近年来随着对天疱疮研究的深入，在桥粒芯蛋白抗体所致的免疫反应机制的基础上，又发现了新的发病机制，同时靶向治疗也取得了很多进展。本文综述近年来有关天疱疮的发病机制及靶向治疗药物的进展。

目的:探讨云南不明原因猝死（简称云南猝死）与致心律失常性右室心肌病（ARVC）桥粒蛋白基因突变之间的病因联系。方法:以4个云南猝死ARVC病理诊断病例家庭为研究对象，收集家庭内的云南猝死ARVC病理诊断病例（ n= 3）尸解心腔血，采集与其有血缘遗传关系的直系亲属（病例亲属， n=4）和无血缘遗传关系的对照人群（ n=7）静脉血，提取DNA进行ARVC桥粒蛋白基因桥粒斑菲素蛋白2（PKP2）、桥粒斑蛋白（DSP）、桥粒芯蛋白2（DSG2）、桥粒芯胶蛋白2（DSC2）、连接桥粒斑珠蛋白（JUP）共97个外显子位点的PCR扩增及测序，结合遗传家系综合分析5个基因的突变情况。 结果:云南猝死ARVC病理诊断病例及病例亲属全部发生DSP基因突变，PKP2、DSG2、DSC2和JUP基因突变各1人，同一人同时携带1~3个基因突变。DSP基因存在4个外显子突变位点，其中1个为新发现杂合同义突变c.4014 C>A（p.A1338A）。1例云南猝死ARVC病理诊断病例同时携带PKP2基因的2个错义突变位点，且1个为新发现杂合子突变c.739 G>C（p.G247R）。新发现JUP基因的1个杂合错义突变位点c.799 G>A（p.A267T），其蛋白质功能预测值高达0.963，蛋白质功能发生异常改变的可能性较高。DSG2和DSC2基因各有1个突变位点。对照人群均未发现上述突变。结论:云南猝死ARVC病理诊断病例及病例亲属携带ARVC桥粒蛋白基因DSP、PKP2、DSG2、DSC2、JUP突变，推测部分云南猝死与ARVC桥粒蛋白基因突变间可能具有一定的病因关联。

目的:了解云南省鹤庆县云南不明原因猝死（简称云南猝死）病例及病例亲属的5个常见致心律失常性右室心肌病（ARVC）桥粒蛋白基因突变情况，探索ARVC桥粒蛋白基因突变与云南猝死之间的病因联系。方法:2021年1月，收集鹤庆县8个发病自然村的云南猝死病例尸解心腔血，采集病例亲属外周静脉血。提取血样DNA，PCR扩增后采用Sanger法对5个桥粒蛋白基因[桥粒斑蛋白（DSP）、桥粒芯蛋白2（DSG2）、桥粒斑菲素蛋白2（PKP2）、桥粒斑珠蛋白（JUP）、桥粒芯胶蛋白2（DSC2）]的97个外显子位点进行测序，综合分析基因突变情况。结果:收集云南猝死病例3人份血样，采集病例亲属36人份血样。39份血样共检出26个基因突变位点，总突变率为26.80%（26/97），DSP、DSG2、PKP2、JUP、DSC2基因分别有13、5、3、3、2个位点发生突变。其中19个为已报道突变，7个为新发现突变：DSP基因3号外显子c.372G>A、15号外显子c.2090A>G、17号外显子c.2371C>A、24-I号外显子c.8458T>G，DSG2基因8号外显子c.861C>T，PKP2基因3号外显子c.892C>A、8号外显子c.1725G>T。3例云南猝死病例及36名病例亲属均为复合基因突变携带者，同一人同时携带3 ~ 9个基因突变位点。结论:鹤庆县云南猝死病例及病例亲属存在ARVC桥粒蛋白DSP、DSG2、PKP2、JUP、DSC2基因突变，可能是部分云南猝死发病的遗传背景因素。

目的:识别中国北方人新的前列腺癌风险变异个体。方法:分析10例中国北方前列腺癌的mRNA测序数据，筛选出26个表达于肿瘤mRNA，且具有潜在生物学功能的单碱基变异。利用Sequenom SNP分型平台，在345例中国北方前列腺癌患者和匹配正常对照的外周血基因组DNA中对这些变异进行基因分型和关联分析。结果:识别2个以前未见报道的与前列腺癌关联的单核苷酸变异， CHST12 rs12536223 C>T( P＝0.033， OR＝2.730，95% CI：1.046~7.097)和 DSP rs28763961A>T( P＝0.030， OR＝0.550，95% CI：0.315~0.948)。rs28763961T的携带增加 DSP在前列腺癌中的表达( P＝0.036)，并显著降低肿瘤患者外周血中总PSA的丰度( P＝0.007)。 结论:rs12536223和rs28763961是新的中国北方人前列腺癌关联变异。rs28763961T等位基因的携带降低前列腺癌的发病风险。

致心律失常性心肌病（ACM）是一种以心律失常为突出表现，同时存在心脏结构异常的遗传性心肌疾病，常见类型为致心律失常性右心室心肌病，表现为右心室起源的心律失常合并右心室扩张及右心衰竭，也可累及左心室而表现多种亚类型，通称为ACM。常见病因为编码心肌细胞的桥粒蛋白基因的突变。近年来对ACM的诊断和鉴别诊断的认识进展较快，但漏诊率和误诊率仍然较高，国内发病率不清楚。从基因型-表型、病因等方面进行诊断及鉴别有重要意义。

目的:探讨ⅩⅦ型胶原蛋白α1（COL17α1）在小鼠衰老皮肤中的表达与作用及其对人表皮干细胞（ESC）干性和增殖能力的影响，并且探讨相关微小RNA（miR）干预人ESC中COL17α1表达的机制。方法:采用实验研究方法。取2个月龄（青年）和24个月龄（老年）雄性C57BL/6J小鼠各12只，取其胸背部全层皮肤标本进行后续检测。对青年小鼠和老年小鼠全层皮肤标本，行苏木精-伊红染色后观察表皮层结构并测量表皮厚度，用透射电子显微镜观察表皮基底膜形态和半桥粒并行半桥粒计数，分别采用实时荧光定量反转录PCR（RT-PCR）法与蛋白质印迹法检测COL17α1的mRNA与蛋白表达，采用免疫荧光法观测COL17α1的蛋白表达与分布。取于解放军总医院第四医学中心行包皮切除手术的3名20~30岁健康男性术后弃用的新鲜包皮组织，提取ESC，取生长良好的细胞进行后续实验。按随机数字表法（分组方法下同）将ESC分为进行相应处理的空白对照组、转染试剂对照组、空载体质粒组、敲低COL17α1质粒组，培养48 h后，采用实时荧光定量RT-PCR法检测COL17α1的mRNA表达，采用蛋白质印迹法检测COL17α1和细胞角蛋白14（CK14）的蛋白表达，采用细胞计数试剂盒8法检测细胞增殖水平。通过DIANA、miRTarBase、miRNAMap、TargetScan、microRNA数据库筛选可能作用于 COL17α1 mRNA 3'非编码区的miR。将ESC分为转染miR模拟物阴性对照物的阴性对照组和转染前述筛选出的各miR的模拟物的各miR模拟物组，转染后48 h，通过蛋白质印迹法检测COL17α1的蛋白表达。基于基因表达综合数据库（GEO）的miR测序数据集GSE114006，使用GEO2R工具统计分析前述筛选出的可造成COL17α1蛋白表达下降的miR在30名青年（18~25岁）人和30名老年（>70岁）人皮肤中的表达。取青年小鼠和老年小鼠全层皮肤标本，采用实时荧光定量RT-PCR法检测前述老年人皮肤中表达增多的miR的表达。取2批ESC，第1批分为COL17α1野生型+miR-203b-3p阴性对照组与COL17α1野生型+miR-203b-3p模拟物组，第2批分为COL17α1突变型+miR-203b-3p阴性对照组与COL17α1突变型+miR-203b-3p模拟物组，分别转染对应序列，48 h后，采用荧光素酶报告基因检测试剂盒检测COL17α1的基因表达水平。组织实验中样本数均为6，细胞实验中样本数均为3。对数据行独立样本 t检验、单因素方差分析、LSD检验或Dunnett检验、Mann-Whitney U检验或Kruskal-Wallis H检验。 结果:与青年小鼠比较，老年小鼠皮肤表皮层与真皮层分界模糊且细胞层次较少，表皮层厚度明显变薄（ Z=-2.88， P<0.01），基底膜形态不连续，表皮-真皮连接处半桥粒较少且分布不均，半桥粒数量明显减少（ Z=-2.91， P<0.01），COL17α1的mRNA和蛋白表达水平均明显降低（ t值分别为10.61、6.85， P<0.01）。与青年小鼠比较，老年小鼠皮肤表皮基底层和毛囊球部的COL17α1蛋白表达均明显减少（ Z=-2.24， P<0.05）。培养48 h后，空白对照组、转染试剂对照组、空载体质粒组、敲低COL17α1质粒组ESC中COL17α1的蛋白表达水平分别为1.00±0.27、1.12±0.21、1.13±0.23、0.42±0.18。相较于空白对照组，转染试剂对照组和空载体质粒组ESC中COL17α1的mRNA和蛋白表达水平、CK14的蛋白表达水平及ESC增殖水平均未发生明显变化（ P>0.05），敲低COL17α1质粒组ESC中这些指标均明显降低（ P<0.05或 P<0.01）。miR-203a-3p、miR-203b-3p、miR-512-5p、miR-124-3p、miR-28-5p、miR-590-3p、miR-329-5p可能结合 COL17α1 mRNA的3'非编码区。转染48 h后，与阴性对照组的1.000±0.224比较，miR-329-5p模拟物组、miR-203b-3p模拟物组和miR-203a-3p模拟物组ESC中COL17α1的蛋白表达水平明显降低（0.516±0.188、0.170±0.025、0.235±0.025， t值分别为3.17、5.43、5.07， P<0.05或 P<0.01）。老年人皮肤中仅miR-203b-3p表达水平明显高于青年人（ t=3.27， P<0.01）。老年小鼠皮肤中miR-203b-3p表达水平明显高于青年小鼠（ Z=-2.88， P<0.01）。转染后48 h，COL17α1野生型+miR-203b-3p模拟物组ESC中COL17α1的基因表达水平明显低于COL17α1野生型+miR-203b-3p阴性对照组（ t=7.66， P<0.01），COL17α1突变型+miR-203b-3p模拟物组ESC中COL17α1的基因表达水平与COL17α1突变型+miR-203b-3p阴性对照组相近（ P>0.05）。 结论:COL17α1的mRNA和蛋白表达水平随小鼠年龄增长而减少，可能导致小鼠ESC脱离表皮基底膜。COL17α1的表达减少可抑制CK14的表达与ESC增殖，这可能是老年人皮肤中表皮层变薄和创面愈合减慢的原因。小鼠衰老皮肤中表达增多的miR-203b-3p可以靶向结合 COL17α1 mRNA的3'非编码区，阻碍转录后翻译过程，造成COL17α1蛋白表达减少。

目的:探究桥粒斑蛋白(DSP)在肺动脉高压(PH)大鼠模型与人肺动脉平滑肌细胞(hPASMCs)的表达变化及其在PH发生、发展中的作用。方法:24只SPF级别雄性SD大鼠运用随机数字表法随机分为正常对照(NC)组、野百合碱(MCT)组、低氧(HYP)组及低氧联合Sugen5416(SuHx)组，检测各组大鼠右心室收缩压(RVSP)及右心室肥厚指数(RVHI)，观察各组大鼠血管增厚程度；蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠中肺组织中DSP的表达情况。体外培养hPASMCs，分别用转化生长因子β1(TGF-β1)或HYP处理细胞24、48、72 h，Western blot检测各组细胞中DSP表达情况。采用小分子siRNA DSP干扰序列及阴性对照序列分别转染hPASMCs，分为DSP干扰(siDSP)组及阴性对照(siNT)组。2组均进行TGF-β1、CoCl 2或HYP处理48 h，Western blot检测增殖分化及凋亡相关蛋白[p-p38、增殖相关蛋白(PCNA)、抗凋亡蛋白(Bcl2)、促凋亡蛋白(Bax)]的表达情况，划痕实验检测细胞的迁移能力变化，EdU细胞增殖流式检测细胞增殖能力变化。 结果:MCT组、HYP组、SuHx组DSP表达量[(3.10±0.59)、(4.34±0.75)、(3.84±0.13)]较NC组(1.00±0.19)升高，差异均有统计学意义( P值均<0.05)。TGF-β1 24 h组、HYP 72 h组hPASMCs的DSP蛋白表达分别较TGF-β1 0 h组及HYP 0 h组升高[(4.42±0.35)比(1.00±0.07)、(2.62±0.32)比(1.00±0.21)]，差异均有统计学意义( P值均<0.01)。siDSP+TGF-β1组、siDSP+CoCl 2组、siDSP+HYP组中hPASMCs的p-p38表达量较siNT+TGF-β1组、siNT+CoCl 2组、siNT+HYP组升高[(2.14±0.20)比(1.00±0.14)、(1.66±0.09)比(1.00±0.12)、(3.03±0.22)比(1.00±0.50)]，差异均有统计学意义( P值均<0.05)。siDSP+HYP组中hPASMCs的PCNA表达量较siNT+HYP组下降[(0.55±0.04)比(1.00±0.04)]，差异有统计学意义( P值<0.05)。siDSP+TGF-β1组、siDSP+CoCl 2组、siDSP+HYP组中hPASMCs的Bcl2/Bax比值较siNT+TGF-β1组、siNT+CoCl 2组、siNT+HYP组下降[(0.85±0.06)比(1.00±0.04)、(0.73±0.08)比(1.00±0.07)、(0.72±0.01)比(1.00±0.05)]，差异均有统计学意义( P值均<0.05)。siDSP+TGF-β1组hPASMCs的细胞迁移率较siNT+TGF-β1组减少[(27.56±2.44)%比(58.05±2.25)%]，差异有统计学意义( t＝9.20， P<0.001)；siDSP+CoCl 2组hPASMCs的细胞迁移率较siNT CoCl 2组减少[(25.78±2.55)%比(47.30±2.10)%]，差异有统计学意义( t＝6.53， P<0.001)。siDSP+TGF-β1组hPASMCs的细胞增殖率较siNT+TGF-β1组减少[(6.07±0.23)%比(10.62±0.50)%]，差异有统计学意义( t＝8.29， P＝0.001)；siDSP+HYP组hPASMCs的细胞增殖率较siNT+HYP组减少[(2.84±0.46)%比(5.56±0.46)%]，差异有统计学意义( t＝4.17， P＝0.014)。 结论:DSP能够促进hPASMCs的增殖和迁移，促进肺血管的重构，在PH的发生、发展起重要作用。

天疱疮是一种由针对桥粒芯蛋白（DSG）的自身抗体介导的自身免疫性水疱性疾病。研究显示，与单独使用糖皮质激素相比，应用利妥昔单抗（RTX）作为一线治疗药物能够使更多的天疱疮患者在停药后仍得到长期缓解。为了解RTX治疗天疱疮患者后介导长期临床缓解的免疫学机制，作者通过流式细胞法分析DSG特异性记忆B细胞和DSG特异性滤泡Th的表型，并通过酶联免疫斑点试验检测单独使用糖皮质激素或RTX治疗的患者的抗体分泌细胞水平。临床研究结果显示，RTX诱发了IgG类别转换的DSG特异性记忆B细胞的显著减少。因此，在应用RTX后完全缓解的患者中不能再检测到抗DSG抗体分泌细胞。相比之下，糖皮质激素并没有改变DSG特异性记忆B细胞的频率或表型，即使在症状缓解的患者中仍能够检测到抗DSG抗体分泌细胞。作者通过使用peptide-HLADRB1*0402 tetramer染色，得出在应用RTX后，DSG3特异性滤泡Th水平显著下降，而在糖皮质激素治疗后其能保持稳定。

目的:探讨lncRNA LINC00657在弥漫型食管胃交界部腺癌（AEG）中表达的意义。方法:采用实时荧光定量PCR检测LINC00657在弥漫型AEG组织和肿瘤原代细胞（PDC）中的表达水平，并检测E-cadherin在AEG组织和PDC中的表达。采用Kaplan-Meier法评价LINC00657的表达与患者3年生存率的关系。结果:AEG组织中LINC00657表达高于癌旁正常组织，差异有统计学意义［（1.41±0.12）比（0.61±0.11）， t=276.038， P<0.001］。在AEG组织和PDC中LINC00657均有高表达，而E-cadherin表达明显下调。LINC00657的表达与肿瘤直径、侵犯深度、淋巴结转移及TNM分期均有关，差异均有统计学意义（ χ2=8.807， P=0.003； χ2=11.983， P=0.001； χ2=10.612， P=0.001； χ2=14.125， P<0.001）。弥漫型AEG中LINC00657高表达组患者的3年总生存率显著低于低表达组（ P<0.01）。LINC00657与E-cadherin表达呈负相关（ r=-0.529， P<0.001）。 结论:在弥漫型AEG组织中LINC00657表达升高与患者的预后不良有关，并与E-cadherin的表达呈负相关。

目的:检测初治多发性大动脉炎（TAK）患者血浆外泌体携带的微小RNA和蛋白，分析其在TAK发病机制中的可能作用。方法:选2020年6月至11月北京协和医院风湿免疫科确诊的初治TAK患者10例，另选与之年龄性别匹配的健康对照者5例，分别通过RNA测序和蛋白质谱技术检测血浆外泌体携带的微小RNA和蛋白，筛选出差异表达的微小RNA和蛋白，并对其进行层次聚类分析、功能、信号通路和结构域富集分析，最终筛选出与血管炎有关的微小RNA和蛋白，探究其在TAK发病机制中的可能作用。统计学采用Fisher精确概率检验或 χ2检验。 结果:TAK患者血浆外泌体携带的差异表达的微小RNA 29个，其中miR-101-3p、miR-122-5p、miR-143-3p、miR-185-3p、miR-192-5p、miR-194-5p、miR-19a-3p、miR-19b-3p、miR-20b-5p、miR-21-5p、miR-22-3p、miR-335-5p、miR-34a-5p、miR-3613-5p、miR-548ad-5p、miR-590-3p、miR-7-5p表达上调，miR-1249-3p、miR-141-3p、miR-199a-5p、miR-199b-5p、miR-200a-3p、miR-200c-3p、miR-204-5p、miR-29c-5p、miR-335-3p、miR-381-3p、miR-4433b-5p、miR-584-5p表达下调。差异表达的蛋白357个，其中236个表达上调，121个表达下调，最终筛选前激肽释放酶、激肽原1、桥粒蛋白。结论:血浆外泌体携带的miR-34a-5p、miR-200c-3p、miR-143-3p、miR-22-3p、miR-21-5p、前激肽释放酶、激肽原1、桥粒蛋白可能通过调节血管生理过程、炎症反应、自身免疫等过程参与TAK的发病机制，具有作为TAK生物标志物和治疗靶点的潜在作用。