目的:探索单独针对直肠乙状结肠交界处癌(RSC)的危险因素和生物标志物来预测患者预后并开发新的治疗靶点。方法:本研究从肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库中收集66例肿瘤和6例正常组织，使用PERL和R软件包综合分析23个m6A调控因子的表达水平、突变情况及与RSC患者预后的关系，通过确定了lncRNAs和m6A的关系，进一步利用Lasso回归构建预后模型。结果:与邻近正常组织比较，23个m6A调节因子中有7个在RSC中存在差异表达，并且有5个m6A调节因子与患者预后相关( P<0.05)。共表达分析结果显示，278个lncRNA的表达与m6A密切相关，许多lncRNAs是预测RSC预后的危险因素( P<0.05)。m6A-lncRNAs在肿瘤组织中表达异常( P<0.05)，可用于预测RSC预后的模型，不受其他临床特征影响。通过LASSO回归，基于3个m6A-lncRNAs分子MCM3AP-AS1、AF117829.1和HCG15建立RSC的预后模型，生存曲线证明了该模型在预测患者生存率方面具有较高的准确性( P<0.05)，该模型可以应用于不同临床分层亚组的预后判断。 结论:m6A甲基化修饰异常及m6A相关lncRNAs与RSC的发生密切相关，相应的预后模型可以为RSC患者的预后评估和个性化治疗策略提供依据。

目的:探讨长链非编码RNA MCM3AP-AS1（MCM3AP antisense RNA 1，MCM3AP-AS1）靶向调控微小RNA-876-5p（miR-876-5p）对卵巢癌SKOV3细胞增殖和转移的影响。方法:选取2017年4月至2018年5月温州市中心医院妇产科收治的40例卵巢癌患者癌组织和相应癌旁组织标本，及卵巢癌细胞系（CaOV3、SKOV3、OVCAR3、OV90）和正常卵巢上皮细胞系（HOSE）。采用实时定量聚合酶链式反应法（qRT-PCR）检测卵巢癌组织和细胞中lncRNA MCM3AP-AS1的表达水平；建立lncRNA MCM3AP-AS1低表达模型，采用MTT实验检测卵巢癌细胞增殖，采用transwell检测卵巢癌细胞的迁移和侵袭水平；采用生物信息分析、荧光素酶实验、qRT-PCR验证lncRNA MCM3AP-AS1和miR-876-5p的靶向关系。结果:lncRNA MCM3AP-AS1在卵巢癌组织中的水平为（8.45±0.86），高于癌旁组织（4.45±0.45）；在卵巢癌细胞中的水平为CaOV3（1.53±0.12），SKOV3（1.82±0.23），OVCAR3（1.34±0.12），高于正常卵巢上皮细胞HOSE（1.00±0.10）；下调lncRNA MCM3AP-AS1能降低卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭；lncRNA MCM3AP-AS1能与miR-876-5p相互作用并下调其表达。结论:lncRNA MCM3AP-AS1可通过靶向抑制miR-876-5p促进卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

目的:探讨长链非编码核糖核酸(lncRNA)微小染色体维持蛋白3相关蛋白-反义链1(MCM3AP-AS1)调节微小核糖核酸(miR)-424-5p/磷酸丝氨酸氨基转移酶1(PSAT1)轴对乳腺癌恶性进展的影响.方法:采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测人正常乳腺上皮细胞MCF-10A和乳腺癌细胞株MDA-MB-231、BT549、BT20中LncRNA MCM3AP-AS1、miR-424-5p和PS AT1信使核糖核酸(mRNA)的表达水平.构建LncRNA MCM3AP-AS1低表达模型、miR-424-5p敲低与过表达模型,并使用RT-qPCR方法验证转染模型构建的成功.分别采用四氮甲基唑蓝(MTT)法、Transwell实验检测乳腺癌细胞株的增殖、迁移、侵袭能力.免疫印迹法检测各组MDA-MB-231细胞中细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和PS AT1蛋白的表达.经生物信息学分析后,采用双荧光素酶报告基因实验与RNA免疫共沉淀(RIP)实验分别验证LncRNA MCM3AP-AS1与miR-424-5p、miR-424-5p与PSAT1之间的靶向关系.结果:在乳腺癌细胞株MDA-MB-231、BT549、BT20 中 MCM3AP-AS1、PSAT1 mRNA 的表达水平显著高于 MCF-10A(P＜0.05),miR-424-5p 表达水平显著低于MCF-10A(P＜0.05).敲低MCM3AP-AS1或过表达miR-424-5p均可以降低MDA-MB-231细胞的吸光度(OD490)值、细胞迁移数目和细胞侵袭数目、CyclinD1、N-cadherin和PS AT1蛋白表达水平(P＜0.05),提高细胞E-cadherin蛋白表达水平(P＜0.05).敲低miR-424-5p的表达逆转了下调MCM3AP-AS1对MDA-MB-231细胞增殖、迁移和侵袭以及相关蛋白表达的影响.双荧光素酶报告基因实验与RIP实验证实MCM3AP-AS1靶向负调控miR-424-5p表达,miR-424-5p靶向负调控PSAT1的表达.结论:LncR-NA MCM3AP-AS1在乳腺癌中呈高表达,其低表达可通过靶向调节miR-424-5p/PSAT1轴抑制乳腺癌的恶性进展.

目的:探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)微小染色体维持蛋白3相关蛋白-反义链1(MCM3AP-AS1)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及其临床意义.方法:使用实时定量PCR检测MCM3AP-AS1在NSCLC组织、癌旁组织和细胞系中的表达.CCK-8用于评估MCM3AP-AS1对NSCLC细胞顺铂敏感性的影响.使用生物信息学预测、萤光素酶报告基因测定来确定miR-195是否是MCM3AP-AS1的靶标.结果:MCM3AP-AS1在NSCLC组织和细胞系中过表达.MCM3AP-AS1-shRNA显著增加NSCLC细胞对顺铂的敏感性.使用萤光素酶报告基因测定法证实MCM3AP-AS1可以调控miR-195的功能.此外,上调MCM3AP-AS1表达显著降低NSCLC细胞对顺铂的敏感性.结论:MCM3AP-AS1可能通过与miR-195的竞争性结合抑制NSCLC对顺铂的敏感性,并且提示了抗NSCLC治疗的潜在新策略.

目的:探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA,LncRNA) MCM3AP-AS1在乳腺癌患者中的表达及其临床病理意义.方法:收集老年女性(年龄≥60岁)晚期乳腺癌患者肿瘤组织穿刺标本64例,应用qRT-PCR技术检测肿瘤组织中的Ln-cRNA MCM3AP-AS1表达情况,免疫组化检测乳腺癌组织样本中的雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progester-one receptor,PR)、人表皮生长因子受体-2(human epidermal growth factor receptor-2,Her-2)、Ki-67抗原、Dickkopf相关蛋白1(Dickkopf-related protein 1,Dkk1)蛋白表达情况.Her-2免疫组化结果2+的患者进一步行荧光原位杂交试验(FISH)检测.分析LncRNA MCM3AP-AS1表达情况与乳腺癌患者临床病理之间的关系及对预后的影响.结果:组织分化差及ER、PR阴性的乳腺癌患者肿瘤组织中LncRNA MCM3AP-AS1的表达明显升高(P＜0.01).LncRNA MCM3AP-AS1的表达与是否存在肺、肝、脑转移均无相关性,但与骨转移关系密切(P＜ 0.01).激素受体阴性、Her-2阳性、Dkk1阳性的患者更容易发生骨转移(P＜0.0i).LncRNA MCM3AP-AS1高表达的乳腺癌患者无进展生存期明显低于低表达组(P＜0.01).结论:LncRNA MCM3AP-AS1与女性乳腺癌的恶性生物学行为关系密切.检测LncRNA MCM3AP-AS1表达对明确乳腺癌发病、转移机制及判断乳腺癌患者预后具有潜在的价值.

目的 探讨长链非编码RNA微小染色体维系蛋白3结合蛋白反义1(lncRNA MCM3AP-AS1)参与细胞因子诱导杀伤(CIK)细胞杀伤肺癌细胞过程中的调控作用,并确定MCM3AP-AS1的发挥功能的靶基因和分子机制.方法 细胞计数试剂盒(CCK-8)法测定CIK细胞对A549细胞的杀伤效应.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测与CIK细胞共培养前后A549细胞中MCM3AP-AS1和miR-524-5p的表达水平.流式细胞术检测CIK细胞共培养前后A549细胞凋亡情况.将MCM3AP-AS1过表达载体、miR-524-5p抑制物、pcDNA-MCM3AP-AS1+miR-524-5p分别转染A549细胞,与CIK细胞共培养后,流式细胞术检测A549细胞凋亡变化.双荧光素酶报告基因实验和RT-qPCR验证MCM3AP-AS1对miR-524-5p的靶向作用.结果 CIK细胞大体以时间、浓度依赖性方式杀伤肺癌细胞,选择效靶比20:1作用12 h进行后续研究.与CIK细胞共培养后,A549细胞MCM3AP-AS1的表达显著降低,miR-524-5p的表达显著升高,A549细胞凋亡率显著增加(P<0.05).过表达MCM3AP-AS1或干扰miR-524-5p表达后,CIK细胞对A549细胞的凋亡促进作用显著降低(P<0.05).MCM3AP-AS1靶向负性调控miR-524-5p表达.过表达miR-524-5p可以逆转过表达MCM3AP-AS1对CIK细胞诱导的A549细胞凋亡的影响(P<0.05).结论 CIK细胞通过调控MCM3AP-AS1/miR-524-5p通路促进肺癌细胞凋亡,为CIK细胞治疗肺癌提供新的依据.

目的 研究LncRNA MCM3AP-AS1对肺癌细胞增殖、迁移侵袭的影响和潜在机制.方法 以BEAS-2B为对照组,实时荧光定量(qRT)-聚合酶链反应(PCR)检测MCM3AP-AS1和miR-16-5p RNA的表达,四氮唑蓝(MTT)法测定A549细胞增殖活性,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,Western印迹检测增殖蛋白CyclinD1、p21和p27及迁移蛋白基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9和MMP-14,双荧光素酶报告系统验证MCM3AP-AS1和miR-16-5p的关系.结果 与对照组相比,肺癌细胞系A549、SPC-A1和NCI-H460中MCM3AP-AS1表达量均显著升高(P<0.05),miR-16-5p表达量显著下降(P<0.05);抑制MCM3AP-AS1表达和过表达miR-16-5p均可抑制A549细胞增殖、迁移和侵袭;MCM3AP-AS1靶向负向调控miR-16-5p的表达;抑制miR-16-5p表达逆转了下调MCM3AP-AS1表达对A549细胞增殖、迁移、侵袭的作用.结论 LncRNA MCM3AP-AS1通过靶向miR-16-5p调控肺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭.MCM3AP-AS1是肺癌潜在分子靶点.

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)微小染色体维持蛋白3相关蛋白-反义链1(MCM3AP-AS1)靶向调控miR-876-5p对结直肠癌(CRC)细胞的增殖和迁移的作用.方法 实时定量聚合酶链式反应法(RT-qPCR)检测CRC组织和细胞中MCM3AP-AS1的表达;用MTT法、划痕愈合实验和Transwell小室法检测CRC细胞的增殖和迁移;采用生物信息分析、双荧光素酶基因报告实验、RT-qPCR验证MCM3AP-AS1和miR-876-5p的靶向关系.结果 与非肿瘤组织和正常结直肠上皮细胞系相比,MCM3AP-AS1在CRC组织和细胞系中表达上调(P<0.05);敲低MCM3AP-AS1能抑制CRC细胞增殖和迁移(P<0.05);生物信息学分析、双荧光素酶基因报告实验和RT-qPCR表明MCM3AP-AS1与miR-876-5p可相互作用;miR-876-5p可削弱MCM3AP-AS1对CRC细胞增殖和迁移的促进作用(P<0.05).结论 MCM3AP-AS1可以通过吸附miR-876-5p促进CRC细胞的增殖和迁移.

目的 探讨lncRNA MCM3AP-AS1对氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖和凋亡的影响及作用机制.方法 用10 mg/L OX-LDL诱导HUVEC细胞48 h,qRT-聚合酶链反应(PCR)检测细胞中MCM3AP-AS1、miR-205-5p和神经生长调节因子(NEGR)1 mRNA表达水平,Western印迹检测NEGR1蛋白表达.分别转染MCM3AP-AS1小干扰RNA、NEGR1小干扰RNA、miR-205-5p模拟物(mimics)或共转染MCM3AP-AS1小干扰RNA与NEGR1过表达载体至HUVEC细胞,然后再用10 mg/L OX-LDL干预48 h后,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western印迹检测细胞中细胞周期蛋白(Cyclin)D1和活化的半胱天冬酶(Cleaved-caspase-3)蛋白表达.双荧光素酶报告基因实验验证MCM3AP-AS1与miR-205-5p、miR-205-5p与NEGR1的调控关系.结果 OX-LDL诱导HUVEC细胞后,细胞中MCM3AP-AS1水平、NEGR1 mRNA和蛋白水平明显升高,miR-205-5p水平明显降低(均P<0.05).下调MCM3AP-AS1、下调NEGR1或上调miR-205-5p均提高了OX-LDL诱导的HUVEC细胞存活率和CyclinD1蛋白表达,而降低了细胞凋亡率和Cleaved-caspase-3蛋白表达(均P<0.05).MCM3AP-AS1靶向负调空miR-205-5p表达,NEGR1是miR-205-5p的靶基因.上调NEGR1逆转了下调MCM3AP-AS1对OX-LDL诱导的HUVEC细胞增殖和凋亡的影响.结论 下调MCM3AP-AS1可能通过调控miR-205-5p/NEGR1轴促进OX-LDL诱导的HUVEC细胞增殖,并降低细胞凋亡.

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)微小染色体维持蛋白3相关蛋白反义链1(MCM3AP-AS1)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、侵袭、迁移的影响及作用机制.方法 体外培养A549肺癌细胞株,并将其分为空白对照(Control)组、阴性对照(NC)组、过表达MCM3AP-AS1组和敲低sh-MCM3AP-AS1组.NC组利用空载质粒转染A549肺癌细胞;过表达MCM3AP-AS1组利用lncRNA MCM3AP-AS1过表达质粒转染A549肺癌细胞;sh-MCM3AP-AS1组使用干扰RNA(siRNA)敲低lncRNA MCM3AP-AS1并转染A549肺癌细胞.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测lncRNA MCM3AP-AS1的相对表达量;CCK8实验检测肺癌细胞的增殖情况;Transwell和划痕实验检测肺癌细胞的侵袭和迁移情况.结果 与Control组相比,NC组lncRNA MCM3AP-AS1水平及肺癌细胞增殖、侵袭和迁移情况均无明显变化(P>0.05),过表达MCM3AP-AS1组lncRNA MCM3AP-AS1水平及肺癌细胞增殖、侵袭和迁移均明显增强(P<0.05),sh-MCM3AP-AS1组lncRNA MCM3AP-AS1水平及肺癌细胞增殖、侵袭和迁移均明显减弱(P<0.05).结论 过表达NSCLC细胞中的lncRNA MCM3AP-AS1水平可促进肺癌细胞的增殖、侵袭及迁移;敲低NSCLC细胞中的lncRNA MCM3AP-AS1水平可抑制肺癌细胞的增殖、侵袭及迁移.