目的 研究瑞戈非尼联合健脾消癌方治疗结直肠癌的临床疗效及其对免疫功能的影响.方法 采用随机数字表法将2022年 2月至 2023 年 12 月南京中医药大学附属南京医院(南京市第二医院)肿瘤科接收的结直肠癌患者 70 例进行分组,观察组(35 例)服用瑞戈非尼联合健脾消癌方,对照组(35 例)予以瑞戈非尼口服,均用药 28 d.评价总有效率;检测治疗前后T淋巴细胞(CD3+)、辅助性T细胞(CD4+)、CD4+/细胞毒性T细胞(CD8+)、糖类抗原(CA125、CA19-9、CA242)、癌胚抗原(carcinoembryonic anti-gen,CEA)、白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-10、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α);统计不良反应(恶心呕吐、手足皮肤反应、腹泻、肝肾功能等).结果 观察组总有效率为 57.14%,高于对照组的 42.86%(P<0.05).治疗后,两组患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均明显高于治疗前(P<0.05),且观察组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均高于对照组(P<0.05).治疗后,两组CA125、CA19-9、CA242、CEA水平均低于治疗前(P<0.05),且观察组CA125、CA19-9、CA242、CEA水平均低于对照组(P<0.05).治疗后,两组血清IL-6、IL-10、TNF-α水平均低于治疗前(P<0.05),且观察组IL-6、IL-10、TNF-α均低于对照组(P<0.05).治疗期间,两组不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 瑞戈非尼联合健脾消癌方对结直肠癌有较好疗效,可减轻炎性反应、调节免疫能力、降低肿瘤标志物水平,且不良反应少,值得临床推广.

白细胞介素(IL)-35是最新发现的IL-12细胞因子家族成员之一，是免疫抑制性细胞因子，主要由调节性T细胞(Treg)和调节性B细胞(Breg)产生，其诱导肿瘤细胞逃避免疫识别与清除，从而促进肿瘤的发生、发展。IL-35在多种血液系统疾病患者中高表达，由于其免疫抑制作用，IL-35逐步成为近年相关研究热点，并为研究疾病的免疫抑制治疗提供新思路。笔者拟就IL-35在血液系统疾病免疫逃逸中作用的研究现状进行阐述，旨在为其在血液系统疾病的诊疗及预后评估中的应用提供理论参考。

目的:探讨他克莫司在治疗重型再生障碍性贫血（SAA）中的免疫调节作用。方法:选取2015年6月至2018年1月天津医科大学总医院血液科确诊的初治SAA患者，应用免疫磁珠分选SAA患者外周血CD8 +T细胞，MTT法检测其增殖能力。应用全身照射（TBI）及供者淋巴细胞输注（DLI）方法制备SAA小鼠模型，其中未接受预处理的正常对照组10只；仅接受TBI组10只；接受TBI及DLI组15只。应用流式细胞术检测CD8 +T细胞内穿孔素、颗粒酶的表达及SAA小鼠模型中外周循环CD4 +/CD8 +细胞比例。应用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测体外培养CD8 +T细胞培养基上清中干扰素γ（IFN-γ）水平。构建SAA小鼠模型研究各组用药后血象恢复情况及生存时间。 结果:共纳入初治SAA患者16例，其中男10例、女6例，年龄22~49岁（中位年龄35岁）。在IL-2浓度20.0、200.0和2 000.0 U/ml刺激时他克莫司可抑制CD8 +T细胞增殖（ P<0.05）。应用他克莫司组SAA患者CD8 +T细胞内穿孔素表达低于空白对照组和IL-2组［（2.25±0.76）%、（6.70±0.82）%比（9.10±1.90）%，均 P<0.05）］。应用他克莫司组CD8 +T细胞IFN-γ水平低于空白对照组（ P<0.05）。给SAA小鼠用药10 d后，他克莫司组SAA小鼠外周血血红蛋白（Hb）、白细胞（WBC）、血小板（PLT）计数均高于SAA组（均 P<0.05）。他克莫司组SAA小鼠CD8 +T细胞内穿孔素表达低于SAA组［（18.39±6.65）比（29.99±9.83）， P<0.05）］。SAA组小鼠中位生存时间为18.6 d，90 d存活率为0；他克莫司组SAA小鼠中位生存时间为44.6 d，90 d存活率为80%。他克莫司组SAA小鼠生存时间长于SAA组（ P<0.05）。 结论:他克莫司对SAA患者免疫状态的调节与环孢素A类似，对CD8 +T细胞有免疫抑制作用。

目的:探讨IgG 4相关性疾病（IgG 4-RD）患者的临床特征，分析淋巴细胞亚型以及潜在的发病机制及免疫治疗靶点。 方法:横断面研究。回顾性收集2018年1月至2022年2月在天津医科大学总医院就诊的IgG 4-RD患者86例。分析患者的人口学资料、症状和体征、器官受累情况、实验室指标、淋巴细胞亚型、组织病理学表现及治疗情况。 结果:86例IgG 4-RD患者的平均发病年龄为36~87（62±11）岁，其中男性51例（59.3%），女性35例（40.7%），34.9%的患者有过敏史，随访时间为4.8（0.4，14.1）个月。最常见的症状体征为腹痛、颌下腺肿大、泪腺肿大（各占20.9%）。75.6%的患者受累器官超过1个，最常见的受累器官为胰腺（52.3%）、颌下腺（51.2%）和泪腺（34.9%）。18.8%（16/85）伴随嗜酸性粒细胞比例升高，30.0%（24/80）IgE升高，61.2%（52/85）补体C3减低，50.0%（42/84）补体C4减低，72.9%（62/85）IgG升高，58.3%（28/48）IgG 1 升高，89.5%（77/86）IgG 4升高。64.7%（55/85）存在自身抗体阳性，最常见的阳性自身抗体是抗核抗体（ANA）（63.5%）。25.7%（9/35）CD4 +T淋巴细胞比例升高，22.9%（8/35）CD4 +/CD8 +T淋巴细胞比值升高，90.0%（18/20）调节性T细胞（Treg）比例升高。50.0%（11/22）IL-2升高，33.3%（10/30）IL-6升高，16.7%（5/30）IL-10升高。79.2%（42/53）存在大量淋巴浆细胞浸润，67.9%（36/53）存在纤维化，35.8%（19/53）IgG 4阳性/IgG阳性浆细胞>40%，且每高倍镜视野IgG 4阳性浆细胞>10个，30.2%（16/53）淋巴滤泡增生或异位形成。应用2011年日本研究小组提出的标准对53例具有详尽病理资料的患者进行评价，24.5%（13/53）可确定诊断，3.8%（2/53）很可能诊断，67.9%（36/53）可能诊断，3.8%（2/53）不能诊断。治疗后6个月，EOS%、IgE、IgG、IgG 4显著下降，补体C3、C4显著升高（均 P<0.05），而且治疗后6个月的IgG 4水平与基线时的C4呈负相关，与IgE、IgG 4/IgG呈正相关。 结论:IgG 4-RD是一组男性多发，多器官受累，伴随嗜酸性粒细胞、IgE、IgG、IgG 1、IgG 4升高，补体降低的免疫性疾病。外周血CD4 +T淋巴细胞、Treg比例相对升高。糖皮质激素和免疫抑制剂治疗有效，治疗后6个月的IgG 4水平与基线时的补体C4水平呈负相关，与IgE水平、IgG 4/IgG呈正相关。

目的:观察原发性胆汁性胆管炎（PBC）患者中IL-38的水平，评估IL-38对PBC患者调节性T细胞（Tregs）向辅助性T细胞（Th）17转分化的调控作用。方法:入组46例PBC患者和24名健康对照者，ELISA测定血清IL-38、IL-35、IL-17水平，流式细胞术检测PMBCs中CD4 +CD25 +CD127 dim/-Tregs和CD4 +IL-17A +Th17细胞比例，实时定量PCR法测定转录因子叉头盒蛋白P3（FoxP3）和维甲酸相关孤核受体γt（RORγt）mRNA表达。纯化的Tregs使用重组IL-38刺激后与自体PBMCs共培养，通过测定细胞增殖和上清细胞因子表达评估Tregs功能。将Tregs向Th17细胞极化培养，并加入重组IL-38刺激，通过检测CCR4、CCR6表达以及IL-17分泌、RORγt mRNA评估IL-38对Tregs向Th17表型转分化的影响。组间比较采用独立样本 t检验或Mann-Whitney U检验。 结果:PBC组血清IL-38水平低于健康对照组，差异有统计学意义[68.0（48.5，96.7）pg/ml与89.6（58.0，265.5）pg/ml， Z=3.25， P=0.037]。PBC组Tregs比例[（6.9±1.3）%与（11.3±3.5）%， t=7.64， P<0.001]、FoxP3 mRNA表达（1.0±0.3与1.9±0.7， t=7.74， P<0.001）、血清IL-35水平[25.9（16.1，37.3）pg/ml与31.0（24.8，52.3）pg/ml， Z=2.02， P=0.047]低于对照组，PBC组Th17细胞比例[（5.5±1.4）%与（3.8±1.0）%， t=5.43， P<0.001]、RORγt mRNA表达（1.4±0.6与1.0±0.4， t=2.72， P=0.008）、血清IL-17水平[202.0（121.6，311.6）pg/ml与104.5（79.8，155.5）pg/ml， Z=4.43， P<0.001]高于对照组。纯化Tregs与自体PBMCs共培养后，PBC组细胞增殖高于对照组[（6.5±1.4）×10 5个与（5.3±1.1）×10 5个， t=2.49， P=0.020]，PBC组上清中IL-35和IL-10分泌水平低于对照组（ P<0.05），但干扰素-γ分泌水平高于对照组（ P=0.011）。PBC组Tregs向Th17细胞极化培养后，CCR4和CCR6平均荧光强度（MFI）、RORγt mRNA和IL-17分泌水平均高于对照组（ P<0.05），但2组间差异无统计学意义。IL-38刺激可增强PBC组和对照组Tregs抑制活性，表现为细胞增殖减弱，IL-35和IL-10分泌增加（ P<0.05）。IL-38刺激仅抑制PBC组Tregs向Th17表型转分化，表现为CCR4 MFI、CCR6 MFI和IL-17分泌降低 P<0.05），但IL-38并未影响对照组Tregs向Th17表型转分化。 结论:IL-38在PBC疾病过程中发挥免疫保护和抑制炎症应答功能，抑制Tregs向Th17细胞转分化。

目的:观察白细胞介素-35(IL-35)对效应T细胞内高迁移率族蛋白B1(HMGB1)分布的影响，进一步探索其机制。方法:分离、培养并活化雄性C57BL/6小鼠脾脏中CD4 + T淋巴细胞，0.025% digitonin处理3 min后固定，FAC Scan流式细胞仪检测细胞质HMGB1的表达及IL-35的影响；进一步以1 μmol/L EX527及1 μmol/L SRT1720调节细胞内HMGB1的分布，观察细胞内LC3-Ⅱ和Beclin 1变化；最后应用蛋白质印迹法(Western blot)检测T细胞内信号转导及转录激活因子(STAT1)-鼠双微体基因2 (MDM2)-p53信号转导通路的变化。符合正态性分布数据进行进行Student’s t检验，不符合正态分布数据进行独立样本非参数检验。 结果:活化效应性T细胞内，HMGB1含量[(58.02±12.77)%]高于对照组[(6.03±2.35)%， t＝9.809， P<0.01]，50 ng/ml重组IL-35处理组细胞质HMGB1[(28.50±10.66)%]低于anti-CD3/CD28组( t＝4.418， P<0.01)；SRT1720抑制细胞质LC3Ⅱ和Beclin 1的表达，与EX527作用相反；活化效应性T细胞中，IL-35促进STAT1磷酸化，抑制细胞质MDM2表达，进而降低p53降解，增加细胞核及细胞质p53。 结论:对STAT1-MDM2-p53信号转导通路的干预可能是IL-35影响高迁移率族蛋白B1分布进而干扰效应T细胞自噬的重要机制之一。

目的:验证过表达小RNA(micro RNA, miR)-23b的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)回输对治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE)小鼠具有更好的协同治疗效果。方法:体外实验将EAE小鼠新鲜外周T淋巴细胞与miR23b-BMSCs (miR23b-BMSC-LN组)，未处理BMSCs(BMSC-LN组)，或未加入BMSCs的空白对照(Control-LN组)共培养48 h，应用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测其中白细胞介素(interleukin, IL)-17、转化生长因子-β(transforming growth factor, TGF-β)的表达水平。用CD4 Percp、CD25 PE、IL-17 APC、Foxp3 APC抗体对细胞进行染色，流式细胞仪分析MOG35-55刺激后的CD4 ＋ IL-17 ＋ Th17细胞和CD4 ＋ CD25 ＋ Foxp3 ＋ Treg细胞的百分比；体内实验应用HE染色分析回输miR23b-BMSCs组(miR23b-BMSC-EAE组)，回输未处理BMSCs组(BMSCs-EAE组)，假手术组(ctrl-EAE组)的脊髓白质的炎性浸润情况。 结果:过表达miR-23b可增强BMSCs可抑制Th17细胞的分化能力[(4.34±0.32)%比(8.21±0.16)%， χ2＝10.03, P<0.05]，并促进调节性T(T regular, Treg)细胞亚群的分化[(1.05±0.27)%比(0.24±0.06)%， χ2＝12.67， P<0.05)]。在病理表现上，miR23b-BMSCs移植能够通过降低Th17/Treg细胞比率以及抑制炎症细胞浸润血脑屏障，从而减轻脊髓脱髓鞘，延缓EAE病程的进展。 结论:过表达miR23b-BMSCs回输治疗具有更高效更持久的治疗效果，为BMSCs治疗自身免疫疾病的应用奠定了基础。

目的:探讨混合益生菌对食物过敏的影响及其作用机制。方法:选取孕15 d的BALB/c小鼠采用随机数字表法分为对照组、食物过敏模型组和混合益生菌组。幼鼠出生后，首先食物过敏模型组和混合益生菌组采用卵清蛋白(OVA)致敏激发建立食物过敏模型；之后混合益生菌组于出生第21-35天给予益生菌溶液灌胃治疗；对照组采用9 g/L盐水灌胃。末次激发24 h后，制作肠道组织病理切片观察其病理变化，制备血涂片计数嗜酸性粒细胞，分离血清测定细胞因子及OVA特异性抗体，分离肠系膜淋巴结分析树突状细胞(DCs)和调节性T淋巴细胞(Tregs)。采用 One- Way ANOVA或 Kruskal- Wallis H检验进行3组间数据比较。 结果:与食物过敏模型组相比，混合益生菌组小鼠腹泻评分显著降低[(2.00±0.71)分比(3.22±0.97分)]；嗜酸性粒细胞百分比、血清白细胞介素(IL)-4、IL-5、IL-13、肥大细胞蛋白酶1(MCPT-1)、OVA特异性抗体水平IgE和IgG水平均显著下降[(2.28±1.61)%比(10.99±2.26)%、(413.68±22.81) ng/L比(708.78±27.66) ng/L、(36.64±3.74) ng/L比(46.05±4.95) ng/L、(201.37±65.61) ng/L比(495.22±96.66) ng/L、(31 924.15±1 177.77) ng/L比(36 175.77±618.29) ng/L、(9.10±8.08) ng/L比(19.69±0.84) ng/L、(30.50±8.81) ng/L比(190.32±6.40) ng/L]；IL-10水平显著升高[(164.12±3.88) ng/L比(123.90±7.31) ng/L]，差异均有统计学意义( t＝3.37、8.72、16.07、3.90、7.40、7.95、3.91、44.00、7.76，均 P<0.01)。与食物过敏模型组相比，混合益生菌组肠系膜淋巴结中CD 103+DCs及CD 103+CD 80-CD 40-DCs表面的程序性细胞死亡分子配体1(PD-L1)水平显著升高[(75.59±0.45)%比(45.60±4.73)%、(67.56±1.87)%比(37.12±6.07)%]；Tregs在CD4 +T淋巴细胞中的比例显著升高[(8.24±0.69)%比(6.20±0.66)%]；Tregs表面程序性细胞死亡分子1(PD-1)表达水平显著升高[(11.25±3.12)%比(4.08±2.33)%]，差异均有统计学意义( t＝7.88、4.48、3.63、3.71，均 P<0.01)。 结论:混合益生菌可改善幼鼠的食物过敏症状，降低炎症水平，其机制可能是通过PD-1/PD-L1通路调节Tregs的产生发挥作用。

目的:观察斑秃患者外周血白细胞介素35（IL-35）表达变化，评估IL-35对斑秃患者调节性T细胞（Treg）活性的调控。方法:收集2019年12月至2021年1月在山西省人民医院就诊的斑秃患者81例（斑秃组）和健康志愿者27例（对照组），分离血清和外周血单个核细胞（PBMC），酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清IL-35水平，实时荧光定量PCR法检测IL-35组成亚基EBI3和IL-12p35 mRNA表达，流式细胞仪检测CD4 +CD25 +CD127 dim/-Treg比例。使用重组人IL-35刺激纯化的Treg，ELISA检测培养上清液中穿孔素和颗粒酶B水平，实时荧光定量PCR检测EBI3、IL-12p35和免疫检查点分子程序性死亡蛋白1、黏蛋白结构域蛋白3、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4、淋巴细胞活化基因3 mRNA表达；将经IL-35刺激或未刺激的Treg与自体PBMC共培养，用细胞计数试剂盒8检测细胞增殖水平。计量资料两组之间比较采用 t检验，多组之间比较采用单因素方差分析，相关性分析采用Pearson检验；计数资料比较采用卡方检验。 结果:与对照组比较，斑秃组IL-35水平[（90.10 ± 11.98）ng/L比（100.74 ± 28.71）ng/L， t= 2.71， P= 0.008]、PBMC中EBI3 mRNA（1.06 ± 0.15比1.25 ± 0.11， t= 6.09， P < 0.001）、IL-12p35 mRNA（1.00 ± 0.15比1.38 ± 0.22， t= 10.16， P < 0.001）、Treg比例（5.91% ± 1.17%比6.85% ± 1.23%， t= 3.54， P= 0.001）均显著降低。斑秃组Treg比例与血清IL-35水平（ r= 0.25， P= 0.026）、PBMC中EBI3 mRNA（ r= 0.31， P= 0.004）、IL-12p35 mRNA水平（ r= 0.24， P= 0.032）均呈正相关。斑秃组未刺激的Treg分泌穿孔素、颗粒酶B水平以及EBI3、IL-12p35、免疫检查点分子mRNA表达均显著低于对照组Treg（ P < 0.05或0.001），抑制PBMC增殖的能力亦低于对照组（ P= 0.013）。重组人IL-35刺激后斑秃患者Treg分泌穿孔素和颗粒酶B水平与未刺激Treg相比无明显变化（ P > 0.05），但EBI3、IL-12p35、免疫检查点分子mRNA表达均显著升高（ P < 0.05或0.001），抑制PBMC增殖的能力亦增强（ P= 0.037）。 结论:斑秃患者外周血IL-35水平明显降低，与Treg功能减弱密切相关，可能参与斑秃发病。

目的 基于网络药理学及分子对接技术探讨归脾汤治疗儿童过敏性紫癜的作用机制.方法 通过BATMAN-TCM数据库检索归脾汤中12 味中药的活性成分及其作用靶点,通过GeneCards?数据库获取儿童过敏性紫癜相关靶点,取二者交集的靶点作为归脾汤治疗儿童过敏性紫癜的相关靶点.使用Cytoscape 3.5.3 软件构建归脾汤治疗儿童过敏性紫癜的"成分-靶点"网络以筛选主要活性成分.通过 STRING 数据库及Cytoscape 3.5.3软件构建交集靶点的蛋白-蛋白相互作用网络,并通过拓扑参数分析筛选出核心靶点.运用DAVID数据库对核心靶点进行基因本体论(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析.使用AutoDock Vina软件对选取的核心靶点及其对应活性成分进行分子对接.结果 共获得归脾汤的活性成分411 个及其作用靶点2193 个,儿童过敏性紫癜相关靶点715 个,取交集后获得223 个归脾汤治疗儿童过敏性紫癜的相关靶点.交集靶点对应的活性成分有 230 个,通过构建"成分-靶点"网络获得桦木醇、β-紫罗兰酮等10 个主要活性成分.筛选出TGF-β1、IL-6、TNF、IL-17A、FOXP3 等35 个核心靶点.GO功能富集分析结果显示,核心靶点涉及的生物过程主要与炎症反应、免疫应答、内皮的保护等有关,涉及的细胞组分主要与溶酶体和滤泡的生成有关,涉及的分子功能主要与各种激酶的活性代谢和血小板的活性有关.KEGG通路富集分析结果显示,核心靶点主要富集在TLR、NF-κB、MAPK、JAK/STAT、PI3K/AKT等信号通路.选取核心靶点TGF-β1 进行分子对接,结果显示,有11 个活性成分与TGF-β1 的结合活性较好(结合能<-5 kal/mol).结论 归脾汤治疗儿童过敏性紫癜的作用机制可能与其多种活性成分通过调控TGF-β1、IL-6、TNF、IL-17A、FOXP3 等靶点及TLR、NF-κB、MAPK、JAK/STAT、PI3K/AKT等信号通路,来调节Th17/调节性T淋巴细胞平衡及抑制炎症反应有关.归脾汤也可能通过调节血小板功能和保护血管内皮细胞来发挥治疗儿童过敏性紫癜的作用.