目的:探讨长链非编码RNA (lncRNA) FBXL19-AS1对胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响，明确lncRNA FBXL19-AS1与微小RNA-339-3p(miR-339-3p)的靶向关系。方法:收集2017年1月至2019至8月间烟台市烟台山医院73例行手术切除且经病理确诊的胰腺癌患者的癌组织及匹配的癌旁正常胰腺组织，体外培养正常胰腺上皮细胞(hTERT-HPNE)和3株胰腺癌细胞(Capan-1、SW1990、PaTu8988)，采用实时荧光定量PCR法检测胰腺癌组织和各株细胞lncRNA FBXL19-AS1和miR-339-3p表达。将胰腺癌Capan-1细胞分为NC组(正常对照组)、si-NC组(转染无意义阴性序列)、si-FBXL19-AS1组(转染FBXL19-AS1小干扰RNA)，miR-NC组(转染空质粒对照)、miR-339-3p组(转染miR-339-3p过表达慢病毒载体)，si-FBXL19-AS1+anti-miR-339-3p NC组(共转染FBXL19-AS1siRNA和miR-339-3p抑制剂阴性对照序列)、si-FBXL19-AS1+anti-miR-339-3p组(共转染FBXL19-AS1siRNA和miR-339-3p抑制剂)。采用CCK-8法检测各组细胞增殖活性，采用Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力，采用蛋白质免疫印迹法检测细胞cyclinD1、基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9蛋白表达。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因实验分析lncRNA FBXL19-AS1和miR-339-3p的靶向关系。结果:胰腺癌组织lncRNA FBXL19-AS1表达量显著高于癌旁正常胰腺组织(2.96±0.21比1.00±0.13， P<0.05)，miR-339-3p表达量显著低于癌旁正常胰腺组织(0.37±0.05比1.00±0.11， P<0.05)。Capan-1、SW1990及PaTu8988细胞lncRNA FBXL19-AS1表达量分别为2.43±0.18、1.97±0.13和1.73±0.14，均显著高于hTERT-HPNE细胞的1.00±0.07，miR-339-3p表达量分别为0.42±0.03、0.54±0.03和0.57±0.04，均显著低于hTERT-HPNE细胞的1.00±0.05。其中以Capan-1细胞的lncRNA FBXL 19-AS1表达量最高，miR-339-3p表达量最低。与si-NC组比较，si-FBXL19-AS1组Capan-1细胞450nm处吸光度值( A450值)、迁移细胞数、穿膜细胞数显著下降[0.47±0.03比0.94±0.06、(81.00±7.41)个比(187.00±16.13)个、(67.00±5.41)个比(141.00±9.24)个]，cyclinD1、MMP2和MMP9蛋白表达量显著降低(0.44±0.03比0.83±0.05、0.48±0.03比0.92±0.07、0.38±0.02比0.73±0.05)。与miR-NC组比较，miR-339-3p组Capan-1细胞 A450值、迁移细胞数、穿膜细胞数显著下降[0.54±0.04比0.94±0.05、(98.00±6.53)个比(193.00±10.02)个、(83.00±6.58)个比(146.00±7.11)个]，cyclinD1、MMP2、MMP9蛋白表达量显著降低(0.47±0.03比0.81±0.07、0.43±0.03比0.94±0.06、0.32±0.02比0.71±0.06)。与si-FBXL19-AS1+anti-miR-NC组比较，si-FBXL19-AS1+anti-miR-339-3p组细胞 A450值、迁移细胞数、穿膜细胞数显著上升[0.96±0.07比0.48±0.03、(204.00±11.25)个比(83.00±5.11)个、(157.00±8.76)个比(64.00±4.12)个]，cyclinD1、MMP2和MMP9蛋白表达量显著升高(0.84±0.06比0.42±0.03、0.96±0.08比0.47±0.08、0.74±0.06比0.37±0.02)。上述差异均有统计学意义( P值均<0.05)。共转染野生型lncRNA FBXL19-AS1和miR-339-3p mimics组Capan-1细胞的荧光素酶活性显著低于共转染野生型lncRNA FBXL19-AS1和miR-NC组(0.47±0.04比1.00±0.10)，差异有统计学意义( P<0.05)，而共转染突变型lncRNA FBXL19-AS1和miR-339-3p mimics组与共转染突变型lncRNA FBXL19-AS1和miR-NC组Capan-1细胞的荧光素酶活性差异无统计学意义。 结论:LncRNA FBXL19-AS1在胰腺癌组织及胰腺癌Capan-1细胞株中呈高表达，敲减lncRNA FBXL19-AS1可靶向结合miR-339-3p调节胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力，促进胰腺癌的发生和发展。

目的:探讨下调lncRNA FBXL19-AS1抑制人膀胱癌细胞系T24的细胞增殖、凋亡及迁移的分子机制。方法:收集2020年3月至2020年7月本院收治的50例膀胱癌患者的癌组织及其癌旁组织标本，采用qRT-PCR检测lncRNA FBXL19-AS1、miR-194-5p表达量；体外培养人膀胱癌细胞T24，随机将其分为si-lncRNA FBXL19-AS1组、miR-194-5p组、si-lncRNA FBXL19-AS1+anti-miR-194-5p组及各自对照si-NC组、miR-NC组、si-lncRNA FBXL19-AS1+anti-miR-NC组；采用MTT法、平板克隆形成实验、流式细胞术、Transwell小室实验进行细胞增殖、克隆形成、凋亡及迁移检测；采用双荧光素酶报告实验验证lncRNA FBXL19-AS1是否靶向miR-194-5p；采用Western blot法检测Bax、Bcl-2蛋白的表达量。结果:与癌旁组织比较，lncRNA FBXL19-AS1在膀胱癌组织中的表达量升高，miR-194-5p的表达量降低(均 P<0.05)；与miR-NC组比较，miR-194-5p组细胞的荧光素酶活性减弱( P<0.05)；与si-NC组比较，si-lncRNA FBXL19-AS1组细胞的lncRNA FBXL19-AS1表达量降低，miR-194-5p的表达量升高，细胞增殖抑制率升高，细胞克隆形成数减少(均 P<0.05)；与miR-NC组比较，miR-194-5p组的miR-194-5p表达量升高，细胞增殖抑制率升高，细胞克隆形成数减少(均 P<0.05)；与si-lncRNA FBXL19-AS1+anti-miR-NC组比较，si-lncRNA FBXL19-AS1+anti-miR-194-5p组的miR-194-5p表达量降低，细胞增殖抑制率降低，细胞克隆形成数增多(均 P<0.05)。与si-NC组比较，si-lncRNA FBXL19-AS1组的细胞凋亡率、Bax、裂解的Caspase3蛋白水平均升高，Bcl-2蛋白水平降低(均 P<0.05)；与miR-NC组比较，miR-194-5p组的细胞凋亡率升高( P<0.05)，Bax、裂解的Caspase3蛋白水平均升高，Bcl-2蛋白水平均降低(均 P<0.05)；与si-lncRNA FBXL19-AS1+anti-miR-NC组比较，si-lncRNA FBXL19-AS1+anti-miR-194-5p组的细胞凋亡率、Bax、裂解的Caspase3蛋白水平均降低，Bcl-2蛋白水平升高(均 P<0.05)。与si-NC组比较，si-lncRNA FBXL19-AS1组的迁移细胞数减少( P<0.05)；与miR-NC组比较，miR-194-5p组的迁移细胞数减少( P<0.05)；与si-lncRNA FBXL19-AS1+anti-miR-NC组比较，si-lncRNA FBXL19-AS1+anti-miR-194-5p组的迁移细胞数增多( P<0.05)。 结论:下调lncRNA FBXL19-AS1可通过调节miR-194-5p抑制膀胱癌细胞的增殖及转移。

As the most common cancer and one of the leading causes of cancer-associated mortality,breast cancer continues to need more key molecules to regulate its progression.F-box and leucine-rich repeat protein 19 antisense RNA 1 (known as FBXL19-AS1) is a long non-coding RNA (IncRNA) which has been reported as an oncogene in several types of human cancers.However,the specific downstream targets of FBXL19-AS1 remain unknown.In this study,we set out to find more reliable downstream molecules of FBXL19-AS1 in breast cancer.FBXL19-AS1 was expressed at a high level in breast cancer cells.Loss-of-function experiments revealed that silencing FBXL19-AS1 could impair cell proliferation and induce cell apoptosis in breast cancer.In addition,the location of FBXL19-AS1 in the cytoplasm was detected by fluorescent in situ hybridization assay,while FBXL19-AS1 regulated the expression of Forkhead box M1 (FOXM 1) by directly absorbing miR-876-5p.Through rescue assays,it was observed that FOXM1 overexpression recovered the inhibited tumor growth caused by FBXL19-AS1 downregulation.We affirmed the function of FBXL19-AS1 in breast cancer and described the mechanism of the FBXL19-AS1/miR-876-5p/FOXM1 axis.The current work presents the molecular mechanism which underlies FBXL19-AS1 in breast cancer and suggests a comprehensive,feasible FBXL19-AS1-mediated therapeutic approach for treating breast cancer.

探讨槐角黄酮对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响并分析其对长链非编码RNA FBXL19-AS1(LncRNA FBXL19-AS1)/微小RNA-342-3p (miR-342-3p)通路的调控机制.采用甲基噻唑基四唑(MTT)法与平板克隆试验检测不同质量浓度(1,5,10 mg·mL-1)的槐角黄酮对肝癌Huh7细胞增殖能力的影响;Transwell小室试验检测槐角黄酮对Huh7细胞迁移及侵袭能力的影响;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测槐角黄酮对Huh7细胞中FBXL19-AS1和miR-342-3p表达水平的影响;双荧光素酶报告试验检测FBXL19-AS1是否靶向miR-342-3p;采用上述方法检测抑制FBXL19-AS1表达或FBXL19-AS1过表达后对Huh7细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响;明胶酶谱检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的活性;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测细胞周期蛋白1(cyclinD1),p21,MMP-2,MMP-9蛋白表达量.槐角黄酮可明显抑制Huh7细胞增殖、迁移及侵袭(P＜0.05),促进p21蛋白表达(P＜0.05),抑制cyclinD1,MMP-2,MMP-9蛋白表达(P＜0.05),并可降低MMP-2和MMP-9活性(P＜0.05);槐角黄酮处理后Huh7细胞中FBXL19-AS1的表达水平显著降低(P＜0.05),miR-342-3p的表达水平显著升高(P＜0.05);双荧光素酶报告试验结果证实FBXL19-AS1靶向抑制miR-342-3p的表达;抑制FBXL19-AS1表达后细胞增殖抑制率显著升高(P＜0.05),细胞克隆形成数显著减少(P＜0.05),迁移细胞数与侵袭细胞数显著减少(P＜0.05),cyclinD1,MMP-2,MMP-9蛋白表达水平显著降低(P＜0.05),MMP-2和MMP-9活性显著降低(P＜0.05),p21蛋白表达水平显著升高(P＜0.05);FBXL19-AS1过表达可逆转槐角黄酮对Huh7细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用.槐角黄酮通过调控LncRNA FBXL19-AS1/miR-342-3p通路抑制肝癌细胞增殖、迁移及侵袭.

目的 探究长非编码RNA F-box和富含亮氨酸的重复蛋白19反义RNA 1(lnc RNA FBXL19-AS1)在急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)THP-1细胞中的作用和机制.方法 将THP-1细胞随机分为pc-NC组、pc-FBXL19-AS1组以及pc-FBXL19-AS1+miR-339-3p mimic组.pc-NC组转染pcDNA3.0-NC,pc-FBXL19-AS1组转染FBXL19-AS1过表达质粒,pc-FBXL19-AS1+miR-339-3p mimic组共转染FBXL19-AS1过表达质粒以及miR-339-3p模拟物.以细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测THP-1细胞增殖能力,以Transwell实验检测THP-1细胞侵袭能力,以蛋白质印迹法检测SKI原癌基因(SKI)表达.结果 72 h时,pc-NC组和pc-FBXL19-AS1组光密度分别为0.60±0.05和0.78±0.07;pc-NC组和pc-FBXL19-AS1组的侵袭细胞数分别为75.00±6.38和120.67±9.18;pc-NC组、pc-FBXL19-AS1组和pc-FBXL19-AS1+miR-339-3p mimic组中SKI蛋白表达水平分别为1.03±0.10,2.08±0.21和1.68±0.11;以上数据,pc-NC组和pc-FBXL19-AS1组相比,pc-FBXL19-AS1+miR-339-3p mimic组与pc-FBXL19-AS1组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05).此外,双荧光素酶报告基因实验表明FBXL19-AS1可直接靶向miR-339-3p.结论 FBXL19-AS1可促进THP-1细胞的增殖与侵袭,FBXL19-AS1可靶向miR-339-3p上调SKI的表达.

长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类长度超过200个核苷酸且不具备编码蛋白能力的非编码RNA,并已成为癌症研究分子领域的重要组成部分.F-box富含亮氨酸重复蛋白 19 反义 RNA1(F-box and leucine-rich repeat protein 19 antisense RNA 1,FBXL19-AS1)作为一种长链非编码RNA,已被发现在肝细胞癌、肺癌和结肠癌等多种人类恶性肿瘤中起着重要作用,其在多种肿瘤组织及血清中呈现异常表达,并能够通过不同机制影响肿瘤细胞的增殖、侵袭转移、抗凋亡、血管生成和上皮间质转化等恶性生物学行为.全文对FBXL19-AS1在肿瘤中的表达、作用及分子调控机制进行综述.

目的 明确F-box富含亮氨酸的重复蛋白19反义RNA 1(F-box and leucine rich repeat protein 19 antisense RNA 1,FBXL19-AS1)与微小RNA-223(microRNA-223,miR-223)对宫颈癌生物学行为的影响,并探讨FBXL19-AS1是否对miR-223具有调节作用.方法 利用实时荧光定量聚合酶链反应检测FBXL19-AS1与miR-223在44例宫颈癌样本与细胞系的表达.利用荧光原位杂交技术检测FBXL19-AS1的定位.利用寡核苷酸片段干扰FBXL19-AS1与过表达miR-223.应用CCK-8法检测细胞增殖能力.细胞划痕实验检测细胞迁移能力.Transwell实验检测细胞侵袭能力.蛋白质印迹法检测各蛋白的表达量.应用荧光素酶报告基因实验检测FBXL19-AS1对miR-223的调节作用.结果 与癌旁组织及End1/E6E7细胞相比,癌组织及HeLa细胞FBXL19-AS1表达量上调而miR-223表达量下调,二者呈负相关(均P<0.05).FBXL19-AS1定位于细胞质.FBXL19-AS1表达与肿瘤大小、淋巴结转移、宫颈侵袭深度以及FIGO分期相关(均P<0.05).干扰FBXL19-AS1显著降低HeLa细胞增殖、迁移和侵袭能力.过表达miR-223显著降低He-La细胞增殖,迁移和侵袭能力.FBXL19-AS1通过海绵吸附方式下调miR-223表达.干扰miR-223部分逆转干扰FBXL19-AS1对HeLa细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响.结论 FBXL19-AS1通过下调miR-223表达增加宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力.