目的:探讨体外膜肺氧合（ECMO）技术对控制型心死亡模型猪供体小肠移植后早期肠道功能的影响。方法:选取体质量22～25 kg白色杂种猪48只，按数字表法随机分为正常对照组（LD组）、心死亡供体组（DCD组）、ECMO支持1 h组（E1组）和ECMO支持3 h组（E3组）共4组，每组12只；每组再随机分为供体组和受体组2个亚组，每个亚组各6只。LD组的供体亚组常规截取移植用小肠；DCD组的供体亚组先建立DCD模型，然后截取移植用小肠；E1、E3组的供体亚组，先建立DCD模型，再分别采用ECMO支持1、3 h后，截取移植用小肠。各受体亚组行小肠移植手术。分别于肠移植前、移植后再灌注1 h及移植后第1、3、5、7天经移植肠造口活检钳切取各受体亚组移植肠组织制备病理切片，采用Park/Chiu评分系统评估肠组织损伤程度，透射电镜下观察移植术后第7天小肠黏膜超微结构，免疫组织化学染色观察移植术后再灌注1 h时肠黏膜细胞凋亡因子caspase-3表达水平。分别于移植前和移植术后第1、3、5、7天采集各受体亚组猪颈外静脉血，检测血清D-乳酸水平评估肠黏膜受损情况及肠道通透性；移植术后第7天检测血浆D-木糖最大浓度评估移植肠吸收能力。结果:（1）各受体亚组组织病理学评分：小肠移植术前，各组移植肠均有肠黏膜损伤，其中E3组肠黏膜损伤最重，肠黏膜损伤程度Park/Chiu评分E3组高于LD组、DCD组及E1组，差异均有统计学意义（ P值均<0.05），而LD组、DCD组、E1组间Park/Chiu评分比较，差异均无统计学意义（ P值均>0.05）。小肠移植术后再灌注1 h和术后第1天时，DCD组Park/Chiu评分最高，明显高于LD组、E1组、E3组，差异均有统计学差异（ P值均<0.05）；而LD组、DCD组、E1组Park/Chiu评分比较，差异均无统计学意义（ P值均>0.05）。术后第3、5、7天，LD组、DCD组、E1组、E3组Park/Chiu评分差异均无统计学意义（ P值均>0.05）。（2）各受体亚组肠黏膜超微结构：术后第7天各组移植肠超微结构示基本恢复正常，LD组与E1组、E3组紧密连接结构与微绒毛改变无明显差异，而DCD组紧密连接结构相对较短、间隙较大。（3）各受体亚组肠黏膜细胞凋亡因子caspase-3表达水平：小肠移植术后再灌注1 h时，DCD组、E3组caspase-3相对表达水平分别高于LD组和E1组，差异均有统计学意义（ P值均<0.05）；而DCD组与E3组以及LD组与E1组比较，差异均无统计学意义（ P值均>0.05）。（4）各受体亚组血浆D-乳酸水平：术后第1天和第3天，DCD组、E3组血浆D-乳酸水平分别高于LD组和E1组，差异均有统计学意义（ P值均<0.05）；DCD组与E3组、LD组与E1组相比，差异无统计学意义（ P值均>0.05）。术后第5、7天，DCD组血浆D-乳酸水平高于LD组、E1组及E3组，差异均有统计学意义（ P值均<0.05），LD组、E1组、E3组血浆D-乳酸水平差异均无统计学意义（ P值均>0.05）。（5）各受体亚组移植肠吸收功能：肠移植术后第7天各组血浆D-木糖最大浓度由高至低依次为LD组、E1组、E3组和DCD组，4组间的比较，差异均有统计学意义（ P值均<0.05）。 结论:ECMO支持1 h可改善移植后早期移植肠吸收功能，减轻移植肠缺血再灌注损伤；降低再灌注时移植肠黏膜caspase-3蛋白表达、减少细胞凋亡可能是其保护机制之一。

目的:在主动免疫兔模型中探讨桥粒重塑在β1肾上腺素能受体自身抗体（β1ARAbs）诱导的室性心律失常（VA）的作用及潜在机制。方法:18只新西兰大白兔（体重2.5~3.5 kg）依据随机数字表法分为3组：模型组（β1ARAbs组，6只）、干预组（Meto组，6只）和对照组（Con组，6只）。经背部多点注射β1肾上腺素能受体胞外第二环抗原肽（2 mg/只）建立动物模型。0、2、4、6和8周时测定抗体水平，8周时记录并比较各组左心室射血分数（LVEF）、VA负荷及心室有效不应期（VERP），检测桥粒结构和桥粒重塑相关蛋白水平。结果:与Con组和Meto组比，β1ARAbs组VA发生次数增加[（397.67±50.81）次对（32.67±3.76）次对（96.33±8.25）次， P均<0.001]，VA持续时间延长[（164.13±10.79） s对（14.95±1.05） s对（57.61±5.27） s， P均<0.001]，LVEF水平（55.97%±2.82%对76.44%±2.00%对70.58%±0.55%，与Con组比较， P<0.001；与Meto组比较， P=0.002）和VA诱发率（75%对6%对8%， P均<0.001）升高；VERP缩短[（115.92±2.24） ms对（136.33±5.80） ms对（131.90±4.38） ms，与Con组比较， P=0.005；与Meto组比较， P=0.025]。蛋白免疫印迹结果显示，β1ARAbs组磷酸化细胞外信号调节激酶（p-ERK）水平升高（2.30±0.16对0.18±0.08对1.43±0.20，与Con组比， P<0.001；与Meto组比， P<0.007）。 结论:β1ARAbs增加VA负荷和持续时间，加重心室重构和VA易感性，潜在机制与ERK信号介导的心肌细胞间桥粒重塑增强有关。

桥粒是一种牢固的细胞间连接，通过中间丝锚定于相邻的细胞膜，对维持组织结构完整性具有重要作用。近年来研究表明，桥粒功能异常与肺癌、肺纤维化、硅沉着病以及支气管哮喘等肺部疾病密切相关。本文就上述研究进行综述，探讨桥粒在肺部疾病中的可能作用，有助于进一步了解相关肺部疾病的机制，并为其诊治和预后评估提供新思路。

目的:建立中国人颊黏膜鳞状细胞癌（BMSCC）细胞系SCC117，分析并鉴定其基本生物学特性。方法:纳入2011年1月就诊于北京大学口腔医学院·口腔医院口腔颌面外科的1例BMSCC患者（59岁中国男性），采用改良组织块培养法对其原发灶手术标本进行体外原代培养，连续传代稳定生长后建立人BMSCC细胞系SCC117。光学显微镜和电镜观察SCC117细胞形态特征，通过生长曲线、染色体核型、异种移植裸鼠成瘤实验等分析其基本生物学特征，免疫组化检测细胞角蛋白（CK14）、肿瘤相关蛋白视网膜母细胞瘤抑制蛋白（RB）、P53、上皮钙黏素（E-cadherin）、P21、同源性磷酸酶-张力蛋白（PTEN）表达情况，PCR检测人乳头瘤病毒（HPV）携带情况。基因组 DNA 短串联重复序列（STR）分析鉴定细胞系身份。结果:人BMSCC细胞系SCC117已在体外连续传代培养超过150代。SCC117细胞呈多角形镶嵌状生长，失去接触抑制，电镜观察可见典型的细胞桥粒结构及张力原纤维。免疫组化显示，SCC117细胞CK14阳性，倍增时间为40.16 h。染色体众数集中在67~69条之间，为亚三倍体。接种SCC117细胞的4只裸鼠均成瘤，SCC117细胞系具有异种致瘤能力，HE染色显示，裸鼠移植瘤与人原发肿瘤组织的病理组织学类型一致，均为鳞状细胞癌。免疫组化结果显示，人原发肿瘤及裸鼠移植瘤组织中RB、P53、E-cadherin均为阳性，P21弱阳性，PTEN阴性。PCR结果显示，SCC117细胞系的HPV检测为阴性。STR序列分析结果显示，SCC117细胞系来源于原发肿瘤组织，未被其他细胞系交叉污染。结论:本研究成功建立中国人BMSCC细胞系SCC117，可为无HPV感染的口腔鳞状细胞癌尤其是BMSCC的研究提供新的实验模型。

目的 探讨腺垂体梭形细胞嗜酸细胞瘤(SCO)的临床病理特征、免疫组化、超微结构、诊断与鉴别诊断.方法 观察2例蝶鞍区腺垂体梭形细胞嗜酸细胞瘤的临床表现、影像学资料、组织形态学特征、免疫组化表型及电镜超微结构,并复习相关文献.结果 2例患者分别44岁和64岁,临床表现均为视力下降.MRI提示鞍区占位.组织学见肿瘤细胞呈梭形,束状或旋涡状排列,细胞胞质丰富嗜酸.散在或灶性分布多少不等的上皮样细胞,与梭形细胞之间存在移行过渡.免疫组化:2例肿瘤细胞均vimentin、S-100、EMA、TTF-1和gelactin 3(+),CK、GFAP、INI1、Syn、CgA和垂体激素等标记(-).电镜见中间连接和少量桥粒以及灶性分布的束状中间丝.结论 腺垂体梭形细胞嗜酸细胞瘤是罕见的鞍区肿瘤,具有复发倾向.诊断时需结合临床病史、影像学资料、组织学形态、免疫组化标记和电镜下形态等综合分析判断.

目的 构建一种体外维持时间长、有利于后续测试研究的胶原基质皮肤模型.方法 将猪胶原和正常人皮肤成纤维细胞混合接种于培养皿,培养得到真皮层结构后,将第3～7代正常人角质形成细胞接种于真皮层表面,培养得到双层皮肤模型.通过HE和Masson染色评估皮肤模型的形态和组织结构,使用电镜观察模型的超微结构,并通过免疫组化和免疫荧光染色观察模型中各层的主要标记物表达情况.结果 HE和Masson染色发现,皮肤模型与正常人皮肤组织有相近的真皮及表皮结构,且模型收获后仍具有稳定良好的真表皮结构,可在体外继续培养14d.电镜下显示,皮肤模型中可见角质层中脂质、颗粒层中透明角质颗粒、角化桥粒、桥粒、基底膜等超微结构.免疫组化及免疫荧光显示,皮肤模型在表皮层中具有与正常皮肤一致的转谷氨酰胺酶、丝聚合蛋白、角蛋白10、Ki67的表达,基底膜具有与正常皮肤一致的Ⅳ型胶原和层黏连蛋白5表达,真皮层具有一致的Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原及原纤维蛋白表达.结论 本研究构建的三维皮肤模型组织结构和多种蛋白的表达与正常人体皮肤相似,模型收获后体外可继续稳定培养至少14d.

目的 探讨整肠生对溃疡性结肠炎小鼠肠道紧密连接蛋白表达以及对氧化应激反应的影响.方法 选用雄性8～10周龄C57BL/6小鼠40只, 随机分为4组:对照组、模型组 (3％DSS) 、5-ASA组 (3％DSS+5-ASA 200mg/kg灌胃) 和整肠生组 (3％DSS+联合整肠生及5-ASA灌胃), 每组10只, 造模7d.观察各组小鼠便血程度、组织学损伤情况, 通过投射电镜观察各组肠道上皮间紧密连接改变情况, 应用Western blot和RT-PCR的方法, 检测小鼠结肠黏膜紧密连接蛋白Occludin、ZO-1、Claudin-2的表达情况.结果 (1) 与模型组比较, 5-ASA组和整肠生组小鼠便血程度明显减轻, DAI评分显著降低 (P＜0.05) .整肠生组与5-ASA组比较, 便血减轻, DAI评分降低 (P＜0.05) . (2) 电镜显示, 对照组肠上皮间紧密连接呈一条致密条带, 结构完整, 见细胞桥粒, 微绒毛光滑、排列整齐, 细胞间隙狭窄;模型组肠上皮间紧密连接结构松散、模糊、密度降低, 桥粒结构消失, 微绒毛稀疏, 短缩且长短不一, 细胞间隙增宽;各治疗组的紧密连接的破坏情况较模型组有不同程度的改善, 整肠生组紧密连接清晰, 细胞间隙缩窄, 微绒毛排列整齐, 出现细胞桥粒. (3) 应用Western blot和Real time-PCR法检测, 与正常组相比, 模型组Occludin、ZO-1蛋白和mRNA表达显著下降, Claudin-2表达显著上调 (P＜0.05);各治疗组较模型组Occludin、ZO-1蛋白表达上调, Claudin-2蛋白表达下调 (P＜0.05), 整肠生组较单用5-ASA组更明显提高Occludin、ZO-1蛋白和mRNA表达. (4) 与正常组相比, 模型组MDA含量增高, SOD活性降低, 与5-ASA组相比, 整肠生组能更显著地降低MDA含量, 提高SOD活性 (P＜0.05) .结论 联合应用整肠生通过调节紧密连接蛋白Occludin、ZO-1的表达和降低氧化应激反应, 来改善溃疡性结肠炎小鼠肠上皮屏障功能.

选择6例不同期型银屑病患者的皮损行电镜观察,其中3例做了治疗前后对照.,例做了非皮疹区的观察.结果:表皮各层细胞均有异常,细胞之间桥粒减少.间隙加宽.棘细胞间隙有嗜中性粒细胞及淋巴细胞浸润.治愈后个别棘细胞核仍大.细胞间隙轻度增宽.非皮疹区棘细胞内线粒体聚集,细胞间隙增宽.以上表明银屑病表皮细胞发育不良,病变广泛.临床治愈病例棘细胞未能恢复正常.可能是复发的原因之一故治愈标准不能单从临床判定.

Two cases of irritated seborrheic keratosis of the eyelid were studied clinicopathologically. One unusually large tumor was confirmed benign electron microscopically. Under light microscope, irritated seborrheic keratosis was diagnosed by the presence of its "stuck on" configuration, numerous horn cysts, and squamous eddies among the proliferated basaloid and squamoid cells. Ultrastructurally, both the basaloid cell and squamoid cell showed high differentiation and well-formed organelles in the cytoplasm. The nuclear chromatin was even and fine, and the nuclear membrane smooth and regular. Tonofilaments and desmosomes could be found. These ultrastructural findings were consistent with the concept that seborrheic keratosis develops on the basis of local arrest of keratocyte maturation.

We studied the electron microscopic and immunohistochemical findings in two elderly patients with spindle cell carcinoma of the cornea and conjunctiva. By light microscopy, correct diagnosis was made by finding the transition between the pleomorphic spindle shaped tumor cells and the overlying squamous epithelium. Ultrastructural findings indicated that squamous ceIJ origin included tonofilament-associated desmosomes and keratohyaline granules in the tumor cells. Positive immunohistochemical staining with antikeratin antibodies provided further evidence to prove the origin of spindle cell carcinoma. Follow-up of the two patients showed the malignant tumor to be quite aggressive in terms of intraocular invasion in the first patient and local recurrence in the second.