Ossification of the Posterior Longitudinal Ligament(OPLL)is a degenerative hyperostosis disease characterized by the transformation of the soft and elastic vertebral ligament into bone,resulting in limited spinal mobility and nerve compression.Employing both bulk and single-cell RNA sequencing,we elucidate the molecular characteristics,cellular components,and their evolution during the OPLL process at a single-cell resolution,and validate these findings in clinical samples.This study also uncovers the capability of ligament stem cells to exhibit endothelial cell-like phenotypes in vitro and in vivo.Notably,our study identifies LOXL2 as a key regulator in this process.Through gain-and loss-of-function studies,we elucidate the role of LOXL2 in the endothelial-like differentiation of ligament cells.It acts via the HIF1A pathway,promoting the secretion of downstream VEGFA and PDGF-BB.This function is not related to the enzymatic activity of LOXL2.Furthermore,we identify sorafenib,a broad-spectrum tyrosine kinase inhibitor,as an effective suppressor of LOXL2-mediated vascular morphogenesis.By disrupting the coupling between vascularization and osteogenesis,sorafenib demonstrates significant inhibition of OPLL progression in both BMP-induced and enpp1 deficiency-induced animal models while having no discernible effect on normal bone mass.These findings underscore the potential of sorafenib as a therapeutic intervention for OPLL.

目的 研究骨肉瘤(osteosarcoma)患者癌组织中热休克蛋白 90 ATP酶激活因子 1(the activator of HSP90 ATPase-1,AHA1)和赖氨酰氧化酶样蛋白 2(lysyl oxidase like-2 protein,LOXL2)表达与侵袭转移基因mRNA表达的相关性及临床意义.方法 选取 2016 年 2 月～2017 年 3 月华北医疗健康集团峰峰总医院诊治的 90 例骨肉瘤患者为研究对象.应用实时荧光定量PCR检测组织中AHA1 mRNA,LOXL2 mRNA及侵袭转移基因Wnt家族成员9A(Wnt9a)mRNA,锌指E盒结合同源盒1(Zinc finger E-box binding homeobox 1,ZEB1)mRNA,锌指E盒结合同源盒2(ZEB2)mRNA,N-钙黏素(N-cad)mRNA和波形蛋白(Vim)mRNA表达.采用Pearson相关分析,比较不同临床特征骨肉瘤患者AHA1 mRNA,LOXL2 mRNA表达差异.Kaplan-Meier生存分析影响AHA1 mRNA,LOXL2 mRNA表达对骨肉瘤患者预后的影响.单因素及多因素COX回归分析影响骨肉瘤患者预后的因素.结果 骨肉瘤组织中AHA1 mRNA(3.16±0.59),LOXL2 mRNA(2.84±0.44)及侵袭转移基因Wnt9a mRNA(3.23±0.42),ZEB1 mRNA(2.73±0.39),ZEB2 mRNA(2.52±0.56),N-cad mRNA(2.71±0.65),Vim mRNA(2.81±0.73)表达均高于癌旁组织(1.10±0.21,0.95±0.18,0.79±0.15,0.64±0.11,0.98±0.19,0.68±0.14,0.72±0.15),差异具有统计学意义(t=31.206,37.716,51.903,48.931,24.706,28.964,26.605,均P<0.05).骨肉瘤组织中AHA1 mRNA与LOXL2 mRNA表达呈显著正相关(r=0.712,P<0.05).骨肉瘤组织中AHA1 mRNA,LOXL2 mRNA与侵袭转移基因Wnt9a mRNA,ZEB1 mRNA,ZEB2 mRNA,N-cad mRNA,Vim mRNA表达呈显著正相关(r=0.504～0.720,均P<0.05).Eneeking分期Ⅲ期、有软组织浸润和有肺转移骨肉瘤组织中AHA1 mRNA,LOXL2 mRNA表达高于Eneeking分期Ⅰ～Ⅱ期、无软组织浸润和无肺转移患者,差异具有统计学意义(t=14.122～171.054,均P<0.05).AHA1 mRNA高表达组和低表达组患者五年生存率分别为36.36%(16/44),78.26%(36/46).AHA1 mRNA高表达组患者五年累积生存率明显低于低表达组,差异有统计学意义(Log-rank χ2=16.081,P<0.05).LOXL2 mRNA高表达组和低表达组患者五年生存率分别为34.88%(15/43),78.72%(37/47).LOXL2 mRNA高表达组患者五年累积生存率明显低于低表达组,差异有统计学意义(Log-rank χ2=15.880,P<0.05).肺转移(OR=1.921,P<0.05),Eneeking分期Ⅲ期(OR=1.906,P<0.05),AHA1 mRNA高表达(OR=1.405,P<0.05),LOXL2 mRNA高表达(OR=1.733,P<0.05)是影响骨肉瘤患者不良生存预后的独立危险因素.结论 骨肉瘤组织中AHA1 mRNA,LOXL2 mRNA表达升高,两者表达与侵袭转移基因表达有关,是影响骨肉瘤患者不良生存预后的独立危险因素.

目的 探讨长链非编码 RNA(lncRNA)赖氨酰氧化酶样 1-反义 RNA1(LOXL1-AS1)、微小 RNA(miR)-3614-5p在急性心肌梗死患者血清中的表达水平,以及对心律失常的预测价值.方法 选择 2021 年 1 月—2023 年1 月西安交通大学第一附属医院心内科住院治疗急性心肌梗死患者148 例作为研究对象(急性心肌梗死组),根据患者是否发生心律失常,分为非心律失常亚组(n =96)和心律失常亚组(n =52),另选取同期与急性心肌梗死患者一般资料相匹配的健康体检者148 例为健康对照组.比较各组血清lncRNA LOXL1-AS1、miR-3614-5p水平;多因素Logistic回归分析急性心肌梗死后心律失常的影响因素;绘制受试者工作特征曲线(ROC)并计算曲线下面积(AUC)分析血清lncRNA LOXL1-AS1、miR-3614-5p水平对急性心肌梗死后心律失常的预测价值.结果 与健康对照组比较,急性心肌梗死组lncRNA LOXL1-AS1 水平升高,miR-3614-5p水平降低(t/P =16.248/<0.001、8.397/<0.001);心律失常亚组病变血管支数、lncRNA LOXL1-AS1 水平高于非心律失常亚组,左心室射血分数(LVEF)、miR-3614-5p水平低于非心律失常亚组[χ2(t)/P = 14.315/<0.001、7.312/<0.001、3.706/<0.001、7.656/<0.001];Target Scan Human网站预测结果显示,lncRNA LOXL1-AS1 与miR-3614-5p有结合位点,可能存在靶向关系;多因素Logistic回归分析结果显示,lncRNA LOXL1-AS1 高、病变血管支数多是急性心肌梗死后心律失常的危险因素,miR-3614-5p、LVEF高是保护因素[OR(95%CI)=3.542(1.589～7.896)、1.527(1.081～2.156)、0.721(0.601～0.865)、0.789(0.664～0.938)];lncRNA LOXL1-AS1、miR-3614-5p及二者联合预测急性心肌梗死后心律失常的AUC为0.820、0.890、0.932,二者联合优于各自单独预测(Z/P =3.470/0.001、2.293/0.022).结论 急性心肌梗死后心律失常患者血清lncRNA LOXL1-AS1 水平显著升高,miR-3614-5p水平显著降低,两者联合对急性心肌梗死后心律失常有较好的预测价值.

Objective:This study aimed to investigate the potential mechanisms by which lysyl oxidase like 3(LOXL3)affects the autophagy in chondrocytes in osteoarthritis(OA),specifically through the activation of mammalian target of rapamycin complex 1(mTORCl).Methods:To establish an OA model,rats underwent anterior cruciate ligament transection(ACLT).Chondrocytes were isolated from cartilage tissues and cultured.Western blotting was performed to assess the expression of LOXL3,Rheb,phosphorylation of p70S6K(p-p70S6K,a downstream marker of mTORC1),and autophagy markers.The autophagy of chondrocytes was observed using an immunofluorescence assay.Results:The expression levels of both LOXL3 and Rheb proteins were upregulated in chondrocytes isolated from the OA model cartilage,in comparison to those from the normal cartilage.The silencing of LOXL3 resulted in a decrease in the protein levels of Rheb and p-p70S6K,as well as an increase in the expression of autophagy-related proteins.Additionally,the effect of LOXL3 could be reversed through the silencing of Rheb.The results of the immunofluorescence assay confirmed the impact of LOXL3 and Rheb on chondrocyte autophagy.Conclusion:LOXL3 inhibits chondrocyte autophagy by activating the Rheb and mTORC1 signaling pathways.

背景:目前已有研究表明红景天苷对多器官纤维化具有改善作用,但红景天苷对血管紧张素Ⅱ引起心肌成纤维细胞纤维化的保护作用尚不明确.目的:探究红景天苷对血管紧张素Ⅱ诱导的SD大鼠心肌成纤维细胞氧化应激及细胞外基质沉积的保护作用及其作用机制.方法:血管紧张素Ⅱ诱导心肌成纤维细胞纤维化,实验分为5 组:正常对照组;模型组(培养基血管紧张素Ⅱ终浓度为1 μmol/L);红景天苷低剂量和高剂量组(加入红景天苷50,100 μmol/L处理2 h,再加入血管紧张素Ⅱ共同孵育48 h);SIRT1抑制剂组(加入SIRT1抑制剂EX527 10 μmol/L处理2 h,再加高剂量红景天苷处理2 h,再加血管紧张素Ⅱ共同孵育48 h).使用CCK8法检测各组细胞活力,Transwell检测细胞迁移率,DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧水平,试剂盒检测细胞内丙二醛含量、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性;采用Western blot和qRT-PCR法检测心肌成纤维细胞纤维化相关mRNA和蛋白的表达水平.结果与结论:①经Vimentin荧光鉴定实验细胞为心肌成纤维细胞;②与正常对照组相比,模型组细胞活力、细胞迁移率、活性氧水平、丙二醛含量显著增加,超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性明显降低,LOXL2、α-SMA、胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ mRNA和蛋白表达显著升高,SIRT1蛋白表达水平明显降低(均P＜0.01);与模型组相比,红景天苷低、高剂量组上述指标呈现相反的变化(均P＜0.05),且红景天苷呈剂量依赖性调控;与红景天苷组相比,SIRT1抑制剂组细胞迁移率、α-SMA蛋白表达水平显著增加(均P＜0.001);③结果表明,红景天苷对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞具有保护作用,能够剂量依赖性地抑制氧化应激和细胞外基质沉积.

目的 考察长链非编码RNA(lncRNA)LOXL1反义RNA 1(LOXL1-AS1)对氧糖剥夺(OGD)诱导的人脑微血管内皮细胞(HBMEC)凋亡和炎性因子表达的影响与机制.方法 将HBMEC分为对照组(正常培养)、OGD组(OGD损伤)、OGD+si-NC组(转染si-NC+OGD损伤)、OGD+si-LOXL1-AS1组(转染si-LOXL1-AS1+OGD损伤)、OGD+miR-NC组(转染miR-NC+OGD损伤)、OGD+miR-761组(转染miR-761 mimic+OGD损伤)、OGD+si-LOXL1-AS1+阴性对照组(转染si-LOXL1-AS1与anti-miR-NC+OGD损伤)、OGD+si-LOXL1-AS1+miR-761抑制剂组(转染si-LOXL1-AS1与miR-761 inhibitor+OGD损伤).RT-qPCR检测LOXL1-AS1和miR-761表达,CCK-8法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blotting检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)蛋白、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测炎性因子白细胞介素-6 IL-6、IL-1β和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.双荧光素酶报告实验检测LOXL1-AS1和miR-761的互补结合.结果 与对照组相比,OGD组HBMEC的LOXL1-AS1表达量、凋亡率、Bax表达量、IL-6、IL-1β和TNF-α水平均升高,存活率、Bcl-2表达量减少(均P＜0.05).抑制LOXL1-AS1后,与OGD组或OGD+si-NC组相比,OGD+si-LOXL1-AS1组HBMEC的LOXL1-AS1表达量、凋亡率、Bax表达量、IL-6、IL-1β和TNF-α水平降低,存活率、Bcl-2表达量增加(均P＜0.05).LOXL1-AS1靶向调控miR-761.过表达miR-761后,OGD+miR-761组HBMEC的存活率、Bcl-2表达量比OGD+miR-NC组增加,凋亡率、Bax表达量、IL-6、IL-1β和TNF-α水平均比OGD+miR-NC组降低(均P＜0.05).OGD+si-LOXL1-AS1+miR-761抑制剂组HBMEC的存活率、Bcl-2表达量低于OGD+si-LOXL1-AS1+阴性对照组,凋亡率、Bax表达量、IL-6、IL-1β和TNF-α水平高于OGD+si-LOXL1-AS1+阴性对照组(均P＜0.05).结论 抑制LOXL1-AS1表达可通过靶向上调miR-761促进OGD诱导的HBMEC细胞存活并抑制凋亡和炎性因子表达.

目的 探讨血清长链非编码核糖核酸(lncRNA)中的赖氨酰氧化酶样1(LOXL1-AS1)、肺腺癌转移性相关转录本1(MALAT1)与上皮性卵巢癌(EOC)患者临床病理特征、血清细胞凋亡分子和预后不良的关系.方法 选取2017年1月至2020年1月该院收治的EOC患者68例作为EOC组,另选取70例卵巢良性肿瘤患者作为良性组,选取同期体检健康者60例作为对照组;对比3组患者血清中lncRNA LOXL1-AS1与ln-cRNA MALAT1表达水平,以lncRNA LOXL1-AS1、lncRNA MALAT1表达水平中位值(1.90、1.38)分别将EOC患者分为lncRNA LOXL1-AS1低表达组(34例)和lncRNA LOXL1-AS1高表达组(34例),以及lncRNA MALAT1低表达组(33例)和lncRNA MALAT1高表达组(35例),对比EOC患者各表达组的临床病理特征、血清细胞凋亡分子[B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、生存素(Survivin)、B细胞CLI/淋巴瘤2关联凋亡基因1(Bag-1)]水平,并采用Pearson相关性分析法探讨其相关性;采用Kaplan-Meier生存曲线分析EOC患者各表达组的预后差异,多因素Cox分析EOC患者的预后不良的影响因素.结果 3组血清lncRNA LOXL1-AS1、lncRNA MALAT1、Bcl-2、Survivin、Bag-1 水平从高到低依次为 EOC 组、良性组、对照组(P＜0.05);血清Bax水平从低到高依次为EOC组、良性组、对照组(P＜0.05).不同年龄和病理类型的EOC患者lncRNA LOXL1-AS1、lncRNA MALAT1表达水平比较差异无统计学意义(P＞0.05),不同国际妇产科联盟(FIGO)分期、淋巴结转移、组织分期的EOC患者lncRNA LOXL1-AS1、lncRNA MALAT1表达水平比较差异有统计学意义(P＜0.05).lncRNA LOXL1-AS1、lncRNA MALAT1 高表达组 Bcl-2、Survivin、Bag-1 水平均高于 lncRNA LOXL1-AS1、lncRNA MALAT1 低表达组,Bax 水平低于lncRNA LOXL1-AS1、lncRNA MAL-AT1低表达组(P＜0.05).Pearson相关性分析结果显示,血清lncRNA LOXL1-AS1与lncRNA MALAT1表达水平均与Bcl-2、Survivin、Bag-1均呈正相关(P＜0.05),与Bax呈负相关(P＜0.05).随访2年后,ln-cRNA LOXL1-AS1低表达组累积生存率为85.29％,高于lncRNA LOXL1-AS1高表达组的55.88％,lncRNA MALAT1低表达组累积生存率为81.82％,高于1ncRN4AMALAT1高表达组的60.00％(P＜0.05).多因素Cox回归分析结果显示,淋巴结转移、lncRNA LOXL1-AS1与lncRNA MALAT1高表达是EOC患者预后不良的独立影响因素(P＜0.05).结论 EOC患者血清lncRNA LOXL1-AS1与lncRNA MALAT1水平呈高表达,且与淋巴结转移、FIGO分期、组织分期、凋亡因子表达及预后相关,其表达水平升高提示患者有EOC的可能,且其预后较差,检测血清lncRNA LOXL1-AS1与lncRNA MALAT1水平可能对EOC的诊断及治疗具有重要意义.

目的:研究胃癌患者抑郁情绪对幽门螺杆菌感染的影响及其与癌基因表达的相关性.方法:选择2O15年3月~2O17年2月期间在自贡市第三人民医院接受胃癌根治术的82例患者作为研究对象并根据术前HAMD评分分为抑郁组和非抑郁组,测定胃癌病灶内幽门螺旋杆菌感染情况以及增殖基因、侵袭基因的m RN A表达量.结果:抑郁组患者胃癌病灶内幽门螺旋杆菌阳性率显著高于非抑郁组;抑郁组胃癌病灶内LOXL2、RAB1A、U HRF1、Slug、ADAM8的mRNA表达量显著高于非抑郁组, MTS1、NOX、E-cadherin、TIMP1的mRNA表达量显著低于非抑郁组;幽门螺旋杆菌阳性的抑郁组胃癌病灶内LOXL2、RAB1A、U HRF1、Slug、ADAM8的mRNA表达量显著高于幽门螺旋杆菌阴性的抑郁组胃癌病灶,MTS1、NOX、E-cadherin、TIMP1的mRNA 表达量显著低于幽门螺旋杆菌阴性的抑郁组胃癌病灶.结论:抑郁情绪能够增加胃癌病灶内幽门螺旋杆菌的感染率并促进癌细胞的增殖、侵袭.

目的:研究压力性尿失禁患者盆底特征的超声定量评价及其与细胞外基质重塑、细胞凋亡的相关性.方法:选择在本院接受手术治疗的压力性尿失禁患者作为研究的SUI组,同期体检的女性健康志愿者作为研究的对照A组,同期因良性疾病接受子宫全切除术的患者作为研究的对照B组.术前测定SUI组和对照A组受试者盆底特征的超声参数,术后测定SUI组和对照B组患者胶原代谢指标、细胞外基质代谢指标、细胞凋亡基因的含量.结果:SUI组患者盆底超声参数BND、R-RVA、V-RVA、UR的水平均显著高于对照A组;SUI组患者盆底组织中Col-Ⅰ、Col-Ⅱ的含量以及Fibulin-5、LOX、LOXL1的mRNA表达量均显著低于对照B组且与盆底超声参数BND呈负相关,ICTP的含量以及Calpain1、Calpain2、Caspase-3、LC3-Ⅱ、Beclin-1的mRNA表达量显著高于对照B组且与盆底超声参数BND呈正相关.结论:压力性尿失禁患者存在盆底支持结构薄弱、尿道活动性增高的超声特征,胶原代谢异常及细胞过度凋亡与盆底改变密切相关.

微小RNA(miRNA)和长链非编码RNA(lncRNA)均属于非编码RNA.miRNA是一段由20~24个核苷酸组成的高度保守单链非编码RNA,其可以特异性结合目标mRNA的3'非翻译区,从而诱导目标mRNA降解或抑制其翻译,最终影响细胞增殖、分化以及凋亡等生物功能.lncRNA是一段长度大于200 bp的单链非编码RNA,其可调节细胞分裂、生长、分化以及凋亡等重要的生物学过程.研究表明miRNA或lncRNA的异常表达可导致晶状体正常发育过程紊乱,晶状体上皮细胞凋亡,纤维细胞排列混乱,晶状体透明度降低,从而导致白内障发生.本文主要总结7种miRNA(miRNA-184、miRNA-204、let-7、miRNA-29、miRNA-16、miRNA-125b、miRNA-34a)以及两种lncRNA(类赖氨酰氧化酶1的反义RNA1、心肌梗死相关转录本)在晶状体发育和白内障形成中的作用机制,为临床寻找白内障防治的新靶点提供思路.