目的:探讨卵巢癌患者造血前B细胞白血病转录因子相互作用蛋白(HPIP)表达和术前中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)水平及其临床检测价值.方法:选取卵巢癌患者为实验组(68例),卵巢良性肿瘤患者为对照组(21例).收集卵巢癌患者临床资料[年龄、国际妇产科联盟(FIGO)分期、病理类型、组织学分级、癌抗原125(CA125)、有无淋巴结转移及有无复发].采用免疫组化法检测HPIP蛋白在卵巢肿瘤组织中的表达情况.采用电阻抗法检测外周血中性粒细胞及淋巴细胞计数,计算术前NLR.随访并记录卵巢癌患者的总生存期(OS)和无病生存期(DFS).绘制Kaplan-Meier曲线及采用Log-rank检验行生存分析.结果:实验组患者HPIP蛋白阳性表达率及术前NLR＞3.24占比高于对照组患者(均P＜0.05).HPIP蛋白表达及术前NLR水平与卵巢癌患者FIGO分期、组织学分级、有无淋巴结转移及复发有关(均P＜0.05).HPIP蛋白低表达及术前NLR低水平卵巢癌患者OS和DFS长于HPIP蛋白高表达及术前NLR高水平患者(均P＜0.05).FIGO分期、组织学分级、有无淋巴结转移、HPIP蛋白表达及术前NLR水平与卵巢癌患者OS和DFS有关(均P＜0.05).结论:卵巢癌患者HPIP蛋白表达及术前NLR水平升高,与患者FIGO分期、组织学分级、有无淋巴结转移和复发以及DFS和OS有关.

目的 分析JMJD2B、HPIP对宫颈癌Hela细胞生物学行为的影响.方法 将Hela细胞分为si-NC组、si-JMJD2B组和si-HPIP组.实时荧光定量PCR检测宫颈癌细胞中JMJD2B、HPIP mRNA表达水平.Western blotting检测宫颈癌细胞和人正常宫颈上皮细胞JMJD2B、HPIP蛋白表达水平.CCK-8检测Hela细胞增殖能力.Transwell检测Hela细胞迁移和侵袭能力.结果 JMJD2B、HPIP蛋白在宫颈癌细胞中表达高于人正常宫颈上皮细胞(P＜0.05).与si-NC组比较,si-JMJD2B组和si-HPIP组JMJD2B、HPIP mRNA和蛋白表达、细胞增殖、迁移细胞数量、侵袭细胞数量均明显减少(P＜0.05).结论 JMJD2B和HPIP表达可能调节宫颈癌Hela细胞增殖、迁移和侵袭等生物学行为.

目的 探讨外周血miR-148a在非小细胞肺癌(NSCLC)中的作用及机制.方法 收集32例NSCLC患者及12名健康对照者的血清样本,运用ELISA检测miR-148a和HPIP的表达.通过双荧光素酶报告基因检测及Western Blot技术探讨miR-148a对HPIP的作用机制.利用CCK-8法分别检测过表达miR-148a和敲除HPIP对A549细胞增殖的影响.结果 NSCLC血清中miR-148a低表达而HPIP高表达.并且miR-148a可以直接靶向HPIP的3'-UTR区域而抑制HPIP水平.另外,过表达miR-148a和敲除HPIP都可以抑制A549细胞的增殖.结论 miR-148a通过靶向HPIP3'-UTR来抑制A549细胞的增殖.

目的:探讨抑制HPIP基因表达对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及凋亡的影响.方法:10 ng/mL的TGF-β1刺激HK-2细胞24,48 h,Western印迹法检测HPIP蛋白表达.将HK-2细胞随机分为空白组、TGF-β1组和TGF-β1+si-HPIP组,处理24 h后,Western印迹法检测HPIP,E-cadherin,α-SMA,N-cadherin,Snail,Twist,t-AKT,p-AKT和Bax蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡率.结果:TGF-β1刺激HK-2细胞24,48 h后HPIP蛋白表达均显著高于对照组(0 h)(P＜0.05).TGF-β1组E-cadherin蛋白表达显著低于空白组,α-SMA,N-cadherin,Snail,Twist,p-AKT和Bax蛋白表达及细胞凋亡率均显著高于空白组(P＜0.05),而TGF-β1+si-HPIP组E-cadherin蛋白表达显著高于TGF-β1组,α-SMA,N-cadherin,Snail,Twist,p-AKT和Bax蛋白表达及细胞凋亡率均显著低于TGF-β1组(P＜0.05).结论:抑制HPIP基因表达可延缓肾小管上皮细胞EMT进程和降低细胞凋亡率,机制可能与下调PI3K/AKT信号有关.

目的 检测HPIP蛋白在子宫内膜癌中的表达水平及探讨其临床意义.方法 应用免疫组化技术,检测HPIP在低分化子宫内膜癌(20例)、中分化子宫内膜癌(30例)、高分化子宫内膜癌(30例)以及正常内膜组织(10例)中的表达,分析其表达水平与癌细胞分级、浸润深度的相关性.结果 与正常的子宫内膜及子宫内膜良性病变相比,HPIP在子宫内膜癌中呈过度表达.①HPIP的表达与组织学分级、FIGO分期、淋巴结转移有关.②HPIP蛋白在正常组织中的表达显著低于在EC中的表达,研究表明HPIP蛋白表达可能与EC的增殖、侵袭有着密切的关系.③HPIP蛋白是有可能是一个非常有价值的生物学标志物,用于预测EC患者预后,并作为治疗癌症的一个潜在靶点.结论 HPIP蛋白的高表达促进子宫内膜癌的进展,可以作为预测子宫内膜癌的新指标.

目的 研究TGF-β1通过影响HPIP的表达,对非小细胞肺癌细胞系A549的增殖和转移的作用.方法 使用CCK-8检测TGF-β1在不同浓度及不同作用时间下对肺癌A549细胞增殖活力的作用;使用Transwell迁移实验检测TGF-β1对肺癌A549细胞迁移能力的影响;使用qRT-PCR检测不同浓度TGF-β1对Homo sapiens pre-B-cell leukemia homeobox interacting protein 1(HPIP/PBXIP1)基因转录的作用;使用western blot检测不同浓度TGF-β1对HPIP蛋白表达的影响;通过siRNA下调HPIP在A549细胞中的表达量,并检测下调表达后对A549细胞增殖活力及迁移能力的影响,并进一步验证对于TGF-β1促进增殖及促进迁移能力的影响.结果 随着TGF-β1浓度的增加,其促进肺癌A549细胞增殖活力的作用逐渐增加;随着TGF-β1作用时间的延长,同样逐渐增加其促进肺癌A549细胞增殖活力的作用;Transwell迁移实验结果显示,TGF-β1可促进肺癌A549细胞的迁移能力;qRT-PCR及western blot结果显示,随着TGF-β1浓度的增加,HPIP的转录及翻译水平逐渐增加;通过siRNA敲低A549细胞中HPIP的表达量,可以显著减弱TGF-β1促进肺癌A549细胞增殖及迁移的能力.结论 TGF-β1具有促进非小细胞肺癌A549细胞增殖及迁移的能力,该作用可能与TGF-β1介导的HPIP表达增加相关.本课题为HPIP作为潜在的非小细胞肺癌治疗靶点提供了一定的理论基础.

目的 探讨造血前B细胞白血病转录因子相互作用蛋白(HPIP)对胰腺癌细胞增殖、 周期及凋亡的影响.方法 采用免疫组织化学染色方法检测胰腺癌组织及对应癌旁组织中HPIP的表达水平,小干扰RNA瞬时转染的方法敲低胰腺癌细胞中HPIP的表达水平,细胞计数试剂盒-8实验、克隆形成实验、流式细胞术检测敲低HPIP对细胞增殖、周期及凋亡的影响,免疫印迹法检测敲低HPIP对于cyclin D1、caspase7和cleaved caspase7表达水平的影响.结果 胰腺癌组织中HPIP的表达明显高于癌旁组织(Z=-2.060,P=0.039).敲低HPIP表达水平后,在24 h起MIA PaCa-2和BxPC-3细胞的生长受到抑制(P均<0.05);MIA PaCa-2(t=4.706,P=0.009)和BxPC-3细胞(t=9.514,P=0.000)形成的阳性克隆数明显减少;MIA PaCa-2(t=7.642,P=0.001)及BxPC-3细胞(t=2.714,P=0.051)中S期细胞比例明显降低,G0/G1期细胞比例明显增加(t=3.244,P=0.031;t=6.095,P=0.003);MIA PaCa-2(t=24.58,P=0.000;t=29.43,P=0.000)和BxPC-3细胞(t=36.45,P=0.000;t=43.52,P=0.000)中的晚期凋亡率和总凋亡率均明显上升;MIA PaC-a-2(t=6.705,P=0.002)和BxPC-3细胞(t=6.238,P=0.003)的cyclin D1表达水平明显下降,caspase 7表达水平变化无统计学意义(t=0.711,P=0.516;t=0.027,P=0.979),cleaved caspase 7表达水平明显上升(t=3.991,P=0.016;t=6.536,P=0.002).结论 与癌旁组织相比,HPIP在胰腺癌中表达水平较高.敲低HPIP可导致胰腺癌细胞生长受到抑制,细胞周期由G0/G1期向S期转化受阻,并促进胰腺癌细胞凋亡.HPIP可能在胰腺癌中发挥癌基因作用.

目的 研究造血前B细胞白血病转录因子相互作用蛋白(Hematopoietic pre-B-cell leukemia transcription fac-tor interacting protein,HPIP)在子宫正常内膜组织、子宫内膜非典型增生组织和子宫内膜癌组织中的表达情况及其在临床预后中的意义.方法 采用免疫组化方法检测26例子宫正常内膜组织、30例子宫内膜非典型增生组织和122例子宫内膜癌组织中HPIP蛋白表达情况.分析HPIP在子宫内膜癌组织中的表达情况与其临床病理特征、患者无病生存期(Disease-free survival,DFS)和总生存期(Overall survival,OS)的相关性.结果 HPIP在子宫正常内膜组织和子宫内膜非典型增生组织的表达显著低于在子宫内膜癌组织中的表达(P<0.05);HPIP在子宫内膜癌组织中的表达程度与组织学分级、FIGO分期、淋巴结转移密切相关(P<0.05);在子宫内膜癌患者中HPIP高表达患者的DFS和OS显著低于HPIP低表达的患者(P<0.05).结论 HPIP蛋白有望成为预测子宫内膜患者预后的生物学标志物,并有可能作为子宫内膜癌治疗的一个潜在靶点.

背景 人造血前B细胞白血病转录因子相互作用蛋白(hematopoietic pre-B cell leukemia transcription factor interacting protein,HPIP)参与多种肿瘤的发生发展过程,其在肺癌中的机制仍有待研究.目的 构建带有Flag标签的HPIP真核表达载体,表达pcDNA3.0-Flag-HPIP融合蛋白,检测其对肺癌细胞增殖、迁移等生物学功能的影响.方法 利用人乳腺文库作为模板,PCR技术扩增HPIP基因的编码序列,将其酶切产物连接到pcDNA3.0-Flag载体并测序.将重组质粒转染至A549肺癌细胞系中,Western blot验证转染后HPIP的蛋白表达情况.采用克隆形成实验、CCK-8法及细胞划痕实验等明确其对肺癌细胞增殖、迁移等功能的影响.结果 PCR扩增得长度为2109 bp的HPIP基因编码序列,并成功插入至pcDNA3.0-Flag载体中.测序和Western blot验证融合蛋白构建成功.CCK-8法和克隆形成实验表明,与对照组相比,转染Flag-HPIP后肺癌A549细胞增殖能力显著增强.划痕实验证实转染Flag-HPIP后可明显提高肺癌A549细胞的迁移能力.结论 本实验成功构建了带有Flag标签的HPIP基因真核表达载体,并证实其能够促进肺癌细胞的增殖和迁移,为后续HPIP在肺癌中的功能研究奠定了良好基础.

目的 研究组蛋白去甲基化酶JMJD2B和造血前B细胞白血病转录因子相互作用蛋白(HPIP)在宫颈癌中的表达及其与预后的关系.方法 收集97例宫颈癌患者临床资料,检测宫颈癌组织及癌旁组织JMJD2B、HPIP表达,分析其与临床病理特征及预后的关系.对生存影响因素进行Cox回归分析,Kaplan-Meier分析生存情况,ROC曲线分析JMJD2B、HPIP对预后的预测效能.结果 JMJD2B、HPIP在宫颈癌组织中阳性表达率高于癌旁组织(P<0.05).JMJD2B、HPIP表达与肿瘤直径、肿瘤分化程度、淋巴结转移及浸润程度有关(P<0.05).多因素分析显示,肿瘤直径、肿瘤分化程度、淋巴结转移、浸润程度、JMJD2B表达、HPIP表达为影响预后的独立因素(P<0.05).JMJD2B、HPIP阳性表达者3年生存率和中位生存期低于阴性表达者(P<0.05).ROC曲线分析显示,JM-JD2B、HPIP联合预测宫颈癌预后灵敏度和AUC均高于单独检测(P<0.05).结论 JMJD2B、HPIP在宫颈癌组织中表达上调,与肿瘤直径、肿瘤分化程度、淋巴结转移及浸润程度有关,可作为宫颈癌预后的预测指标.