目的:分析克拉玛依市女性HPV感染率及人群分布特点，为本地区宫颈癌预防及人群筛查提供参考依据。方法:2010年1月至2011年11月在克拉玛依市对21~59岁妇女，采用液基细胞学联合HC2-HPV检测初筛宫颈癌及癌前病变。任一结果检测阳性者采用导流杂交基因芯片技术进行HPV分型检测，细胞学和／或高危HPV阳性者再转诊做阴道镜和组织活检。结果:4 536名研究对象HPV总感染率为21.52％，汉族和少数民族人群的感染率分别为17.63%和27.88%（ x2=42.081， P<0.01）。HPV感染率与年龄、族别密切相关，少数民族人群显著高于同年龄组汉族人群（ P<0.05）。汉族女性感染高峰为24~30岁和41~45岁年龄组；随着年龄的增长，HR-HPV的感染率呈下降趋势。少数民族女性感染高峰年龄分别为36~40岁和51~59岁年龄组，随着年龄的增高，HR-HPV的感染率呈上升趋势。HSIL与宫颈癌中，汉族与少数民族人群的主导亚型为HPVl6、58、52、18、53，其中少数民族女性HPVl8、52型显著高于汉族人群（ x2=5.98， P=0.04； x2=11.64， P<0.01)。少数民族人群中宫颈疾病患者HPV多重感染率27.04%（43/159）显著高于汉族6.97%（27/387）（ x2=13.84， P<0.01）。 结论:HPV感染率随年龄变化呈双峰状态且存在民族特异性，HPVl6、58、52、18、53为本地区少数民族及汉族女性中常见的基因型别，少数民族女性宫颈病变标本的多重感染率显著高于汉族。

目的:探讨锌指蛋白(ZNF)772甲基化及高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)检测在意义不明的非典型鳞状细胞(ASCUS)病人分流中的意义.方法:选取初筛ASCUS病人195例,均接受HC2-HPV-DNA检测及ZNF772基因DNA甲基化检测;比较宫颈上皮内瘤样变(CIN) Ⅱ及以上与CIN Ⅱ以下、CIN Ⅲ及以上及CIN Ⅲ以下病人ZNF772基因位点甲基化水平的差异,并评估ZNF772甲基化水平及HR-HPV对ASCUS病人CIN Ⅱ及以上、CIN Ⅲ及以上的分流价值.结果:病理学检查显示,195例ASCUS病人中炎症80例(41.03％)、CIN Ⅰ64例(32.82％)、CIN Ⅱ29例(14.87％)、CIN Ⅲ/CIS/AIS 18例(9.23％)、SCC/AC 4例(2.05％).HR-HPV(HC2)阳性141例(72.31％)、HR-HPV(HC2)阴性54例(27.69％);CIN Ⅱ及以上病人HR-HPV(HC2)阳性检出率高于CIN Ⅱ以下(P<0.05);CIN Ⅲ及以上病人HR-HPV(HC2)阳性检出率高于CIN Ⅲ以下(P<0.05).CIN Ⅱ及以上、CIN Ⅲ及以上病人ZNF772基因-420、-422位点甲基化水平分别高于CIN Ⅱ以下、CIN Ⅲ以下病人(P<0.05).ZNF772基因-420、-422位点甲基化水平及HR-HPV诊断CIN Ⅱ及以上的AUC(95％CI)分别为0.867(0.811～0.911)、0.806(0.743～0.859)、0.777(0.712～0.834),诊断CIN Ⅲ及以上的AUC(95％CI)分别为0.891(0.838～0.931)、0.868(0.813～0.912)、0.780(0.716～0.836).ZNF772基因-420位点甲基化水平诊断CIN Ⅱ及以上、CIN Ⅲ及以上的AUC面积最大.结论:相较于HC2-HPV-DNA检测,ZNF772甲基化检测更能准确地识别ASCUS中CIN Ⅱ及以上、CIN Ⅲ及以上病变病人,有望成为分流ASCUS的有效替代手段.

目的 在细胞学诊断为未明确诊断意义的不典型鳞状上皮细胞(ASCUS)、低级别鳞状上皮内病变(LSIL)、不除外高度病变的不典型鳞状上皮细胞(ASC-H)的患者中,评价免疫细胞化学p16/细胞增殖相关核抗原(Ki-67)双染色法对其中高级别子宫颈病变[包括子宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅱ、CINⅢ]的筛查效能,并分析p16/Ki-67双染色法对于ASCUS、LSIL、ASC-H患者分流的意义.方法 收集2015年10月-2016年3月在北京大学第一医院妇科门诊就诊的液基薄层细胞学检查(TCT)结果为ASCUS、LSIL、ASC-H的患者共251例,对其子宫颈脱落细胞分别行p16/Ki-67双染色法检测、高危型HPV(HR-HPV)检测[采用第2代杂交捕获技术(HC-Ⅱ)检测HR-HPV DNA],并行阴道镜活检组织的病理检查,以组织学病理诊断为“金标准”,采用敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和受试者工作特征(ROC)曲线下面积比较p16/Ki-67双染色法和HR-HPV检测的筛查效能.结果 (1)251例患者的子宫颈脱落细胞中,p16/Ki-67双染色的总阳性率为21.1％(53/251).其中,细胞学诊断为ASCUS患者的子宫颈脱落细胞中p16/Ki-67双染色的阳性率为13.9％ (15/108),LSIL患者为21.6％(22/102),ASC-H患者为39.0％(16/41),3者比较,差异有统计学意义(x2=78.516,P＜0.05);阴道镜活检后病理诊断为低级别子宫颈病变(包括正常子宫颈、CINⅠ)患者的子宫颈脱落细胞中p16/Ki-67双染色的阳性率为13.0％(28/215),高级别子宫颈病变患者为69.4％(25/36),两者比较,差异有统计学意义(x2=7.932,P＜0.05).(2)以阴道镜活检后的病理诊断为“金标准”,在细胞学诊断为ASCUS、LSIL、ASC-H的患者中,p16/Ki-67双染色法筛查高级别子宫颈病变的特异度(分别为89.8％、83.3％、88.9％)及阳性预测值(分别为33.3％ 、31.8％、81.3％)均明显高于HR-HPV检测(特异度分别为71.4％、15.6％、40.7％,阳性预测值分别为26.3％、12.6％、38.5％;P均＜0.05),其受试者工作特征(ROC)曲线下面积(分别为0.799、0.708、0.909)也均明显大于HR-HPV检测(分别为0.696、0.531、0.561;P均＜0.05).结论 对于细胞学诊断为ASCUS、LSIL、ASC-H的患者,p16/Ki-67双染色法可作为筛查其高级别子宫颈病变的有效检测手段,其筛查效能明显优于HR-HPV检测.

目的 通过分析宫颈癌筛查的结果,探讨宫颈癌筛查的最佳方法,为临床工作提供依据.方法 回顾性分析2015年1月至2016年12月本院收治的224例患者,所有患者均接受薄层液基细胞学检查(thinprep cytologic test,TCT)、高危型乳头瘤状病毒(high-risk human papilloma virus,HR-HPV)基因检测、阴道镜检查及组织活检,以组织病理学为金标准,高度鳞状上皮内病变(high-grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)和癌作为阳性结果,低度鳞状上皮内病变(low-grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)和正常作为阴性结果.HR-HPV基因检测使用两种方法:HPV DNA 杂交捕获(hybrid capture Ⅱ, HPV DNA HC-2)和Cervista高危型HPV基因检测(A9、A7、A5/A6).TCT结果正常而A7和A9阳性者行阴道镜检查.HPV DNA HC-2光量读数/阴性测定值(light reading/negative measurement value,RLU/CO)大于1为阳性.结果 经组织病理学确认,TCT结果为不典型鳞状细胞病变(atypical squamous cells of undetermined significance,ASCUS)、LSIL、HSIL患者的阳性率分别为10.3%、12.7%、70.8%;TCT结果为ASCUS、LSIL、HSIL且合并HPV阳性患者的阳性率分别为17.2%、19.6%、80.0%,诊断率升高;TCT结果为无上皮内病变或恶性改变(no intraepithelial lesion and malignant cells,NILM)且HR-HPV A7和A9阳性患者的阳性率为15.0%.TCT筛查HSIL的灵敏度为40.5%,特异度为96.2%;Cervista HPV HR筛查HSIL的灵敏度为88.1%,特异度为43.4%;TCT联合 Cervista HPV HR筛查HSIL的灵敏度为97.8%,特异度为61.5%.HPV DNA HC-2值在HSIL和LSIL患者中差异无显著性(P>0.05).结论 宫颈上皮病变的程度与病毒滴度无关;单独的HPV HR检查特异性差,宫颈细胞学结合HR-HPV分型能提高诊断率,尤其是TCT提示LSIL、意义不明或结果正常但临床症状明显时;TCT联合Cervista HPV HR筛查方法可在临床上推广.

目的 采用匹多莫德配伍利巴韦林片及重组人干扰素α2b栓三联药物治疗宫颈鳞状上皮内瘤变(CIN)患者宫颈高频电波刀电圈切除术(LEEP)后高危型人乳头状瘤病毒(HR-HPV)持续感染的临床效果.方法 选取2014年6月至2015年12月在安徽省妇幼保健院宫颈疾病中心就诊、经宫颈疾病三阶梯筛查联合第二代杂交捕获实验(HC-2)证实CIN病变合并HR-HPV感染,行LEEP术、术后1年仍为HR-HPV持续感染者,共70例患者,按随机数字表法分为对照组与试验组,每组35例.试验组采用匹多莫德配伍利巴韦林片及重组人干扰素α2b栓三联药物治疗,对照组仅使用重组人干扰素α2b栓治疗.两组患者均在停药3个月后进行液基细胞学检测(TCT)、HC-2检查.结果 药物治疗3个月后,两组患者TCT结果差异有统计学意义(χ2=8.403,P=0.038);对照组复查HR-HPV阳性率高于试验组,差异有统计学意义(χ2=4.629,P=0.031);对照组、试验组患者病毒DNA载量分别为(19.14 ±62.07)和(0.96 ±2.67),两组差异无统计学意义(t=9.056,P=0.004).结论 匹多莫德配伍利巴韦林片及重组人干扰素α2b栓三联药物治疗能有效降低HR-HPV持续感染,值得推广应用.

目的 研究不同亚型人乳头状瘤病毒(HPV)感染合并宫颈细胞学异常状态者宫颈鳞状上皮内瘤样病变2级及以上(CIN 2+)或3级及以上(CIN3+)的患病情况.方法 2008—2010年在深圳和周边地区开展的两项以人群为基础的宫颈癌筛查横断面研究,共12097名25~59岁的妇女参加.通过液基细胞学联合多种高危型人乳头瘤病毒(hrHPV)检测方法进行筛查,对细胞学结果为意义不明的不典型鳞状上皮细胞(ASC-US)及以上者或任一种HPV检测结果阳性者行阴道镜下宫颈组织活检.最终10805名具有完整第二代杂交捕获技术(HC2)、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI)HPV分型检测结果及细胞学、病理结果的妇女纳入分析.结果 CIN2+和CIN3+中,HPV感染率前6位的亚型为HPV16、HPV52、HPV58、HPV33、HPV31和HPV18.CIN2+和CIN3+中细胞学构成比最高的为高度鳞状上皮内病变(HSIL).感染HPV16、HPV31、HPV58、HPV33、HPV18、HPV52者CIN2+的发生率分别为41.3%、31.5%、30.6%、28.7%、28.2%和17.7%,CIN3+的发生率分别为33.5%、20.5%、19.4%、15.7%、19.2%和8.3%;无宫颈上皮病变或恶性细胞(NILM)、ASC-US、低度鳞状上皮内病变(LSIL)、非典型鳞状上皮-不除外高度病变(ASC-H)、HSIL、非典型腺上皮细胞(AGC)人群中,其CIN2+的发生率分别为0.4%、6.9%、11.1%、36.4%、82.0%和16.7%;CIN3+的发生率分别为0.2%、3.1%、4.2%、22.7%、64.8%和0.0%.NILM合并HPV16、HPV18、HPV31、HPV334种亚型感染人群CIN2+的发生率分别为12.6%、13.3%、15.8%和11.5%;CIN3+的发生率分别为10.3%、11.1%、7.9%和7.7%.ASC-US合并各hrHPV感染的人群中,其CIN2+发病率前6位为HPV31(35.7%)、HPV33 (26.9%)、HPV16(26.5%)、HPV58(22.4%)、HPV52(18.6%)和HPV68(15.4%);CIN3+发病率前6位为HPV16(20.4%)、HPV31(14.3%)、HPV33(11.5%)、HPV58(8.6%)、HPV68(7.7%)和 HPV52 (5.8%).结论 细胞学联合HPV 亚型分析能更有效地评估CIN2+和CIN3+的患病风险;HPV31、HPV33、HPV52和HPV58的流行率高,在合并NILM与ASC-US状态时,患CIN2+和CIN3+的风险大,或有必要行阴道镜检查.

目的 探讨单一或多重感染状态下高危型人乳头状瘤病毒(HR-HPV)DNA病毒载量与宫颈病变之间的关系.方法 在山西省、河南省和新疆维吾尔自治区共招募2 653名参加宫颈癌筛查的女性,采用高危型第二代杂交捕获(HR HC2)技术检测所有参与者的宫颈脱落细胞标本,按照TBS分类系统进行细胞学诊断.571例宫颈标本进行PCR扩增+线性反向杂交HPV分型检测,以确定HPV型别及单一或多重感染;以HR HC2半定量检测结果反映HR-HPV的病毒载量.根据国际人乳头状瘤病毒参照中心中的HPV生物学分类,将HR HC2检测范围内的13种HR-HPV分成不同亚组进行分析.结果 正常宫颈组(436例)、宫颈上皮内瘤变1级(CIN1)组(88例)和宫颈上皮内瘤变2级及以上(CIN2+)组(47例)研究对象的HR-HPV阳性率分别为29.82％、85.23％和100％.随着宫颈病变级别的增高,HPV单一感染率及其病毒载量均呈升高趋势(P＜0.001).单一感染中,α-9 HR-HPV阳性率及其病毒载量均随宫颈病变的增高而升高(P＜0.05);α-7 HR-HPV的病毒载量在CIN1组较高,但各组病变之间的差异无统计学意义(P＝0.130).多重感染者的中位病毒载量总体趋势为CIN1组(559.13 pg/ml)高于正常组(37.73 pg/ml,P＝0.025)和CIN2+组(332.91 pg/ml,P＝0.790),而CIN1组单一感染者的中位病毒载量(167.93 pg/ml)低于多重感染(559.73 pg/ml,P＝0.044);α-9 HR-HPV多重感染占所有多重感染的80.56％,其病毒载量随病变增高而升高,但各病变级别的病毒载量分布差异无统计学意义(P＞0.05);其次为α-7 HR-HPV多重感染(66.67％),其病毒载量在CIN1组中较高,但与CIN2+组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 不同种系HR-HPV单一或多重感染者的病毒载量随宫颈病变级别的增高呈现出不同的趋势,宫颈高级别病变中以α-9 HR-HPV高病毒载量感染为主,低级别病变中HR-HPV多重感染病毒载量高于单一感染病毒载量.

为了评价人乳头状瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)恒温DNA扩增检测技术用于高危型HPV检测和宫颈癌早期及癌前病变筛查的准确性和可行性.本研究于2016年6月至8月,在我国内蒙古地区招募2 774例30～64岁有性生活史的妇女进行宫颈癌筛查;采用薄层液基细胞学技术完成细胞学诊断.采用恒温DNA扩增HPV检测技术(Isomega)和第二代杂交捕获技术(Hybrid Capture 2,HC2)平行检测宫颈标本;对于Isomega检测为HPV16/HPV18阳性的标本和两种方法检测不一致的标本,使用线性探针法(INNO-LiPA)进行分型验证.以病理诊断为金标准,评价Isomega用于筛查宫颈上皮内瘤变(Cervical Intraepithelial Neoplasia,CIN)2级及以上患者的灵敏度和特异度.结果表明,Isomega与HC2检测高危型HPV的总一致率为92.72％ (Kappa=0.74),阳性一致率为86.78％,阴性一致率为93.77％;以INNO-LiPA分型结果为标准,Isomega检出HPV16和HPV18的准确率分别为96.97％和86.11％.以病理诊断为金标准,Isomega筛查CIN2+的灵敏度和特异度分别为87.76％和82.94％.Isomega能准确检测HPV16、HPV18和其他高危型别HPV,有较高的筛查灵敏度和特异度.

高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV) E6癌蛋白在宫颈癌发生发展中起重要作用.本研究旨在评估一种新型、快速、低成本的HPV E6癌蛋白检测技术(OncoE6TM,AVC,Sunnyvale,CA,USA)在棉签和液基细胞学(Liquid-based cytology,ThinPrep(R))两种不同采样和储存介质宫颈标本中对HPV E6癌蛋白检测结果的一致性和对宫颈上皮内瘤变2/3(CIN2/3)及以上病变检出准确性.依托于1999年在山西省建立的宫颈癌筛查队列,对2014年随访中HPV DNA检测(第二代杂交捕获技术,HC2)阳性妇女的棉签和ThinPrep(R)标本均进行E6癌蛋白检测,并用线性反向探针杂交技术(LiPA,Innogenetics)进行HPV基因分型.在294例HPV阳性妇女的棉签和ThinPrep标本中,E6癌蛋白阳性率相当(11.2％ vs 7.8％,P=0.16);两者一致率为96.6％、Kappa值0.8.E6癌蛋白检测和LiPA基因分型对HPV16和HPV18型别的检测结果在两种标本中的一致性均较高(＞90％).E6癌蛋白检测对CIN2+的检出效果如下:在棉签标本中,其灵敏度50.0％、特异度93.9％、阳性预测值51.6％;而ThinPrep标本中,灵敏度46.9％、特异度97.1％、阳性预测值68.2％;两者ROC曲线下面积同样为0.72;各项指标间无统计学差异(P＞0.05).同样,对CIN3+的检出效果也相当,各指标间无统计学差异(P＞0.05).E6蛋白检测在不同检测条件下可重复性较好,且两种标本有其不同的优势,应当根据不同地区卫生资源,适当选择标本类型,进行宫颈癌筛查.

目的 比较常规细胞学、高危型HPV-DNA病毒测定及DNA倍体分析方法在诊断宫颈癌及癌前病变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)的优缺点.方法 374名妇女做宫颈活检前进行了宫颈细胞常规细胞学诊断、高危型HPV-DNA病毒测定和DNA倍体分析.用宫颈刷刷取宫颈细胞,每个样本制成二张液基薄层玻片,一张经巴氏染色用于常规细胞学诊断(TBS),另一张经Feulgen染色做DNA倍体分析,剩余样本做HC2-HPV-DNA检测.宫颈活检样本进行组织病理诊断.结果 374例宫颈活检样本中发现167例宫颈炎,92例CIN1,63例CIN2,37例CIN3和15例宫颈浸润癌.在259例宫颈炎和CINl病例中,高危型HPV检测201例为阴性,58例为阳性;DNA倍体分析发现有异倍体细胞的病例为40例,219例为阴性;TBS诊断ASCUS及以上级别的病例30例,229例为正常.在115例CIN2、CIN3和宫颈浸润癌中,高危型HPV病毒测定阳性为98例,阴性为17例;DNA倍体分析阳性为93例,阴性为22例;TBS诊断ASCUS及以上级别的有79例,正常为36例.诊断CIN2及以上级别的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值,高危型HPV测定分别为85.2％、77.6％、62.8％和92.2％.DNA倍体分析分别为80％、84.6％、69.9％和90.9％;TBS诊断为68.7％、88.4％、72.5％和86.4％.结论 在诊断宫颈高级别癌前病变(CIN2和CIN3)和宫颈癌上,HPV-DNA病毒方法敏感性高,特异性低;常规细胞学方法敏感性低,特异性高;DNA倍体分析方法正好介于二种方法之间.三种方法均有优缺点,具体运用应根据实际情况而定.