目的:探讨罗格列酮(RG)对舒尼替尼(SU)耐药肾癌(RCC)细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法:采用递增SU浓度法(1、3、5、10、15 μmol/L)培养建立耐药RCC细胞株(786-O/SR和A498/SR)，转染短发夹RNA(shRNA)静默过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达。实验分为空白组(不加药物)，sh(－)组(未转染shRNA)、shPPARγ组(转染shPPARγ)和shNC组(转染阴性对照)，后3组给予30 μmol/L RG。使用5-乙炔基-2’脱氧尿苷(EdU)染色、Transwell小室法和划痕实验分别检测RG对耐药细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响。流式细胞术分析RG对细胞周期和细胞凋亡的影响，蛋白质印迹法(Western blot)检测视网膜母细胞瘤蛋白(pRb)、细胞周期素D1(Cyclin D1)、周期蛋白依赖激酶4和6(CDK4、CDK6)、周期蛋白依赖激酶抑制因子21和27(p21、p27)的表达。组间比较采用单因素方差分析。结果:786-O/SR和A498/SR细胞sh(－)组、shPPARγ组、shNC组的EdU细胞阳性率[(23.0±2.0)%、(27.5±5.1)%；(31.0±2.2)%、(38.6±2.5)%；(22.3±3.6)%、(25.3±2.4)%比(52.0±3.6)%、(55.3±6.8)%， F＝73.457、27.212， P<0.01]；侵袭细胞数[(47.0±7.8)、(72.0±9.0)个；(90.6±11.2)、(104.0±9.6)个；(54.0±13.5)、(66.0±7.5)个比(129.6±11.7)、(169.6±18.1)个， F＝34.236、48.367， P<0.01]；细胞迁移率[(25.6±5.7)%、(25.7±2.1)%；(39.9±5.8)%、(38.6±5.4)%；(25.3±4.7)%、(28.8±3.9)%比(59.3±11.4)%、(63.5±8.7)%， F＝13.557、29.859， P<0.01]均低于空白组，其中shPPARγ组均高于sh(－)组和shNC组。G 1期细胞比例sh(－)组高于空白组[(69.4±1.3)%、(73.1±2.2)%比(50.3±2.3)%、(52.0±3.6)%， F＝34.815、22.033， P<0.01]；S期细胞比例sh(－)组低于空白组[(16.2±1.1)%、(14.1±1.7)%比(34.4±2.1)%、(33.0±1.4)%， F＝91.784、58.237， P<0.01]。sh(－)组pRb(0.17±0.2、0.14±0.09比0.37±0.02、0.32±0.02， F＝71.950、83.872， P<0.01)、Cyclin D1(0.21±0.09、0.21±0.02比0.45±0.06、0.65±0.04， F＝20.865、48.571， P<0.01)、CDK4(0.34±0.02、0.27±0.02比0.53±0.03、0.47±0.03， F＝46.726、72.617， P<0.01)、CDK6蛋白表达量(0.38±0.01、0.25±0.08比0.59±0.02、0.44±0.03， F＝40.428、55.998， P<0.01)低于空白组，而p21(0.57±0.05、0.41±0.03比0.17±0.02、0.17±0.02， F＝80.713、77.589， P<0.01)、p27蛋白表达量(0.67±0.02、0.50±0.02比0.23±0.03、0.16±0.02， F＝35.688、69.329， P<0.01)高于空白组。786-O/SR细胞凋亡率空白组低于sh(－)组[(10.2±1.7)%比(25.5±2.1)%， F＝35.768， P<0.01]，RG对A498/SR细胞凋亡无影响。 结论:RG由PPARγ依赖及非依赖途径共同参与调节抑制SU耐药RCC细胞的增殖和侵袭。

目的:探讨细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C(CDC25C)对肾细胞癌进展与舒尼替尼治疗敏感性的影响及其机制。方法:分析基因本体论(GO)细胞周期数据集与基因表达综合数据库(GEO)肾癌舒尼替尼耐药基因集，结合癌症基因组图谱(TCGA)数据，鉴定出差异表达的CDC25C基因。在Caki-1与786-O细胞系中转染CDC25C小干扰RNA(siRNA)及其阴性对照，通过细胞活性检测、集落形成和Transwell实验分别检测CDC25C对肾癌增殖、迁移和侵袭潜能的影响。通过免疫印迹法检测CDC25C蛋白表达，给予舒尼替尼处理探究CDC25C对肾癌靶向治疗敏感性的影响。Gene Ontology富集分析进一步明确CDC25C潜在的作用通路。采用 t检验及Anova-test等进行组间差异分析，Spearman检验进行相关分析，Kaplan-Meier法绘制生存曲线。 结果:CDC25C在肾癌组织中表达量(0.45±0.54)显著高于正常组织(0.07±0.15)，差异有统计学意义( t＝0.758， P<0.01)。生存分析显示CDC25C高表达患者中位生存期(63.7个月)显著低于低表达组(91.7个月)，差异有统计学意义(Log-rank＝9.860， P<0.01)。敲低CDC25C后Caki-1细胞克隆形成数目[(56.33±7.77)个]低于对照组[(111.67±17.50)个， t＝4.991， P<0.01]、侵袭细胞数[(81.33±9.02)个]低于对照组[(201.00±18.52)个， t＝10.006， P<0.01]，舒尼替尼半抑制浓度(IC 50)值[(0.35±0.19) μmol/L]也显著低于对照组细胞[(6.73±1.47) μmol/L， t＝7.439， P<0.01]，786-O细胞趋势一致。 结论:CDC25C在肾癌中表达增高并促进肿瘤细胞增殖、转移与舒尼替尼耐药性，靶向CDC25C作用轴有望进一步遏制肾癌进展。

目的:观察转移性肾透明细胞癌(m-ccRCC)在经过舒尼替尼治疗后，行肾癌切除术后癌组织中胶质瘤相关癌基因同源物-2(GLI-2)的表达对预后的影响。方法:选取2016年1月至2018年12月期间就诊于我院的43例m-ccRCC患者，接受舒尼替尼治疗后行肾癌切除术，应用免疫组织化学法检测肾癌组织中GLI-2、舒尼替尼靶向分子[血管内皮生长因子受体(VEGFR)-1和VEGFR-2]和C反应蛋白(CRP)的表达。应用Kaplan-Meier分析其表达与预后的关系。应用蛋白质印迹法(Western blot)和定量聚合酶链反应(qPCR)检测舒尼替尼耐药细胞株(786-O-R)和亲本细胞株(786-O)中蛋白和mRNA的表达。分类变量采用 χ2检验。 结果:43例患者中，1例(2.33%)获得完全缓解(CR)，7例(16.28%)获得部分缓解(PR)，总体有效率为18.60%；单因素分析发现核分级、GLI-2、血管内皮生长因子(VEGF)-1、VEGFR-2和CRP水平是影响舒尼替尼治疗的无进展生存期的因素[风险比( HR)＝2.650、3.770、2.850、2.970、2.660， P<0.05)，多因素分析发现，GLI-2是影响舒尼替尼治疗的无进展生存期的因素( HR＝4.180， P<0.05)；亲本细胞株(786-O)中GLI-2的表达显著低于舒尼替尼抗性细胞株(786-O-R)。 结论:GLI-2可能参与了m-ccRCC对舒尼替尼形成耐药的过程。

目的:建立肾癌舒尼替尼耐药细胞株,探讨蛋白二硫键异构酶A成员4(PDIA4)调控肾细胞癌舒尼替尼耐药的机制.方法:采用小剂量间歇诱导法建立786-O和OS-RC-2耐药细胞株(786-OR和OS-RC-2R),采用实时荧光定量PCR法、蛋白免疫印迹法检测PDIA4在耐药肾癌细胞株与非耐药肾癌细胞株中的表达情况,通过慢病毒感染构建PDIA4稳定过表达或敲减肾癌细胞系,通过细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测PDIA4对肾癌细胞增殖影响;通过qRT-PCR和Western blot检测凋亡相关蛋白BCL2、BAX、Caspase3、Cleaved-Caspase3、Caspase9表达.结果:与对照组亲本细胞株786-O和OS-RC-2相比,耐药细胞株786-OR和OS-RC-2R的PDIA4表达水平明显升高(P＜0.05).过表达PDIA4可促进肾癌细胞的生长和活力以及降低肾癌细胞对舒尼替尼的敏感性(P＜0.05);而敲低PDIA4能抑制肾癌细胞的生长和活力以及升高肾癌细胞对舒尼替尼的敏感性(P＜0.05).此外,过表达PDIA4能抑制促凋亡蛋白的表达(P＜0.05),而敲低PDIA4能促进促凋亡蛋白的表达(P＜0.05).结论:PDIA4与肾细胞癌舒尼替尼耐药有关,其机制是抑制细胞凋亡引起肾癌细胞癌舒尼替尼耐药,靶向PDIA4则可以逆转耐药.

甲状腺髓样癌(MTC)起源于滤泡旁细胞,是甲状腺癌中一种特殊的分型.MTC的转移率及术后复发率高,预后较差,晚期MTC的主要治疗方式是靶向治疗.多靶点酪氨酸激酶抑制剂(MKI)索拉菲尼和仑伐替尼对晚期MTC显示出较高的疾病控制率,凡德他尼、卡博替尼与安罗替尼已获批用于晚期MTC的治疗,舒尼替尼也初步显示一定疗效.RET激酶抑制剂是一种更精准治疗MTC的靶向药物,与MKI相比,不良反应小,耐受性更好.塞尔帕替尼和普拉西替尼在2020年获批治疗MTC,且对以往接受过酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗的患者显示出良好的疗效,但部分患者出现了获得性耐药以及新的基因突变.目前新一代能够克服耐药突变的RET激酶抑制剂正在Ⅰ/Ⅱ期临床试验中,本文旨在对MTC靶向治疗的研究进展作一综述.

目的:探讨舒尼替尼(SU11248)对耐药白血病细胞K562/ADR死亡的诱导作用及其相关信号通路.方法:使用不同浓度舒尼替尼干预K562/ADR细胞,分别于24、48、72、96 h收集各组细胞,采用MTS法检测舒尼替尼对K562/ADR细胞增殖能力的影响,确定适当的舒尼替尼干预时间和浓度.通过qPCR和Western blot检测舒尼替尼干预后K562/ADR细胞的凋亡相关基因mRNA和蛋白表达水平变化.使用4种不同细胞死亡抑制剂Nec-1、VX-765、CQ、Fer-1检测舒尼替尼干预后K562/ADR细胞的死亡方式.通过qPCR和 Western blot检测舒尼替尼干预后K562/ADR细胞的焦亡相关基因mRNA和蛋白表达水平变化.结果:舒尼替尼可明显抑制K562/ADR细胞的增殖,抑制效果呈一定的时间及浓度依赖性(r48h=0.9579、r4μg/ml=0.9740),其48 h的IC50为(3.96±0.14)μg/ml;舒尼替尼干预后K562/ADR细胞凋亡相关基因Bax、BCL-2、Caspase-3、Caspase-9的mRNA和蛋白表达水平均无明显变化;4种不同细胞死亡抑制剂处理后,仅焦亡抑制剂VX-765能够明显逆转舒尼替尼对K562/ADR细胞的增殖抑制作用(P＜0.01);舒尼替尼干预后 K562/ADR 细胞焦亡相关基因 Caspase-1、Caspase-4、Caspase-5、NLRP3、GSDMD、IL-1β的mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P＜0.01).结论:舒尼替尼可诱导耐药白血病细胞K562/ADR发生焦亡,深入研究细胞焦亡相关信号通路有望为耐药白血病治疗提供实验依据.

软组织肉瘤的传统治疗方法主要包括广泛切除、放疗及化疗,治疗目标是控制原发灶、预防肿瘤转移.化疗可减轻临床症状,延长患者生命,但易形成耐药性.某些蛋白激酶在软组织肉瘤细胞中呈现异常表达,靶向药物可通过抑制这些蛋白激酶而阻滞细胞增殖.软组织肉瘤的靶向治疗药物可分为小分子化合物和单克隆抗体两大类,小分子化合物包括伊马替尼、帕唑帕尼、舒尼替尼、索拉非尼、阿帕替尼、克唑替尼、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白抑制剂等,单克隆抗体主要包括贝伐单抗、olaratumab、cixutumumab、conatumumab等.

胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)是消化系统最常见的间叶源性肿瘤,起源于Cajal细胞或胃肠起搏细胞.其能够生长于胃肠道的任何部位,胃和小肠多见,其次为结直肠.GIST的发病机制与c-kit及血小板源性生长因子受体α(platelet-derived growth factor receptor-alpha,PDGFRA)的活化突变有关.GIST的临床表现无特征性,最终靠病理学确诊,而病理诊断取决于形态学和免疫组织化学结果.必要时可行基因学分析,其中CD117与DOG1的表达有助于特殊基因型GIST的诊断.目前GIST在治疗上以外科手术联合靶向治疗为主要方案,近年来随着新型手术器械的发展,腹腔镜手术也已逐渐得到人们的认可.伊马替尼是一种酪氨酸激酶抑制剂,能够特异性抑制kit、PDGFRA和bcl-al,于2001年批准使用.而舒尼替尼与伊马替尼比较而言,作用靶点更多,是GIST的二线药物,二者作用机理类似.以伊马替尼为代表的分子靶向药物在对GIST的治疗及改善患者预后中有显著疗效,在肿瘤的分子靶向治疗中代表着里程碑式的意义.但是随着用药时间的增长,GIST耐药逐渐成为影响GIST患者预后的重要因素之一.GIST的发病机制复杂,基因突变的种类多样,所以根据患者个体情况所制定的特定治疗方案更为重要.危险度分级被广泛应用于判断预后和指导分子生物靶向治疗.本文就胃肠道间质瘤现阶段的诊治与治疗研究进展作一综述.

包括血管生长因子受体(vascular endothelial growth factor receptor,VEGFR)抑制剂在内的多种分子靶向药物在过去的10年内极大地改善了晚期肾细胞癌患者的预后,但是大部分接受靶向药物治疗的患者最终会出现耐药,并出现疾病演进.因此有必要探索新的治疗方案以克服靶向药物的耐药性,进一步延长患者的无进展生存期.最近几年的临床研究发现,靶向程序性死亡受体1 (programmed cell death protein 1,PD-1)的新型免疫治疗单抗,可通过阻断PD-1通路介导的免疫抑制反应,增强T细胞对肿瘤细胞的识别,激活其攻击和杀伤能力,最终可延长那些对VEGFR抑制剂耐药的晚期肾癌患者的无进展生存期,PD-1单抗也因此成为晚期肾癌的新型免疫治疗制剂.前期临床研究发现,联合PD-1单抗及舒尼替尼或培唑帕尼等VEGFR抑制剂用于治疗晚期肾细胞癌患者,会产生较多的严重并发症,阻碍了这种联合治疗模式的探索.本文旨在尝试使用一种选择性较高的VEGFR抑制剂阿西替尼,与PD-1单抗pembrolizumab联合用于晚期肾细胞癌治疗,评估这种新型联合疗法的疗效及安全性.

胃肠间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)是胃肠道最常见的间叶组织来源肿瘤.伊马替尼是转移或不可切除GIST的标准一线治疗药物.但随着临床应用时间的延长,伊马替尼耐药病例在逐渐增加.对于这组伊马替尼耐药的GIST患者二线如何选择合理的诊疗策略,是临床亟待解决的问题.目前,指南推荐二线可选择增加伊马替尼剂量和直接换用舒尼替尼治疗.针对患者个体时,是选择伊马替尼加量,还是直接换用舒尼替尼治疗,这是临床医生关注的焦点.该文对一线标准剂量伊马替尼治疗失败的不同基因型GIST患者二线靶向治疗选择进行综述.