目的:研究宫颈癌(CC)癌组织中畸胎瘤衍生生长因子1(Cripto-1)与哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达及其临床意义。方法:应用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测2012年1月至2017年5月成都医学院第二附属医院收治的152例CC组织及40例正常宫颈组织中Cripto-1与mTOR表达，统计学分析组间表达差异及两者与临床病理特征及预后的关系。结果:CC组织中Cripto-1与mTOR的相对表达量明显高于正常宫颈组织( P<0.05)。CC组织中Cripto-1与mTOR表达呈正相关( r＝0.634， P<0.05)。CC组织中Cripto-1、mTOR蛋白与国际妇产科联盟(FIGO)分期、病理分级有关( P均<0.05)，与患者年龄、肿瘤的病理类型、浸润深度、是否伴有淋巴结转移无关( P均>0.05)。高Cripto-1表达患者的3年总体生存率(OS)与低Cripto-1表达患者的3年OS差异无统计学意义( P>0.05)，而高mTOR表达组3年OS明显低于低mTOR表达组患者(χ 2＝5.808， P＝0.016)。 结论:CC组织中Cripto-1与mTOR均表达增加，两者均与FIGO分期、病理分级有关，有可能成为CC诊断、治疗及评估的新分子标志物。

畸胎瘤衍生生长因子-1（CR-1）与肿瘤的发生、发展及预后之间存在密切关系。研究结果显示，许多肿瘤中可见CR-1异常表达，它在肿瘤的发生、肿瘤细胞的侵袭和转移、肿瘤血管生成以及上皮-间质转化（EMT）过程中发挥重要作用,可能与Nodal信号通路、非Nodal信号通路、Wnt/β-catenin及Notch信号通路等多种细胞信号传导通路有关。目前，CR-1被认为是新的肿瘤标志物，可能成为不同类型肿瘤干预性治疗的新靶点，也有可能成为肿瘤患者早期诊断以及预后评估重要的靶点，可为肿瘤的早期诊断与治疗提供一种新思路。通过对CR-1的结构与生物学特性、CR-1在肿瘤中的作用机制、CR-1与各种肿瘤的关系以及CR-1在肿瘤诊断、治疗和预后评估中4个方面的介绍，旨在对CR-1与不同部位肿瘤的关系相关研究进展作一综述。

目的 筛查预测非小细胞肺癌(NSCLC)侵袭、转移及预后的生物因子.方法 采用免疫组织化学方法检测145例NSCLC患者血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)的形成和Cripto-1的表达水平.结果 Cripto-1在NSCLC中的表达率(56.6％)显著高于正常组织(36.6％)(P＜0.001).37.2％的NSCLC组织中存在VM,但在正常肺组织中未发现VM(P＜0.05).Cripto-1表达与VM形成显著相关(P＜0.001).高水平的Cripto-1和VM形成会导致总生存期(o-verall survival,OS)降低(P＜0.001).多因素分析表明,Cripto-1上调、VM形成、淋巴结转移和TNM分期是反映NSCLC预后的重要指标.结论 Cripto-1和VM水平在NSCLC中显著升高,可能作为免疫标志物来预测该肿瘤的侵袭、转移和预后.

目的:探讨表面标志物Cripto-1(CR-1)的表达对食管癌干细胞生长的作用机制.方法:自食管癌Eca109细胞中分选Eca109干细胞,提取正常食管上皮细胞HEEC和Eca109细胞、Eca109干细胞总蛋白,采用Western-blot法检测CR-1表达水平;构建CR-1基因沉默载体CNE2/CR-1 -及过表达载体CNE1/CR-1 +,利用脂质体转染法将CNE2/CR-1 -和CNE1/CR-1 +分别转染进Eca109干细胞中,并设对照组,采用RT-PCR法检测CR-1表达;MTT法检测对照组、CNE2/CR-1 -组、CNE1/CR-1 +组Eca109干细胞增殖情况;流式细胞仪检测各组Eca109干细胞凋亡情况;Western-blot法检测各组细胞Akt、p-Akt蛋白表达情况.结果:Eca109细胞及Eca109干细胞中CR-1表达均明显高于HEEC(P<0.01).RT-PCR结果显示,CNE2/CR-1 -组CR-1表达水平明显低于对照组,CNE1/CR-1 +组明显高于对照组(P<0.01).MTT结果显示,CNE2/CR-1 -组细胞增殖明显低于对照组,CNE1/CR-1 +组明显高于对照组(P<0.01).流式细胞仪检测显示,CNE2/CR-1 -组细胞凋亡率明显高于对照组, CNE1/CR-1 +组细胞凋亡率明显低于对照组(P<0.01).Western-blot结果显示,CNE2/CR-1 -组p-Akt蛋白表达明显低于对照组,CNE1/CR-1 +组p-Akt蛋白表达明显高于对照组(P<0.01);而Akt蛋白表达未出现明显变化(P>0.05).结论:CR-1作为潜在的食管癌干细胞标记物,可能通过PI3K/Akt信号通路调控食管癌干细胞的增殖与凋亡.

目的:分析宫颈癌组织中同源形成素样蛋白2(FMNL2)、HERC4表达量与癌细胞浸润性生长的相关性.方法:选择在我院接受手术切除治疗的宫颈癌患者作为研究对象,术后收集入组患者的宫颈癌组织和癌旁组织,抽提RNA后采用PCR反应试剂盒测定FMNL2、HERC4及上皮间质转化基因、增殖基因的mRNA表达量.结果:宫颈癌组织中FMNL2、HERC4、Exosomes、Cripto-1、ZEB1、Snail、Vi-mentin、Piwil2、STOML-2、BCL-2、Smo、XIAP 的 mRNA 表达量显著高于癌旁组织(P< 0.05);高FMNL2表达量的宫颈癌组织中Exosomes、Cripto-1、ZEB1、Snail、Vimentin的mRNA 表达量显著高于低FMNL2表达量的宫颈癌组织(P<0.05);高 HERC4表达量的宫颈癌组织中Piwil2、STOML-2、BCL-2、Smo、XIAP的mRNA表达量显著高于低HERC4表达量的宫颈癌组织(P<0.05).结论:宫颈癌组织中高表达的FMNL2及HERC4分别能够促进癌细胞的上皮间质转化以及增殖,进而参与癌细胞浸润性生长的过程.

目的 研究Nodal生长分化因子(Nodal)及其受体在不同发育期小鼠的不同组织器官中的表达情况.方法 将10对(雌雄各一只为一对)小鼠分为4组:3对小鼠作为成年鼠组,剩余7对使其交配,其中3只孕鼠为胎鼠组,3只孕鼠为新生鼠组,1只孕鼠为仔鼠组.分别选取胎鼠、新生鼠、仔鼠、成年鼠的脑、肝、肾、心、肺等全身多种组织器官制备蛋白样品,采用Western blot方法检测Nodal及其Ⅰ型受体激活素受体样激酶(ALK)7、ALK4和辅助受体Cripto-1蛋白的表达.结果 仅大脑、小脑、肝脏、肾脏等4种组织器官在小鼠个体发育4个不同时期均有Nodal蛋白表达,其中只有肝和肾在4个发育时期同时表达Nodal及其受体蛋白.此外,与胎鼠、新生鼠和仔鼠3个发育阶段明显不同的是,大多数成年鼠组织器官均表达Nodal及其受体蛋白.结论 在小鼠个体发育后期,Nodal信号对肝脏和肾脏器官的生长发育可能具有一定作用.

目的:测定肝脏良恶性病变磁共振(M RI)动态增强扫描定量参数水平并探讨其对病情的评估价值.方法:67例原发性肝癌患者、78例肝脏良性病变患者分别作为肝癌组、肝脏良性病变组.检测两组患者的术前M RI动态增强扫描定量参数水平,评估具体参数水平与肝癌相关增殖、侵袭基因表达量的相关关系.结果:肝癌组平均强化时间(MET)、最大上升斜率(MSI)的水平低于肝脏良性病变组,最大下降斜率(MSD)的水平高于肝脏良性病变组.肝癌组病灶组织中增殖基因PRM T5、CDCA5、SIRT2、XIAP、Cep55 mRNA的表达量均高于肝脏良性病变组;侵袭基因Cripto-1、IFITM3 mRNA的表达量高于肝脏良性病变组,KLF4、HOXA9 mRNA的表达量低于肝脏良性病变组.Pearson检验发现,肝癌组织MRI动态增强扫描定量参数MET、MSI、MSD的水平与癌细胞增殖、侵袭活性均直接相关.结论:肝癌MRI动态增强扫描定量参数MET、MSI、MSD水平存在明显异常,且具体水平可客观反映肿瘤恶性程度.

目的 探讨血清Cripto-1在胃癌诊断和疗效判断中的应用价值,为临床提供参考依据.方法 选择2018年1-6月山东大学齐鲁医院收治的胃癌患者79例(胃癌组)、慢性萎缩性胃炎患者42例(慢性萎缩性胃炎组)和体检健康者30例(健康对照组)的血清标本.Cripto-1采用酶联免疫吸附法检测,癌胚抗原(CEA)、糖链抗原724(CA724)采用电化学免疫发光法测定.结果 胃癌组 、萎缩性胃炎组和健康对照组血清Cripto-1水平中位数(四分位数)分别为3.76(1.42～9.73)μg/L、0.71(0.34～0.86)μg/L、0.36(0.28～0.51)μg/L,差异有统计学意义(P<0.001);其中胃癌组血清Cripto-1水平高于萎缩性胃炎组和健康对照组(均P<0.05);萎缩性胃炎组高于健康对照组(P<0.05).血清CEA水平中位数(四分位数)3.46(2.15～4.59)U/L和CA724水平3.45(2.44～4.75)U/L仅在胃癌组升高(均P<0.05).Cripto-1诊断胃癌的受试者工作特征曲线下面积为0.818(95％CI:0.747～0.876),其明显高于CEA和CA724(均P<0.05).胃癌患者手术后血清Cripto-1水平明显低于手术前水平(P<0.05).结论 血清Cripto-1在胃癌患者中表达升高,经手术治疗后水平发生下降,其诊断价值优于CEA和CA724,是一项潜在的胃癌早期诊断和疗效判断指标.

Cripto-1是一种癌基因, 同时是一种多功能的信号因子.其可在细胞膜表面接受TGF-β、Wnt/β-catenin/TCF、Glypican/c-Src/MAPK/AKT、Notch、GRP78等多种肿瘤形成相关通路的信号, 从而促进肿瘤的发生、侵袭、转移及血管形成.因此, Cripto-1可能是诊断肿瘤和判断预后的新型生物标志物.深入研究调节Cripto-1上游基因表达和活性及Cripto-1下游基因的信号通路, 可揭示癌症中其他潜在的新型治疗靶点, 为肿瘤的诊断和治疗提供更多的思路.

目的 观察小干扰RNA(siRNA)技术沉默大肠癌细胞中Cripto-1表达联合5-氟尿嘧啶(5-FU)对大肠癌细胞增殖和迁移的影响,并探讨其与上皮间质转化(EMT)的关系.方法 体外培养人大肠癌Lovo细胞,将细胞分为正常对照组、Cripto-1 siRNA组、5-FU组、联合组.正常对照组加入含10％胎牛血清的RPMI1640培养液中常规培养48 h;Cripto-1 siRNA组加入100μL无血清Opti-MEM培养基、8μL LipofectamineTM2000、10μL siRNA混匀,进行转染,转染完成后更换普通培养基继续培养48 h;5-FU组加入10 mg/L 5-FU培养48 h;联合组先按Cripto-1 siR-NA组的方法进行转染,然后加入10 mg/L 5-FU继续培养48 h.采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况,Transwell实验观察细胞的迁移能力,Western blotting法检测细胞中Cripto-1蛋白及上皮标志物E钙黏蛋白(E-cadherin)、间质标志物Snail蛋白的相对表达量.结果 Cripto-1 siRNA、5-FU组、联合组的细胞增殖率均低于正常对照组(P均<0.05),联合组细胞细胞增殖率低于Cripto-1 siRNA和5-FU组(P均<0.05),Cripto-1 siRNA组与5-FU组比较差异无统计学意义(P>0.05).Cripto-1 siRNA、5-FU组、联合组的细胞迁移数较正常对照组减少(P均<0.05),联合组细胞迁移数较Cripto-1 siRNA组和5-FU组减少(P均<0.05),5-FU组较Cripto-1 siRNA组减少(P<0.05).Cripto-1 siRNA组、5-FU组、联合组Cripto-1和Snail蛋白表达低于正常对照组,E-cadherin蛋白表达高于正常对照组(P均<0.05);联合组Cripto-1和Snail蛋白表达低于Cripto-1 siRNA组、5-FU组,E-cadherin蛋白表达高于Cripto-1 siRNA组、5-FU组(P均<0.05);Cripto-1 siRNA组与5-FU组各蛋白表达比较差异无统计学意义(P均>0.05).结论 采用siRNA技术沉默大肠癌细胞中的Cripto-1表达,可增强5-FU对大肠癌细胞增殖和迁移的抑制作用,Cripto-1可能通过介导EMT促进大肠癌的发生发展.