目的:对1例临床表现为全面发育落后、癫痫、异常面容的患儿进行临床和遗传学分析。方法:收集患儿临床资料，抽取患儿及父母外周血，应用高通量捕获测序分析，对可疑致病变异进行Sanger测序验证及生物信息学分析。结果:患儿临床表现为全面发育落后、癫痫发作、自闭症、特殊面容，高通量测序结果显示 DYRK1A基因第11外显子存在c.1920_c.1927delCCTCTACC(p.Ser641Rfs*31)杂合变异，父母均未携带此变异，为新发突变。 结论:DYRK1A基因在第11外显子c.1920_c.1927 delCCTCTACC(p.Ser641Rfs*31)变异为该患儿的遗传学病因，丰富了 DYRK1A致病基因谱，为临床诊断和遗传咨询提供了依据。

双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1A(Dual-specifically tyrosine phosphorylation regula-ted kinase 1A,Dyrk1A)位于21号染色体,编码763个氨基酸,在中脑黑质、纹状体中表达丰富.Dyrk1A参与神经发育、细胞增殖与分化等生理过程.此外,Dyrk1A基因在神经退行性疾病的病理发生过程及信号通路调控方面也发挥重要作用.本文就Dyrk1A基因编码、结构和表达谱及其参与细胞信号转导通路、神经元发育和细胞周期、突触形成和神经元功能等相关生理功能与神经退行性疾病的关系作一综述.

目的 通过在帕金森病模型中分析双特异性酪氨酸调控激酶1A(DYRK1A)与NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)激活的关系,探讨帕金森病中神经炎症的治疗靶点.方法 (1)采用MPP+处理BV2细胞(小鼠小胶质细胞)后,使用免疫印迹法(Western blot)检测DYRK1A及NLRP3蛋白的表达水平;加用DYRK1A抑制剂(Harmine)处理帕金森细胞模型,使用CCK8法检测小胶质细胞活性,免疫印迹法检测NLRP3蛋白表达水平.(2)MPTP慢性PD动物模型中,腹腔注射DYRK1A抑制剂(Harmine),免疫组织荧光观察小鼠中脑黑质区小胶质细胞数目,免疫印迹法检测小鼠中脑黑质区NLRP3蛋白表达水平.结果 (1)不同浓度MPP+处理小胶质细胞后,DYRK1A及NLRP3的蛋白水平较对照组均有升高(P＜0.05);Harmine(浓度为10、15 μmol/L)时可改善 MPP+对BV2细胞活性的损伤(P＜0.05);相比MPP+组,Harmine+MPP+组NLRP3蛋白水平明显下降(P＜0.05).(2)与对照组相比,模型组小鼠中脑黑质的小胶质细胞数量增多;与模型组相比,模型中浓度抑制剂组小鼠中脑黑质的小胶质细胞数量减少;模型组小鼠中脑黑质区NLRP3的蛋白水平较对照组升高,与模型组比较,模型中浓度及高浓度抑制剂组小鼠中脑黑质中NLRP3蛋白表达下降明显(P＜0.05).结论 抑制DYRK1A可减轻帕金森病模型中NLRP3炎症蛋白的激活,为帕金森病的治疗和研究提供新的思路.

高危型人乳头瘤病毒 (HPV) 感染与宫颈癌的发生关系已经明确, HPV编码的早期蛋白E7是HPV致宫颈癌的主要相关蛋白之一.G1/S检查点是细胞周期中不可逆的关键点, 决定了细胞进入细胞周期与否, 与肿瘤的发生发展关系密切.pRb蛋白是调控细胞周期G1/S检查点中的限速底物, 是起调控作用的主要因子之一.E7通过影响pRb蛋白、E2F家族、Cyclin/CDK2复合物、p27蛋白、Dyrk1B等细胞周期相关蛋白来影响G1/S检查点的正常工作, 形成失控的细胞增殖.高危型HPV E7蛋白对细胞周期检查点的影响, 既是HPV致癌机制的重要组成部分, 也可能成为攻克此类癌症的突破口.本文综述了高危型HPV E7蛋白对细胞周期G1/S检查点的影响.

目的 探讨趋化因子CXCL13、双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1b (dual specificity tyrosine phosphorylationregulated kinase 1b,Dyrk1b)蛋白在宫颈癌组织中的表达及与临床病理特征的关系.方法 宫颈癌和子宫肌瘤患者各98例,分别取手术切除宫颈癌组织、癌旁组织以及子宫肌瘤组织,采用免疫组织化学法检测3组CXCL13、Dyrk1b蛋白阳性表达率;分析CXCL13、Dyrk1b蛋白阳性表达率与宫颈癌患者临床病理特征的关系;Spearman 法分析CXCL13、Dyrk1b蛋白阳性表达率与临床病理特征的相关性;比较CXCL 13、Dyrk1b蛋白阳性与阴性表达宫颈癌患者3 a生存率及无进展生存期.结果 癌旁组织、子宫肌瘤组织CXCL13蛋白均呈阴性表达,宫颈癌组织CXCL13蛋白阳性表达率为66.33％;宫颈癌组织Dyrk1b蛋白阳性表达率(82.65％)高于癌旁组织(15.31％)和子宫肌瘤组织(10.20％)(P＜0.05);肿瘤直径≤3 cm、高分化、FIGO分期Ⅰ期、无淋巴结转移、无脉管浸润的宫颈癌患者CXCL13蛋白阳性表达率(38.89％、28.57％、49.10％、39.47％、37.14％)、Dyrk1b蛋白阳性表达率(63.89％、61.90％、70.91％、65.79％、60.00％)低于肿瘤直径＞3 cm(82.26％、93.55％)、中低分化(76.62％、88.31％)、FIGO分期Ⅱ期(88.37％、97.67％)、有淋巴结转移(83.33％、93.33％)、有脉管浸润(82.53％、95.23％)者(P＜0.05),不同年龄、肿瘤类型宫颈癌患者CXCL13、Dyrk1b蛋白阳性表达率比较差异无统计学意义(P＞0.05);Spearman相关分析显示,CXCL13、Dyrk1b蛋白阳性表达与肿瘤直径(r=0.575,P=0.023;r=0.617,P=0.033)、FIGO分期(r=0.732,P=0.001;r=0.697,P=0.021)、淋巴结转移(r=0.563,P=0.031;r=0.757,P=0.006)、脉管浸润(r=0.586,P=0.045;r=0.633,P=0.009)呈正相关,与肿瘤分化程度(r=-0.781,P=0.005;r=-0.813,P=0.001)呈负相关,CXCL13阳性表达与Dyrk1b蛋白阳性表达呈正相关(r=0.633,P=0.009);CXCL13、Dyrk1b蛋白阴性表达的宫颈癌患者无进展生存期[(25.0±10.2)、(28.0±9.8)个月]、3 a生存率(63.64％、70.59％)高于CXCL13[(12.0±8.5)个月、30.77％]、Dyrk1b蛋白[(10.0±9.6)个月、32.10％]阳性表达者(P＜0.05).结论 宫颈癌组织CXCL13、Dyrk1b蛋白均呈高表达,且表达程度与肿瘤进展有关,其高阳性表达率提示患者预后不良.

目的 筛选 HIV感染相关Burkitt淋巴瘤(Burkitt lymphoma ,BL )与弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma ,DLBCL)中差异性微小核糖核酸(microRNA ,miRNA).方法 收集上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心5份BL和3份DLBCL新鲜冰冻组织标本,19份BL和15份DLBCL石蜡标本. Agilent human miRNA microarray芯片技术检测新鲜冰冻的BL和DLBCL组织中miRNA表达情况,查找差异miRNA .利用SmartRNAplexTMmiRNA技术在BL和DLBCL石蜡组织中验证关键miRNA ,生物信息学方法预测靶基因.结果 以DLBCL 为参照,BL 组中有42个差异性miRNA ,其中28个miRNA上调,14个miRNA下调.以真核生物正向调控和高表达分子能促进肿瘤发生为依据,从BL组表达上调的miRNA选出5个关键miRNA验证,结果与芯片一致.与DLBCL相比,5个 miRNA 在 BL 中的表达均上调,分别为 miRNA-16-2-3p 、miRNA-20a-3p 、miRNA-130b-3p 、miRNA-185-5p和miRNA-423-5p(t值分别为2 .715 、2 .539 、2 .750 、4 .004和3 .625 ,均 P＜0 .05) .其中miRNA-16-2-3p对应的靶基因可能主要为CTNND2和 RAD21 ;miRNA-20a-3p的靶基因可能主要为DYRK1A和GPAM ;miRNA-130b-3p的靶基因可能主要与IRF1 、DICER1 、PTEN等相关;miRNA-185-5p的靶基因可能主要为VEGFA 、NFATC3和SEC24C ;miRNA-423-5p的靶基因可能主要是PA2G4和PNKD .结论 BL和DLBCL中存在差异表达的miRNA ,有望为BL和DLBCL 诊断、鉴别诊断提供新的分子标志物.关键miRNA潜在靶基因与细胞生存、增殖、分化、凋亡和癌变等相关,可能对BL的发生、发展起重要作用.

目的 明确1例智力障碍、癫痫患儿分子遗传学病因,为该家系成员提供遗传咨询及产前诊断.方法 应用染色体G显带核型分析、单核苷酸多态性微阵列及荧光实时定量PCR对患儿及家系成员进行遗传学检查.结果 患儿外周血染色体核型显示为46,XX;单核苷酸多态性微阵列显示为arr[19]21q22.12q22.13(36860195～38801482)×1 dn,杂合缺失约1.9 Mb,包含DYRK1A、PIGP、HLCS、CLDN14四个致病基因;定量PCR检测结果显示:患儿DYRK1A基因第1外显子杂合缺失;父母及胎儿检测结果均未发现异常.结论 应用单核苷酸多态性微阵列技术,明确了1例21q22微缺失患儿遗传学诊断,并为该家系成员提供了准确的产前诊断;为DYRK1A基因单倍体剂量不足可导致一种新的可被识别的综合征提供了新的依据;P IGP基因可能是导致早发性难治性癫痫的重要因素,但具体的致病机制仍需进一步的探究.

例1女,7岁6月龄,因“癫痫、全面发育落后”就诊,基因检测结果显示患儿存在DYRK1A基因新生剪切位点突变(NM_001396.3:c.951 +1G＞A).例2男,3岁11月龄,因“热性惊厥、智力障碍”就诊,基因检测结果显示DYRK1A基因框移突变(NM_001396.3:c.849dupC p.1284Hfs*4).结合患儿的特殊面容、临床表现及分子遗传学结果,2例患儿均诊断为常染色体显性遗传性智力障碍7型.

Objective: Mcl-1 overexpression confers acquired resistance to Bcl-2 inhibitors in non-small cell lung cancer (NSCLC), but no direct Mcl-1 inhibitor is currently available for clinical use. Thus, novel therapeutic strategies are urgently needed to target Mcl-1 and sensitize the anti-NSCLC activity of Bcl-2 inhibitors.Methods: Cell proliferation was measured using sulforhodamine B and colony formation assays, and apoptosis was detected with Annexin V-FITC staining. Gene expression was manipulated using siRNAs and plasmids. Real-time PCR and Western blot were used to measure mRNA and protein levels. Immunoprecipitation and immunofluorescence were used to analyze co-localization of dual specificity tyrosine-phosphorylation-regulated kinase 1A (DYRK1A) and Mcl-1.Results: Suppression of DYRK1A resulted in reduced Mcl-1 expression in NSCLC cells, whereas overexpression of DYRK1A significantly increased Mcl-1 expression. Suppression of DYRK1A did not alter Mcl-1 mRNA levels, but did result in an accelerated degradation of Mcl-1 protein in NSCLC cells. Furthermore, DYRK1A mediated proteasome-dependent degradation of Mcl-1 in NSCLC cells, and DYRK1A co-localized with Mcl-1 in NSCLC cells and was co-expressed with Mcl-1 in tumor samples from lung cancer patients, suggesting that Mcl-1 may be a novel DYRK1A substrate. We showed that combined therapy with harmine and Bcl-2 antagonists significantly inhibited cell proliferation and induced apoptosis in NSCLC cell lines as well as primary NSCLC cells.Conclusions: Mcl-1 is a novel DYRK1A substrate, and the role of DYRK1A in promoting Mcl-1 stability makes it an attractive target for decreasing Bcl-2 inhibitor resistance.

Cullin-RING ligases (CRLs) comprise a large group of modular eukaryotic E3 ubiquitin ligases.Within this family,the CRL4 ligase (consisting of the Cullin4[CUL4]scaffold protein,the Rbx1 RING finger domain protein,the DNA damage-binding protein 1[DDB1],and one of many DDB1-associated substrate receptor proteins) has been intensively studied in recent years due to its involvement in regulating various cellular processes,its role in cancer development and progression,and its subversion by viral accessory proteins.Initially discovered as a target for hijacking by the human immunodeficiency virus accessory protein r,the normal targets and function of the CRL4 substrate receptor protein DDB1-Cut4-associated factor 1 (DCAF1;also known as VprBP) had remained elusive,but newer studies have begun to shed light on these questions.Here,we review recent progress in understanding the diverse physiological roles of this DCAF1 in supporting various general and cell type-specific cellular processes in its context with the CRL4 E3 ligase,as well as another HECT-type E3 ligase with which DCAF1 also associates,called EDD/UBR5.We also discuss emerging questions and areas of future study to uncover the dynamic roles of DCAF1 in normal physiology.