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肾组织石蜡切片免疫荧光技术中抗原修复方法的探讨
编辑人员丨6天前
目的:比较多种抗原修复方法在肾组织石蜡切片免疫荧光技术中的应用,探讨最佳抗原修复法。方法:选取2018年6月至2019年6月期间郑州大学第一附属医院肾脏病理中心的45例肾活检组织标本为研究对象,其中狼疮肾炎、膜性肾病、IgA肾病各10例及淀粉样变性肾病15例。分别用5种抗原修复法处理各组肾组织石蜡切片。按照标本来源和抗原修复方法分为6组:对照组(冰冻切片标本)、高压热修复联合胰蛋白酶消化双修复(高压热联合胰酶)组、微波热修复联合胰蛋白酶消化双修复(微波热联合胰酶)组、高压热修复(高压热)组、微波热修复(微波热)组、胃蛋白酶消化(胃蛋白酶)组。分析和比较5种热修复抗原方法的石蜡切片与冰冻切片免疫荧光染色和半定量评分的差异。结果:高压热联合胰酶、微波热联合胰酶组肾组织石蜡切片的免疫荧光染色结果与对照组一致,与对照组比较,两组免疫荧光半定量评分的差异无统计学意义(均 P>0.05)。高压热组、微波热组和胃蛋白酶组石蜡切片免疫荧光染色结果较对照组假阴性率高,免疫荧光半定量评分的差异有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:高压热修复联合胰蛋白酶消化双修复法与微波热修复联合胰蛋白酶消化双修复法为石蜡切片的最佳抗原修复方法。
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编辑人员丨6天前
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血清胱抑素C水平与IgA肾病临床及病理特征的相关性
编辑人员丨6天前
目的:探讨血清胱抑素C(CysC)与IgA肾病临床及病理特征的相关性。方法:收集2010年1月至2021年1月在上海中医药大学附属龙华医院经肾活检确诊的原发性IgA肾病421例进行回顾性分析。根据肾活检时血清CysC水平分为血清CysC高水平组(≥1.03 mg/L)及CysC正常组,对患者的临床资料及病理指标进行比较,采用Spearman法分析估算的肾小球滤过率(eGFR)与血清CysC的相关性,多元线性回归分析与血清CysC水平相关的临床病理因素,并用受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)评估联合血清CysC预测相关病理损伤的能力。结果:CysC高水平组患者的年龄、合并高血压、血肌酐、尿素及血尿酸水平均明显高于血清CysC正常组,而eGFR水平明显低于血清CysC正常组( P均<0.05)。Spearman相关性分析显示,血清CysC与eGFR呈负相关( r=-0.744, P<0.001)。在病理损伤方面,CysC高水平组在肾小管萎缩与肾间质纤维化及肾小动脉管壁增厚等程度高于CysC正常组( P均<0.05)。多元线性回归分析提示,高血压、血肌酐、尿素、血尿酸、肾小管萎缩与肾间质纤维化及肾小动脉管壁增厚与血清CysC水平具有相关性(标准回归系数β值分别为0.048、0.299、0.260、0.134、0.195、0.068, P均<0.05)。在临床因素的基础上加入血清CysC后,能提高对肾小管萎缩和肾间质纤维化的预测效能[AUC分别为0.829(95% CI 0.787~0.870)、0.847(95% CI 0.808~0.886), P<0.05]。 结论:原发性IgA肾病患者年龄偏大、合并高血压、肾功能水平较差、病理损伤程度较重时,更易出现血清Cys C水平升高。血清CysC与高血压、血肌酐、尿素、血尿酸、肾小管萎缩与肾间质纤维化及肾小动脉管壁增厚相关。联合血清CysC水平可有效提高对肾小管萎缩与肾间质纤维化的预测能力。
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编辑人员丨6天前
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IgA肾病患者血清miR-155、SOCS-1水平与肾间质纤维化的相关性
编辑人员丨6天前
目的:探究IgA肾病患者血清微小核糖核酸-155(miR-155)、细胞因子信号转导抑制因子-1(SOCS-1)水平变化及其与肾间质纤维化的关系。方法:选取2009年1月至2018年6月济宁市第一人民医院收治的365例原发性IgA肾病患者作为研究对象,根据肾间质纤维化程度将入组患者分为T0组139例、T1组124例、T2组102例。另选取同期在本院体检的健康者361例作为健康对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测研究对象的血清miR-155表达水平,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清SOCS-1、转化生长因子-β1(TGF-β1)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达水平。采用logistic回归模型分析IgA肾病患者肾间质纤维化发生的影响因素;采用Pearson法分析IgA肾病患者血清miR-155、SOCS-1水平与肾间质纤维化发生影响因素、TGF-β1、MCP-1相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-155、SOCS-1水平对IgA肾病患者肾间质纤维化发生的预测价值。结果:健康对照组、T0组、T1组、T2组SBP、DBP、24 h尿蛋白定量、血肌酐、血尿酸水平及血清miR-155、TGF-β1、MCP-1、尿视黄醇结合蛋白(RBP)、乙酰βD氨基葡萄糖苷酶(NAG)水平依次显著升高,血红蛋白、eGFR、尿渗透压及血清SOCS-1水平依次显著降低(均 P<0.05)。高SBP、高DBP、低血红蛋白、高血肌酐、高尿酸、高24 h尿蛋白定量、低eGFR水平是影响IgA肾病患者肾间质纤维化发生的独立危险因素(均 P<0.05)。IgA肾病患者血清miR-155水平与TGF-β1、MCP-1、SBP、DBP、血肌酐、血尿酸水平及24 h尿蛋白定量呈正相关,与SOCS-1、血红蛋白、eGFR水平呈负相关(均 P<0.05)。血清SOCS-1水平与TGF-β1、MCP-1、SBP、DBP、血肌酐、血尿酸水平及24 h尿蛋白定量呈负相关,与血红蛋白、eGFR水平呈正相关(均 P<0.05)。血清miR-155、SOCS-1水平联合检测预测IgA肾病患者肾间质纤维化发生的曲线下面积为0.882,明显大于血清miR-155、SOCS-1水平单独检测(均 P<0.05)。 结论:IgA肾病患者血清miR-155表达上调、SOCS-1表达下调,可能作为预测因子,对肾间质纤维化发生具有一定评估价值。
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编辑人员丨6天前
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泪液病原和免疫组分检测及其临床意义的研究现状
编辑人员丨6天前
眼表疾病是眼科临床常见疾病,临床医生仅根据症状、体征、血清学检查很难准确早期诊断,甚至可造成误诊。泪液检测相对于血液检测更能反映眼表局部病情,且具有无创性、诊断准确性高、诊断速度快的特点。泪液检测应用聚合酶链式反应、酶联免疫吸附测定、基因芯片等现代检验技术,检测泪液中的病原和免疫组分,包括微生物核酸、泪液抗体(IgM、IgG、IgE、IgA、抗核抗体等)和细胞因子(白细胞介素、肿瘤坏死因子、干扰素、转化生长因子、表皮生长因子等)。泪液检测提供了眼表局部病原体感染和免疫反应信息。目前国内外大量泪液检测研究显示,不仅眼表疾病,葡萄膜炎、眼底疾病、甲状腺相关眼病,甚至糖尿病、乙型肝炎、获得性免疫缺陷综合征等全身疾病,泪液成分都有一定规律性变化。此外,通过对泪液病原和免疫组分成分的研究对研究疾病成因、生化及免疫过程、疾病治疗等均有重要意义。本文就泪液采集、泪液病原和免疫组分临床意义、各个疾病泪液特点方面,阐述眼表泪液检测的进展,以期为临床工作提供参考。
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编辑人员丨6天前
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IgA肾病患者血清MMP-7、TNFR1水平与肾间质纤维化、肾功能损害和肾脏预后的关系
编辑人员丨6天前
目的:探讨IgA肾病(IgAN)患者血清基质金属蛋白酶-7(MMP-7)、肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)水平与肾间质纤维化、肾功能损害和肾脏预后的关系。方法:前瞻性纳入沧州市中心医院2015年7月至2018年7月收治的114例IgAN患者进行研究,根据肾间质纤维化(RIF)程度分成T0组( n=48)、T1组( n=34)、T2组( n=32),同时选取同期体检的健康志愿者67例为对照组。比较各组血清MMP-7、TNFR1、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)水平及24 h尿蛋白定量、估算肾小球滤过率(eGFR);比较不同IgAN牛津分型(MEST)患者血清MMP-7、TNFR1水平,分析IgAN患者血清MMP-7、TNFR1水平与肾功能指标、MEST的相关性及MMP-7与TNFR1的相关性。随访36个月,绘制Kaplan-Meier生存曲线,采用Log rank χ 2检验分析不同血清MMP-7、TNFR1水平患者肾脏预后的差异。 结果:T0、T1、T2组血清MMP-7、TNFR1水平及Scr、BUN、UA高于对照组,且T1、T2组高于T0组,T2组高于T1组(均 P<0.05),不同RIF程度患者24 h尿蛋白定量比较差异均有统计学意义(均 P<0.05)。T0、T1、T2组eGFR低于对照组,且T1、T2组低于T0组,T2组低于T1组(均 P<0.05)。系膜增生M1级、节段硬化或粘连S1级、毛细血管内增生性病变E1级患者的血清MMP-7、TNFR1水平高于系膜增生M0级、节段硬化或粘连S0级、毛细血管内增生性病变E0级的患者(均 P<0.05)。IgAN患者血清MMP-7、TNFR1水平与Scr、BUN、UA、24 h尿蛋白定量、MEST呈正相关,与eGFR呈负相关,且血清MMP-7与TNFR1水平呈正相关(均 P<0.05)。MMP-7、TNFR1高水平组的肾脏生存率低于MMP-7、TNFR1低水平组(均 P<0.05)。 结论:IgAN患者血清MMP-7、TNFR1水平升高,随着RIF程度越重,二者水平越高,且与肾功能指标存在相关性,二者水平升高能引起肾脏预后不良。
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编辑人员丨6天前
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经尿道输尿管镜碎石术与后腹腔镜输尿管切开取石术治疗输尿管上段结石效果比较
编辑人员丨6天前
目的:探讨经后腹腔镜输尿管切开取石术(RLU)与尿道输尿管镜碎石术(URL)对输尿管上段结石患者的肾功能、氧化应激及免疫球蛋白的影响。方法:回顾性选取2017年6月至2020年4月义乌市中心医院收治的输尿管上段结石患者78例的临床资料。根据手术方式的不同分为URL组( n=38,URL治疗)和RLU组( n=40,RLU治疗),比较两组患者肾功能[肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)]、氧化应激[超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)]、免疫球蛋白[免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)]及并发症情况。 结果:RLU组术后 1 d Scr(79.59±6.02)μmol/L、BUN(6.93±1.17)mmol/L、NGAL(4.78±0.61)μg/L,均低于URL组[Scr(86.98±8.27)μmol/L、BUN(7.62±1.24)mmol/L、NGAL(6.03±0.79)μg/L]( t=4.53、2.53、7.85, P < 0.001、 P=0.014、 P < 0.001)。RLU组术后1 d IgA(1.94±0.25)g/L、IgM(1.55±0.24)g/L、IgG(6.59±1.25)g/L,均低于URL组[IgA(2.38±0.23)g/L、IgM(1.82±0.27)g/L、IgG(7.89±1.36)g/L]( t=8.08、4.67、4.40, P < 0.001、0.001、0.001)。RLU组术后1 d的MDA(7.49±1.26)mmol/L,低于URL组的(8.93±1.38)mmol/L( t=4.817, P < 0.001)。RLU组术后1 d的SOD(72.18±7.55)mg/L,高于URL组的(63.49±6.69)mg/L( t=5.37, P < 0.001)。URL组术后并发症发生率为15.79%(6/38),RLU组术后并发症发生率为7.50%(3/40),两组术后并发症发生率比较,差异无统计学意义(χ2=1.31, P=0.252)。 结论:与URL相比,RLU治疗输尿管上段结石,对患者肾功能、氧化应激及免疫球蛋白的影响明显更轻,且不增加并发症发生率。
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编辑人员丨6天前
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中西医结合治疗布鲁氏菌病的效果研究
编辑人员丨6天前
目的:观察中西医结合治疗布鲁氏菌病临床效果及对体液免疫指标的影响。方法:于2019年10月,以天津市第二人民医院收治住院的布鲁氏菌病患者169例作为研究对象,按照随机数字法分为两组,中西医结合治疗组84例,西医治疗组85例。西医治疗组给予抗菌素等常规西医支持治疗。中西医结合治疗组在西医治疗组基础上给予中医辨证施治的中药,6周为1疗程。对比两组患者治疗后临床疗效、中医证候积分,分析治疗前后患者体液免疫指标、生化及肝肾功能变化。结果:中西医结合治疗组总有效率为100.00%(84/84),西医治疗组为97.65%(83/85),差异无统计学意义( P>0.05)。两组患者治疗前中医证候积分差异无统计学意义( P>0.05),治疗后中医证候积分均低于治疗前( P<0.05),其中中西医结合治疗组中医证候积分低于西医治疗组( P<0.05)。两组患者治疗前IgG、IgA、IgM、C3、C4、miRNA-155、C-反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)、谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)差异均无统计学意义( P>0.05);治疗后IgG、IgA、IgM、miRNA-155、CRP、ESR、ALT和AST均低于治疗前,C3和C4补体水平高于治疗前( P<0.05),其中中西医结合治疗组IgG、IgA、IgM、miRNA-155、CRP、ESR、ALT和AST均低于西医治疗组,而C3和C4补体水平高于西医治疗组( P<0.05)。 结论:中西医结合治疗布鲁氏菌病可以明显改善中医证候积分,同时降低CRP和ESR水平,其作用机制可能与调节患者体液免疫指标有关。
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编辑人员丨6天前
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吗替麦考酚酯在对熊去氧胆酸应答不佳的原发性胆汁性胆管炎患者中的应用
编辑人员丨6天前
目的:观察熊去氧胆酸(UDCA)联合吗替麦考酚酯(MMF)治疗UDCA应答不佳的原发性胆汁性胆管炎(PBC)患者的疗效。方法:研究对象为北京协和医院根据巴塞罗那标准UDCA应答不佳的PBC患者,干预方式为MMF(0.75~1.5 g/d)联合UDCA(13~15 mg·kg -1·d -1)治疗,观察期为至少12个月。检测比较治疗前后各时间点血清ALT、AST、ALP、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、白蛋白(Alb)、总胆红素(TBil)、免疫球蛋白(Ig)M、IgG、IgA水平,参照既往报道的巴塞罗那标准7个应答标准评价生化应答率。治疗后与基线指标的比较符合正态分布采用配对 t检验,不符合正态分布则采用非参数Wilcoxon秩和检验。2组独立样本分析不符合正态分布采用Mann-Whitney U检验。 结果:共纳入29例PBC患者,最终有17例患者联合治疗满12个月。治疗后3个月血清ALP较基线显著下降[(369±184) U/L和(309±148) U/L, t=2.149, P=0.045],3个月后该统计学差异消失。治疗6个月后GGT下降差异具有统计学意义[266.5(205.5,414.0) U/L和217.5(173.8,391.8) U/L, Z=-2.334, P=0.018],且持续至用药后12个月。免疫球蛋白IgM、IgG和IgA在联合治疗3个月、6个月及12个月时差异均有统计学意义。AST、TBil、白蛋白差异均无统计学意义。各应答标准评估疗效,应答率在9.5%~23.5%。 结论:UDCA联合MMF治疗UDCA应答不佳的患者疗效欠佳,这可能与联合治疗干预时机有关。早期识别UDCA应答不佳的患者,用更高质量的研究验证联合治疗方案具有重要意义。
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编辑人员丨6天前
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2型PI3Kδ过度活化综合征临床与免疫学特征分析
编辑人员丨6天前
目的:分析2型PI3Kδ过度活化综合征(APDS2)患儿的临床与免疫学特征。方法:回顾性分析重庆医科大学附属儿童医院收治的1例APDS2患儿临床资料、免疫相关基因测序、影像学和实验室检查结果,利用流式细胞术对患儿淋巴细胞亚群及其表型进行检测,并以正常同龄儿童或患儿父亲为对照进行对比分析。结果:患儿 女,6岁4月龄,因"面色苍白1个月余,咳嗽7 d"于2017年6月首次入院,IgA(<0.067 g/L)降低伴IgM(2.55 g/L)升高,腹部超声提示肝脏(肋下1.7 cm)和脾脏(肋下3.6 cm)肿大,基因测序显示患儿PIK3R1基因c.1425+1G>A杂合突变,予醋酸泼尼松(10 mg/次,3次/d,逐渐减量)口服治疗7个月,患儿IgM降至正常(1.72 g/L),肝脾缩小(肝肋下0 cm,脾肋下0.5 cm)。2019年7月因"面色苍黄半个月"二次入院,精细免疫分型提示初始CD4 +T细胞(0.386)和初始CD8 +T细胞(0.271)比例降低,终末分化效应记忆CD8 +T细胞(0.377)和过渡性B细胞(0.223)比例增高。患儿CD3 +T、CD4 +T、CD8 +T细胞(4 125、5 213、3 497)磷酸化蛋白激酶B(AKT)的平均荧光强度峰值高于其父亲(3 434、3 312、3 058)。患儿滤泡辅助T细胞(0.299)、Th1(0.491)和类Th1(0.438)比例高于正常儿童(0.156、0.313、0.303),而Th17(0.126)和类Th17(0.188)比例低于正常儿童(0.198,0.315)。患儿T细胞衰老指标CD57比例(0.306)高于正常儿童(0.246)。 结论:APDS2患儿体液免疫和细胞免疫均有不同程度受损,激素治疗对其淋巴组织增生和自身免疫性溶血性贫血等临床症状有一定改善。
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编辑人员丨6天前
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不同血清白蛋白水平硬皮病相关间质性肺病患者的预后比较
编辑人员丨6天前
目的:探讨基线血清白蛋白水平与硬皮病相关间质性肺病短期、长期预后的关系。方法:以2008年1月1日至2018年12月31日于四川大学华西医院住院并诊断为硬皮病相关间质性肺病的259例患者为研究对象(其中150例为首次诊断),从医院信息管理系统获取患者第1次住院时检测的血清白蛋白、人口学特征、外周血血红蛋白等数据(基线数据)与治疗方案,随访至2019年6月1日患者生存情况。259例患者基线血清白蛋白平均值为37.67 g/L,其中≤37.67 g/L者118例(低蛋白组),>37.67 g/L者141例(高蛋白组)。结果:259例患者年龄50.0(41.0,61.0)岁,其中男性64例;随访时间为627(61,1 426)d。低蛋白组男性占比[30.5%(36/118)与19.9%(28/141),χ 2=3.92, P=0.048],红细胞沉降率水平[45.0(27.0,69.0)与29.0(19.0,46.0)mm/1 h, Z=4.07, P<0.001]、中性粒细胞百分比[71.50(63.35,77.13)与65.60(59.50,72.50)%, Z=3.65, P<0.001]、外周血血小板计数[196(140,273)×10 9/L与172(126,240)×10 9/L, Z =1.99, P=0.046]、外周血中性粒细胞绝对值与淋巴细胞绝对值的比值[3.85(2.53,5.28)与2.61(1.97,3.83), Z =4.57, P<0.001]、血小板计数与淋巴细胞绝对值的比值[149.0(112.0,216.8)与113.5(72.8,158.8), Z =4.98, P<0.001]、谷草转氨酶[27.0(21.0,39.0)与23.0(19.5,30.0)IU/L, Z =2.93, P=0.003]、球蛋白[31.2(26.9,36.8)与29.5(25.6,32.8)g/L, Z =2.28, P=0.023]、血清胱抑素C[1.14(0.98,1.33)与1.02(0.88,1.16)mg/L, Z =3.80, P<0.001]、IgA[2 710(1 965,3 505)与2 460(1 862,3 105)mg/L, Z =2.13, P=0.033]、IgG[15.05(12.83,21.08)与13.60(11.53,17.23)g/L, Z =3.24, P=0.001]、IgE[60.44(24.92,197.99)与34.82(14.72,85.04)kIU/L, Z =3.33, P=0.001]和循环免疫复合物[0.13(0.08,0.19)与0.10(0.08,0.13)O.D, Z =2.60, P=0.009]水平,均高于高蛋白组,差异均有统计学意义;而血红蛋白[121.5(101.8,132.0)与129.0(119.0,142.0)g/L, Z =5.05, P<0.001]、白蛋白[(33.28±3.49)与(41.34±2.95)g/L, t=20.17, P<0.001]和IgM[1 320(932,1 745)与1 560(1 170,2 030)mg/L, Z =2.63, P=0.009]水平较高蛋白组更低,差异均有统计学意义;低蛋白组患者抗生素的使用率更高[60例(50.8%)与43例(30.5%),χ 2=11.10, P=0.001]。随访至1、5和10年的患者数分别为248、245和244例,Kaplan-Meier法计算低蛋白组与高蛋白组1、5和10年累积生存率分别为91.0%与98.4%、87.0%与97.1%和81.6%与97.1%,差异均有统计学意义(χ 2=6.23, P=0.013;χ 2=6.15, P=0.013;χ 2=7.00, P=0.008)。 结论:硬皮病相关间质性肺病患者在血清白蛋白≤37.67 g/L时死亡风险增加,预后较差。
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编辑人员丨6天前
