目的:探讨长链非编码RNA (lncRNA) FBXL19-AS1对胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响，明确lncRNA FBXL19-AS1与微小RNA-339-3p(miR-339-3p)的靶向关系。方法:收集2017年1月至2019至8月间烟台市烟台山医院73例行手术切除且经病理确诊的胰腺癌患者的癌组织及匹配的癌旁正常胰腺组织，体外培养正常胰腺上皮细胞(hTERT-HPNE)和3株胰腺癌细胞(Capan-1、SW1990、PaTu8988)，采用实时荧光定量PCR法检测胰腺癌组织和各株细胞lncRNA FBXL19-AS1和miR-339-3p表达。将胰腺癌Capan-1细胞分为NC组(正常对照组)、si-NC组(转染无意义阴性序列)、si-FBXL19-AS1组(转染FBXL19-AS1小干扰RNA)，miR-NC组(转染空质粒对照)、miR-339-3p组(转染miR-339-3p过表达慢病毒载体)，si-FBXL19-AS1+anti-miR-339-3p NC组(共转染FBXL19-AS1siRNA和miR-339-3p抑制剂阴性对照序列)、si-FBXL19-AS1+anti-miR-339-3p组(共转染FBXL19-AS1siRNA和miR-339-3p抑制剂)。采用CCK-8法检测各组细胞增殖活性，采用Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力，采用蛋白质免疫印迹法检测细胞cyclinD1、基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9蛋白表达。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因实验分析lncRNA FBXL19-AS1和miR-339-3p的靶向关系。结果:胰腺癌组织lncRNA FBXL19-AS1表达量显著高于癌旁正常胰腺组织(2.96±0.21比1.00±0.13， P<0.05)，miR-339-3p表达量显著低于癌旁正常胰腺组织(0.37±0.05比1.00±0.11， P<0.05)。Capan-1、SW1990及PaTu8988细胞lncRNA FBXL19-AS1表达量分别为2.43±0.18、1.97±0.13和1.73±0.14，均显著高于hTERT-HPNE细胞的1.00±0.07，miR-339-3p表达量分别为0.42±0.03、0.54±0.03和0.57±0.04，均显著低于hTERT-HPNE细胞的1.00±0.05。其中以Capan-1细胞的lncRNA FBXL 19-AS1表达量最高，miR-339-3p表达量最低。与si-NC组比较，si-FBXL19-AS1组Capan-1细胞450nm处吸光度值( A450值)、迁移细胞数、穿膜细胞数显著下降[0.47±0.03比0.94±0.06、(81.00±7.41)个比(187.00±16.13)个、(67.00±5.41)个比(141.00±9.24)个]，cyclinD1、MMP2和MMP9蛋白表达量显著降低(0.44±0.03比0.83±0.05、0.48±0.03比0.92±0.07、0.38±0.02比0.73±0.05)。与miR-NC组比较，miR-339-3p组Capan-1细胞 A450值、迁移细胞数、穿膜细胞数显著下降[0.54±0.04比0.94±0.05、(98.00±6.53)个比(193.00±10.02)个、(83.00±6.58)个比(146.00±7.11)个]，cyclinD1、MMP2、MMP9蛋白表达量显著降低(0.47±0.03比0.81±0.07、0.43±0.03比0.94±0.06、0.32±0.02比0.71±0.06)。与si-FBXL19-AS1+anti-miR-NC组比较，si-FBXL19-AS1+anti-miR-339-3p组细胞 A450值、迁移细胞数、穿膜细胞数显著上升[0.96±0.07比0.48±0.03、(204.00±11.25)个比(83.00±5.11)个、(157.00±8.76)个比(64.00±4.12)个]，cyclinD1、MMP2和MMP9蛋白表达量显著升高(0.84±0.06比0.42±0.03、0.96±0.08比0.47±0.08、0.74±0.06比0.37±0.02)。上述差异均有统计学意义( P值均<0.05)。共转染野生型lncRNA FBXL19-AS1和miR-339-3p mimics组Capan-1细胞的荧光素酶活性显著低于共转染野生型lncRNA FBXL19-AS1和miR-NC组(0.47±0.04比1.00±0.10)，差异有统计学意义( P<0.05)，而共转染突变型lncRNA FBXL19-AS1和miR-339-3p mimics组与共转染突变型lncRNA FBXL19-AS1和miR-NC组Capan-1细胞的荧光素酶活性差异无统计学意义。 结论:LncRNA FBXL19-AS1在胰腺癌组织及胰腺癌Capan-1细胞株中呈高表达，敲减lncRNA FBXL19-AS1可靶向结合miR-339-3p调节胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力，促进胰腺癌的发生和发展。

目的:探讨下调lncRNA FBXL19-AS1抑制人膀胱癌细胞系T24的细胞增殖、凋亡及迁移的分子机制。方法:收集2020年3月至2020年7月本院收治的50例膀胱癌患者的癌组织及其癌旁组织标本，采用qRT-PCR检测lncRNA FBXL19-AS1、miR-194-5p表达量；体外培养人膀胱癌细胞T24，随机将其分为si-lncRNA FBXL19-AS1组、miR-194-5p组、si-lncRNA FBXL19-AS1+anti-miR-194-5p组及各自对照si-NC组、miR-NC组、si-lncRNA FBXL19-AS1+anti-miR-NC组；采用MTT法、平板克隆形成实验、流式细胞术、Transwell小室实验进行细胞增殖、克隆形成、凋亡及迁移检测；采用双荧光素酶报告实验验证lncRNA FBXL19-AS1是否靶向miR-194-5p；采用Western blot法检测Bax、Bcl-2蛋白的表达量。结果:与癌旁组织比较，lncRNA FBXL19-AS1在膀胱癌组织中的表达量升高，miR-194-5p的表达量降低(均 P<0.05)；与miR-NC组比较，miR-194-5p组细胞的荧光素酶活性减弱( P<0.05)；与si-NC组比较，si-lncRNA FBXL19-AS1组细胞的lncRNA FBXL19-AS1表达量降低，miR-194-5p的表达量升高，细胞增殖抑制率升高，细胞克隆形成数减少(均 P<0.05)；与miR-NC组比较，miR-194-5p组的miR-194-5p表达量升高，细胞增殖抑制率升高，细胞克隆形成数减少(均 P<0.05)；与si-lncRNA FBXL19-AS1+anti-miR-NC组比较，si-lncRNA FBXL19-AS1+anti-miR-194-5p组的miR-194-5p表达量降低，细胞增殖抑制率降低，细胞克隆形成数增多(均 P<0.05)。与si-NC组比较，si-lncRNA FBXL19-AS1组的细胞凋亡率、Bax、裂解的Caspase3蛋白水平均升高，Bcl-2蛋白水平降低(均 P<0.05)；与miR-NC组比较，miR-194-5p组的细胞凋亡率升高( P<0.05)，Bax、裂解的Caspase3蛋白水平均升高，Bcl-2蛋白水平均降低(均 P<0.05)；与si-lncRNA FBXL19-AS1+anti-miR-NC组比较，si-lncRNA FBXL19-AS1+anti-miR-194-5p组的细胞凋亡率、Bax、裂解的Caspase3蛋白水平均降低，Bcl-2蛋白水平升高(均 P<0.05)。与si-NC组比较，si-lncRNA FBXL19-AS1组的迁移细胞数减少( P<0.05)；与miR-NC组比较，miR-194-5p组的迁移细胞数减少( P<0.05)；与si-lncRNA FBXL19-AS1+anti-miR-NC组比较，si-lncRNA FBXL19-AS1+anti-miR-194-5p组的迁移细胞数增多( P<0.05)。 结论:下调lncRNA FBXL19-AS1可通过调节miR-194-5p抑制膀胱癌细胞的增殖及转移。

目的:探讨微小RNA(miRNA，miR)-93-5p调控胰腺癌细胞对吉西他滨敏感性及其机制。方法:将抗miR-NC(anti-miR-NC组)、抗miR-93-5p(anti-miR-93-5p组)、miR-NC(miR-NC组)、miR-93-5p(miR-93-5p组)、pcDNA-NC(pcDNA-NC组)和pcDNA-F-box富含亮氨酸重复蛋白5(FBXL5)(pcDNA-FBXL5组)转染至Capan-1胰腺癌细胞(购自中国科学院细胞库)，将anti-miR-93-5p分别与si-NC、si-FBXL5共转染至胰腺癌细胞，标记为anti-miR-93-5p＋si-NC组和anti-miR-93-5p＋si-FBXL5组。实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测mRNA表达；蛋白质印迹法(Western blot)检测蛋白表达；噻唑蓝法(MTT)检测细胞存活率；流式细胞仪检测细胞凋亡；荧光素酶报告实验检测miR-93-5p和FBXL5的靶向关系。采用 t检验或单因素方差分析比较不同组间计量资料差异。 结果:吉西他滨组Capan-1胰腺癌细胞miR-93-5p表达低于对照组(0.32±0.29比1.00±0.10， t＝6.650， P<0.05)，FBXL5基因mRNA和蛋白表达高于对照组(mRNA为3.14±0.31比1.00±0.02，蛋白为1.12±0.12比0.40±0.03， t＝19.710、17.076， P<0.05)。anti-miR-93-5p组胰腺癌细胞miR-93-5p、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、多药耐药基因相关蛋白1(MRP1)、细胞存活率和半数抑制浓度(IC 50)低于anti-miR-NC组[0.35±0.04比1.00±0.11、0.45±0.05比1.15±0.12、0.33±0.03比0.75±0.08、(52.44±5.24)%比(97.22±10.03)%、(7.29±0.73) mg/L比(22.13±2.11) mg/L， t＝16.660、16.154、14.747、12.667、19.940， P值均<0.05]，裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved-Caspase-3)和细胞凋亡率高于anti-miR-NC组(0.85±0.09比0.39±0.04、16.27±1.63比4.25±0.43， t＝14.012、21.391， P<0.05)。miR-93-5p靶向调控FBXL5基因表达。anti-miR-93-5p组胰腺癌细胞磷磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达低于anti-miR-NC组(0.25±0.03比0.75±0.08、0.38±0.04比0.89±0.09， t＝20.176、12.399， P<0.05)。anti-miR-93-5p＋si-FBXL5组胰腺癌细胞p-PI3K和p-Akt蛋白表达高于anti-miR-93-5p＋si-NC组(0.66±0.07比0.32±0.04、0.79±0.08比0.42±0.05， t＝16.433、19.128， P<0.05)。 结论:抑制miR-93-5p表达可增强胰腺癌细胞对吉西他滨的敏感性，其机制可能与miR-93-5p靶向调控FBXL5及PI3K/Akt信号通路有关。

目的:分析汉族大学新生抑郁症（MDD）发病率遗传学病因的性别差异。方法:对8 079名基线调查（2018年4—10月）时未患抑郁症的来自济宁、日照、潍坊市的汉族大学新生开展1年随访调查，同时收集4 828份全静脉血。提取DNA后，使用Sequenom Mass Array时间飞行质谱生物芯片技术进行抑郁症相关17个遗传位点基因型检测。使用logistic回归进行单因素分析，使用广义多因子降维法分析基因-基因之间的交互作用。使用世界卫生组织复合性国际诊断交谈表中文版（CIDI 3.0）筛查抑郁症。结果:汉族大学新生抑郁症1年发病率为2.23%（95% CI：1.91%~2.60%），其中，男性发病率为1.97%（95% CI：1.52%~2.56%），女性发病率为2.39%（95% CI：1.98%~2.90%），且性别差异无统计学意义（ P>0.05）。rs768705位点（邻近基因：TMEM161B）的AG型是MDD的风险因素（ OR=1.98，95% CI：1.24~2.83），rs17727765位点（邻近基因：CRYBA1）的TC型是男性MDD的风险因素（ OR=9.61，95% CI：2.04~45.30）。一个8基因座（PMFBP1、OLFM4、LHPP、ENOX1、TMEM161B、SPPL3、FBXL4和L3MBTL2）交互作用模型预测女性抑郁症的准确度为60.05%。尚未发现有效的男性抑郁症预测模型。 结论:抑郁症遗传学病因可能存在性别差异，需要进一步开展男性抑郁症遗传学病因研究。

目的 探讨受肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)调控的hsa-miR-18b-5p在前列腺癌(PCa)中的表达水平及作用,并研究对其在PCa发生发展过程中的分子机制.方法 利用生物信息学技术分析在PCa中高表达的miRNA,构建肿瘤相关成纤维细胞并与PCa细胞系共培养,验证CAFs对PCa细胞增殖和迁移的影响及对hsa-miR-18b-5p的调控作用;RT-qPCR验证20例患者癌组织及癌旁正常组织、前列腺正常上皮增生细胞及PCa各细胞系中hsa-miR-18b-5p的表达水平;通过脂质体法将阴性对照及hsa-miR-18b-5p抑制物分别转染入PCa细胞C4-2、LNCAP中,分为NC inhibitor组和hsa-miR-18b-5p inhibitor组;采用细胞集落形成、CCK-8实验、划痕愈合、Transwell、IC50实验、流式细胞术分别检测C4-2、LNCAP细胞增殖、迁移、侵袭、耐药能力、凋亡和周期;建立PCa裸鼠移植瘤模型,定期测量移植瘤的质量和体积,Kaplan-Meier生存曲线分析裸鼠生存情况;利用靶基因预测分析网站(Targetscan、Mirtarbase、miRDB、miRDIP)预测has-miR-18b-5p的靶基因,并通过双荧光素酶报告基因分析验证hsa-miR-18b-5p与靶基因的靶向关系,RT-qPCR、Western blotting检测各组细胞靶基因的表达水平.结果 生物信息学分析结果显示,在PCa中高表达的miRNA有17个,结合差异表达程度以及相关文献筛选出拟研究的基因:miR-148a、miR-17、miR-18b-5p、miR-770、miR-297-3p.CAFs与PCa细胞系共培养后hsa-miR-18b-5p的表达水平升高(P<0.01),且促进PCa细胞的增殖与迁移(P<0.01),敲除has-miR-18b-5p可抵消CAFs对PCa细胞增殖及迁移的影响,确定has-miR-18b-5p为研究基因.与正常前列腺上皮细胞或肿瘤旁组织相比,PCa细胞或肿瘤组织中hsa-miR-18b-5p的表达升高(P<0.05);敲除hsa-miR-18b-5p可抑制C4-2、LNCAP细胞的增殖、迁移、侵袭以及耐药(P<0.05);敲除hsa-miR-18b-5p可抑制裸鼠移植瘤质量和体积的增长,增加裸鼠的生存时间(P<0.05).靶基因预测分析网站显示,FBXL3是hsa-miR-18b-5p的一个潜在作用靶点,双荧光素酶报告基因证实has-miR-18b-5p与FBXL3基因间存在结合位点,且敲除hsa-miR-18b-5p可增加C4-2、LNCAP细胞中FBXL3的蛋白表达(P<0.05).结论 CAFs上调前列腺癌细胞hsa-miR-18b-5p的表达水平,后者可能通过靶向调控FBXL3基因的表达促进PCa细胞的增殖和转移.

目的 探究益气活血解毒方治疗晚期卵巢癌有效可能的单核苷酸多态性(SNPs)位点及基因靶点.方法 选取2015年3月至2016年12月就诊于中国中医科学院广安门医院的气虚血瘀型晚期卵巢癌患者300例.服用益气活血解毒方半年后抽取外周血,按照中位无进展生存期分为2组,通过2组的对比筛选出显著差异的SNPs位点及可能的对中药敏感的基因靶点.结果 筛选出差异的SNPs位点共计242 901个,其中存在显著差异的变异位点1 773个.筛选出信使RNA的差异表达基因158个,其中上调基因58个,下调基因100个.将筛选出的SNPs位点进行基因定位并与差异表达基因取交集,得到与中药干预疗效差异有关的基因为:CD40、AFF3、EIF2AK3、WNK1、FYB、FBXL13、PLXNC1、BCL11A、IFI16、GNG7.结论 中药治疗晚期卵巢癌的有效性可能与SNPs位点及基因靶点有关.

目的 探讨周围型非小细胞肺癌(NSCLC)的超声造影定量参数检测及其与肿瘤恶性程度的相关关系.方法 选取2014年1月至2017年10月间商洛市商南县医院收治的行手术切除治疗的125例高度疑似周围型NSCLC患者,根据手术病理结果分组,周围型NSCLC组(90例),不典型增生组(24例),良性组(11例).比较三组患者术前超声造影参数峰值强度、强度指数水平及术中所得病灶组织中NSCLC增殖、侵袭相关基因表达量的差异,采用Pearson检验评估周围型NSCLC患者的峰值强度和强度指数水平与肿瘤恶性程度的相关性.结果 周围型NSCLC组、不典型增生组的峰值强度和强度指数水平高于良性组;肺部病灶组织中增殖相关基因FBXL20 mRNA的表达量低于良性组,PGRN、Sgo1和TIGAR mRNA的表达量高于良性组;肺部病灶组织中侵袭相关基因CTEN、CTTN和Nupr1 mRNA的表达量高于良性组,PIK3CA和WWC3 mRNA的表达量低于良性组,其中周围型NSCLC组上述指标水平变化均较不典型增生组显著,差异均有统计学意义(均P＜0.05).周围型NSCLC患者的超声造影定量参数峰值强度和强度指数水平与增殖相关基因FBXL20 mRNA的表达量呈负相关,与PGRN、Sgo1和TIGAR mRNA的表达量呈正相关;与侵袭相关基因CTEN、CTTN和Nupr1 mRNA的表达量呈正相关,与PIK3CA和WWC3 mRNA的表达量呈负相关,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 周围型NSCLC存在超声造影定量参数水平的异常改变,具体水平与肿瘤恶性基因表达量直接相关,是客观反映肿瘤恶性程度的可靠手段之一.

目的 探讨肝细胞癌(HCC)组织中环指蛋白216( RNF216)的表达及临床意义.方法 从肿瘤基因表达图谱(TCGA)数据集中下载HCC患者的基因表达和临床特征数据,分析RNF216表达与HCC临床病理特征和预后的关系;进一步采用Kaplan?Meier Plottor在线数据库对HCC组织RNF216 mRNA表达与预后的关系进行大数据分析.应用基因本体(GO)分析联合京都基因和基因组百科全书(KEGG)功能富集分析筛选RNF216可能参与并主要影响的生物学功能或通路.结果

目的 探讨FBXL20在胃癌细胞中的表达及其在胃癌细胞增殖、迁移和侵袭中的作用和机制.方法 Western blot检测人胃癌细胞系(BGC-823、AGS、MKN-45)及胃黏膜上皮细胞系(GES-1)中FBXL20蛋白的表达.靶向FXBL20 shRNA慢病毒载体抑制AGS细胞中FBXL20表达,CCK-8实验检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力.Western blot检测抑制FBXL20后Wnt通路中相关蛋白水平变化.结果 与胃黏膜上皮细胞系相比,胃癌细胞系中FBXL20的表达明显增加(P＜0.05).与对照组相比,抑制FBXL20的AGS细胞在增殖、迁移和侵袭能力方面明显降低(P＜0.05).抑制FBXL20能降低GSK-3β的泛素化降解,导致Wnt通路中GSK-3β、p-GSK-3βTyr216的表达增加,而β-catenin、p-β-catenin、Cyclin D1及E-cadherin的表达降低.结论 FBXL20可能通过调控Wnt通路促进胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭.

探讨槐角黄酮对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响并分析其对长链非编码RNA FBXL19-AS1(LncRNA FBXL19-AS1)/微小RNA-342-3p (miR-342-3p)通路的调控机制.采用甲基噻唑基四唑(MTT)法与平板克隆试验检测不同质量浓度(1,5,10 mg·mL-1)的槐角黄酮对肝癌Huh7细胞增殖能力的影响;Transwell小室试验检测槐角黄酮对Huh7细胞迁移及侵袭能力的影响;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测槐角黄酮对Huh7细胞中FBXL19-AS1和miR-342-3p表达水平的影响;双荧光素酶报告试验检测FBXL19-AS1是否靶向miR-342-3p;采用上述方法检测抑制FBXL19-AS1表达或FBXL19-AS1过表达后对Huh7细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响;明胶酶谱检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的活性;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测细胞周期蛋白1(cyclinD1),p21,MMP-2,MMP-9蛋白表达量.槐角黄酮可明显抑制Huh7细胞增殖、迁移及侵袭(P＜0.05),促进p21蛋白表达(P＜0.05),抑制cyclinD1,MMP-2,MMP-9蛋白表达(P＜0.05),并可降低MMP-2和MMP-9活性(P＜0.05);槐角黄酮处理后Huh7细胞中FBXL19-AS1的表达水平显著降低(P＜0.05),miR-342-3p的表达水平显著升高(P＜0.05);双荧光素酶报告试验结果证实FBXL19-AS1靶向抑制miR-342-3p的表达;抑制FBXL19-AS1表达后细胞增殖抑制率显著升高(P＜0.05),细胞克隆形成数显著减少(P＜0.05),迁移细胞数与侵袭细胞数显著减少(P＜0.05),cyclinD1,MMP-2,MMP-9蛋白表达水平显著降低(P＜0.05),MMP-2和MMP-9活性显著降低(P＜0.05),p21蛋白表达水平显著升高(P＜0.05);FBXL19-AS1过表达可逆转槐角黄酮对Huh7细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用.槐角黄酮通过调控LncRNA FBXL19-AS1/miR-342-3p通路抑制肝癌细胞增殖、迁移及侵袭.