目的 观察吲哚-3-甲醇(I3C)对低氧诱导的肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的作用.方法 采用0.2％Ⅰ型胶原酶消化分离SD大鼠PASMCs,以低氧(1％O2)作为诱导剂,建立PASMCs增殖的细胞模型,以不同浓度的I3C(25、50、100、200 μmol·L-1)干预24h,检测细胞增殖及存活率;设置哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抑制剂rapamycin或缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)抑制剂LW6为阳性对照组,以100 μmol·L-1 I3C,HIF-1α稳定剂DMOG或mTOR激活剂MHY1485干预24 h后,CCK-8试剂盒检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞周期;Western blot检测HIF-1α、总的mTOR及磷酸化的mTOR和细胞周期调控相关蛋白的表达,确定I3C抑制PASMCs增殖的作用机制.结果 25～100μmol·L-1 I3C抑制低氧诱导的PASMCs增殖的作用具有浓度依赖性(P＜0.05),而100 μmol·L-1与200 μmol·L-1 I3C抑制细胞增殖的作用无明显差异,且I3C无明显细胞毒性作用.I3C(100 μmol·L-1)与LW6均可抑制低氧诱导的PASMCs增殖,阻滞细胞周期于G0/G1期,抑制HIF-1α、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、Cyclin E、细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)2、CDK4和CDK6的表达(P＜0.05),且DMOG能够逆转I3C的上述作用(P＜0.05).另外I3C与rapamycin在抑制低氧诱导的PASMCs增殖与mTOR/HIF-1α信号通路活化方面作用相似,且MHY1485能够逆转I3C抑制细胞增殖及mTOR/HIF-1α信号通路活化的作用(P＜0.05).结论 I3C可通过抑制mTOR/HIF-1α信号通路减弱低氧诱导的PASMCs增殖.

目的 分析子宫内膜癌病灶超声造影参数与Beclin1、Beclin1关联X蛋白(Bax)及周期素依赖性激酶4(CDK4)表达水平的相关性.方法 选取2022年1月至2023年1月在联勤保障部队第九○○医院就诊的4 2例子宫内膜癌患者作为恶性组,5 8例癌前病变患者作为良性组.两组患者均给予超声造影成像检查并测定造影剂平均渡越时间(MMT)、达峰时间(TTP)及峰值强度(Peak),均进行子宫切除术并采集病灶组织,检测Beclin1、Bax、CDK4及周期素依赖性激酶6(CDK6)表达水平.采用Pearson相关分析子宫内膜癌病灶超声造影参数与Beclin1、Bax及CDK4表达水平的相关性.结果 恶性组病灶Peak高于良性组,MMT长于良性组,TTP短于良性组,Beclin1、Bax表达水平低于良性组,CDK4、CDK6表达水平高于良性组,差异均有统计学意义(P＜0.05).恶性组中TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期患者病灶Peak高于 Ⅰ～Ⅱ期患者,MMT长于Ⅰ～Ⅱ期患者,TTP短于Ⅰ～Ⅱ期患者,差异均有统计学意义(P＜0.05).恶性组中TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期患者病灶组织Be-clin1、Bax表达水平低于Ⅰ～Ⅱ期患者,CDK4、CDK6表达水平高于Ⅰ～Ⅱ期患者,差异均有统计学意义(P＜0.05).Pearson相关分析结果显示,子宫内膜癌病灶Peak、MTT与CDK4及CDK6表达水平呈正相关(P＜0.05),与Beclin1、Bax表达水平呈负相关(P＜0.05),TTP与病灶组织CDK4及CDK6表达水平呈负相关(P＜0.05),与Beclin1、Bax表达水平呈正相关(P＜0.05).结论 子宫内膜癌患者MTT长于癌前病变患者,以及Peak、CDK4、CDK6表达水平均高于癌前病变患者,子宫内膜癌患者病灶超声造影参数 MTT、TTP及Peak与Beclin1、Bax及CDK4表达水平相关,超声造影检查有助于辅助临床判断子宫内膜癌患者细胞凋亡相关蛋白表达情况.

目的 基于网络药理学、分子对接和体内实验方法探讨感冒清热片抗肺损伤的作用机制.方法 以中药系统药理学数据库和分析平台(TCM-SP)、Genecards等数据库,筛选感冒清热片治疗肺损伤的潜在作用靶点.采用Cytoscape 3.9.0 软件构建"中药-有效成分-靶点"网络,并用生物信息云平台对潜在作用靶点进行基因本体(GO)功能与京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析.建立蛋白互作(PPI)网络,并与"中药-有效成分-靶点"网络进行交集分析,筛选关键靶蛋白.将关键靶蛋白和有效成分进行分子对接.建立肺损伤小鼠模型验证感冒清热片对关键靶标蛋白的作用.结果 共筛选出感冒清热片治疗肺损伤的作用靶点 707 个,对应11 味中药中 107 种化合物.利用构建的"中药-有效成分-靶点"网络发现感冒清热片可能通过豆甾醇、芦丁、金合欢素等有效成分对前列腺素G/H合成酶 1(PTGS1)、雄激素受体(AR)、乙酰胆碱酯酶(ACHE)等作用靶点进行调控.利用PPI网络发现SRC酪氨酸激酶(SRC)、表皮生长因子受体(EGFR)、信号转导因子和转录激活因子 3(STAT3)等核心靶点.通过PPI网络与"中药-有效成分-靶点"网络交集分析,筛选出关键靶标蛋白周期蛋白依赖性激酶 1(CDK1)、CDK2、EGFR、雌激素受体 1(ESR1)和SRC.分子对接研究显示,感冒清热片中的豆甾醇、芦丁、金合欢素分别与CDK1、CDK2、EGFR、ESR1、SRC有较好的结合能力.体内实验发现感冒清热片可剂量依赖性地减轻肺损伤小鼠的肺组织损伤、炎性浸润,降低TNF-α、IL-1β、IL-6 的含量,增强CDK1、CDK2 的表达,降低EGFR、ESR1 和SRC的表达.结论 感冒清热片对肺损伤的治疗作用可能通过其所含的豆甾醇、芦丁、金合欢素等关键活性成分,作用于CDK1、CDK2、EGFR、ESR1、SRC等关键靶标蛋白,调控神经活性配体-受体相互作用、癌症途径、钙信号通路等关键信号通路来实现的.

目的:探讨丛状纤维组织细胞瘤（PFHT）临床病理特点及其鉴别诊断。方法:收集空军军医大学（第四军医大学）西京医院2008年9月至2019年12月PFHT病例10例进行临床资料、镜下及免疫组织化学染色观察。该组病例中，男性3例，女性7例；年龄1~54岁。结果:病变表现为突出于皮肤的包块，组织学特点，肿瘤由单核细胞样细胞及多核巨细胞构成丛状或结节状，外周围绕短梭形纤维母/肌纤维母细胞，由纤维结缔组织分隔。按病理组织分型，7例为组织细胞样型，其中3例结节内伴有黏液变性；1例为纤维母细胞型，主要由纤维母细胞样细胞组成；2例为混合型。免疫组织化学染色显示，单核或多核组织细胞样细胞CD68（8/10）、CD10（6/8）、CD163（5/8）、cyclin D1（8/8）、CDK4（5/8）、PGP9.5（4/5）、β-catenin（4/6）和MiTF（2/6）阳性；瘤细胞及周边纤维母细胞样细胞波形蛋白（9/9）阳性。Ki-67阳性指数为5%~40%，平均20%。所有病例均进行手术切除，术后随访9个月~11年，仅有2例复发。结论:PFHT是一种低度恶性的软组织肿瘤，诊断主要依靠组织病理学和免疫组织化学标记。

目的:探讨高压氧（HBO）联合纳米二氧化硅粒子（Nano-SiO 2）对结肠癌细胞Colon-26的抑制效应，并探讨可能的分子机制。 方法:将结肠癌细胞Colon-26分为对照组、Nano-SiO 2处理组、HBO组及HBO与Nano-SiO 2联合处理组，采用Lipofectamine 2000转染特定的质粒（miR-218-5p mimics、miR-218-5p inhibitor）或microRNA于细胞内，以MTT法测定不同分组下的细胞量、微列阵检测法测定不同分组下的整体microRNA表达差异、逆转录定量聚合酶链反应及免疫印迹测定不同分子的表达情况。 结果:HBO组与对照组比较，细胞存活率差异无统计学意义（ P>0.05）；Nano-SiO 2处理可使细胞存活率降至对照组的60%，而联合处理可使细胞存活率降至对照组的30%，差异均有统计学意义，且2种处理组间差异也有统计学意义（ P<0.05）。Nano-SiO 2处理组及联合处理组有27个microRNA的表达存在明显差异，其中联合处理组细胞中miR-218-5p显著高于HBO组和Nano-SiO 2组，差异有统计学意义（ P<0.05）。双荧光素酶报告基因系统证实miR-218-5p对CDK6的3’非翻译区具有明显的抑制作用（ P<0.05）。microRNA阴性对照转染细胞中，联合处理组较Nano-SiO 2组细胞数量显著降低，差异有统计学意义（ P<0.05）；而miR-218-5p inhibitor转染组中，联合处理组与Nano-SiO 2组的细胞数量差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:HBO和Nano-SiO 2联合处理可通过miR-218-5p/CDK6信号轴上调抑制结肠癌细胞Colon-26的增殖。

目的:探讨四维自动左心房（左房）定量（4D Auto LAQ）分析技术在慢性肾脏病（CKD）患者的左房容积和应变功能改变评估中的作用，同时筛选出能够早期识别CKD患者左房功能受损的敏感参数。方法:回顾性队列研究。选取2022年8月—2023年3月在大连医科大学扬州临床医学院肾内科住院治疗的、未进行透析的CKD患者90例作为病例组，根据患者肾小球滤过率进行CKD分期，进而分别纳入CKD3、CKD4、CKD5组；另选取同期健康体检的志愿者34例作为对照组。采用单因素方差分析、 χ2检验和非参数检验分析基线资料的组间差异。采集并对比各组被试者左心室（左室）后壁厚度（LVPWD）、左室射血分数（LVEF）、左房前后径（LAD），左室收缩末期内径（LVESD）、左室舒张末期内径（LVEDD）、二尖瓣口舒张早期峰值流速（E峰）、二尖瓣口舒张晚期峰值流速（A峰）、二尖瓣环舒张早期运动速度峰值（e’峰）、E/A值和E/e’值等二维常规超声心动图参数，左房最小容积（LAVmin）、左房最大容积（LAVmax）、左房收缩前容积（LAVpreA）、左房最大容积指数（LAVImax）、左房射血容量（LAEV）；左房射血分数（LAEF）等4D Auto LAQ分析的左房容积参数，以及储存期纵向应变（LASr）和周向应变（LASr-c）、管道期纵向应变（LAScd）和周向应变（LAScd-c）、收缩期纵向应变（LASct）和周向应变（LASct-c）等4D Auto LAQ分析的左房应变参数。应用Pearson相关分析左房应变参数与LAEF和LAVImax的相关性，绘制受试者操作特征（ROC）曲线寻找评价左房功能的最优参数，并通过Pearson相关和Spearman相关探讨其相关性。 结果:（1）基线资料组间比较：与对照组相比，CDK3组、CKD4组和CKD5组患者血肌酐和脑钠肽水平均升高，CKD4组和CKD5组收缩压和舒张压均升高，差异均有统计学意义（ P值均<0.05）。与CKD3组相比，CKD4和CKD5组收缩压和血肌酐均升高，CKD5组脑钠肽升高，差异均有统计学意义（ P值均<0.05）；与CKD4组相比，CKD5组血肌酐和脑钠肽均升高，差异有统计学意义（ P值均<0.05）。各组被试者年龄、性别、体表面积、体质量指数比较，差异均无统计学意义（ P值均>0.05）。（2）二维常规超声心动图参数测量值组间比较：9个常规超声心动图参数中，LVEDD、LVESD、LVPWD、A峰、E/e’、LAD 4组间比较差异均有统计学意义（ P值均<0.05），LVEF、E峰、E/A 4组间比较差异无统计学意义（ P值均>0.05）。CKD4组和CKD5组LVEDD、LVPWD、A峰、E/e’、LAD均高于对照组；CKD5组LVESD低于对照组、CKD3组和CKD4组，CKD5组LVEDD高于CKD3组、E/e’高于CKD3组和CKD4组，差异均有统计学意义（ P值均<0.05）。（3）4D Auto LAQ参数测量值组间比较：CKD3组LAVmin、LAVpreA、LASr、LAScd、LASr-c、LAScd-c，以及CKD4组和CKD5组12个4D Auto LAQ参数与对照组比较差异均有统计学意义（ P值均<0.05）；CKD5组LAVmax、LAEV及LASct的绝对值高于CKD3组，LASr低于CKD3组，差异均有统计学意义（ P值均<0.05）。病例组各组LAVmax、LAVmin、LAVpreA、LAVImax、LAEV、LASct、LASct-c的绝对值均高于对照组，且随CKD分期增加而增加；LAEF及LASr、LAScd、LASr-c、LAScd-c的绝对值均低于对照组，且除LASr-c外，其他4个参数值随CKD分期增加而降低。以上各指标4组间总体比较，差异均有统计学意义（ P值均<0.05）。（4）相关性分析：LAEF与 LAScd、LASct、LAScd-c、LASct-c均呈负相关（ r=0.298、-0.219、-0.323、-0.293， P值均<0.05），与LASr、LASr-c均呈正相关（ r=0.466、0.574， P值均<0.001）；LAVImax与LASr、LASr-c呈负相关（ r=-0.322、-0.433， P值均<0.001），与LAScd-c呈正相关（ r=0.327， P<0.001）。（5）ROC曲线分析结果显示，左房应变参数LASr的ROC曲线下面积最大［AUC为0.922（95％ CI 0.877~0.967），灵敏度为67.80％，特异度为100.00％，截断值为0.175］，优于其他参数。（6）对基线资料与应变参数（LASr、LASr-c）的相关性进行分析，血肌酐、收缩压、脑钠肽与LASr的均呈负相关（ r=-0.589、-0.441， rs=-0.578， P值均<0.001）。在观察者内和观察者间进行重复性检验时，ICC>0.75，表示重复性较好。 结论:CKD患者左房容积增大，储备功能、管道功能降低，泵功能代偿性升高。LASr是早期识别CKD患者左房功能受损的敏感参数，血肌酐、收缩压和脑钠肽与左房功能受损相关。4D Auto LAQ技术是评估CKD患者左房功能的有效方法，在临床工作中具有一定的指导作用。

目的:探讨罗格列酮(RG)对舒尼替尼(SU)耐药肾癌(RCC)细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法:采用递增SU浓度法(1、3、5、10、15 μmol/L)培养建立耐药RCC细胞株(786-O/SR和A498/SR)，转染短发夹RNA(shRNA)静默过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达。实验分为空白组(不加药物)，sh(－)组(未转染shRNA)、shPPARγ组(转染shPPARγ)和shNC组(转染阴性对照)，后3组给予30 μmol/L RG。使用5-乙炔基-2’脱氧尿苷(EdU)染色、Transwell小室法和划痕实验分别检测RG对耐药细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响。流式细胞术分析RG对细胞周期和细胞凋亡的影响，蛋白质印迹法(Western blot)检测视网膜母细胞瘤蛋白(pRb)、细胞周期素D1(Cyclin D1)、周期蛋白依赖激酶4和6(CDK4、CDK6)、周期蛋白依赖激酶抑制因子21和27(p21、p27)的表达。组间比较采用单因素方差分析。结果:786-O/SR和A498/SR细胞sh(－)组、shPPARγ组、shNC组的EdU细胞阳性率[(23.0±2.0)%、(27.5±5.1)%；(31.0±2.2)%、(38.6±2.5)%；(22.3±3.6)%、(25.3±2.4)%比(52.0±3.6)%、(55.3±6.8)%， F＝73.457、27.212， P<0.01]；侵袭细胞数[(47.0±7.8)、(72.0±9.0)个；(90.6±11.2)、(104.0±9.6)个；(54.0±13.5)、(66.0±7.5)个比(129.6±11.7)、(169.6±18.1)个， F＝34.236、48.367， P<0.01]；细胞迁移率[(25.6±5.7)%、(25.7±2.1)%；(39.9±5.8)%、(38.6±5.4)%；(25.3±4.7)%、(28.8±3.9)%比(59.3±11.4)%、(63.5±8.7)%， F＝13.557、29.859， P<0.01]均低于空白组，其中shPPARγ组均高于sh(－)组和shNC组。G 1期细胞比例sh(－)组高于空白组[(69.4±1.3)%、(73.1±2.2)%比(50.3±2.3)%、(52.0±3.6)%， F＝34.815、22.033， P<0.01]；S期细胞比例sh(－)组低于空白组[(16.2±1.1)%、(14.1±1.7)%比(34.4±2.1)%、(33.0±1.4)%， F＝91.784、58.237， P<0.01]。sh(－)组pRb(0.17±0.2、0.14±0.09比0.37±0.02、0.32±0.02， F＝71.950、83.872， P<0.01)、Cyclin D1(0.21±0.09、0.21±0.02比0.45±0.06、0.65±0.04， F＝20.865、48.571， P<0.01)、CDK4(0.34±0.02、0.27±0.02比0.53±0.03、0.47±0.03， F＝46.726、72.617， P<0.01)、CDK6蛋白表达量(0.38±0.01、0.25±0.08比0.59±0.02、0.44±0.03， F＝40.428、55.998， P<0.01)低于空白组，而p21(0.57±0.05、0.41±0.03比0.17±0.02、0.17±0.02， F＝80.713、77.589， P<0.01)、p27蛋白表达量(0.67±0.02、0.50±0.02比0.23±0.03、0.16±0.02， F＝35.688、69.329， P<0.01)高于空白组。786-O/SR细胞凋亡率空白组低于sh(－)组[(10.2±1.7)%比(25.5±2.1)%， F＝35.768， P<0.01]，RG对A498/SR细胞凋亡无影响。 结论:RG由PPARγ依赖及非依赖途径共同参与调节抑制SU耐药RCC细胞的增殖和侵袭。

目的:探讨核小体装配蛋白1样1(NAP1L1)对鼻咽癌细胞增殖能力的影响及其机制。方法:选取2017年1月到2021年1月新乡市中心医院收集的60例鼻咽癌组织和癌旁组织作为研究对象，采用免疫组织化学分析癌旁组织和鼻咽癌组织NAP1L1蛋白表达水平。采用NAP1L1短发卡RNA(shRNA)慢病毒感染低分化鼻咽癌细胞SUNE-1，建立对照组和NAP1L1 KD组细胞系，采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、克隆形成实验和体外移植瘤实验分析NAP1L1对鼻咽癌细胞增殖的影响。采用流式细胞术分析两组细胞周期水平；采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分析肿瘤组织和癌旁组织中周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)、周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)和细胞周期素D1(CCND1) mRNA和蛋白表达水平。组间计量数据比较采用 t检验。 结果:NAP1L1蛋白主要表达于细胞核中。定量结果显示，癌旁组织NAP1L1蛋白表达强度(31.64±7.01)明显低于鼻咽癌组织NAP1L1蛋白表达强度(91.80±15.18)，差异有统计学意义( t＝27.87， P<0.05)。对照组细胞48 h和72 h吸光度( A)值(1.08±0.08、1.89±0.11)明显高于NAP1L1 KD组细胞48 h和72 h A值(0.79±0.08、1.31±0.05)，差异有统计学意义( t＝6.328、11.570， P<0.05)。克隆形成实验结果显示，对照组细胞克隆形成数量(109.50±14.45)明显高于NAP1L1 KD组细胞克隆形成数量(66.33±7.69)，差异有统计学意义( t＝6.462， P<0.05)。接种30 d后对照组细胞在裸鼠成瘤体积和重量[(1 072.90±114.87) mm3、(4.96±0.52) g]显著高于NAP1L1 KD组细胞[(855.90±55.54) mm 3、(3.27±0.23) g]，差异有统计学意义( t＝5.387、9.425， P<0.05)对照组细胞G 0/G 1期比例[(55.03±3.09)%]明显低于NAP1L1 KD组细胞[(74.88±2.16)%]，差异有统计学意义( t＝12.890， P<0.05)。对照组细胞G 2/M期比例[(5.61±0.63)%]明显低于NAP1L1 KD组细胞[(14.01±1.03)%]，差异有统计学意义( t＝17.080， P<0.05)。对照组细胞S期比例[(30.27±1.79)%]明显高于NAP1L1 KD组细胞[(11.44±2.34)%]，差异有统计学意义( t＝15.650， P<0.05)。对照组细胞CDK4、CDK6和CCND1蛋白表达水平(1.23±0.06、1.03±0.09、0.88±0.05)明显高于NAP1L1 KD组细胞(0.41±0.07、0.60±0.05、0.30±0.05)，差异有统计学意义( t＝21.330、10.560、19.980， P<0.05)。 结论:NAP1L1在鼻咽癌组织中呈高表达，通过调节与肿瘤细胞周期相关蛋白的表达水平，调节细胞周期变化，进而影响肿瘤细胞恶性增殖的能力。

目的:探讨黏液样多形性脂肪肉瘤（myxiod pleomorphic liposarcoma，MPLPS）的临床病理及分子遗传学特征。方法:收集2015—2021年福建省立医院诊治及会诊MPLPS病例共6例，对其进行组织形态学观察及免疫组织化学染色，并运用荧光原位杂交（FISH）检测DDIT3（CHOP）和MDM2/CDK4基因。结果:6例病例中男性4例，女性2例，年龄26~74岁（平均年龄53.8岁）。肿瘤最大径3.8~16.0 cm（平均11.8 cm）。病理组织学上6例表现相似，表现为黏液性脂肪肉瘤样和多形性脂肪肉瘤样重叠的组织学形态。S-100蛋白4例（4/6）阳性，Ki-67阳性指数50%~95%。FISH法检测示DDIT3（CHOP）及MDM2/CDK4均为阴性（6/6）。1例基因测序存在TP53（p.R248W）胚系突变。结论:MPLPS是脂肪肉瘤的一种罕见亚型，病理学上表现为黏液性脂肪肉瘤样和多形性脂肪肉瘤样相重叠的形态，遗传学上少数有TP53基因胚系突变，但缺乏DDIT3（CHOP）基因易位和MDM2/CDK4基因扩增。

目的:探讨先天性膝关节反屈(congenital dislocation of the knee，CDK)的产前超声诊断线索。方法:回顾性分析2013年1月至2018年10月郑州大学第三附属医院诊断的13例CDK病例的产前超声特征，结合基因检测结果、病理结果等进行分析。结果:13例胎儿均于我院进行孕中期产前超声诊断，二维、三维超声均显示为膝关节反屈(单侧3例，双侧10例)。所有病例均伴有多发异常，主要包括足内翻(5例)、重叠指(2例)、鼻骨短小(1例)、颈后皮肤层增厚(2例)、胸廓狭小(1例)、椎体发育异常(1例)等。其中超声诊断Larsen综合征2例，先天性多发性关节挛缩症3例，窒息性胸廓发育不良1例，CDK 7例。所有胎儿引产后均证实存在CDK。已知其中3例进行染色体检查，3例染色体微阵列分析(CMA)结果未见异常，1例进一步进行了二代测序结合一代测序筛查提示FLNB基因突变，证实为Larsen综合征。结论:CDK可孤立存在，也可以是多种疾病的共同表现形式，产前检出膝关节反屈时要注意是否合并其他异常，根据线索进一步行相关基因的检测，可为遗传咨询提供有价值的信息。