类风湿关节炎(RA)是一种复杂的自身免疫性疾病,现有治疗手段虽能缓解症状,但长期使用副作用明显.近年来,中性粒细胞胞外陷阱(NETs)作为RA病理过程中的关键因素受广泛关注.NETs由活化的中性粒细胞释放,含有DNA和抗菌蛋白,不仅参与免疫防御,还通过多种机制加剧RA的病理进展.调控肽基精氨酸脱亚胺酶4、活性氧生成及脱氧核糖核酸酶等可减少NETs的形成和积累,促进NETs清除.这些方法在实验和动物模型中展现良好前景,但临床应用仍需进一步研究验证.随着基因编辑和纳米医学发展,NETs有望为RA的精准治疗提供新的解决方案,改善患者预后和生活质量.深入研究NETs在RA中的作用机制有助于开发新的治疗策略,为RA患者提供更有效的治疗手段.

目的:分析国家自然科学基金委员会（简称自然科学基金委）2010—2021年检验医学领域项目整体申请与资助情况。方法:采集2010—2021年自然科学基金委检验医学领域申请与资助数据，重点针对学科内资助项目经费、地域、依托单位分布情况、关键词以及代表性论文进行分类统计，并分析和总结10余年来整体的项目特点。结果:2010—2021年自然科学基金委检验医学领域共收到项目申请7 746项、累计资助1 152项、资助金额共计50 631.7万元。项目申请数由2010年的228项增加至2021年1 184项，项目资助数由2010的36项增加至2021年的137项，项目资助金额也相应地由2010年的1 012.0万元增长至2021年的6 538.0万元，均逐年上升。在检验医学领域（H26）中，分支学科H2605（分子生物学检验）与H2606（检验医学研究新技术与新方法）是受资助数量最多的2个方向，占59.7%（688/1 152）。地域获资助情况中，北京、广东、上海、重庆、浙江和江苏为获资助数较多的前6个地区，占60.2%（695/1 152）。30家依托单位获得检验医学领域826项资助，占总数71.7%（826/1 152）。在检验领域1 152资助项目中，肿瘤（37.1%，427项）、感染类疾病（26.9%，310项）、循环系统疾病（5.3%，61项）、自身免疫疾病（4.3%，49项）、内分泌与代谢性疾病（2.8%，32项）是出现频率较高的疾病类型；蛋白（33.4%，385项）、DNA（19.4%，224项）、RNA（17.3%，199项）、外泌体（6.0%，69项）和细胞（5.9%，68项）是研究较多的标志物；纳米技术（6.0%，69项）、质谱技术（3.0%，34项）、探针技术（1.82%，21项）、电化学技术（1.6%，19项）和二代测序技术（1.6%，18项）是研究较多的检验技术。检验领域10年来在建立参考值范围、鉴定新型疾病标志物、开发检验新技术等方面取得多项突破，形成多个具有特色方向的研究团队。结论:自然科学基金委2010—2021年检验医学资助项目数及金额均显著上升，不同二级代码、地域和依托单位资助情况差异明显，研究范围广泛，多个团队在新型标志物挖掘与检验新技术等方面已取得标志性成果，整体水平有望进一步提升。

遗传性视网膜变性(IRD)发病机制复杂多样，常常导致不可逆盲，目前尚缺乏有效的治疗方法。近年来，针对IRD的基因治疗显示出广阔的应用前景，而如何将基因药物递送至靶细胞并安全、高效地表达成为目前研究发展的关键点。病毒载体系统转染效率较高，但具有潜在的免疫反应和生物安全等问题，其临床应用的局限性使非病毒载体系统的开发应运而生。DNA纳米复合体是新型非病毒载体的研究热点之一，这种聚合物/DNA复合物纳米粒子由多肽、脂质、多糖等物质压缩和包裹DNA而成，在IRD的应用上取得了较大的进展。此外，非病毒载体在成本、制备难易度、包装容量及安全性上均显示出其优势，为视网膜色素变性、Stargardt病、先天性视网膜劈裂、Leber先天性黑矇等IRD的基因治疗提供了新的研究思路。本文对近年来非病毒载体系统在转染效率、靶向性和安全性等方面的进展及其在IRD基因治疗中的应用进行综述。

外泌体是一种包含RNA、DNA片段及蛋白质等多种生物活性物质的纳米级微囊泡，由多泡体与胞膜融合后分泌到细胞外环境中。外泌体内的微小RNA(miRNA)主要参与干细胞的分化、血细胞的生成、器官的形成、肿瘤的发生发展及转移等。外泌体miRNA因其较高的稳定性和易于检测的优点，被认为是具有潜力的生物学检测指标。本文就外泌体miRNA在胰腺癌诊断中的研究现状进行综述。

目的:在哺乳动物细胞内基于线性双链DNA"与门"基因线路构建纳米抗体文库。方法:应用基于线性双链DNA的"与门"逻辑基因线路构建纳米抗体文库，首先通过PCR扩增将互补决定区（CDR）随机序列引入上、下游线性双链DNA，将其共转染至HEK293T细胞，转染48 h后，经RNA提取、cDNA合成、PCR扩增、高通量测序和数据处理步骤，鉴定"与门"形成的纳米抗体文库序列，对本策略进行了分析与评价。结果:深度测序共测得4 173 356条序列，其中约88.18%的序列为纳米抗体文库序列。文库核酸序列最丰富的序列长度为264 bp，为理论设计长度。后续在264 bp序列中鉴定出22 172种纳米抗体序列，且CDR1~3序列中的核苷酸频率符合NNK模式。结论:本研究开发了一种基于线性双链DNA"与门"逻辑基因线路在哺乳动物细胞中构建纳米抗体文库的新方法。

目的:研究Ta 4C 3-PVP纳米片对三阴性乳腺癌4T1细胞小鼠移植瘤的放射增敏作用。 方法:于雌性BALB/c小鼠右侧腹皮下注射4T1细胞建立4T1荷瘤小鼠模型，按肿瘤体积大小均匀分为空白对照组、单纯Ta 4C 3-PVP组、单纯照射组、Ta 4C 3-PVP联合照射组。尾静脉注射20 mg/kg Ta 4C 3-PVP预处理24 h后给予8 Gy单次肿瘤局部X射线照射，测量移植瘤体积、瘤重，检测肿瘤细胞增殖标志物Ki-67蛋白表达、DNA双链断裂(DSBs)分子标志物γ-H2AX焦点形成，绘制肿瘤生长曲线并计算放射增敏系数(EF)及抑瘤率。 结果:与空白对照组相比，单纯照射组、Ta 4C 3-PVP联合照射组于照射后16 d均能明显抑制肿瘤生长( t＝5.41、9.59， P < 0.05)、降低瘤重( t＝2.67、4.40， P < 0.05)，其中Ta 4C 3-PVP联合照射组的EF达1.57，抑瘤率约为64%，明显优于单纯照射组(42%)。免疫组织化学结果显示，与空白对照组相比，单纯照射组和Ta 4C 3-PVP联合照射组肿瘤细胞Ki-67蛋白表达受到明显抑制( t＝5.73、8.02， P < 0.05)、γ-H2AX焦点产额明显增加( t＝2.97、9.86， P < 0.05)，且Ta 4C 3-PVP联合照射组较单纯照射组Ki-67表达抑制更显著( t＝4.75， P < 0.05)、γ-H2AX焦点产额更多( t＝4.42， P < 0.05)。 结论:Ta 4C 3-PVP纳米片可通过增加射线诱导的DNA DSBs，增强4T1荷瘤小鼠移植瘤的放射敏感性。

拉曼光谱在检验医学领域的应用正在不断进步和发展，基于拉曼光谱技术的生物传感平台为疾病精准分子诊断提供了一种新的手段，特别是表面增强拉曼散射（SERS）技术作为一种快速无损的检测方法，具有样品制备简单、受水的干扰小、实时检测等优点，在医学检验领域显示出巨大的应用潜力。同时，随着SERS与其他技术包括电化学、纳米新材料、微流控、生物芯片、DNA纳米机器、人工智能和机器学习等技术的集成结合，其在医学检验领域将发挥越来越重要的作用。相信随着对SERS研究的不断深入以及多个学科领域之间的交叉融合，其在生物医学检测领域将得到广泛应用，并有望成为下一代精准诊断的重要技术平台。

目的:制备融合C3Fab的抗程序性死亡-配体1（PD-L1）纳米抗体P3C8-C3Fab，并研究其对血浆半衰期的影响。方法:将来源于蛋白G的C3Fab肽段，通过DNA重组技术与纳米抗体P3C8进行分子融合，并构建重组质粒pET21a-P3C8-C3Fab，在大肠杆菌BL21菌株中进行诱导表达和纯化，并采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测P3C8-C3Fab与PD-L1蛋白、小鼠IgG和表达PD-L1肿瘤细胞的结合，利用双抗夹心ELISA检测不同时间小鼠血清中残留P3C8-C3Fab，以评估C3Fab对PD-L1纳米抗体血浆半衰期的延长作用。结果:成功构建了融合C3Fab的抗PD-L1纳米抗体P3C8-C3Fab，其在BL21菌中以可溶形式高效表达，经纯化获得质量分数约为90%的NbP3C8-C3Fab蛋白，得率为7.18 mg/L。P3C8-C3Fab随着质量浓度的增加，对PD-L1蛋白和小鼠IgG亲和力也逐渐升高，且呈现浓度相关性；P3C8-C3Fab与肺癌A549细胞的结合呈浓度相关性。小鼠血清中P3C8-C3Fab的浓度标准曲线呈典型的S型浓度相关性；P3C8血浆半衰期仅为0.44 h，而P3C8-C3Fab的血浆半衰期达到9.36 h，血浆半衰期延长了21.27倍。结论:C3Fab与纳米抗体P3C8连接可以显著延长其血浆半衰期，对改善纳米抗体的体内作用具有应用价值。

外泌体是一类拥有磷脂双分子层结构的纳米大小的囊形小体，几乎所有类型细胞都可以分泌。外泌体可通过相关的生物活性物质(DNA、microRNA和蛋白质等)与靶细胞相互作用而实现信息传递和功能调控。以慢性阻塞性肺疾病及支气管哮喘为代表的慢性气道炎症性疾病是常见的呼吸系统疾病，伴随着对外泌体结构功能持续深入的探究，人们发现外泌体在气道炎症性疾病进展中发挥着重要作用，外泌体很可能成为慢性气道炎症性疾病的新型诊断生物标志物、潜在的治疗靶点及药物的载体。本文对外泌体的特性和功能以及在慢性气道炎症性疾病诊疗中的研究进展作一综述。

目的:研究聚乙烯吡咯烷酮(PVP)修饰的碳化钽(Ta 4C 3)纳米片对人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞放射敏感性的影响。 方法:合成并表征Ta 4C 3-PVP纳米片。利用荧光显微镜观察MDA-MB-231细胞对异硫氰酸荧光素(FITC)标记Ta 4C 3-PVP纳米片的摄取情况。CCK-8法检测不同浓度的Ta 4C 3-PVP纳米片对MDA-MB-231细胞的毒性。将MDA-MB-231细胞分为空白对照组、Ta 4C 3-PVP组、单纯照射组和Ta 4C 3-PVP＋照射组，克隆形成试验检测细胞放射敏感性的改变，酶标仪检测细胞内活性氧(ROS)水平和脂质氧化产物丙二醛(MDA)含量，免疫荧光法检测DNA双链断裂(DSBs)分子标志物γH2AX焦点形成及有丝分裂灾难形成。 结果:成功合成Ta 4C 3-PVP纳米片，呈薄片形貌，水动力直径和厚度分别约为143.93和1.35 nm。FITC标记的Ta 4C 3-PVP被MDA-MB-231细胞摄取后主要分布于细胞质中。Ta 4C 3-PVP纳米片在浓度高达400 μg/ml时，对MDA-MB-231细胞无明显毒性。克隆形成试验结果显示，50和100 μg/ml Ta 4C 3-PVP预处理使受照MDA-MB-231细胞的存活曲线分别较单纯照射组下移，且呈浓度依赖性，低、高浓度Ta 4C 3-PVP预处理的放射增敏比(SER D0 )分别为1.21和1.45。Ta 4C 3-PVP＋照射组于照射后2和12 h细胞内ROS水平均明显高于单纯照射组( q＝20.01、7.193， P< 0.05)，于照射后1、4和8 h Ta 4C 3-PVP＋照射组含≥5个γH2AX焦点的阳性细胞率均明显高于单纯照射组( q＝36.78、14.87、8.217， P< 0.05)，Ta 4C 3-PVP＋照射组于照射后24和48 h的MDA含量均明显高于单纯照射组( q＝14.02、7.015， P< 0.05)，Ta 4C 3-PVP＋照射组于照射后72 h的有丝分裂灾难比例明显高于单纯照射组( q＝16.33， P< 0.05)。 结论:Ta 4C 3-PVP纳米片通过提高辐射诱导的ROS水平增强人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的放射敏感性。