目的:探讨miRNA-30a-5p（miR-30a-5p）与异黏蛋白（MTDH）体外对人乳腺癌细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响。方法:利用癌症基因组图谱（TCGA）数据库数据，分析数据库中112例乳腺癌患者癌及癌旁组织MTDH和103例乳腺癌患者癌及癌旁组织miR-30a-5p的表达情况；采用Pearson相关性分析法分析数据库中1 222例乳腺癌患者MTDH与miR-30a-5p的相关性；数据更新时间为2022年8月。将乳腺癌MDA-MB-231细胞分为阴性对照组（转染阴性对照序列）、miR-30a-5p过表达组（转染miR-30a-5p模拟物）、siMTDH组[转染针对MTDH基因的小干扰RNA（siMTDH）]、siMTDH+miR-30a-5p过表达组（同时转染siMTDH、miR-30a-5p模拟物）；采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞增殖能力，采用细胞划痕实验检测细胞迁移能力，Transwell法检测细胞侵袭能力，采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测细胞miR-30a-5p、MTDH、基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9、波形蛋白（vimentin）和β-catenin mRNA的相对表达量，采用蛋白质印迹法检测MTDH、N-钙黏蛋白（N-cad）、β-catenin、Snail和MMP-9蛋白的表达。结果:TCGA数据库中，乳腺癌组织中MTDH表达水平较癌旁组织高，miR-30a-5p表达水平较癌旁组织低，差异均有统计学意义（均 P<0.001）；1 222例乳腺癌患者MTDH与miR-30a-5p表达呈负相关（ r=-0.134， P<0.001）。与阴性对照组比较，siMTDH组和miR-30a-5p过表达组24、48、72h细胞增殖能力均降低（均 P<0.001）。miR-30a-5p过表达组、siMTDH组细胞划痕愈合率均低于阴性对照组[（61.6±1.6）%、（54.7±5.9）%比（80.3±3.0）%]（均 P<0.05）。迁移细胞数均低于阴性对照组[（881±50）个、（725±63）个比（1 172±66）个]（均 P<0.05）。与阴性对照组相比，miR-30a-5p过表达组、siMTDH组MDA-MB-231细胞MMP-2、MMP-9、vimentin和β-catenin mRNA的相对表达量均较阴性对照组下调（均 P<0.05）。miR-30a-5p过表达组、siMTDH组MDA-MB-231细胞N-cad、β-catenin、Snail和MMP-9蛋白的相对表达量均较阴性对照组下调（均 P<0.05）。与siMTDH组比较，siMTDH+miR-30a-5p过表达组MDA-MB-231细胞迁移数差异无统计学意义[（476±5）个比（389±46）个， t=3.37， P=0.078]，siMTDH+miR-30a-5p过表达组与miR-30a-5p过表达组迁移细胞数比较，差异亦无统计学意义[（476±5）个比（477±22）个， t=0.02， P=0.983]。 结论:乳腺癌组织中miR-30a-5p与MTDH表达呈负相关，在体外，乳腺癌MDA-MB-231细胞过表达miR-30a-5p或沉默MTDH均可抑制细胞增殖、侵袭、迁移，但MTDH可能不是miR-30a-5p的靶基因。

乳腺癌作为威胁女性健康的第一大癌,其治疗策略需要不断更新和完善.基因MTDH作为一个铁死亡过程的驱动基因,在乳腺癌中具有潜在的治疗价值.全文概述了MTDH在乳腺癌转移、耐药、免疫微环境、癌细胞干性中的作用以及其与铁死亡的相关性,显示其作为乳腺癌治疗的特异性靶标具有巨大潜力,但缺乏足够的临床研究数据支持.深入探索MTDH与乳腺癌及免疫的关系,有望找到新型治疗方法,克服目前乳腺癌治疗面临的转移及耐药难题,改善乳腺癌患者的治疗效果和预后.

目的:探讨异黏蛋白(metadherin,MTDH)干扰是否通过提高胶质瘤替莫唑胺(temozolomide,TMZ)耐药株的药物敏感性促进细胞凋亡.方法:基于培养的U251人神经胶质瘤细胞和U251MG/TMZ人星形胶质瘤耐替莫唑胺细胞,通过qRT-PCR检测细胞中MTDH、miR-1471和miR-153-3p的表达.根据人MTDH的序列合成siRNA/NC,并转染至U251MG/TMZ细胞中.通过CCK8检测细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞的凋亡,Western blot法检测耐药相关基因的表达.采用不同浓度的替莫唑胺(2.5、5、10、20、40、80、160 μmol/L)作用于转染si-MTDH/NC的U251MG/TMZ细胞,48 h后通过CCK8法检测细胞增殖.结果:U251MG/TMZ细胞中具有高表达的MTDH和低表达的miR-1471、miR-153-3p.与Control组比较,U251MG/TMZ组细胞的增殖能力显著增加,凋亡率显著降低,MTDH、ABCG2、MGMT和Pgp的mRNA表达显著增加,MTDH、ABCB1、MGMT、ABCG2和p-AKT1的蛋白表达显著增加.与NC组比较,si-MTDH组细胞的增殖能力显著降低,凋亡率显著增加,MTDH、ABCG2、MGMT和Pgp的mRNA表达显著降低,MTDH、ABCB1、MGMT、ABCG2和p-AKT1的蛋白表达显著降低.结论:MTDH干扰通过提高胶质瘤替莫唑胺耐药株的药物敏感性促进细胞凋亡,其机制可能与AKT1通路有关.

Endometriosis is a common chronic gynecological disease with endometrial cell implantation outside the uterus.Angiogenesis is a major pathophysiology in endometriosis.Our previous studies have demon-strated that the prodrug of epigallocatechin gallate(ProEGCG)exhibits superior anti-endometriotic and anti-angiogenic effects compared to epigallocatechin gallate(EGCG).However,their direct binding targets and underlying mechanisms for the differential effects remain unknown.In this study,we demonstrated that oral ProEGCG can be effective in preventing and treating endometriosis.Additionally,1D and 2D Proteome Integral Solubility Alteration assay-based chemical proteomics identified metadherin(MTDH)and PX domain containing serine/threonine kinase-like(PXK)as novel binding targets of EGCG and ProEGCG,respectively.Computational simulation and BioLayer interferometry were used to confirm their binding affinity.Our results showed that MTDH-EGCG inhibited protein kinase B(Akt)-mediated angiogenesis,while PXK-ProEGCG inhibited epidermal growth factor(EGF)-mediated angiogenesis via the EGF/hypoxia-inducible factor(HIF-1a)/vascular endothelial growth factor(VEGF)pathway.In vitro and in vivo knockdown assays and microvascular network imaging further confirmed the involvement of these signaling pathways.Moreover,our study demonstrated that ProEGCG has superior therapeutic effects than EGCG by targeting distinct signal transduction pathways and may act as a novel anti-angiogenic therapy for endometriosis.

目的:探讨血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)及食管鳞癌组织异黏蛋白(MTDH)表达水平与食管鳞癌患者临床预后的相关性.方法:以我院于2019年4月至2021年4月收治的食管鳞癌患者88例为研究对象.收集患者临床病理特征及血清TGF-β1、Bcl-2及食管鳞癌组织MTDH表达水平,分析不同病理特征患者血清TGF-β1、Bcl-2及食管鳞癌组织MTDH表达水平的差异.随访2年,按是否死亡将患者分为存活组、死亡组,比较两组患者血清TGF-β1、Bcl-2及食管鳞癌组织MTDH表达水平.经Spearson相关分析,分析血清TGF-β1、Bcl-2及食管鳞癌组织MTDH表达水平与临床预后的相关性.经受试者工作曲线(ROC)评估血清TGF-β1、Bcl-2及食管鳞癌组织MTDH表达水平预测食管鳞癌患者预后的价值.结果:Ⅲ+Ⅳ期食管鳞癌患者TGF-β1、Bcl-2、MTDH表达水平高于Ⅰ+Ⅱ期患者;低分化食管鳞癌患者TGF-β1、Bcl-2、MTDH表达水平高于中高分化患者;存在淋巴结转移食管鳞癌患者TGF-β1、Bcl-2、MTDH表达水平高于无淋巴结转移患者(P＜0.05).死亡组患者TGF-β1、Bcl-2、MTDH表达水平高于存活组(P＜0.05).Spearson分析结果显示,血清TGF-β1、Bcl-2及组织MTDH表达水平与TNM分期、分化程度、淋巴结转移呈正相关,r值0.264～0.523不等(P＜0.05),与预后呈中高强度正相关,r值依次为0.532、0.478、0.636(P＜0.05).ROC结果显示:TGF-β1、Bcl-2、MTDH表达水平评估食管鳞癌预后预测价值较佳,AUC值依次为0.874、0.793、0.893;以MTDH预测价值最佳,灵敏度、特异度分别为93.70％、78.57％,此时最佳截断值为1.45.结论:食管鳞癌患者血清TGF-β1、Bcl-2及食管鳞癌组织MTDH表达水平与临床病理特征及预后均呈正相关,通过监测TGF-β1、Bcl-2及MTDH表达便于及时了解病情进展,且对预后评估具有较好预测价值.

背景与目的:长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因5(long non-coding RNA small nucleolar RNA host gene 5,lncRNA SNHG5)在多种癌症中发挥促癌作用,但其对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)的影响和调节机制尚不清楚.本研究旨在探究lncRNA SNHG5/miR-26a-5p/异粘蛋白(metadherin,MTDH)信号轴促进CRC转移的机制.方法:分析癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中的数据,探索CRC中异常表达的lncRNA并进行生存分析.收集2020年10月—2021年10月经手术切除的100例CRC、癌旁组织样本及患者的完整临床资料,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测lncRNA SNHG5、miR-26a-5p表达水平,采用免疫组织化学法检测MTDH的表达水平,分析lncRNA SNHG5在CRC中的相对表达水平与临床病理学特征及生存期的关系.通过细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)检测、克隆形成、划痕、transwell实验及体内异种移植实验检测lncRNA SNHG5对CRC细胞增殖、迁移及侵袭的影响,通过蛋白质印迹法(Western blot)和免疫组织化学检测CRC细胞转移、上皮-间充质转化相关分子表达水平与lncRNA SNHG5表达水平的关系.通过RNA下拉实验、双荧光素酶报告基因检测、RNA免疫共沉淀实验探究SNHG5与miR-26a-5p、MTDH与miR-26a-5p在物理上的相互作用,通过CCK-8、EdU、transwell实验验证三者在功能上的相互关系,采用Western blot检测分析SNHG5、miR-26a-5p、MTDH表达对迁移、侵袭相关分子的影响.结果:TCGA数据库分析结果显示,lncRNA SNHG5在CRC中显著上调.RTFQ-PCR和免疫组织化学检测结果显示,CRC组织中lncRNA SNHG5、MTDH水平显著上调(P＜0.05),miR-26a-5p水平下降(P＜0.05),SNHG5高表达的样本中MTDH水平也较高.浆膜及浆膜外浸润、远处转移、淋巴结转移、TNM Ⅲ期的CRC组织lncRNA SNHG5表达量高于浆膜下浸润、无远处转移、无淋巴结转移、TNM Ⅰ～Ⅱ期的组织,差异有统计学意义(P＜0.05).生存分析结果显示,lncRNA SNHG5高表达与总生存率显著相关(P＜0.05).过表达lncRNA SNHG5能够提升CRC细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力,促进移植瘤生长和肺转移,提高Ki-67增殖指数和波形蛋白(vimentin)的相对表达水平(P＜0.05),降低E-钙粘蛋白(E-cadherin)的相对表达水平(P＜0.05),而抑制lncRNA SNHG5表达后CRC细胞的发展受到抑制.RNA下拉实验、双荧光素酶报告基因检测、RNA免疫共沉淀实验证实SNHG5与miR-26a-5p、MTDH及miR-26a-5p存在物理上的相互作用,在lncRNA SNHG5过表达细胞中上调miR-26a-5p或下调MTDH表达可部分逆转lncRNA SNHG5对CRC细胞增殖、迁移、侵袭及相关分子表达水平的影响.结论:LncRNA SNHG5在CRC组织和细胞中表达上调,其高表达与肿瘤进展及生存不良有关,可作为miR-26a-5p的分子海绵调节MTDH表达促进SW620细胞增殖和转移.

目的:探讨异黏蛋白(MTDH)和程序性死亡因子10(PDCD10)在结直肠癌组织中的水平及临床意义.方法:选取2014年12月-2015年12月55例结直肠癌和55例肠息肉患者.采用实时荧光定量技术(RT-PCR)检测MTDH和PDCD10.结果:经RT-PCR检测,结直肠癌组织MTDH、PDCD10mRNA高于癌旁组织、肠息肉组织,差异有统计学意义(P＜0.05);癌旁组织、肠息肉组织MTDH、PD-CD10 mRNA水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结直肠癌组织中MTDH、PDCD10 mRNA的水平在不同年龄、性别患者之间差异无统计学意义(P＞0.05),随着患者恶性程度的增加,MTDH、PDCD10mRNA水平不断升高,结直肠癌组织中MTDH、PDCD10表达与患者TNM分期、是否伴肝转移、出现淋巴结转移有关(P＜0.05).Ⅲ～Ⅳ期、伴盱转移和淋巴结转移的结直肠癌患者,组织中MTDH、PDCD10表达高于Ⅰ～Ⅱ期、无肝转移和淋巴结转移的结直肠癌患者(P＜0.05).结直肠癌组织中MTDH的表达与PDCD10的表达呈正相关(r=0.409,P=0.012).结论:结直肠癌组织中MTDH、PDCD10的表达高于正常组织和肠息肉组织.结直肠癌组织中MTDH、PDCD10与TNM分期、分化程度、远处转移及伴肝转移有关.

目的 研究异粘蛋白(MTDH)和跨膜蛋白16a (Tmem16a)在脉络膜黑色素瘤中的表达及临床意义.方法 选择25例(25只眼)确诊的脉络膜黑色素瘤术后组织为实验组,另取瘤旁正常脉络膜组织15例(15只眼)作为对照组,采用免疫组化法检测其MTDH 、Tmem16a蛋白表达情况,分析MTDH、Tmem16a蛋白表达情况和患者临床特征之间的关系.结果 实验组MTDH、Tmem16a阳性表达率分别为60％、52％,均明显高于对照组(P＜0.05).MTDH、Tmem16a蛋白表达与脉络膜恶性黑色素瘤巩膜浸润程度及远处转移相关(P＜0.05);与年龄、性别、肿瘤大小无关(P＞0.05).结论 MTDH、Tmem16a在脉络膜黑色素瘤中呈高表达,且与巩膜浸润程度及远处转移相关,可能成为临床诊治脉络膜黑色素瘤的重要指标.

目的 检测胃腺癌中异黏蛋白(MTDH)和原癌基因C-myc的表达,关注二者在不同临床特征中的表达差异及相关性.方法 87例胃腺癌患者肿瘤组织为观察组,45例正常胃黏膜组织为对照组.采用免疫组织化学染色方法检测两组中MTDH和C-myc的表达.结果 两组中MTDH和C-myc的表达差异有统计学意义.观察组中MTDH和C-myc的表达均与肿瘤的最大径和增殖指数相关,MTDH表达与分化程度相关,C-myc表达与肿瘤淋巴结转移相关.相关分析显示观察组MTDH和C-myc的表达呈正相关.结论 胃腺癌术后组织中MTDH和C-myc表达明显增加,可以促进胃黏膜上皮的癌变过程,同时对肿瘤的进展有一定价值,二者有一定协同作用.

OBJECTIVE To detect the reversal effect of Guizhi Fuling Wan on cisplatin-resistant ovarian cancer SKOV3/DDP cells and its relationship with protein expression of phosphatase and tensin homolog (PTEN) and metadherin (MTDH). METHODS Guizhi Fuling Wan (GFW) concentrated solution was prepared according to the Chinese Pharmacopoeia 2015 edition, Wistar rats were given GFW viagavage at 4 g·kg-1·d-1,8 g·kg-1·d-1,16 g·kg-1·d-1,or given saline as blank control for 5 days.Blood samples were taken and the corresponding drug-containing low-dose sera, medium-dose sear, high-dose sera and blank sera were prepared.The XCELLigence RTCA S16 real-time label-free cell analyzer was used to detect the reversal effect by the sera combined with cisplatin or paclitaxel in SKOV3/DDP cells. Annexin V-FITC and PI double-staining were used to detect the apoptosis-inducing effect of the sera in the cells. RT-qPCR and western blot were used to detect the mRNA and protein expression of PTEN and MTDH after the cells treated with the sera. RESULTS The inhibition rate of low-dose sera against SKOV3/DDP cells was less than 5%.After the low-dose sera combined with cisplatin or pacli-taxel, the IC50 of SKOV3/DDP cells against cisplatin and paclitaxel decreased by 3.01 and 1.79-fold, respectively.The total apoptosis rates induced by the low-dose sera,medium-dose sear,high-dose sera and blank sera in SKOV3/DDP cells were 11.08±0.13,19.42±0.30,24.23±0.31,and 3.21±0.24,respec-tively; there was a significant difference between the groups (P<0.01). RT-qPCR results showed that, compared with the blank serum, the sera can up-regulate the expression of PTEN mRNA and down-regulate the expression of MTDH mRNA in a dose-dependent manner. Western blot results showed that the induction effect to PTEN protein and the inhibition effect to MTDH protein by the sera were gradually enhanced with thesera dose increasement. CONCLUSION The resistance reversal effect of Guizhi Fuling Wan on ovarian cancer SKOV3/DDP cells may be related to the inhibition of MTDH, up-regulation of PTEN and induction of apoptosis, providing with an experiment basis for the applica-tion of Guizhi Fuling Wan as a reversal agent for chemotherapy resistance of ovarian cancer.