目的:建立采用1H定量核磁共振波谱法(1H qNMR)测定帕瑞昔布钠对照品质量分数的方法.方法:在1H qNMR中,使用Bruker Ascend 600超导核磁共振谱仪,以氘代二甲基亚砜为溶剂,采用zg30脉冲序列,弛豫延迟时间为30s,扫描次数为64次.结果:以帕瑞昔布钠δ7.74的氢质子响应信号作为样品定量信号,以马来酸86.23的氢质子响应信号作为内标物定量信号.样品内标物信号响应面积比与质量比的线性回归方程为y=0.296 2x-0.001 0,相关系数为0.999 7,重复性实验的RSD为0.15％(n=6).测得帕瑞昔布钠(以C19H17N2O4S-计)的质量分数为93.91％,与质量平衡法(93.83％,按C19H17N2O4S-计)、HPLC外标一点法(93.89％)结果一致.结论:本文建立的核磁定量方法可用于帕瑞昔布钠的质量分数测定,该方法准确、快速,并为质量平衡法对标准物质定值提供有力佐证.

目的 建立定量核磁方法,同时测定复方阿胶浆(Compound E'jiao Jiang,CEJ)的药材提取液中多类成分的含量,为中间体的质量评价提供可靠的分析手段.方法 采用水信号预饱和脉冲序列Noesygpprld采集样品的1H-NMR图谱.通过文献调研、数据库检索以及加标实验的方式进行核磁谱峰归属.进一步确定各化合物的定量峰,采用内标法定量.开展方法学考察,考察项包括线性、精密度、稳定性、重复性、耐用性、准确度.另基于核磁共振氢谱的信噪比确定方法的检测限和定量限,并对3批中间体样本进行分析.结果 共指认22种化合物,其中17种可同时定量分析,包括缬氨酸、丙氨酸、异亮氨酸、焦谷氨酸、γ-氨基丁酸5种氨基酸,乙酸根、富马酸根、丙酮酸根、琥珀酸根、甲酸根、乳酸6种小分子有机酸根,葡萄糖、果糖、半乳糖、蔗糖4种糖类以及尿苷、胆碱.线性考察结果得出相关系数均不小于0.999 5,精密度考察结果显示,RSD均小于2.7％,重复性考察RSD均小于2.5％,耐用性及稳定性考察RSD均小于2.6％,加样回收实验得出平均回收率为90.0％～105.0％、RSD小于2.2％,分析值与参考值平均相对偏差小于4.0％.对3批样品进行定量分析,17种成分的测定结果均高于定量限,且满足线性范围.3批样品可定量部分占总固体含量的质量分数分别为71.09％、84.44％、70.09％.结论 各方法学考察均满足要求;研究开发的定量核磁方法检测时间短、制样方式简单,能有效提高分析效率,为CEJ的生产过程物质转移规律研究打下基础.

目的 建立定量核磁共振技术(qNMR)同时测定注射用丹参多酚酸中咖啡酸、丹参素、原儿茶酸和阿魏酸.方法 通过qNMR测定4种单体酚酸,脉冲序列zg30抑制水峰,谱宽设定8 012.8 Hz,温度为25℃,采样点数为131 072,采集时间为4.09 s,弛豫延迟时间为8.26 s,纵向弛豫时间为1.25 s;采样次数为16,接收器增益值为35.6,数字化仪分辨率值为18,空扫次数为4,发射机频率偏移为6.0 ×10-6.以三氟乙酸-d为内标,根据峰面积比与质量比计算4种单体酚酸的含量.结果 咖啡酸、丹参素、原儿茶酸、阿魏酸分别选取 9.47X10-6(s,H-7)、8.02×10-6(s,H-8)、5.86×10-6(s,H-8)、12.79×10-6(s,H-8)处的信号为定量峰;分析物在12 h后稳定性较差,所有样品在制备后12h内完成测定;咖啡酸在0.103～1.625μg·mL-1(r2=0.999 3),丹参素在 2.256～3.194 μgmL-1(r2=0.999 5),原儿茶酸在9.699～13.584 pgmL-1(r2=0.999 8),阿魏酸在 1.566～2.649 μg·mL-1(r2=0.999 6)均呈良好的线性关系;加样回收率分别为104.9％、101.5％、104.1％、101.4％,RSD值分别为1.6％、2.1％、2.3％、1.5％;精密度、准确性、重复性均良好.结论 建立的qNMR可同时测定注射用丹参多酚酸中咖啡酸、丹参素、原儿茶酸和阿魏酸.

目的:建立采用1H定量核磁共振(qNMR)波谱法测定那红地那非对照品的含量.方法:在1 H qNMR中,使用Bruker Ascend 600超导核磁共振谱仪,以氘代氯仿为溶剂,采用noesyigld1 d脉冲序列,弛豫延迟时间为30 s,扫描次数32次.结果:以那红地那非δ8.15和δ9.14的氢质子响应信号作为样品定量信号,以1,3,5-三甲氧基苯δ6.09的氢质子响应信号作为内标物定量信号.样品δ8.15与内标物δ6.09信号响应面积比与质量比的线性回归方程为y=0.1197 x+0.0034,相关系数为0.9991,重现性实验的RSD为1.66％(n=5),重复性实验的RSD为0.76％,测得那红地那非的含量为97.48％;样品 δ9.14与内标物δ6.09信号响应面积比与质量比的线性回归方程为:y=0.1168 x+0.0045,相关系数为0.9991,重现性实验的RSD为1.69％,重复性实验的RSD为0.43％,测得那红地那非的含量为95.35％.1 H qNMR法测得那红地那非的含量(两组响应信号测得的含量平均值)为96.42％,与质量平衡法结果(96.54％)以及HPLC外标一点法结果(97.07％)一致.结论:本研究建立的核磁定量方法可用于那红地那非的含量测定,该方法准确、快速,并为质量平衡法对标准物质定值提供有力的佐证.

目的 建立灯心草抗焦虑有效部位菲类成分的定量核磁共振波谱含量测定方法,同时采用高效液相色谱加以验证.方法 以对苯二甲酸作为内标,探头温度298.2 K,脉冲序列zg 30,扫描次数NS=16,脉冲延迟时间dl=ls.定量特征信号选择为去氢厄弗酚C4-H峰(δ8.35),灯心草酚C4-H峰(δ7.31)和厄弗酚C4-H峰(δ7.07).结果 厄弗酚,核磁共振与高效液相色谱法结果分别为338.75和340.87 mg·g-1;去氢厄弗酚为41.14和42.99 mg·g-1;灯心草酚结果为109.13和107.73 mg·g-1,而对于去氢灯心草酚,HPLC结果为9.561 mg·g-1.结论 两种方法结果基本一致,表明QNMR可用于灯心草抗焦虑有效部位菲类成分的含量测定.QNMR操作简单、快速、专属性强、不需高纯对照品、只需价格低廉的内标物即可同时定量多个化学成分.

银杏二萜内酯原料是从银杏叶中提取纯化所得,是银杏二萜内酯葡胺注射液的原料.分别建立了银杏二萜内酯原料药的1H-NMR含量测定和指纹图谱分析方法.采用1H-NMR法对3批样品进行含量测定,并与高效液相测定结果进行比较,结果显示2种方法的检测结果基本一致.指纹图谱研究确定了24个质子峰作为共有指纹峰,并利用对照品及NMR信息对指纹峰进行了指认.10批样品的测定结果发现,其指纹图谱相似度均大于0.99.该研究建立的银杏二萜内酯原料药1HNMR含量测定和指纹图谱分析方法,快速,便捷,且具有良好的精密度、稳定性和重复性,为银杏二萜内酯原料药及其制剂的质量评价提供依据以及新的思路.

目的 建立复方对乙酰氨基酚片中阿司匹林、咖啡因和对乙酰氨基酚测定的氢核磁共振波谱方法.方法 采用氘代甲醇为溶剂,马来酸为内标.采用zg30脉冲序列获取1H-NMR谱图.测试温度:300 K;谱宽:8012 Hz;采集时间:4.01 s:弛豫时间:20 s,样品扫描次数:64次;空扫次数:2次.并采用HPLC法测定进行比较.结果 阿司匹林、对乙酰氨基酚和咖啡因平均回收率分别为101.29％、101.68％、99.13％,RSD值分别为1.15％、1.73％、1.92％.qNMR法测定结果与HPLC法测定结果基本一致.结论 氢核磁共振波谱法操作简便、快速,能准确测定复方对乙酰氨基酚片中阿司匹林、咖啡因和对乙酰氨基酚.

建立了固相萃取(SPE)-定量核磁共振波谱(qNMR)测定双黄连胶囊中绿原酸含量的方法.绿原酸是双黄连胶囊处方中金银花提取物的有效成分.样品用纯水在室温条件下超声提取,以HC-C18型SPE柱对提取液进行富集净化后,用qNMR测定绿原酸的含量.考察了超声时间、SPE样品前处理条件以及定量核磁共振实验条件对结果的影响.选择氘代二甲基亚砜为溶剂,标定后的对苯二甲醛作为内标.选择脉冲宽度P1=14.1 μs,延迟时间d1=1s,扫描次数NS=512为qNMR定量绿原酸的实验条件.绿原酸的定量峰为δ 6.138-6.182 (H-8',d,1H).结果 显示,所建方法的日内精密度的RSD为1.2％,日间精密度RSD为1.5％,绿原酸与对苯二甲醛峰面积比与质量比的零截距标准曲线线性相关系数为0.9999,且斜率与理论值相符.该法测定绿原酸的LOD为0.0017 mg/g;LOQ为0.079 mg/g.包括样品经SPE预处理过程的绿原酸的回收率为100.2％～103.2％.实际测定双黄连胶囊中的绿原酸的含量为9.68～10.35 mg/g.

氢核磁共振定量(1H-qNMR)技术已经广泛应用于化学对照品的定值,是常用的赋值佐证方法,但在具体试验过程中会受多种因素影响.结合实际工作积累,本文讨论了内标与外标定量方法的差异,建议优先选择内标定量方法.探讨了内标选择的考虑因素,要保证内标物质的纯度以及溶解性等;称样方式及称样量对结果的潜在影响;溶剂选择以及温度影响,低温下应注意二甲亚砜的凝固点,升温时不用三氯甲烷等易挥发溶剂.对于弛豫延迟时间等关键仪器参数设置进行讨论,提出解决方法.举例阐述数据处理时的适宜积分方式以及在手动积分时的关注点.同时,依据《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)2020年版四部9101中分析方法验证指导原则,分析氢核磁共振定量试验方法学应考察的具体内容,充分保障其测定结果的准确性.

目的:建立采用1 H定量核磁共振波谱(1H quantitative nuclear magnetic resonance,1H qNMR)法测定盐酸莫西沙星及其杂质7-氨基莫西沙星喹啉羧酸对照品含量的方法.方法:采用核磁共振波谱法,使用Bruker Ascend 600超导核磁共振谱仪,以氘代二甲基亚砜(DMSO-d6)为溶剂,脉冲序列为noesyigld1d,弛豫延迟时间为30 s,扫描次数16次.结果:选取氢谱图中δ6.09为内标物的定量信号,δ8.67和δ7.68为盐酸莫西沙星的定量信号,δ8.60和δ7.69为7-氨基莫西沙星喹啉羧酸的定量信号,测得盐酸莫西沙星及其杂质7-氨基莫西沙星喹啉羧酸的含量与质量平衡法结果基本一致.结论:本研究建立的核磁定量方法可用于盐酸莫西沙星及其杂质7-氨基莫西沙星喹啉羧酸的含量测定,该方法准确、快速,并为质量平衡法对标准物质定值提供有力的佐证.