目的:探究D-氨基酸氧化酶（D-amino acid oxidase，DAAO）在砷暴露致仔鼠学习记忆损害中的作用。方法:将18只昆明种妊娠小鼠采用随机数字表法分为未处理组（蒸馏水， n = 6）和染砷组[饮用水中含60 mg/L亚砷酸钠（NaAsO 2）， n = 12]，自由饮水；自妊娠第1天至仔鼠断乳前经母鼠染砷，仔鼠断乳后至实验结束以自由饮水方式染砷。仔鼠出生后6周，根据母鼠的组别，将染砷组仔鼠分为NaAsO 2组和NaAsO 2 + DAAO抑制剂6-氯苯并[d]异恶唑-3-醇（6-chlorobenzo[d]isoxazol-3-ol，CBIO）组，未处理组仔鼠为对照组；对照组和NaAsO 2组仔鼠腹腔注射0.5%羧甲基纤维素钠，NaAsO 2 + CBIO组仔鼠腹腔注射60 mg/kg CBIO，连续干预2周。干预结束后，采用Y迷宫实验测定仔鼠空间学习记忆能力；仔鼠经心脏灌流后取脑组织，并分离海马，经苏木素-伊红（hematoxylin-eosin，HE）染色观察仔鼠海马组织神经细胞形态；超高效液相串联三重四级杆质谱法测定D-丝氨酸含量；实时荧光定量PCR测定突触素（synaptophysin，SYP），突触小体相关蛋白25（synaptosomal-associated protein 25，SNAP25），突触后致密物95（postsynaptic density 95，PSD95），DAAO和N-甲基-D-天冬氨酸受体（N-methyl-D-aspartate receptor，NMDAR）亚基NR1、NR2A、NR2B mRNA水平。 结果:对照组、NaAsO 2组、NaAsO 2 + CBIO组仔鼠Y迷宫实验交替反应率[（58.06 ± 3.78）%、（48.61 ± 5.75）%、（56.25 ± 6.76）%]比较，差异有统计学意义（ F = 4.87， P = 0.023），且NaAsO 2组明显低于对照组和NaAsO 2 + CBIO组（均 P < 0.05）。HE染色结果显示，对照组仔鼠海马组织CA1、CA3区神经细胞数量较多，状态良好；NaAsO 2组神经细胞数量较少，形态不规则，细胞形态轮廓不清晰；NaAsO 2 + CBIO组神经细胞数量较多，细胞轮廓有所改善，组织损伤减轻。对照组、NaAsO 2组、NaAsO 2 + CBIO组仔鼠海马D-丝氨酸含量及SYP、SNAP25、PSD95、DAAO、NR1、NR2A、NR2B mRNA水平比较，差异均有统计学意义（ F = 5.41、4.41、10.16、7.60、6.98、5.63、6.53、4.33， P = 0.017、0.031、0.002、0.005、0.007、0.015、0.009、0.033）；其中，NaAsO 2组仔鼠海马D-丝氨酸含量和SYP、SNAP25、PSD95、NR1、NR2B mRNA水平均明显低于对照组和NaAsO 2 + CBIO组，NR2A mRNA水平明显低于对照组，DAAO mRNA水平明显高于对照组和NaAsO 2 + CBIO组（均 P < 0.05）。 结论:砷暴露能够损害仔鼠学习记忆能力，降低海马D-丝氨酸含量以及NMDAR亚基和突触相关基因转录水平，上调DAAO转录水平；而抑制DAAO可使D-丝氨酸含量以及NMDAR亚基和突触相关基因转录水平升高，改善砷暴露所致的仔鼠学习记忆能力损害。

L-正缬氨酸是合成抗高血压药物培垛普利的重要中间体,其合成主要通过化学方法,具有产品纯度低、环境污染等缺点.提出一种基于多酶介导拆分DL-正缬氨酸结合不对称还原生产高纯度L-正缬氨酸的方法.首先,将混合型DL-正缬氨酸中的D型经过D-氨基酸氧化酶氧化成相应酮酸,然后利用亮氨酸脱氢酶将酮酸不对称还原生成L-正缬氨酸,同时NADH被氧化成NAD+,最后利用甲酸脱氢酶构建NADH循环再生系统.D-正缬氨酸被氧化过程中会产生副产物过氧化氢(H2O2),通过外源添加过氧化氢酶消除该副产物.基于前期最适转化温度、最适转化pH优化基础上,对过氧化氢酶添加量和单次底物添加量进行优化,利用分批补料策略提高L-正缬氨酸产量.结果显示,在最适条件下,L-正缬氨酸产量达到61.09 g/L对映体过量值(e.e.)和转化率分别为99％和96.1％.本研究合成L-正缬氨酸较之化学方法,具有环境污染少、产品纯度高等特点,为制药行业中光学纯L-正缬氨酸的生产提供了一种有效的方法.

D-丝氨酸由丝氨酸消旋酶 (Serine racemase, Srr) 催化L-丝氨酸生成,由D型氨基酸氧化酶(D-amino-acid oxidase, DAAO) 催化降解,是谷氨酸能系统的重要神经递质.D-丝氨酸与N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体的甘氨酸位点结合,与激动剂共同激活NMDA受体.偏头痛是一种反复发作的原发性头痛,在影响人类生活质量的同时也给社会造成了巨大负担.多项研究证实,NMDA受体激活在偏头痛发生发展中发挥重要作用.目前,D-丝氨酸调节NMDA受体在偏头痛中的作用机制尚无具体研究,但其在偏头痛相关疾病如神经病理性疼痛、抑郁、双相障碍、癫痫、精神分裂症中却有不同程度的研究.本文将通过总结D-丝氨酸在偏头痛相关疾病中的研究进展得出一定规律,从而为D-丝氨酸在偏头痛中的研究提供新的思路.

D-丝氨酸( D-Ser)作为神经递质发挥重要作用的同时,其与氧化代谢酶D-氨基酸氧化酶(DAAO)具有细胞毒性,与癫痫、精神分裂症、老年痴呆症、抑郁症、焦虑症、成瘾等神经精神疾病的发生、发展有密切关系.本文将对D-Ser代谢途径及其与相关疾病的研究进展进行综述.

目的 评价不同浓度七氟醚对静态膨肺患者心肺转流(cardiopulmonary bypass,CPB)后肺气体交换及术后气管留管时间的影响.方法 择期行CPB下瓣膜置换手术患者75例,男39例,女36例,年龄22～65岁,ASAⅡ或Ⅲ级.采用随机数字表法将患者随机分为三组:每组25例.CPB期间停止呼吸后,予持续静态膨胀,呼吸环路压力维持10 cmH2O,膨肺气体采用空气,分别复合吸入1％七氟醚(L组)或2％七氟醚(H组),对照组(N组)不复合吸入七氟醚.分别于切皮前、CPB停机后1、3、6h抽取动脉血行血气分析.计算肺泡-动脉氧分压差(DAaO2)、呼吸指数(RI)和氧合指数(OI).记录术后气管留管时间和ICU留观时间.结果 与切皮前比较,CPB停机后1、3、6h三组DAaO2、RI明显升高(P＜0.05);CPB停机后1h三组OI明显降低(P＜0.05).三组不同时点DAaO2、RI和OI差异无统计学意义.三组CPB停机后1、3、6h发生OI＜300 mmHg的比例、术后气管留管时间和ICU留观时间差异无统计学意义.结论 心脏瓣膜置换手术CPB期间,静态膨肺采用10 cmH2O压力,复合吸入1％或2％浓度七氟醚,与单纯静态膨肺比较,不能进一步改善CPB后患者肺气体交换,不影响术后气管留管时间和ICU留观时间.

目的:探讨D-丝氨酸(D-serine)对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠海马区tau蛋白过度磷酸化的影响.方法:42只SPF级昆明小鼠随机分为6组:Control组、Saline组、Aβ组、Aβ+ D-serine组、Aβ+ DAAO组、Aβ+ BE组;每组7只动物.AD模型组小鼠双侧海马CA1区微量注射Aβ1-42造模,之后连续10 d分别腹腔注射生理盐水,D-serine (30 mg/kg),D-氨基酸氧化酶(DAAO) (30 mg/kg),苯甲酸钠(BE) (30 mg/kg).采用免疫组织化学以及Western Blot方法检测各组小鼠海马区IL-1β、p-MAPT(S404)、p-GSK3β以及DCX表达的具体变化.结果:与Control组相比,Aβ组小鼠海马区IL-1β以及p-MAPT(S404)蛋白表达明显增多(P＜0.01),而p-GSK3β以及DCX蛋白表达明显减少(P＜0.01);而与Aβ组相比,Aβ+D-serine组IL-1β以及p-MAPT(S404)蛋白表达明显减少(P＜0.01);p-GSK3β以及DCX蛋白表达明显增多(P＜0.01).结论:D-serine可以改善Aβ1-42诱导的AD模型小鼠海马区tau蛋白过度磷酸化以及神经损伤.

目的 研究β-内酰胺类抗生素、D-Ser及D-氨基酸氧化酶(DAAO)抑制剂三药联用抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)感染的疗效.方法 体外利用肉汤微稀释法和结晶紫染色法评价DAAO抑制剂5-氯苯并[d]异恶唑-3-醇(CBIO)对细菌生长和生物被膜的影响;建立小鼠全身感染模型和大鼠腿部感染模型,以生存率和组织匀浆细菌计数为指标评价三药联用疗效;小鼠皮下给药评价CBIO的安全性.结果 在体外MIC测定时CBIO没有抑菌作用,但分别与苯唑西林和美罗培南联用时可对两种抗菌药物的抗菌活性产生明显的拮抗作用.D-Ser和CBIO单用对于MRSA N315所产生物被膜的抑制和清除作用较弱,当与抗生素联用时可显著提升生物被膜的抑制率和清除率;皮下单独给予健康小鼠30mg/kgCBIO后5d内,小鼠生存状况良好(n=5);三药(β-内酰胺类抗生素、D-Ser和CBIO)联用相比单用抗生素以及抗生素和D-Ser两药联用,可一定程度上提高小鼠存活率、降低大鼠腿部肌肉组织持菌量.结论 β-内酰胺类抗生素、D-Ser及CBIO联用在体内具有良好的抗MRSA感染作用,且CBIO体内安全性良好,但CBIO会与抗生素产生一定程度的拮抗作用.一定浓度的CBIO与β-内酰胺类抗生素、D-Ser联用或许能为MRSA感染的临床用药提供新的选择.