肝肾阴虚证辨证施膳组(a1b2)分别为(41.50 ± 8.71)、(31.35 ± 8.63)、(31.12 ± 4.94)分,气滞血瘀证辨证施膳组(a1b3)分别为(45.92 ± 7.86)、(35.17 ± 7.57)、(30.83 ± 7.32)分,脾肾阳虚证非辨证施膳组(a2b1)分别为(46.29 ± 8.38)、(39.79 ± 7.65)、(36.64 ± 6.83)分,肝肾阴虚证非辨证施膳组(a2b2)分别为(40.50 ± 8.12)、(38.10 ± 8.93)、(35.38 ± 8.24)分,气滞血瘀证非辨证施膳组(a2b3)分别为(45.62 ± 7.99)、(41.83 ± 7.31)、(38.83 ± 7.96)分;3个时间点肝病中医证候积分经广义估计方程统计发现有统计学意义( χ2值为63.998, P<0.05),且各组的组间比较有统计学意义( χ2值为20.993, P<0.05);入院第14天和出院2周,辨证施膳3组患者与非辨证施膳3组患者肝病中医证候积分的组间比较有统计学意义( F值为3.244、3.489,均 P<0.05)。 结论:基于中医"固本开渠"理论,辨证施膳组可有效降低肝硬化腹水患者中医证候积分,改善症状,增强疗效,值得临床推广应用。
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编辑人员丨5天前
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基于网络药理学研究金龙补肾合剂防治代谢综合征的作用机制
编辑人员丨5天前
目的:结合网络药理学和实验验证探讨金龙补肾合剂防治高糖高脂饮食诱导代谢综合征大鼠脂质代谢紊乱的作用及机制。方法:检索TCMSP和相关文献获得金龙补肾合剂中枸杞子、金樱子、龙眼肉、大枣、绞股蓝、罗汉果、母丁香药物的活性成分和作用靶点,检索GeneCards在线数据库获得代谢综合征相关靶点,利用Venny 2.1.0获得金龙补肾合剂和代谢综合征的交集靶点,采用STRING在线数据库构建交集靶点PPI网络。使用Cytoscape 3.9.0中Cyto NCA插件筛选度值前50位的核心靶点。利用DAVID Bioinformatics Resources 6.8在线分析平台进行GO功能富集与KEGG通路富集分析。采用高糖高盐高脂饲料喂养20周建立代谢综合征大鼠模型。将造模成功大鼠按随机数字表法分为模型组、阳性对照组和金龙补肾合剂组,另设空白对照组,每组8只。金龙补肾合剂组灌胃金龙补肾合剂1.8 ml/kg,阳性对照组灌胃二甲双胍溶液90 mg/kg,空白组和模型组灌胃等体积生理盐水,1次/d,连续干预4周。观察大鼠体重、腹围及空腹血糖变化,检测大鼠血脂水平,采用HE染色观察肝组织病理变化,采用ELISA法测定肝组织中三磷酸腺苷(ATP)、IL-1β、IL-6水平,采用qRT-PCR检测肝组织肝激酶B1(LKB1)、AMPK、Akt1、肉碱棕榈酰转移酶1A(CPT1A)、下调乳酸脱氢酶A(LDH-A)mRNA水平,采用Western blot测定肝组织p-LKB1、LKB1、p-AMPK、AMPK、p-Akt1、Akt1蛋白表达。结果:获得金龙补肾合剂主要活性成分141个,841个作用靶点,代谢综合征靶点18 763 个,得到药物和疾病交集靶点820个。KEGG通路富集分析得到173条通路,主要涉及PI3K-Akt、HIF-1信号通路等。实验结果显示,金龙补肾合剂组大鼠体重、空腹血糖及血脂水平降低,大鼠肝脏糖脂质代谢紊乱改善;血清ATP水平升高( P<0.05),IL-1β、IL-6水平降低( P<0.05);肝组织LKB1、AMPK、Akt1、CPT1A mRNA水平升高( P<0.05),LDH-A mRNA水平降低( P<0.05),p-LKB1/LKB1、p-AMPK/AMPK及p-Akt1/Akt1比值升高( P<0.05)。 结论:金龙补肾合剂可通过多靶点、多通路改善代谢综合征脂质代谢紊乱,其机制可能通过调节LKB1/AMPK/Akt信号通路发挥作用。
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编辑人员丨5天前
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枸杞多糖影响大鼠背部皮瓣存活的研究
编辑人员丨5天前
目的:探讨枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharide,LBP)对大鼠背部任意皮瓣存活状态及术后炎性因子、凋亡因子的影响。方法:取84只SD雄性大鼠,随机平均分成4组,在大鼠背部依照样布设计4.5 cm 2的任意皮瓣。对照组术后采用生理盐水灌胃(LBP0组),实验组术后用200、400、800 mg/(kg·d)LBP灌胃,分别为LBP200、LBP400、LBP800组,持续时间为2周。记录各组大鼠皮瓣术后的一般情况,包括炎性渗出、水肿、皮瓣张力、皮温及坏死。各组分别于术后0.5、1、3、5、7、10及14 d随机选取3只大鼠测算皮瓣存活面积。切取皮瓣组织样本,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测皮瓣组织中TNF-α、Caspase-3因子的mRNA表达。 结果:大鼠背部任意皮瓣造模后3 d,各组皮瓣创面均可见不同程度渗血及肿胀,部分皮瓣逐步出现暗红至青紫,术后7 d皮瓣坏死逐渐显现,术后10 d坏死边界渐清晰,术后2周坏死区域结痂翘起。各组大鼠术后1周内,皮瓣存活面积差异无统计学意义( P>0.05)。术后3 d,LBP800与LBP0组相比,TNF-α因子mRNA表达差异有统计学意义( P<0.05),且在术后10 d差异更明显( P<0.01)。术后5 d,LBP400与LBP0组相比,TNF-α因子mRNA表达量也存在差异( P<0.05);LBP800与LBP0组相比,Caspase-3因子mRNA表达量存在差异( P<0.05),且术后14 d两组差异更明显( P<0.01)。术后7 d,LBP400与LBP0组相比,Caspase-3因子mRNA表达量存在明显差异( P<0.05)。 结论:适宜浓度的LBP干预可显著降低皮瓣炎性反应因子及凋亡因子的mRNA表达,有助于降低皮瓣组织坏死的风险,改善皮瓣存活微环境。
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编辑人员丨5天前
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基于数据挖掘的中药专利复方治疗阿尔茨海默病用药规律
编辑人员丨5天前
目的:运用数据挖掘方法分析AD专利复方的用药规律。方法:筛选专利数据库中治疗AD的中药复方,借助中医传承计算平台、SPSS Statistics 21.0及SPSS Modeler 18.0等软件进行频次统计、聚类分析和关联分析,分析用药规律。结果:共纳入专利复方220个,涉及中药361味;排名前10的高频药依次为石菖蒲、远志、人参、川芎、黄芪、枸杞子、茯苓、熟地黄、当归、丹参;高频药中使用频次最高的药物类别为补虚药和活血化瘀药;药性多属温、平、寒;药味多属甘、苦、辛;归经多属五脏经络;关联规则分析得出关联数据16条,其中两项组合4条,三项组合12条,关联性最强的药组为“石菖蒲-远志”和“石菖蒲-川芎-远志”;聚类分析得出4个处方组合和3个药对组合,包含开心散、左归丸、八珍汤等加减结构。结论:中药专利复方治疗AD以“调补五脏治其本,化痰祛瘀治其标”为核心治法,符合中医药治疗AD的理论基础,可为临床实践及新药研发提供参考。
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编辑人员丨5天前
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近20年中药复方专利治疗糖尿病肾病用药规律及新方探索
编辑人员丨5天前
目的:基于数据挖掘方法分析近20年中药复方专利干预DN的用药及配伍规律,为临床新药的研发提供依据。方法:检索国家专利平台治疗DN的中药复方专利,运用Excel 2019软件进行药物频次、性味归经统计;利用SPSS Modeler 18.0及SPSS Statistic 26.0软件进行药物关联规则和聚类分析;采用Cytoscape 3.9.0软件构建核心药物共现复杂网络,并展现潜力新方新药的关联性。结果:共纳入中药复方专利261项,包含中药438味,高频中药有黄芪、生地黄、丹参、枸杞子等,药物类别以补虚药为主,性味以寒、甘居多,归经多属肝、肾经。常用药对有灵芝-生地黄等,常用角药有三七-当归-灵芝等。聚类药物有“三七、灵芝、当归、芡实、生地黄、枸杞子”等7组,潜力药物有“凌霄花-宽筋藤-刺楸树根-毛蜂子-黑阳参-柠条-泽泻实-断节参”等5组,通过拓扑属性分析筛选得到治疗DN的核心新方。结论:国家中药复方专利治疗DN基于本病本虚标实的病机,多运用益气健脾、滋阴补肾、活血化瘀等治法提高临床疗效,可为新药研发提供思路。
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编辑人员丨5天前
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孙郁芝治疗慢性肾盂肾炎经验
编辑人员丨5天前
孙郁芝教授认为,慢性肾盂肾炎属中医“劳淋”范畴,患者病程较长,症状复杂,病机多为脾肾亏虚,湿热留恋,兼有气机郁滞,治疗时应兼顾补肾健脾、清热利湿、行气通淋,用药主张平和中正,较少应用峻烈之品,自拟经验方药用黄芪、白术、茯苓、柴胡、杜仲、狗脊、山萸肉、枸杞子、女贞子、土茯苓、蒲公英、萹蓄、乌药、车前子、砂仁、香附、生龙齿、炙甘草,辨证灵活加减。附病案一则分析。
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编辑人员丨5天前
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基于ERK/Nrf2-ARE通路探究枸杞多糖对七氟烷麻醉诱导雄性大鼠生殖毒性的拮抗作用机制
编辑人员丨5天前
目的:探究枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharides,LBP)对七氟烷麻醉诱导的雄性大鼠生殖毒性的作用,分析其对细胞外信号调节激酶(extracellular-signal-regulated kinase,ERK)/核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)-抗氧化反应元件(antioxidant response element,ARE)信号通路的影响。方法:取SD雄性大鼠按计算机随机生成数字法分为空白对照组、模型组、LBP低剂量组、LBP高剂量组和阳性对照组,除空白对照组外其余均以七氟烷麻醉诱导,同时腹腔注射给药,空白对照组和模型组予以等体积生理盐水,LBP低、高剂量组分别予以100 mg/kg、200 mg/kg LBP,每天1次,阳性对照组予以10 mg/kg维生素E,隔天1次,14 d后处死。计算各组大鼠睾丸与附睾的脏器指数;检测睾丸组织标志酶酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)含量;HE染色观察大鼠睾丸组织病理学;检测睾丸组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;TUNEL染色观察大鼠睾丸组织细胞凋亡率;Western blotting检测大鼠睾丸组织内Bax、Bcl-2及ERK/Nrf2-ARE通路蛋白表达。结果:LBP低、高剂量组和阳性对照组睾丸脏器指数[(0.39±0.04)%、(0.47±0.05)%、(0.62±0.05)%]和附睾脏器指数[(0.08±0.01)%、(0.11±0.01)%、(0.14±0.02)%]均比模型组[(0.33±0.03)%,(0.05±0.01)%]高(均 P<0.001),ACP[(122.13±5.39)U/g、(115.37±4.45)U/g、(109.74±4.73)U/g]、LDH含量[(260.43±15.18)U/g、(245.17±8.13)U/g、(236.19±10.23)U/g]均比模型组[(129.98±6.17)U/g、(279.89±18.41)U/g]低(均 P<0.001),AKP含量[(224.41±11.69)U/g、(247.59±12.17)U/g、(266.74±13.78)U/g]、SOD活性[(3.11±0.12)U·mg/蛋白、(4.05±0.14)U·mg/蛋白、(4.78±0.15)U·mg/蛋白]均比模型组[(200.48±10.48)U/g、(2.02±0.09)U·mg/蛋白]高(均 P<0.001),MDA含量[(14.86±1.41)nmol·mg/蛋白、(10.39±1.22)nmol·mg/蛋白、(5.25±0.47)nmol·mg/蛋白]均较模型组[(18.36±1.99)nmol·mg/蛋白]低(均 P<0.001),睾丸细胞凋亡率均较模型组低(均 P<0.001),且呈LBP剂量依赖性(均 P<0.001)。模型组大鼠生精小管变薄,生精细胞明显减少,部分曲精管内仅残留少量精原细胞;给药后,LBP低、高剂量组和阳性对照组生精小管结构比较完整,各级生精细胞排列有序,数量增多,空泡减少。模型组大鼠睾丸组织中Bcl-2、p-ERK1/2、Nrf2、HO-1、NQO1蛋白水平较空白对照组高,Bax蛋白水平较空白对照组低(均 P<0.05);LBP低、高剂量组Bcl-2、p-ERK1/2、Nrf2、HO-1、NQO1蛋白水平较模型组高,Bax蛋白水平较模型组低(均 P<0.05),且呈LBP剂量依赖性( P<0.05)。 结论:LBP对七氟烷麻醉诱导的雄性大鼠生殖毒性有拮抗作用,可能与抑制ERK/Nrf2-ARE通路有关。
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编辑人员丨5天前
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基于病例报告文献对草药和膳食补充剂增强华法林抗凝作用的分析与评价
编辑人员丨5天前
目的:对病例报告文献报道的草药和膳食补充剂(HDS)增强华法林的抗凝作用进行分析和评价。方法:检索国内外相关数据库(截至2021年10月10日),选择HDS与华法林相互作用致抗凝作用增强的病例报告文献。根据病例报告中患者国际标准化比值升高程度和出血事件发生情况评价HDS增强华法林抗凝作用的程度。根据HDS与华法林抗凝作用增强的因果关系评价结果、病例报告数量和其他证据(国家相关机构发布警告、临床研究、药代动力学/药效动力学研究、动物实验研究等),建立HDS与华法林相互作用可靠性评分标准,评价HDS增强华法林抗凝作用的可靠性。总得分≥9分为高度可靠,6~8分为较可靠,3~5分为可能可靠,≤2分为可疑可靠。结果:共收集到41篇文献,涉及56例患者、26种HDS。轻度增加华法林抗凝作用的HDS有5种,包括当归、草木犀流浸液片、南瓜籽、鱼油和水飞蓟;中度者6种,包括生姜、芒果、蜂花粉、斯卡珀农葡萄、核桃和灰树花;重度者15种,包括蔓越莓、丹参、甘草、红花、蒲公英、枸杞、葡萄柚、洋甘菊、石榴汁、虾青素胶囊、苦艾、蜂王浆、越橘、红枣和贯叶连翘。增强华法林抗凝作用可靠性评价为高度可靠的HDS有1种,为蔓越莓(评分为11分);较可靠者8种,包括丹参、甘草、红花、蒲公英、枸杞、葡萄柚、洋甘菊和石榴汁(评分分别为8、7、7、7、7、6、6、6分);可能可靠者12种,包括当归、生姜、草木犀流浸液片、芒果、虾青素胶囊、蜂花粉、苦艾、蜂王浆、斯卡珀农葡萄、核桃、越橘和灰树花(评分分别为5、5、5、5、4、4、4、3、3、3、3、3分);可疑可靠者5种,包括南瓜籽、红枣、鱼油、水飞蓟和贯叶连翘(评分分别为2、2、2、0、-1分)。结论:蔓越莓、丹参、甘草、红花、蒲公英、枸杞、葡萄柚、洋甘菊和石榴汁等HDS增强华法林抗凝作用的程度和可靠性均较高,应避免在华法林治疗期间使用。
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编辑人员丨5天前
