目的:探讨双波长激光联合生物陶瓷材料iRoot SP辅助磨牙根管治疗的效果.方法:选择2020年1月-2023年6月收治的104例磨牙根管治疗患者,按照随机数字表法分为对照组与试验组,每组52例.对照组采用iRoot SP糊剂进行根管充填,试验组以双波长激光(Nd∶YAG和Er:YAG)联合iRoot SP糊剂进行治疗.比较2组总有效率、疼痛程度及并发症,观察治疗前、治疗后6周及12周的血清白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素17(IL-17)、肿瘤坏死因子 α(TNF-α)、出血指数(bleeding index,BI)、牙周探诊深度(depth of periodontal probing,PD)和临床附着水平(clini-cal attachment level,CAL).采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析.结果:试验组总有效率显著高于对照组,根管填充后疼痛程度显著低于对照组(P＜0.05);试验组治疗后6、12周的IL-6、IL-17、TNF-α、BI、PD和CAL显著低于对照组(P＜0.05).结论:双波长激光联合生物陶瓷材料iRoot SP辅助磨牙根管治疗效果较为理想,有利于减轻牙周炎症和疼痛程度.

目的 研究D-半乳糖(D-galactose,D-gal)对小鼠睾丸TM4支持细胞连接功能损伤以及淫羊藿素(icaritin,ICT)的改善作用机制.方法 首先将TM4细胞分为正常对照组、不同浓度D-gal处理组,Western blot检测TM4细胞连接功能相关蛋白(ZO-1、Occludin、β-catenin 和 Cx43)以及 ERα/FAK信号通路相关蛋白(ERα、FAK和pY397-FAK)表达水平的变化;随后MTT筛选ICT药物浓度,并将TM4细胞分为正常对照组、D-gal处理组、D-gal处理+不同浓度ICT组,Western blot检测上述蛋白表达水平变化;分子对接研究ERα与ICT之间的相互作用,并预测两者之间的亲和力;最后将TM4细胞分为正常对照组、D-gal处理组、ERα抑制剂组、D-gal+ICT组、ERα抑制剂+ICT组,Western blot检测上述蛋白表达水平的变化.结果 D-gal可浓度依赖性下调连接功能相关蛋白(ZO-1、Occludin、β-catenin 和 Cx43)以及 ERα/FAK信号通路相关蛋白(ERα、FAK和pY397-FAK)表达水平;给予ICT药物后,上述蛋白表达水平均明显上调;ERα和ICT分子对接结果显示,ERα的Asp351氨基酸残基与ICT之间形成2个距离为3.4 ?和2.4 ?的氢键,且两者之间的对接结合能小于-7 kcal·mol-1;ERα抑制剂处理TM4细胞后,上述蛋白表达水平均明显下调,给予ICT后,上述蛋白表达水平未有明显变化.结论 D-gal可导致TM4细胞连接功能损伤,而ICT可改善其损伤,机制可能与上调ERα/FAK信号通路相关.

目的 研究黄芪总黄酮(TFA)对子宫内膜异位症(EMs)子宫内膜细胞增殖和迁移的影响,并基于ERα/STAT3信号通路探讨其潜在分子机制.方法 分离人EMs患者子宫内膜细胞.(1)为初步探究不同剂量TFA对EMs子宫内膜细胞增殖和迁移的影响,将实验分为5组:对照(NC)组、EMs组、TFA高剂量组(TFA-H,TFA2 mg/mL干预异位子宫内膜细胞)、TFA中剂量组(TFA-M,TFA 1 mg/mL干预异位子宫内膜细胞)、TFA低剂量组(TFA-L,TFA0.5 mg/mL干预异位子宫内膜细胞).采用平板克隆形成实验、CCK-8检测细胞增殖能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Western blotting、RT-qPCR检测细胞ERα、STAT3蛋白和mRNA表达水平.(2)为探究ERα/STAT3信号通路对EMs子宫内膜细胞的影响,使用ERα诱导剂Feruti-nin干预EMs子宫内膜细胞,将实验分为两组:NC组,ERα诱导剂(Ferutinin)组.Western blot、RT-qPCR检测细胞ERα、STAT3蛋白和mRNA表达水平,CCK-8检测细胞增殖能力,Trans well实验检测细胞迁移能力.(3)为进一步探究TFA及ERα/STAT3信号通路在EMs子宫内膜细胞的作用机制,将实验分为4组:NC组、EMs 组、TFA-M 组、TFA-M+Ferutinin 组.Western blot、RT-qPCR 检测细胞 ERα、STAT3 蛋白和 mRNA 表达水平,CCK-8检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞迁移能力.结果 (1)与NC组相比,EMs组细胞克隆增殖能力增加(P＜0.01);与EMs组相比,TFA-L组(P＜0.05)、TFA-M组(P＜0.05)和TFA-H组(P＜0.01)细胞的克隆增殖能力降低.与NC组相比,EMs组细胞活力增加(P＜0.01);与EMs组相比,TFA-L组、TFA-M组和TFA-H组细胞活力降低(P＜0.05).与NC组相比,EMs组细胞相对迁移距离增加(P＜0.01);与 EMs 组相比,TFA-L 组(P＜0.05)、TFA-M 组(P＜0.05)和 TFA-H 组(P＜0.01)细胞相对迁移距离减少.与NC组相比,EMs组细胞ERα和STAT3蛋白及mRNA表达水平增加(P＜0.01);与EMs组相比,TFA-L 组(P＜0.05)、TFA-M 组(P＜0.01)和 TFA-H 组(P＜0.01)细胞的 ERα 和 STAT3 蛋白及mRNA表达水平降低.根据以上实验结果,选择TFA-M进行后续实验.(2)与NC组相比,Ferutinin组细胞ERα和STAT3蛋白及mRNA表达水平增加(P＜0.01).与NC组相比,Ferutinin组细胞细胞活力增加(P＜0.01).与NC组相比,Ferutinin组细胞克隆增殖能力增加(P＜0.01).(3)与NC组相比,EMs组细胞ERα和STAT3蛋白及mRNA表达水平增加(P＜0.05);与EMs组相比,TFA-M组细胞ERα和STAT3蛋白及mR-NA 表达水平减少(P＜0.05);与TFA-M组相比,TFA-M+Ferutinin组细胞ERα和STAT3蛋白及mRNA表达水平增加(P＜0.05).与NC组相比,EMs组细胞活力增加(P＜0.05);与EMs组相比,TFA-M组细胞活力减少(P＜0.05);与TFA-M组相比,TFA-M+Ferutinin组细胞活力增加(P＜0.05).与NC组相比,EMs组细胞克隆增殖能力增加(P＜0.05);与EMs组相比,TFA-M组细胞克隆增殖能力降低(P＜0.05);与TFA-M组相比,TFA-M+Ferutinin组细胞克隆增殖能力增加(P＜0.05).结论 TFA可下调EMs中子宫内膜细胞的增殖和迁移能力,这可能与ERα/STAT3信号通路相关.

目的:构建雌激素受体α配体结合域(ERα-LBD)表达载体，优化表达条件得到可溶性ERα-LBD蛋白。方法:在Addgene网站检索关键词ESR(雌激素受体，estrogen receptor)，选择符合条件的质粒载体pcDNA-HA-ER WT(Addgene plasmid # 49498; http：//n2t.net/addgene：49498; RRID：Addgene_49498)，设计引物并扩增得到目的片段ERα-LBD，分别构建蛋白表达载体pET-28a-LBD和pGEX-4T1-LBD，改变诱导温度、异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)浓度以及诱导时间对表达条件优化。待细菌裂解并提取蛋白后进行凝胶电泳，可在细菌上清的泳道中观察到明显的紫色蛋白表达条带，即为可溶性ERα-LBD蛋白。结果:pET-28a-LBD重组质粒未能表达重组蛋白ERα-LBD，重组质粒pGEX-4T1-LBD在Rosetta和BL21(DE3)感受态中以1 mmol/L IPTG诱导仅能得到包涵体；以0.2 mmol/L IPTG 16 ℃过夜诱导培养，则可得到可溶性ERα-LBD蛋白。结论:成功构建ERα-LBD表达载体并优化诱导表达条件，获得可溶性ERα-LBD蛋白。

目的:观察雌激素受体α(ERα)在腺性肥大乳房乳腺组织和上皮细胞中的定位和表达，探讨其在腺性乳房肥大症病因学上的意义。方法:对10例腺性乳房肥大症患者和正常体积乳房乳腺上皮细胞进行原代培养，采用免疫组织化学法(IHC)和免疫荧光组织化学法(IFHC)对乳腺组织的病理学特点进行观察，采用蛋白质印迹法(Western blot)检测组织及细胞中ERα蛋白的表达量。组间比较采用单因素方差分析。结果:ERα表达于导管和小叶的腔上皮细胞内，在肌上皮细胞和间质细胞等细胞内几乎不表达，且腺性肥大乳房乳腺组织导管上皮处ERα阳性细胞数多于小叶，两者比例较为恒定(1.7∶1.0)。ERα阳性细胞在腺性肥大乳房和正常体积乳房乳腺组织中的阳性表达率(PER)分别为17.25%和6.13%。腺性肥大乳房组、正常体积乳房组细胞株中的ERα蛋白表达值(PEV)为1.965和1.002。腺性肥大乳房乳腺组织中ERα PER和ERα PEV与正常体积乳房组间差异有统计学意义( P<0.05)，且PER和ERα PEV与乳房肥大的严重程度呈正相关。 结论:ERα在乳腺组织内的表达定位具有特征性。与正常体积乳房乳腺上皮细胞比较，腺性肥大乳房乳腺上皮细胞的ERα PER和ERα PEV均明显增高，且ERα表达情况的高低与乳房肥大的严重程度成正相关。由此推测，腺性乳房肥大症的发生与乳腺组织内ERα的分布特点和上皮细胞内ERα表达增多有密切关。

Background::Estrogen is involved in the pathophysiological process of benign prostatic hyperplasia (BPH), in which epithelial-mesenchymal transition (EMT) plays an important role. Upregulation of aquaporin (AQP) 5, which is directly activated by estrogen, has been reported to promote EMT in multiple cells. This study aimed to examine the effects of AQP5 on estrogen-induced EMT in the prostate.Methods::Normal prostate (NP) tissue samples without any histopathological changes and BPH tissue samples with pathologically confirmed hyperplasia were obtained. An EMT cell model was subsequently established by adding estradiol (E2) to RWPE-1 cells, after which AQP5 knockdown was performed. Tissue morphological and immunohistochemical features were examined using hematoxylin-eosin and immunohistochemical staining. Western blot analysis was performed to determine the expression of AQPs, estrogen receptors, and EMT-related proteins. Cell proliferation was assessed and supernatants were collected for enzyme-linked immunosorbent assay to determine transforming growth factor-β1 (TGF-β1) concentrations. Immunofluorescence staining was performed to assess protein expressions in RWPE-1 cells. Results::BPH tissues exhibited greater EMT (TGF-β1: 1.362 ± 0.196 vs. 0.107 ± 0.067, P = 0.003; vimentin: 1.581 ± 0.508 vs. 0.221 ± 0.047, P < 0.001; E-cadherin: 0.197 ± 0.188 vs. 1.344 ± 0.088, P < 0.001), higher AQP5 (1.268 ± 0.136 vs. 0.227 ± 0.055, P < 0.001) and estrogen receptor (ER) α (1.250 ± 0.117 vs. 0.329 ± 0.134, P < 0.001) expression but lower ERβ (0.271 ± 0.184 vs. 1.564 ± 0.130, P < 0.001) expression than NP tissues. E2-stimulated cells had higher AQP5 expression (1.298 ± 0.058 vs. 1.085 ± 0.104, P = 0.049), increased cell proliferation (1.510 ± 0.089 vs.1.000 ± 0.038, P < 0.001), and EMT (TGF-β1 concentration: 0.352 ± 0.021 ng/mL vs. 0.125 ± 0.014 ng/mL, P < 0.001; vimentin: 1.641 ± 0.120 vs. 0.188 ± 0.020, P = 0.002; E-cadherin: 0.075 ± 0.030 vs. 0.843 ± 0.046, P < 0.001) than controls. E2-stimulated cells with AQP5 knockdown exhibited decreased EMT (TGF-β1 concentration: 0.223 ± 0.041 ng/mL vs. 0.352 ± 0.021 ng/mL, P= 0.016; vimentin: 0.675 ± 0.056 vs. 1.641 ± 0.120, P = 0.001; E-cadherin: 0.159 ± 0.037 vs. 0.075 ± 0.030, P = 0.040) than E2-stimulated cells with non-related small interfering RNA (siRNA). Conclusion::Our findings suggest that estrogen induces BPH possibly by promoting AQP5 expression. Hence, AQP5 might be a novel target for modulating EMT in prostate epithelial cells.

目的:探讨乳腺导管原位癌（DCIS）X线摄影表现与病理学免疫组织化学分型的关系。方法:回顾性分析2016年1月至2019年10月在青岛大学附属医院经手术病理证实的505例DCIS患者共514个病灶的资料。根据免疫组织化学结果将全部DCIS病灶分为雌激素受体（ER）阳性型（215个病灶）、人表皮生长因子受体2（HER2）阳性型（282个病灶）和三阴性型（17个病灶）。患者术前均接受X线摄影检查，参照乳腺影像报告及数据系统（BI-RADS）标准分析不同分子分型患者的影像学表现，如病变类型，钙化性病变的钙化形态、分布，乳腺构成及BI-RADS分类情况。采用χ2检验或Fisher确切概率法分析不同分子分型DCIS患者影像表现分布的差异，两两比较时检验水准α采用Bonferroni校正法。结果:ER阳性型44.7%（96/215）表现为阴性或非钙化性病变；HER2阳性型41.1%（116/282）表现为钙化伴肿块/非对称致密/结构扭曲；三阴性型82.4%（14/17）为钙化性病变，包括单纯钙化（7/17）和钙化伴肿块/非对称致密/结构扭曲（7/17）。DCIS HER2阳性型与ER阳性型在病变类型方面差异有统计学意义（χ2=13.747， P=0.003）。细线样/细小分支状钙化（34/201）多见于HER2阳性型，无定形钙化（67/119）多见于ER阳性型，差异有统计学意义（χ2=27.498， P<0.001）。团簇状分布钙化（59/119）多见于ER阳性型，线样/段样分布（76/201）多见于HER2阳性型，差异有统计学意义（χ2=13.123， P=0.004）。 结论:DCIS的X线表现与其病理学免疫组化不同分型有一定关系，认识其X线表现有助于为临床个性化治疗和预后提供更多依据。

目的:探讨雌激素受体α（ERα）、雌激素受体β（ERβ）在中国女性食管鳞状细胞癌（ESCC）中的表达及其与患者临床病理特征、婚育因素的关系和对预后的影响。方法:选取河南省南阳市中心医院2001年1月至2016年12月女性原发性ESCC患者110例。免疫组织化学法（IHC）检测ESCC组织中ERα、ERβ蛋白表达水平。logistic回归分析ERα、ERβ表达与患者婚育因素（经期状态、初潮年龄、初次生育年龄、妊娠次数）及临床病理特征（肿瘤部位、肿瘤浸润深度、有无淋巴结转移、肿瘤分期）的关系；Kaplan-Meier法进行生存分析，并行log-rank检验；Cox比例风险模型进行多因素生存分析。结果:ERα、ERβ蛋白在女性ESCC组织中阳性表达率为37.3%（41/110）、64.5%（71/110）。ERβ表达与肿瘤部位（ χ2=6.999， P=0.030）、肿瘤分期（ χ2=11.097， P<0.01）和妊娠次数（ χ2=6.304， P=0.012）有关。妊娠次数>3次（ HR=2.553，95% CI 1.051～6.203， P=0.039）、ERβ阳性（ HR=2.580，95% CI 1.966～3.386， P<0.01）是患者生存独立保护因素；ERα阳性（ HR=0.530，95% CI 0.384～0.739， P<0.01）、淋巴结转移（ HR=0.663，95% CI 0.512～0.858， P=0.002）是患者生存独立危险因素。 结论:ERα和ERβ表达可预测女性ESCC患者预后。

目的:探讨雌激素受体(ESR1)对乳腺癌细胞辐射抗性的影响及分子机制。方法:在雌激素受体阴性乳腺癌细胞中转染ESR1过表达质粒(过表达对照vector组、过表达ESR1 OE组)，在雌激素受体阳性乳腺癌细胞中通过慢病毒转染方法构建稳定敲低ESR1(敲低对照shNC组、敲低shESR1组)的细胞模型，采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)和免疫印迹方法检测自噬相关基因mRNA(ATG5)和蛋白表达水平(LC3B-I、LC3B-II、P62、FIP200、ATG5、ATG7、ATG12、Beclin1、ULK1)；在8 Gy X射线的电离辐射处理下，免疫印迹法检测自噬通量；采用流式细胞术检测细胞死亡；采用集落形成实验检测乳腺癌细胞辐射敏感性(未照射sham组、照射IR组、电离辐射联合铁死亡抑制剂处理Fer-1＋IR组、电离辐射联合凋亡抑制剂处理Z-VAD＋IR组、电离辐射联合自噬抑制剂处理CQ＋IR组)；用台盼蓝染色检测自噬基因敲低和过表达细胞模型以及雌激素受体抑制剂他莫昔芬(TAM)与电离辐射联合治疗下乳腺癌细胞的死亡率(他莫昔芬未处理TAM－组、他莫昔芬处理TAM＋组)。结果:在8 Gy X射线照射后24 h处理条件下，雌激素受体阳性乳腺癌ZR75细胞ESR1的敲低促进细胞死亡( t＝3.49、3.13, P < 0.05)，而雌激素受体阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞ESR1的过表达抑制细胞死亡( t＝4.16、7.48, P < 0.05)；与单纯照射相比，自噬抑制剂氯喹的处理后增加了敲低ESR1的ZR75细胞集落形成数量( t＝8.49, P < 0.05),抑制自噬可以减少沉默ESR1所致的ZR75细胞死亡。在电离辐射处理下，MDA－MB－231细胞过表达ESR1促进了细胞保护性自噬；ZR75细胞敲低ESR1后细胞保护性自噬降低。在ZR75细胞中敲低ATG5发现自噬降低，细胞死亡增加( t＝4.19、6.39, P < 0.05)，而在ZR75中过表达ATG5可以逆转因敲低ESR1导致的细胞死亡增加( t＝1.70、4.65, P < 0.05)。化疗药物他莫昔芬处理雌激素受体阳性乳腺癌细胞ZR75后发现自噬基因ATG5、ATG12的表达下降，自噬抑制，细胞死亡增加( t＝18.70, P < 0.05)，电离辐射处理促进了这一进程( t＝16.82, P < 0.05)。 结论:雌激素受体ESR1通过增加ATG5自噬相关蛋白，促进雌激素受体阳性乳腺癌细胞的保护性自噬，从而导致雌激素受体阳性乳腺癌细胞的辐射抵抗，化疗药物他莫昔芬联合电离辐射治疗增加了雌激素受体阳性乳腺癌细胞的辐射敏感性。

外阴叶状肿瘤是一种罕见的疾病，目前国内外报道不足20例，其大多数为良性肿瘤。外阴叶状肿瘤的来源有两种假说，一是起源于外阴异位乳腺组织，即“乳房线”学说；二是来源于肛门-生殖器乳腺样腺体，可分泌雌、孕激素，具有分化成良、恶性肿瘤的潜力。本文报道1例16岁青春期女性原发性外阴叶状肿瘤，单侧发病，肿瘤切面为典型叶状肿瘤外观，行外阴肿物剥除术，术后病理检查可见肿瘤表面被覆腺上皮和肌上皮，梭形间质细胞丰富，管内生长呈叶状结构；免疫组化法检测显示腺上皮细胞中雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、转录因子GATA结合蛋白3（GATA3）表达阳性，肌上皮细胞中细胞增殖相关核抗原（Ki-67）、α平滑肌肌动蛋白（SMA）、p63表达阳性，符合良性叶状肿瘤的诊断。通过总结本例患者的临床表现、肿瘤形态、病理检查等情况，以期对外阴叶状肿瘤的发生、发展、诊断及治疗有进一步的认识。