目的 探讨循环微小核糖核酸(miR)-126-3p在非小细胞肺癌(NSCLC)中表达及诊断价值.方法 收集多中心miR芯片及测序数据探讨NSCLC的循环miR-126-3p的表达差异.为了评估循环miR-126-3p综合表达水平,计算标准化均数差(SMD)和综合受试者工作特征(sROC)曲线,分析sROC曲线的曲线下面积(AUC),探讨灵敏度、特异度、阳性阴性似然比,并结合组织进一步综合分析循环miR-126-3p表达.通过miRDB、starBase v2.0和TargetScan 7.1,结合NSCLC中的上调差异基因,利用互补序列方法筛选了循环miR-126-3p潜在靶基因.结果 基于6项循环miR数据集发现循环miR-126-3p表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),受试者工作曲线显示循环miR-126-3p有较强的诊断效能(AUC＞0.5),而在199例NSCLC组中综合表达低于对照组(SMD=-1.46).sROC曲线显示循环miR-126-3p区分NSCLC组和对照组有高准确性(AUC=0.91),Egger's检验不存在发表偏倚(P＞0.05),灵敏度、特异度均≥0.80,阳性似然比、阴性似然比为5.37和0.18.此外,对26个数据集1 320例NSCLC循环和组织综合分析显示,循环miR-126-3p在NSCLC组中表达低于对照组(SMD=-2.07).sROC曲线显示低表达的循环miR-126-3p在区分NSCLC组和对照组有高准确性(AUC=0.97).此外,筛选得到循环miR-126-3p的潜在靶基因ADAM9和SLC7A5在NSCLC组中表达均高于对照组.结论 低表达的循环miR-126-3p可能是NSCLC高准确性筛查的重要生物标志物.

为探讨补阳还五汤抗大鼠脑缺血再灌注损伤的机制,180只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组、补阳还五汤+miR-26a-5p激动剂(激动剂)组、补阳还五汤+激动剂阴性对照(激动剂阴性对照)组,每组36只;每组又按再灌注时间分为第3、7、14天3个亚组.除假手术组外,其余各组采用线栓法诱导大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,缺血90 min后再灌注.补阳还五汤组、激动剂组、激动剂阴性对照组建模24 h后开始给予补阳还五汤灌胃,每日2次;假手术组、模型组灌胃等量生理盐水,直至处死的前1 d.激动剂组和激动剂阴性对照组建模24 h后分别于侧脑室注射miR-26a-5p激动剂和miR-26a-5p激动剂阴性对照剂,其他各组注射等量生理盐水.各组建模24 h后腹腔注射5-溴脱氧尿苷(BrdU),每日1次,直至处死的前1 d.采用改良版神经损伤严重程度评分(mNSS)评价神经功能缺损,2,3,5-三苯四氮唑(TTC)染色检测脑梗死体积,TUNEL染色检测脑组织细胞凋亡,免疫荧光双标记法检测BrdU/NeuN双阳性(BrdU+/NeuN+)细胞数评估新生神经元,双荧光素酶实验验证PTEN是miR-26a-5p的靶基因,实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polyme rase chain reaction,RT-qPCR)检测 PTEN 及 miR-26a-5p 的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测 PTEN、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt 的表达.结果显示,与模型组比较,补阳还五汤可促进脑缺血大鼠神经功能恢复,缩小脑梗死体积,增加BrdU+/NeuN+细胞数,上调miR-26a-5p的表达,调控PTEN/PI3K/Akt信号通路,促进神经元新生;侧脑室注射miR-26a-5p激动剂后加强上述效应.综上所述,补阳还五汤可促进脑缺血大鼠神经功能恢复,减小脑梗死体积,促进脑缺血大鼠神经元新生,其机制可能是通过miR-26a-5p激活PTEN/PI3K/Akt信号通路.

目的 探讨妊娠期高血压miR-26b、miR-15b、miR-204-5p、miR-200a表达水平及临床意义.方法 回顾性选取83例2022年1月至2023年1月承德市妇幼保健院收治的妊娠期高血压患者的临床资料作为病例组,其中28例妊娠期高血压作为妊娠期高血压组、28例轻度子痫前期作为轻度子痫前期组、27例重度子痫前期作为重度子痫前期组;另随机选择同期于本院产科门诊规律围产期保健并入院待产的94名正常足月单胎妊娠孕妇为对照组.结果 收缩压、舒张压:重度子痫前期组>轻度子痫前期组>妊娠期高血压组>对照组,差异有统计学意义(P<0.05).血清miR-26b、miR-15b、miR-204-5p、miR-200a表达水平:重度子痫前期组>轻度子痫前期组>妊娠期高血压组>对照组,差异有统计学意义(P<0.05).血清miR-26b、miR-15b、miR-204-5p、miR-200a水平联合检测诊断妊娠期高血压的AUC值为0.940,高于各指标单独检测(0.768、0.809、0.744、0.795,P<0.05).病例组不良妊娠结局总发生率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 妊娠期高血压患者不良妊娠结局的几率更大,血清miR-26b、miR-15b、miR-204-5p、miR-200a在妊娠期高血压患者中呈高表达,其表达水平与患者病情严重程度具有一定关系,且四者联合检测对妊娠期高血压的诊断价值更高.

目的:探讨长链非编码RNA（long non-coding RNA，LncRNA）核仁小RNA宿主基因6（SNHG6）对前列腺肿瘤干细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响及其机制。方法:采用流式分选技术从前列腺肿瘤细胞PC-3中分选出CD44 +CD24 -肿瘤干细胞和非CD44 +CD24 -细胞，采用实时荧光定量PCR检测两种细胞中SNHG6和微小RNA（miR）-26a表达，5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）法检测细胞增殖，流式细胞仪检测细胞凋亡，四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞对顺铂的化疗敏感性，免疫印迹法（Western blot）检测细胞中细胞核增殖相关抗原（Ki67）、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白表达；双荧光素酶报告基因实验检测SNHG6、miR-26a和zeste基因增强子同源物2（EZH2）的靶向关系，Western blot检测miR-26a模拟物对EZH2蛋白表达的影响。 结果:与非CD44 + CD24 -细胞比较，SNHG6在CD44 +CD24 -细胞中的表达水平明显升高（ P<0.05）；与NC-siRNA组[（1.00±0.06）%、（96.85±6.48）%、（0.72±0.06）%、（0.43±0.03）%、（5.32±0.15）%、（0.35±0.03）]比较，SNHG6-siRNA组细胞中SNHG6表达水平（0.25±0.03）、细胞增殖活力（75.36±5.1）%和细胞中Ki67（0.38±0.03）、Bcl-2蛋白（0.21±0.02）表达水平均明显降低，而miR-26a表达水平、细胞凋亡率（13.83±2.36）%和Bax蛋白（0.48±0.03）表达水平均明显升高，且细胞对顺铂化疗敏感性明显增强（ P<0.05）；miR-26a是SNHG6的靶基因，而EZH2是miR-26a的靶基因，miR-26a模拟物可使EZH2蛋白表达水平降低。 结论:SNHG6在前列腺肿瘤干细胞中表达上调，干扰其表达可抑制肿瘤干细胞增殖，促进细胞凋亡，并增强肿瘤干细胞对顺铂的敏感性，其作用机制可能与靶向调控miR-26a/EZH2轴有关。

目的:探讨miR-26a在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、迁移和侵袭中的作用。方法:本研究为实验研究。将A549细胞分为空白对照组和miR-26a过表达组；将H1299细胞分为对照组和miR-26a低表达组。采用MTT法检测A549、H1299细胞培养第1～5天的细胞活力，采用划痕实验和Transwell实验分别检测A549、H1299细胞培养48 h后的细胞迁移和侵袭能力，采用定量反转录聚合酶链反应法检测A549、H1299细胞中miR-26a基因表达。分别比较空白对照组与miR-26a过表达组及对照组与miR-26a低表达组的细胞活力、迁移和侵袭能力。结果:H1299细胞的细胞活力、迁移和侵袭能力均强于A549细胞，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。H1299细胞中miR-26a表达水平低于A549细胞[(1.002±0.069)比(3.114±0.497)]，差异有统计学意义( t＝7.29， P＝0.002)。miR-26a过表达组A549细胞活力、迁移和侵袭能力均低于空白对照组[(0.546±0.013)比(0.743±0.022)、(0.327±0.049)比(0.609±0.029)、(38.667±4.932)比(56.667±7.371)]，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。miR-26a低表达组H1299细胞活力、迁移和侵袭能力均高于对照组[(0.966±0.023)比(0.758±0.019)、(0.741±0.014)比(0.632±0.048)、(104.333±7.095)比(74.667±7.094)]，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:miR-26a在NSCLC细胞增殖、迁移及侵袭中起抑制作用。

目的:探讨miRNA-3653-3p（miR-3653-3p）对子宫内膜癌细胞增殖、侵袭能力的影响及其相关机制。方法:从OncoLnc数据库中下载356例子宫内膜癌患者资料，数据更新时间为2020年；采用Kaplan-Meier法分析miR-3653-3p表达水平与子宫内膜癌患者总生存的关系；采用miRGator数据库预测与miR-3653-3p存在结合位点的靶基因。选择人子宫内膜癌细胞株AN3CA、HEC-1A、HEC-1B、Ishikawa和人正常子宫内膜上皮细胞株ESC，采用实时荧光聚合酶链反应（qRT-PCR）检测miR-3653-3p相对表达量。选取miR-3653-3p表达最低的细胞株为研究对象，分为阴性对照组和miR-3653-3p组，分别转染对照空载质粒和miR-3653-3p过表达质粒。采用CCK-8法检测细胞的增殖能力，Transwell法检测细胞的侵袭能力；qRT-PCR和蛋白质印迹法检测miR-3653-3p靶基因的表达。蛋白质印迹法检测miR-3653-3p对Wnt-β-catenin信号通路相关蛋白表达的影响。结果:OncoLnc数据库中数据分析显示，与miR-3653-3p低表达的子宫内膜癌患者相比，miR-3653-3p高表达的患者总生存较好（ P<0.01）。与人正常子宫内膜上皮细胞ESC相比，子宫内膜癌细胞株AN3CA、HEC-1A、HEC-1B、Ishikawa中miR-3653-3p表达水平均降低（均 P<0.05），并且HEC-1A细胞中miR-3653-3p的相对表达量最低，选择HEC-1A细胞进行后续实验。CCK-8实验结果显示，与阴性对照组相比，第2、3、4、5天miR-3653-3p组HEC-1A细胞能力均降低（均 P<0.05）。Transwell小室侵袭实验结果显示，培养26 h时，阴性对照组和miR-3653-3p组HEC-1A细胞侵袭数分别为（80±11）个和（21±4）个，差异有统计学意义（ t＝5.18， P<0.01）；与阴性对照组比较，miR-3653-3p组细胞侵袭数降低。采用miRGator数据库预测miR-3653-3p的靶基因可能是胎盘特异蛋白8（PLAC8）。阴性对照组和miR-3653-3p组HEC-1A细胞中PLAC8 mRNA的相对表达量分别为6.26±0.83和0.97±0.31，差异有统计学意义（ t＝6.00， P<0.01），miR-3653-3p组PLAC8 mRNA的相对表达量低于阴性对照组。与阴性对照组相比，miR-3653-3p组HEC-1A细胞PLAC8蛋白降低，Wnt-β-catenin信号通路相关蛋白β-catenin、转化生长因子β（TGF-β）、GSK-3β、Rac1表达均降低。 结论:miR-3653-3p可能通过调节PLAC8-Wnt-β-catenin信号通路抑制子宫内膜癌细胞的增殖、侵袭。

目的:探讨高压氧治疗对创伤性蛛网膜下腔出血患儿神经功能、脑微循环和血清miR-143水平的影响。方法:前瞻性选取2015年2月至2020年5月商丘市第一人民医院儿科重症监护室收治的50例创伤性蛛网膜下腔出血患儿作为研究对象，根据治疗方法分为对照组（ n=24）和观察组（ n=26）。对照组患儿采用常规药物治疗，观察组患儿在对照组治疗基础上的采用高压氧治疗。比较治疗前后2组患儿的格拉斯哥昏迷量表（GCS）评分、脑微循环指标、颅内压、血清miR-143水平及预后情况。 结果:观察组患儿治疗1、2个疗程后的颅内压明显低于对照组，GCS评分、血清miR-143水平高于对照组，差异均有统计学意义（ P<0.001）；观察组患儿治疗2个疗程后的平均通过时间（MTT）、脑血流量（CBF）、脑血容量（CBV）、平均动脉压（MAP）较对照组明显改善，差异均有统计学意义（ P<0.001）；观察组患儿预后良好率明显高于对照组，差异有统计学意义（ P<0.05）。 结论:高压氧治疗创伤性蛛网膜下腔出血患儿，可提高患儿的血清miR-143水平，降低颅内压，改善脑微循环及预后。

目的:探讨骨肉瘤阿霉素耐药细胞外泌体与 MDR1、miRNAs的相关性及作用机制。 方法:选取骨肉瘤MG63和U2OS细胞株构建阿霉素耐药株，通过MTT法检测耐药和敏感株的50%抑制浓度（half maximal inhibitory concentration，IC 50），于15~120 min中间隔15 min观察一次荧光染色检测荧光强度的变化，RT-PCR和Western Blot检测 MDR1的mRNA和P-gp蛋白表达水平等验证骨肉瘤细胞耐药性；通过粒径分析及Western Bolt检测鉴定外泌体。观察PKH26标记的阿霉素耐药细胞外泌体的胞吞作用，并采用MTT法和细胞划痕实验检测阿霉素耐药细胞外泌体与骨肉瘤细胞共培养后细胞的增殖水平、迁移能力及耐药性的变化。通过骨肉瘤源性外泌体测序及生物信息分析、RT-PCR验证miRNAs在骨肉瘤敏感和耐药细胞中的mRNA差异表达水平。观察MG63和U2OS中正常骨肉瘤细胞组与耐药细胞组、耐药细胞+正常外泌体组、耐药细胞+耐药外泌体组成瘤裸鼠肿瘤生长情况，血清外泌体鉴定及其miR-21-5p的mRNA表达水平，RT-PCR、Western Blot和免疫组化检测肿瘤组织中 MDR1的mRNA和miR-21-5p蛋白的表达水平。 结果:MG63和U2OS中阿霉素耐药株IC 50（11.81、9.33 μg/ml）高于正常株（2.21、0.93 μg/ml），荧光强度减弱速度高于正常株， MDR1的mRNA和P-gp的蛋白表达水平（2.15±0.10、2.127±0.12；0.92±0.11、0.73±0.10）均高于正常株（1.12±0.16，1.02±0.11；0.46±0.03、0.30±0.04），差异均有统计学意义（ P<0.05）。耐药外泌体分别与正常株共培养时可通过胞吞作用进入骨肉瘤细胞内集中分布于细胞质。骨肉瘤细胞与耐药外泌体共培养，分别以2、4、6、8 μg/ml的阿霉素浓度处理后，耐药组增殖水平显著上升，耐药组迁移能力（54.20±9.32，19.24±2.88；76.40±5.41，30.26±4.87）较正常组（35.947±3.922，6.72±3.546；51.217±5.546，19.31±1.930）均高，差异有统计学意义（ P<0.05）。选择外泌体测序和生信分析中10种上调明显的miRNAs，进行RT-PCR验证其在正常和耐药株中的mRNA表达差异性，其中耐药株miR-372-3p、miR-21-5p、miR-155-5p表达水平均显著升（MG63：5.89±0.26 vs. 0.99±0.06；U2OS：1.05±0.07 vs. 8.80±0.93），差异有统计学意义（ P<0.05）。MG63和U2OS中正常细胞组与耐药细胞组比较、正常外泌体组与耐药外泌体组比较，后两者裸鼠肿瘤体积呈现不同程度的增速；终末肿瘤重量不同程度地增加。血清外泌体中耐药组miR-21-5p的mRNA表达水平（1.13±0.12、1.14±0.12；0.90±0.07，0.93±0.04）均较正常组（0.86±0.07、0.86±0.05；0.71±0.05，0.75±0.03）增高，差异均有统计学意义（ P<0.05）。 结论:骨肉瘤耐药细胞外泌体通过细胞间传递 MDR1基因、miRNAs使细胞的增殖水平和迁移能力增强；耐药细胞及其成瘤裸鼠血清和肿瘤组织中 MDR1基因、miR-21-5p表达上调，提示其可能参与调节骨肉瘤MG63、U2OS的耐药过程。

目的:研究子痫前期（PE）产妇胎盘组织中长链非编码RNA（lncRNA）的差异表达及其中之一MIR210HG对绒毛膜滋养层细胞系HTR8/SVneo细胞生物学特性的影响，并对MIR210HG进行功能分析。方法:选取2018年7月至2019年7月青岛大学附属医院收治的PE产妇39例（PE组）和同期正常妊娠产妇39例（对照组）。（1）采用转录组测序（RNA-seq）技术分析两组产妇胎盘组织中差异表达的lncRNA；实时荧光定量PCR技术方法检测两组产妇胎盘组织中差异表达的lncRNA之一MIR210HG的表达水平，并分析MIR210HG表达水平与收缩压、舒张压和新生儿出生体重的相关性。（2）构建小分子干扰RNA（siRNA），转染HTR8/SVneo细胞以敲低MIR210HG的表达，实验分为两组，即MIR210HG敲低（KD）组（HTR8/SVneo细胞转染siRNA敲低了MIR210HG的表达）和阴性对照（NC）组（HTR8/SVneo细胞转染NC siRNA），采用活细胞计数（CCK-8）法、穿膜小室（transwell小室）体外实验检测两组HTR8/SVneo细胞增殖和迁移能力的变化。（3）采用RNA相互作用百科全书（ENCORI）数据库预测与MIR210HG相互作用的RNA，并采用基因本体（GO）功能注释、京都基因和基因组百科全书（KEGG）和BioCarta通路富集方法对MIR210HG的功能进行分析。结果:（1）RNA-seq技术共检测出显著差异表达的lncRNA 26个，其中表达上调21个、下调5个。MIR210HG在PE组产妇胎盘组织中的表达水平显著高于对照组（分别为9.30 ±1.90、1.10 ±0.20； t=4.425， P<0.01）；MIR210HG的表达水平与收缩压（ r2=0.234， P<0.05）和舒张压（ r2=0.190， P<0.05）均呈线性正相关关系，与新生儿出生体重呈线性负相关关系（ r2=0.157， P<0.05）。（2）与NC组相比，KD组HTR8/SVneo细胞的增殖和迁移能力均显著增强（ P均<0.05）。（3）ENCORI数据库分析共预测出可能与MIR210HG相互作用的RNA 38个。GO功能注释分析显示，MIR210HG可能参与免疫应答分子中介物产生的调控等27条通路的功能；KEGG通路富集显示，MIR210HG可能参与同种异体移植物排斥等8条通路的功能；BioCarta通路富集显示，MIR210HG可能参与翻译起始因子通路等8条通路的功能。 结论:lncRNA MIR210HG在PE产妇的胎盘组织中表达上调，降低MIR210HG的表达水平可促进HTR8/SVneo细胞的增殖和迁移，MIR210HG可能是滋养层细胞生物学行为的调节因子。

目的:探讨消退素D1（RvD1）治疗系统性红斑狼疮（SLE）模型小鼠的分子机制。方法:选取8周龄雌性MRL/lpr小鼠（SLE小鼠模型，12只）和ICR小鼠（健康对照小鼠，6只），将MRL/lpr小鼠按照随机数字表法随机分为磷酸缓冲溶液（PBS）组和RvD1组（每组各6只），尾静脉分别注射0.2 ml PBS和5 μg/kg RvD1，8周后检测PBS组和RvD1组小鼠血清抗双链DNA（dsDNA）抗体、尿蛋白和滤泡辅助T细胞（Tfh）比例。处死小鼠后分离PBS组小鼠脾脏CD4 +T细胞，按随机数字表法将细胞分为CD4 +T细胞+二甲基亚砜（DMSO）（A组）、CD4 +T细胞+RvD1（B组）、初始CD4 +T细胞+DMSO（C组）、初始CD4 +T细胞+RvD1（D组），检测各组细胞E26转录因子1（ETS1）mRNA的表达水平和Tfh比例和分化情况。将miR-338-3p抑制剂与PBS组脾脏CD4 +T细胞或初始CD4 +T细胞共培养，检测细胞ETS1 mRNA的表达水平和Tfh的分化情况。用shRNA-circ_0006779慢病毒或空载慢病毒感染ICR组小鼠的脾脏CD4 +T细胞，检测各组细胞miR-338-3p mRNA、ETS1 mRNA的水平和Tfh的分化情况（细胞实验的筛孔数均为5）。 结果:RvD1组小鼠脾脏CD4 +T细胞ETS1 mRNA表达量高于PBS组（1.00±0.33比0.34±0.13， P=0.014）；RvD1组小鼠脾重、血清抗dsDNA抗体水平、尿蛋白水平、Tfh细胞比例均低于PBS组（均 P<0.05）。RvD1与CD4 +T细胞体外共培养结果发现：B组CD4 +T细胞ETS1 mRNA表达量高于A组（1.00±0.08比0.25±0.05， P<0.001）、Tfh比例低于A组（16.06%±3.06%比21.76%±3.42%， P=0.020）；RvD1与初始CD4 +T细胞体外共培养结果发现：D组初始CD4 +T ETS1 mRNA表达量高于C组（1.00±0.25比0.21±0.16， P<0.001）、Tfh分化程度低于C组（8.81%±1.01%比12.60%±1.86%， P=0.011）。与不加miR-338-3p抑制剂相比，miR-338-3p抑制剂可以增加PBS组CD4 +T细胞ETS1 mRNA表达量（1.00±0.24比0.10±0.01， P<0.001），降低Tfh细胞分化程度（9.56%±1.53%比13.60%±1.32%， P<0.001）；与空载慢病毒组相比，shRNA-circ_0006779慢病毒可以增加ICR组CD4 +T细胞miR-338-3p水平（1.00±0.22比1.38±0.21， P=0.002），降低ETS1 mRNA水平（0.76±0.13比1.00±0.14， P=0.005），提高Tfh细胞分化程度（4.00%±0.65%比1.68%±0.60%， P<0.001）。 结论:RvD1通过circ_0006779/miRNA-3384-3p/ETS1轴抑制Tfh细胞分化，治疗小鼠的SLE。